透明质酸酶PH-20和肿瘤

肿瘤的发生、增殖和转移与细胞外基质(ECM)有着密切的关系,透明质酸(HA)是细胞外基质中含量最多、所占体积最大的组份,而透明质酸酶(HAase)能特异性地分解透明质酸,从而在肿瘤发生发展中发挥重要作用。目前,人类基因组中已经发现6个透明质酸酶样序列HYAL1、HYAL2、HY-AL3、HYAL     

人乳腺癌细胞株透明质酸酶基因的表达及其意义

目的检测人乳腺癌细胞透明质酸酶(hyaluronidase,Hyase)基因的表达.方法应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分别测定9株人乳腺癌细胞的透明质酸酶基因表型,并与透明质酸酶的表达作对比分析.结果 9株人乳腺癌细胞均表达透明质酸酶基因的HYAL-1亚型,且存在差异性,不表达PH-20亚型.结论 HYAL-1为人乳腺癌细胞株透明质酸酶的主要基因表型.     

尿透明质酸-透明质酸酶1联合检测对膀胱癌诊断和治疗的意义

目的:探讨尿透明质酸(HA)和透明质酸酶1(HYAL1)联合检验对膀胱癌诊断和治疗的意义。方法:取自40位膀胱肿瘤患者术前(40份)及术后(40份)尿液标本80份,另20份尿液取自对照组(包括正常人、泌尿生殖系其他疾病患者)。采用放射免疫标记技术和ELISA技术检测尿液HA和HYAL1水平,并对其结果进行讨论分析。结果:患者术前组中HYAL1水平是术后组的1.5倍(P<0.05),是对照组的2～4倍(P<0.05);而术前组中HA水平在G2/G3移行细胞癌患者中显著升高,是术后组的1.5倍(P<0.05),是对照组的1.5～3倍(P<0.05),但在G1级患者尿中无显著升高(P>0.05)。而HA HYAL1联检在膀胱癌诊断中具有较高的灵敏度(95%)、特异度(75%)和精确度(88.33%)。结论:HA HYAL1联检是诊断膀胱癌和手术评估的一种非侵入性、高灵敏度、高特异度的检测方法。     

人精子细胞膜结合型透明质酸酶促进人乳腺癌细胞增殖的实验观察

目的　探讨人精子细胞膜结合型透明质酸酶 (PH2 0 )促进乳腺癌细胞增殖的机制。方法　将人PH2 0cDNA转染到人乳腺癌细胞株MDA2 31中 (MDA2 31 PH2 0 ) ,对照组用pcDNA3空载体替代PH2 0重组体。将MDA2 31 PH2 0和MDA2 31 pcDNA3分别以同样数量种植到鸡胚绒毛尿囊膜 (CAM)上 ,种植后第 4天切取肿瘤称重 ,并用免疫组织化学方法研究肿瘤组织中血管形成的变化。另外 ,用Trans well细胞培养法研究MDA2 31 PH2 0和MDA2 31 pcDNA3细胞对牛主动脉内皮细胞 (ABAE)生长的影响 ;用Western印迹法观察这两组细胞的成纤维细胞生长因子 2 (FGF 2 )表达水平 ,并用酶联免疫吸附试验测定两组细胞的FGF 2和透明质酸 (HA)分泌量。结果　MDA2 31 PH2 0组平均肿瘤重量为4 4 7mg± 10 2mg ,MDA2 31 pcDNA3组为 2 1 3mg± 2 8mg,两组比较差异有显著意义 (t=2 4 18,P =0 0 38)。MDA2 31 PH2 0肿瘤组织中新生血管明显增多。MDA2 31 PH2 0细胞FGF 2蛋白质表达水平增高 ,同时细胞FGF含量 (8 10pg/ml± 1 5 6pg/ml)和HA含量 (12 2 0ng/ml± 2 5 4ng/ml)也均高于对照组(分别为 3 94pg/ml± 0 82pg/ml和 4 6 2ng/ml± 96ng/ml,均P <0 0 1)。结论　PH2 0可能通过促进癌细胞释放FGF 2和分解HA成小片段 ,刺激新生血管生长并促进肿瘤     

尿透明质酸酶和核基质蛋白22联合检测在膀胱肿瘤诊断中的价值

目的探讨尿液中透明质酸酶(HAase)和核基质蛋白22(NMP-22)联合检测在膀胱肿瘤诊断中的价值。方法采用ELISA方法分别检测40例健康人(对照组)、60例膀胱肿瘤(肿瘤组)患者手术前后尿HAase、NMP-22含量,并计算两指标术前单独检测及联合检测的灵敏度、特异性和准确度。结果肿瘤组手术前后尿HAase含量分别为(77.5±21.8)、(51.5±14.7)mg/ml,对照组为(23.3±6.3)mg/ml,术前含量高于术后(P<0.05)以及对照组(P<0.01)。肿瘤组手术前后NMP-22含量分别为(26.4±6.6)、(17.6±4.4)ng/ml,对照组为(8.1±2.1)ng/ml,术前含量高于术后(P<0.05)以及对照组(P<0.01)。术前尿HAase检测的灵敏度、特导性及准确度分别为89.1%、86.4%及86.1%,术前尿NPM-22检测的灵敏度、特异性及准确度分别为74.3%、85.2%及78.6%,而HAase与NMP-22联合检测的灵敏度、特异性及准确度分别为95.1%、80.9%及90.3%。结论尿HAase与NMP-22联合检测诊断膀胱肿瘤的灵敏度、特异性和准确度均较高...     

透明质酸酶和透明质酸对血管内皮细胞增殖及CD44表达的影响

目的 :探讨透明质酸酶 (HAase)和透明质酸 (HA)对血管内皮细胞增殖的影响和可能机制 ,寻找促血管新生的新途径。 方法 :采用牛主动脉内皮细胞 (BAEC)离体培养模型 ,分别经 HAase或 HA刺激 ,用 MTT法观察 BAEC增殖率的变化 ;经流式细胞术 (FCM)测定细胞周期和细胞表面粘附分子 CD44的表达。 结果 :HAase(5 0μg/ ml)作用后细胞增殖率 (% )为5 0 .10± 1.2 3(P<0 .0 1) ,使细胞周期中 S期和 G2 / M期细胞比例增加 12 .8% ,CD44的表达细胞数和表达量增加 ;而高浓度HA (10 0μg/ m l)则抑制 BAEC的增殖和 CD44的表达。 结论 :HAase可降解细胞外基质中具有抗血管新生作用的 HA,促进内皮细胞的增殖 ,有可能提高促血管生长因子治疗心肌缺血的局部疗效     

膜结合型透明质酸酶PH-20 mRNA在消化道肿瘤表达的意义

目的研究膜结合型透明质酸酶(PH-20)mRNA表达与消化道肿瘤侵袭能力及淋巴结转移的关系,探讨其预测肿瘤侵袭危险度的意义。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测59例消化道肿瘤患者的原发癌、癌旁组织、淋巴结转移癌(其中13例)及4例消化道良性病变和各种细胞系(SGC-7901、BGC823、LS-174-T、HCT8、95-D、A549、HFL、HEPG2、L-02)中PH-20mRNA的表达水平。结果PH-20mRNA在上述组织中均有表达,消化道原发癌和淋巴结转移癌均明显高于癌旁组织(P<0.05)。消化道肿瘤PH-20mRNA表达与肿瘤浸润程度有关,浸润性肿瘤的PH-20mRNA表达量高于浅表性肿瘤(P<0.01)。结论PH-20mRNA表达改变可能与消化道肿瘤的发展有关,高表达PH-20mRNA的肿瘤细胞具有高侵袭潜能。     

透明质酸酶对眼眶成纤维细胞增殖及分泌透明质酸的影响

目的 探讨透明质酸酶对人眼眶成纤维细胞增殖以及分泌透明质酸的影响,为透明质酸酶用于甲状腺相关眼病患者的治疗提供实验依据.方法 取健康意外死亡者眼眶脂肪组织行眼眶成纤维细胞培养,用不同浓度透明质酸酶(0 μg/mL、5 μg/mL、10 μg/mL、50 μg/mL、100 μg/mL、200 μg/mL、500 μg/mL)分别处理细胞,在不同时间点(24 h、48 h、72 h)观察细胞形态变化;MTT法检测细胞增殖情况;ELISA法检测透明质酸含量.结果 体外成功培养人眼眶成纤维细胞;各浓度透明质酸酶作用眼眶成纤维细胞后细胞形态密度未见明显差别;MTT测得A值在各时间点上的差异无统计学意义(P值均＞0.05);各浓度实验组分别与在同一时间点的正常对照组相比差异无统计学意义(P0.05);各浓度透明质酸酶组均较空白对照组透明质酸含量减少,随浓度升高透明质酸含量降低,随时间变化实验组与对照组透明质酸含量差值增加.各浓度组在3个时间点分解透明质酸量与空白对照组差异均具有统计学意义(P<0.01).结论 通过获取人眼眶脂肪结缔组织进行组织块法成功培养、传代获得纯化眼眶成纤维细胞;实验设定浓度范围的透明质酸酶对眼眶成纤维细胞的增殖无明显影响;眼眶成纤维细胞能分泌透明质酸,不同浓度透明质酸酶均对其有分解作用,且呈剂量和时间依赖性.     

血清透明质酸酶水平与糖尿病的相关性研究

目的 探讨血清透明质酸酶水平同糖尿病的相关性.方法 将住院的84名患者纳入研究,每位患者均于人院后第2天空腹抽血进行生化、透明质酸酶、糖化血红蛋白、糖耐量实验等指标检测.根据血糖水平及既往病史,将患者分为正常对照组,糖耐量异常组以及糖尿病组.结果 三组患者血清透明质酸酶水平分别为:(31.92 ±4.34)、(54.76±8.09)、(85.81±9.66) ng/ml(P ＜0.01),多因素回归统计显示,血清透明质酸酶水平与患者血糖水平明显相关(P＜0.01).结论 血清透明质酸酶水平同糖尿病明显相关,糖尿病患者血透明质酸酶水平明显升高.     

透明质酸酶与水囊促宫颈成熟效果比较

目的　比较透明质酸酶与水囊促宫颈成熟的效果，探讨其临床应用价值。方法　将７６例符合引产指征的单胎、头位、尚未临产的初孕妇随机分为透明质酸酶组（Ａ组）４６例，水囊组（Ｂ组）３０例。结果　Ｂ组进入产程所需时间较Ａ组明显缩短（Ｐ＜０．０１），有效率明显高于Ａ组（Ｐ＜０．０５）。而手术产率、第一产程、胎儿窘迫率、新生儿Ａｐｇａｒ评分、产后２ｈ出血量、产后病率等两组差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论　水囊促宫颈成熟优于透明质酸酶。     

透明质酸酶封闭治疗脂肪乳渗漏的对比研究

脂肪乳常被用于治疗长时间不能经口喂养的新生儿或早产儿 ,其目的是为新生儿提供足够的营养 ,使新生儿达到正常的生长发育。但由于脂肪乳输注时间长 ,患儿血管壁脆性大 ,皮下脂肪薄 ,血管易移动等 ,难免发生渗漏现象 ,容易造成局部组织坏死、溃疡等严重后果。传统做法多采用硫酸镁湿敷患处 ,效果不甚理想。自 1998年以来 ,我院采用透明质酸酶作渗漏处封闭注射 ,取得满意效果 ,现报告如下。1　临床资料1 1　一般资料 :自 1998年 1月至 2 0 0 1年 1月 ,NICU病房共补救脂肪乳外渗引起局部皮肤肿胀患儿 38例 ,男 2 3例 ,女 15例 ;其中足月儿 1…     

电离辐射对成纤维细胞中透明质酸蛋白及透明质酸酶1mRNA表达水平的影响

目的:观察电离辐射对成纤维细胞中透明质酸（HA）蛋白及透明质酸酶1（HAase1） mRNA表达水平的影响,并探讨其在放射性臂丛神经损伤发病机制中的作用。方法: 成纤维细胞分别采用0.5、1.0、2.0、4.0和6.0 Gy X射线照射,作为 5个剂量组,同时设假照射对照组（0 Gy）。透射电镜观察0、2.0、4.0和6.0 Gy X射线照射后48 h成纤维细胞的形态变化。采用ELISA法和RT-PCR法检测0、0.5、1.0、2.0、4.0、和6.0 Gy X射线照射后24及48 h成纤维细胞中HA蛋白及HAase1 mRNA表达水平的变化。结果：2.0 Gy X射线照射后48 h细胞染色质凝聚,有空泡形成;4.0 Gy X射线照射后48 h细胞核凹陷、染色质断裂;6.0 Gy X射线照射后细胞核凹陷、染色质固缩、出现空泡,部分胞浆溶解。不同剂量X射线照射后24 h HA蛋白表达均明显增高,与0 Gy组比较差异有统计学意义(P<0.05);0.5～2.0 Gy X射线照射后48 h HA蛋白表达变化不明显,4.0和6.0 Gy组与 0 Gy组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。0～6.0 Gy X射线照射后24 h HAase1 mRNA水平明显增高,与0 Gy组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。1.0、4.0和6.0 Gy X射线照射后48 h HAase1 mRNA水平明显增高,与0 Gy组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：电离辐射可诱导人成纤维细胞中HA蛋白表达和HAase1 mRNA水平增高,可能对放射性臂丛神经损伤的发生发展起到一定的作用。     

透明质酸酶及肝素对血管生成影响的实验研究

目的 探讨透明质酸酶(hyaluronidase，Hyase)及肝素对血管生成的影响。方法 应用人乳腺癌细胞株与人脐静脉内皮细胞(ECV—304)双室联合培养技术。结果 6株表达不同水平Hyase的人乳腺癌细胞株对诱导血管生成潜能存在明显差异，Hyase高达细胞株诱导ECV—304生成血管的潜能明显大于Hyase低表达细胞株(P＜0．05)；加用肝素后无论Hyase高表达或低表达细胞株均未能诱导血管生成，对ECV—304也无形态学上的影响。结论 Hyase与血管生成存在相关性，肝素能抑制血管生成。     

透明质酸酶及透明质酸与Tca8113细胞增殖和黏附的相关性

目的 探讨透明质酸酶(HAase)及透明质酸(HA)与Tca8113细胞增殖、黏附的相关性.方法 采用间接免疫荧光法测定Tca8113 细胞CD44s、CD44v6与HAase蛋白表达.单独或联合应用HAase 单抗、CD44s单抗和 CD44v6单抗处理体外培养的Tca8113细胞;用CCK-8新型试剂盒分别测定其黏附和增殖能力,同时观察细胞形态.结果 Tca8113细胞表达CD44s、CD44v6与HAase蛋白.与对照组比较,HAase 单抗、CD44s单抗和 CD44v6单抗均能抑制Tca8113细胞的黏附与增殖(P<0.05),HAase单抗与CD44单抗存在协同作用(P<0.05).结论 HAase/HA与跨膜受体CD44的激活是促进肿瘤细胞黏附、增殖的重要途径.     

胸膜腔注入透明质酸酶治疗结核性胸膜炎疗效观察

目的：观察胸膜腔内注入透明质酸酶治疗结核性胸膜炎的疗效。方法：将51例结核性胸腔积液患者随机分为两组,在规则抗结核的治疗基础上,对治疗组在胸腔穿刺抽液后注入2.5ml透明质酸酶,对照组注射异烟肼＋地塞米松2.5ml。结果：治疗组共计28例,完全吸收24例,大部分吸收3例,好转1例,无效0例,总有效率为100%,对照组23例,完全吸收15例,大部分吸收4例,好转4例,无效0例,总有效率为83%。结论：通过胸腔内注入透明质酸酶治疗结核性胸腔积液明显优于传统的注入异烟肼及地塞米松。     

放射治疗对肿瘤病人血清层粘蛋白和透明质酸的影响及意义

层粘蛋白 (ＬＮ)和透明质酸 (ＨＡ)均为细胞外基质成分 ,分别属于细胞外基质中的结构性糖蛋白金糖。近年来的研究表明 ,它仍与肿瘤细胞的浸润转移过程有密切关系。本研究旨在观察恶性肿瘤病人放疗前后血清ＬＮ和ＨＡ的水平变化及其临床意义。1　材料与方法1 1　病例选择 :收集我院 1996年 7月～ 1999年 7月经病理证实的肿瘤病人77例 ,其中恶性肿瘤 6 0例 ,年龄 18～75岁 ,中位年龄 5 7 5岁。男性 38例 ,女性 2 2例。包括食道癌 14例、肺癌 12例 ,乳腺癌 10例 ,鼻咽癌 6例 ,胃癌 8例 ,结直肠癌 4例 ,其它 6例 ,全部为中晚期不易手术的病人。…     

丝裂霉素加透明质酸酶膀胱灌注预防膀胱癌电切术后复发

1 对象和方法 1.1 对象 1999-08/2004-06丝裂霉素加透明质酸酶组66(男42,女24)例,年龄25～78(平均56.8)岁;肿瘤单发55例,多发11例;初发60例,复发6例;病理诊断均为膀胱移行细胞癌. 按WHO标准病理分级:G1级48例,G2级18例.     

透明质酸酶1的研究进展

透明质酸酶(hyalumnidase)是能特异性分解细胞外基质成分一透明质酸(HA)的一种蛋白水解酶，通过作用于细胞外基质影响细胞的增殖、分化及迁移，并在胚胎发育和肿瘤发生发展过程中发挥作用。目前，人类基因组中已经发现7个透明质酸酶样序列，编码的透明质酸酶具有组织特异性，行使不同的功能。     

透明质酸黏素和肿瘤

透明质酸(hyaluronic acid,HA)是以β-D-N-乙酰氨基葡萄糖和β-D-葡萄糖磺酸为结构单元的、通过β-1,4-糖苷键重复排列构成的一类链状高分子酸性粘多糖.HA是细胞外基质的重要成分,对于维持组织结构、细胞黏附、活化、迁移、以及细胞信号的转导有重要作用[1].透明质酸黏素(hyaladherin),也即透明质酸连接蛋白(hyaluronan-binding proteins),指一类可结合HA糖链的、具有相似氨基酸序列和空间构象的分子.它们在体内有广泛的功能,涉及介导细胞-细胞及细胞-基质黏附、HA的摄取与降解、细胞内信号转导等方面.近年来发现,透明质酸黏素和某些肿瘤有一定联系,可能参与了这些肿瘤的侵袭和转移过程.本文拟就此作一综述.     

诱导型一氧化氮合酶及肿瘤坏死因子-α基因多态与矽肺易感性

目的探讨诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）基因多态性与矿工矽肺易感性的关系.方法采用病例对照设计,以男性矽肺病人184例为病例组,111例无矽肺的男性接尘矿工为对照组.应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）技术检测iNOS Ser608Leu和TNF-α-308位点的多态性.结果 iNOS Ser608Leu位点携带T等位基因（C/T或T/T）的个体患矽肺的危险性降低（OR=0.48,95%CI=0.29～0.80）,且与矽肺期别相关（P＜0.01）.在矽尘高暴露组中,T等位基因的保护作用明显（OR=0.43,95%CI=0.24～0.78）.TNF-α-308基因多态与矽肺危险性之间无相关性（P＞0.05）,但携带A等位基因（G/A或A/A基因型）的吸烟工人更易发生矽肺（OR=2.48,95%CI=1.16～5.32）.结论iNOS基因16外显子C＞T突变可能是抵抗矽肺发生和发展的保护因素,TNF-α-308位点基因多态在矽肺发病的遗传易感因素中不起主要作用,但该多态性与吸烟有交互作用.