白细胞在油酸引起的急性肺损伤中的作用

以0.1ml/kg油酸静脉注入复制大鼠急性肺损伤模型。实验动物出现呼吸困难、低氧血症和白细胞减少。注油酸二小时后,肺指数、血清及BALF中β-葡萄糖醛酸酶(β-g)活力明显增高。组织学检查可看到肺微血管内有白细胞聚集,间质有白细胞浸润,间质和肺泡内水肿,出血和充血。以抗多形核白细胞抗体造成白细胞减少的大鼠,肺损伤就没有正常大鼠那样严重。结果表明白细胞参与油酸引起的急性肺损伤。     

藤黄酸减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的探讨藤黄酸(GA)对脂多糖(LPS)所致小鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。方法采用尾静脉注射LPS(4 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型。实验将小鼠随机分为对照组(control组)、模型组(model组)、藤黄酸组(GA组)和藤黄酸预处理组(GA+LPS组),6 h后测定肺湿/干重比值(W/D);检测髓过氧化物酶(MPO)活性;检测肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量和白细胞计数;ELISA检测肺匀浆中白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果模型组小鼠肺W/D、MPO活性、BALF中蛋白含量和白细胞数量均增加,肺组织IL-1β和TNF-α水平升高(均P0.01);藤黄酸预处理可减轻LPS引起的以上指标变化(均P0.05)。结论 GA可减轻LPS诱导的急性肺损伤,其机制可能与降低肺组织IL-1β和TNF-α的含量、抑制中性粒细胞在肺部的聚集和减轻肺部水肿相关。     

巨噬细胞浸润及细胞间粘附分子-1表达在油酸致大鼠急性肺损伤发病中的作用

目的:探讨巨噬细胞浸润及细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达在油酸诱导的大鼠急性肺损伤(ALI)中的作用。方法:雄性Wistar大鼠静脉注射油酸复制ALI为油酸组,静脉注射生理盐水为对照组。静注后4h,测定血气(左心PaO₂)、肺泡通透指数等肺损伤指标。支气管肺泡灌洗液(BALF)中巨噬细胞比和可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)水平。用原位杂交检测ICAM-1mRNA表达水平和免疫组化双重套染方法检测巨噬细胞浸润程度与ICAM-1表达的关系。结果:油酸组PaO₂低于对照组、肺泡通透性指数高于对照组(P＜0.01),BALF中巨噬细胞比例,sICAM-1水平显著高于对照组(P＜0.01)。油酸组肺组织ICAM-1表达明显高于对照组,且肺组织中巨噬细胞浸润数、ICAM-1表达水平和肺损伤指标呈显著正相关。结论:巨噬细胞浸润在油酸致急性肺损伤中起重要作用,ICAM-1参与介导了巨噬细胞对组织的粘附、浸润和ALI的发生发展。     

黄岑苷干预对输血相关急性肺损伤大鼠肺组织IL-1β、IL-10、TNF-α和iNOS表达的影响

目的探讨黄岑苷干预对输血相关急性肺损伤大鼠肺组织白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法 SD大鼠45只,随机分为对照组、输血相关急性肺损伤组(TRALI)和黄岑苷干预组(造模前3d,每日经腹腔注射0.2ml的黄芩苷溶液,50mg/kg),每组15只。制模完成后处死大鼠,HE染色观察肺组织病理学改变,取支气管肺泡灌洗液(BALF)检测细胞总数、中性粒细胞比例;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组大鼠支气管肺泡灌洗液中IL-10、IL-1β、TNF-α的含量。免疫组织化学与Western bolt检测大鼠肺组织中iNOS的表达。结果 TRALI组大鼠肺组织肺泡间隔增厚、肺间质充血及肺泡腔可见大量炎性细胞浸润,正常组大鼠肺组织结构清楚,肺泡壁结构完整,肺泡内未见炎性细胞渗出。TRALI组BALF细胞总数与中性粒细胞比例、IL-10、IL-1β与TNF-α的含量比正常组显著升高,给予黄岑苷干预后,则显著降低。TRALI组大鼠肺组织iNOS阳性表达水平显著升高,给予黄岑苷干预后,则显著降低。结论黄岑苷对输血相关急性肺损伤的保护作用与降低肺部炎性因子表达减轻炎性反应相关。     

Wortmannin对急性肺损伤小鼠肺组织IL-1β和TNF-α表达的影响

目的研究Wortmannin对急性肺损伤模型小鼠肺组织白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法 30只昆明小鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组和Wortmannin处理组。采用腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型,对照组腹腔注射同体积的生理盐水,Wortmannin处理组则于造模前2 h腹腔注射Wortmannin(1.4 mg/kg)。LPS注射后6 h处死大鼠,计算肺组织湿/干重(W/D)比值,Western blot方法检测三组小鼠肺组织内IL-1β和TNF-α蛋白的表达变化,RT-PCR方法检测三组小鼠肺组织内IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的表达变化。结果急性肺损伤组小鼠肺组织IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA表达水平显著上升,显著高于正常对照组(0.05);相比于急性肺损伤组小鼠,Wortmannin处理组小鼠肺组织IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA表达水平显著降低(0.05)。结论 Wortmannin能抑制急性肺损伤小鼠肺组织IL-1β和TNF-α表达。     

右美托咪定减轻脂多糖致大鼠急性肺损伤

目的探讨右美托咪定在减轻脂多糖(LPS)致大鼠急性肺损伤(ALI)中的作用及相关机制。方法将SD大鼠随机分为:对照组、脂多糖组(LPS组,腹腔注射LPS 5 mg/kg)和右美托咪定+脂多糖组(LD组,腹腔注射右美托咪定25μg/kg+LPS 5 mg/kg)。6 h后,收集左肺支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA检测BALF中白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;取右肺组织进行HE染色观察肺组织病理学变化,并进行肺损伤评分;计算肺组织湿重/干重(W/D)的比值;Western blot检测肺组织中HGMB1、TLR4和TLR2蛋白的表达。结果与对照组相比,LPS组中肺损伤评分、W/D比值、BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量明显升高(P0.05),且肺组织中HMGB1,TLR2,TLR4的表达上调(P0.05);与LPS组相比,LD组中各指标变化显著减轻(P0.05)。结论右美托咪定能够减轻LPS致大鼠急性肺损伤,可能与HGMB1和TLRs蛋白表达的抑制有关。     

TyrphostinA1预防大鼠油酸性肺损伤的机制研究

目的：研究JAK/STAT信号通路抑制剂tyrphostinA1对大鼠油酸性肺损伤的影响，并探讨其作用机制。方法： 以大鼠油酸型ALI为研究对象，利用动物肺功能测定仪测定肺损伤过程中吸气气道阻力（Ri）和动态肺顺应性(Cdyn)的变化，利用光镜观察肺部形态学变化，称重法计算肺指数及湿/干比（W/D），紫外分光光度法检测肺组织微血管的渗透性和肺泡灌洗液（BALF）中蛋白含量，酶联免疫吸附法（ELISA）检测肺泡灌洗液（BALF）TNF-α、IL-6和IL-10的含量。结果： TyrphostinA1明显改善大鼠肺功能，减轻肺组织病理学损伤，降低肺指数及肺湿/干重比，降低肺渗透性和肺泡灌洗液（BALF）中蛋白及TNF-α、IL-6的含量，提高肺泡灌洗液（BALF）中IL-10的含量。结论： TyrphostinA1能抑制油酸诱导的肺损伤，其作用机制可能与调节细胞因子（TNF-α、IL-6和IL-10）的合成与释放有关。     

蛋白转导Rab GEF1减轻小鼠肝脏缺血再灌注所致的肺损伤

目的:探讨转录反式激活因子-Rab鸟嘌呤核苷酸交换因子1(Tat-RabGEF1)融合蛋白对小鼠肝脏缺血再灌注(IR)所致肺损伤的作用及其可能的机制。方法:选用雄性C57BL/6小鼠24只,按随机数字表法分为假手术(sham)组、IR组和Tat-RabGEF1组,每组8只。采用肝脏缺血90 min再灌注4 h制备肺损伤模型,Tat-Rab-GEF1组于再灌注即刻经尾静脉注射Tat-RabGEF1 (10 mg/kg)。再灌注4 h后处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),采用ELISA法检测BALF中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6 (IL-6)和白细胞介素1β(IL-1β)的含量;取肺组织进行病理学检测,测定湿/干重比、β-氨基己糖苷酶(β-Hex A)和髓过氧化物酶(MPO)水平,并采用Western blot法测定肺组织类胰蛋白酶的表达水平。结果:(1)肝缺血90 min再灌注4 h肺组织病理损伤明显,湿/干重比增高,Tat-RabGEF1尾静脉注射明显减轻肺脏病理损伤。(2)与IR组比较,Tat-RabGEF1组BALF中TNF-α、IL-6和IL-1β浓度,以及肺组织β-Hex A、MPO水平和类胰蛋白酶表达显著降低(P 0.05)。结论:体内蛋白转导Rab GEF1减轻肝IR所致的肺损伤,减少肺组织炎症反应和细胞因子水平,其机制可能与抑制肥大细胞激活有关。     

乌司他丁下调脂多糖诱导小鼠急性肺损伤肺组织中miR-21表达

目的乌司他丁对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)肺组织miR-21、程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的表达及炎性反应的影响。方法将小鼠按随机数字表分为对照组、LPS组、低和高剂量乌司他丁干预组(UTI-L group,UTI-H group),每组10只。造模后72 h,苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理改变;吉姆萨染色计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中多形核白细胞(PMN)分类计数;BCA法测BALF中蛋白含量;酶联免疫吸附(ELISA)法测其中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;髓过氧化物酶(MPO)试剂盒测MPO活性;Western blot测肺组织PDCD4蛋白表达;实时荧光定量PCR测肺组织miR-21和PDCD4 mRNA转录水平。结果与对照组比,LPS组表现出典型的ALI病理改变,肺部炎性反应明显,肺湿干重比(W/D)增加(P0.05);BALF中PMN百分比、IL-1β含量、TNF-α含量和MPO活性明显增高(P0.05);伴随肺miR-21水平增高(P0.05),PDCD4蛋白表达降低(P0.05)。与LPS组比,乌司他丁干预后小鼠肺部ALI病理改变减轻,肺湿干重比(W/D)降低(P0.05);BALF中PMN计数、IL-1β、TNF-α含量和MPO活性降低(P0.05);伴随肺miR-21水平降低及PDCD4蛋白表达增加(P0.05),且作用呈剂量相关性。结论乌司他丁可下调miR-21,可能在转录后水平调控PDCD4 mRNA的翻译,增加PDCD4蛋白表达,发挥对脂多糖诱导的急性肺损伤的保护作用。     

磷脂酶A_2活性与肺肾上素能受体失衡关系的研究

在油酸所致实验性大鼠急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的发病过程中,大鼠肺中α及β肾上腺素能受体(αAR、βAR)之间正常的动态平衡发生了破坏,αAR明显增多,在注入油酸后1h、4h和6h,其最大结合容量(Bmax)     

MSCs-FGF2基因治疗对急性肺损伤小鼠的保护作用

目的研究间充质干细胞-纤维母细胞生长因子2(MSCsFGF2)基因治疗对脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠的保护作用。方法 40只雄性C57/B6小鼠随机分为对照组、急性肺损伤组、MSCs组、MSCs-FGF2组,每组10只。应用脂多糖建立小鼠急性肺损伤模型,观察4组小鼠肺组织病理改变、计算肺损伤评分、计算肺组织湿重与干重比值,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中中性粒细胞数量,实时PCR方法检测小鼠肺组织FGF2 mRNA表达,Western印迹法测定小鼠肺组织FGF2蛋白表达,ELISA法测定小鼠BALF中TNF-α和IL-6浓度。结果与急性肺损伤组小鼠比较,MSCs-FGF2组小鼠肺组织病理改变明显减轻、肺损伤评分明显降低(P0.05)、肺组织湿重与干重比值明显降低(P0.05)、BALF中中性粒细胞数量明显降低(P0.05)、肺组织FGF2 mR NA及蛋白表达量明显增加(P0.05)、BALF中TNF-α和IL-6浓度明显降低(P均0.05)。结论 MSCs-FGF2基因治疗对脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠有确切的保护作用。     

地塞米松对大鼠内毒素急性肺损伤肺泡灌洗液中白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α含量的影响

目的 探讨地塞米松对大鼠内毒素（LPS）急性肺损伤（ALI）肺泡灌洗液中白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量的影响.方法 将48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、急性肺损伤组（内毒素ALI模型组）、地塞米松干预组,每组16只.每组大鼠依据不同的观察时间点（以大鼠气管内滴注LPS的时刻为起始时刻后的1、2、4、8 h 4个时间点）分为4个亚组（n=4）.给予正常对照组气管内滴注0.9%氯化钠溶液 0.3 mL,10 min后股静脉注射0.9%氯化钠溶液 1 mL;急性肺损伤组气管内滴注LPS 0.2 mg/kg（溶于0.3 mL 0.9%氯化钠溶液）,10 min后股静脉注射0.9%氯化钠溶液 1 mL;地塞米松干预组气管内滴注LPS 0.2 mg/kg,10 min后股静脉注射地塞米松注射液3 mg/kg（溶于1 mL 0.9%氯化钠溶液）.各组于1、2、 4、8 h 4个时间点于心脏抽血检测动脉血氧分压（PaO2）;取肺组织进行肺湿/干质量比值（W/D）测定,并采用苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织形态学变化;用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测肺泡灌洗液（BALF）中IL-1β和TNF-α的含量.结果 给予气管内滴注LPS后于1、2、4、8 h观察大鼠动脉血PaO2,急性肺损伤组、地塞米松干预组较正常对照组显著降低,两组PaO2均在4 h时达最低点,各时间点动脉血PaO2对比,地塞米松干预组均显著高于急性肺损伤组,差异均有统计学意义（P〈0.05）.在LPS致炎后1、2、4、8 h 4个时间点急性肺损伤组、地塞米松干预组各时间点W/D比值均较正常对照组显著增加,两组间比较地塞米松干预组较急性肺损伤组降低,差异具有统计学意义（P〈0.05）.病理形态学观察可见急性肺损伤组与地塞米松干预组均出现肺水肿、出血、炎性细胞浸润,而地塞米松干预组肺损伤程度较急性肺损伤组减轻.ELISA试验结果显示急性肺损伤组在气管内滴入LPS 1 h后BALF中IL-1β、TNF-α含量迅速升高,4 h时达峰值,地塞米松干预后IL-1β、TNF-α表达在相同时间点均较模型组显著降低,差异具有统计学意义（P〈0.05）;而正常对照组BALF中IL-1β、TNF-α在不同时间点无明显变化.结论 地塞米松可通过抑制内毒素性大鼠ALI肺组织中IL-1β、TNF-α的表达,改善呼吸氧合功能,减轻肺损伤.     

油酸引起大鼠急性肺损伤过程中支气管-肺泡冲洗液(BALF)中溶酶体酶、蛋白及细胞的动态变化

实验用大白鼠72只,以0.1ml/kg体重油酸静脉注入形成大鼠急性肺损伤。注油酸后动物表现呼吸困难,并逐渐加重。尸检可见一天内肺大片出血,BALF呈血性;     

白藜芦醇通过激活SGK1上调急性肺损伤小鼠肺泡上皮钠离子通道的表达

目的探讨白藜芦醇(resveratrol)对急性肺损伤(ALI)小鼠肺泡上皮钠离子通道(ENaC)的作用及可能机制。方法将小鼠随机分为对照(control)组、LPS组、RES组和PP242组,每组6只。苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理;BCA法测肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测炎性因子水平;流式细胞计量术检测BALF中性粒细胞比例;Western blot检测肺组织α-ENaC蛋白表达和SGK1磷酸化水平,实时荧光定量PCR(qPCR)检测肺组织α-ENaC mRNA转录水平。结果 1)与对照组相比,LPS组肺组织损伤明显,BALF中性粒细胞比例、蛋白含量和炎性因子水平明显升高(P0.05),肺组织α-ENaC表达和SGK1磷酸化水平显著下调(P0.05);2)与LPS组相比,RES组肺损伤明显减轻,BALF中性粒细胞比例、蛋白含量和炎性因子水平明显降低(P0.05),伴α-ENaC表达和SGK1磷酸化水平显著上调(P0.05);3)与RES组相比,PP242组肺损伤明显加重,BALF中性粒细胞比例、蛋白含量和炎性因子水平明显升高(P0.05),同时伴α-ENaC表达和SGK1磷酸化水平显著下调(P0.05)。结论 SGK1介导的α-ENaC上调机制参与了RES对ALI的保护作用。     

抗巨噬细胞移动抑制因子抗体在油酸致急性肺损伤发病中的干预作用

目的:探讨抗巨噬细胞移动抑制因子单克隆抗体(anti-MIFMAb)在油酸诱导的大鼠急性肺损伤(ALI)中的干预作用,及其对巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠静脉注射油酸复制ALI为油酸组,静脉注射生理盐水为对照组,大鼠先给予抗-MIF单抗腹腔注射后再给予油酸静脉注射为抗-MIF单抗干预组。静注后4h,3组大鼠分别测定动脉血氧分压(PaO₂),肺泡通透指数等肺损伤指标;用ELISA法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)水平;用原位杂交检测MIF和ICAM-1mRNA表达水平;用免疫组化双重套染方法检测巨噬细胞浸润程度与MIF表达的关系。结果:油酸组PaO₂低于对照组和干预组,肺通透性指数高于对照组和干预组(P<0.01),BALF中sICAM-1水平显著高于对照组和干预组(P<0.01)。油酸组肺组织MIF和ICAM-1表达明显高于对照组和干预组(P<0.01),经抗-MIF单抗干预ICAM-1表达变化不明显,但MIF表达显著下调,巨噬细胞浸润减少且肺损伤指标改善。结论:MIF和ICAM-1在介导巨噬细胞对组织的粘附、浸润和ALI的发生发展中起重要作用,抗-MIF单抗主要通过阻断MIF表达,减少巨噬细胞浸润而起肺保护作用。     

谷氨酰胺抑制早产高氧肺损伤大鼠肺组织的炎症反应及其机制

目的研究谷氨酰胺对早产高氧肺损伤大鼠肺部炎症反应的影响及机制。方法制备早产高氧肺损伤大鼠模型,给予谷氨酰胺处理。利用Diff-Quik染色检测大鼠支气管肺泡灌洗液中炎症细胞聚集情况,HE染色观察早产高氧肺损伤大鼠肺组织的炎症变化,TUNEL染色观察早产高氧肺损伤大鼠肺组织的细胞凋亡情况,ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,Western blot法检测肺组织中丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1(MKP-1)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及胞质磷脂酶A2(cPLA2)的磷酸化水平。结果谷氨酰胺处理可以抑制肺部炎症反应和细胞凋亡,减少IL-1β和TNF-α的表达,促进MKP-1的磷酸化,抑制MAPK的激活和cPLA2磷酸化,减轻肺部炎症,缓解早产高氧大鼠肺组织肺炎症损伤。结论谷氨酰胺通过调节MKP-1/MAPK信号通路抑制早产高氧肺损伤大鼠肺部炎症反应。     

用基因突变直接分析来检测α_1-抗胰蛋白酶缺乏

α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)是由肝脏合成的一个重要血浆蛋白酶抑制因子,其主要作用场所在肺泡,能抑制多形核白细胞弹性蛋白酶,防止肺弹性蛋白被水解。若弹性蛋白酶过盛,肺泡出现永久性损伤,最终导致肺气肿。遗传性酶缺乏者发生肺气肿为一般人辞的20～30倍。此外,缺酶的幼儿的14%将发展成为致死的肝硬化。α_1-AT的合成受一个常染色体上Pi位     

HSF1对LPS诱导的急性肺损伤小鼠的保护作用及其相关差异表达基因的筛选

目的:探讨热休克因子1(heat shock factor 1,HSF1)减轻脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的作用及其分子机制。方法:采用气管滴注LPS的方法制备小鼠急性肺损伤模型,观察HSF1野生型小鼠(HSF1~(+/+))和HSF1敲除小鼠(HSF1~(-/-))肺大体改变和肺组织病理改变,检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中总蛋白、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β和IL-6的蛋白表达。采用基因芯片技术筛选经LPS处理后的HSF1~(+/+)和HSF1~(-/-)小鼠肺组织中的差异表达基因,并进一步采用real-time PCR对CXC趋化因子受体2(CXC chemokine receptor 2,CXCR2)的表达进行验证。结果:与经LPS刺激后的HSF1~(+/+)小鼠相比,经LPS刺激的HSF1~(-/-)小鼠肺大体和病理损伤加重,BALF中总蛋白、VEGF、TNF-α、IL-1β和IL-6的含量升高,差异具有统计学意义(P0.05)。基因芯片分析发现,与经LPS处理的HSF1~(+/+)小鼠相比,HSF1~(-/-)小鼠共筛选出918个差异基因,有65个基因表达差异明显,其中Atg7、ccr1、cxcr2、Tbl1xr1、Mmp9、Pparg、Plcb2、Arrb2、Cntn1、Col4a6等共28个基因在HSF1~(-/-)小鼠的肺组织中表达明显上调;Fgfr1、Fgfr2、Map4k4、Ddx58、Tfg、Stat3、Smad4、Lamc1、Sdc3等共37个基因表达明显下调。Real-time PCR结果显示,CXCR2的mRNA水平在LPS刺激的HSF1~(-/-)小鼠肺组织较HSF1~(+/+)小鼠表达明显上调,表达趋势与基因芯片结果一致。结论:HSF1能减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤,CX-CR2可能参与了对肺组织的保护作用。     

急性肺损伤大鼠肺泡内中性粒细胞凋亡的延迟

目的 :观察急性肺损伤 (ALI)时中性粒细胞 (PMN)的凋亡情况 ,以阐明其在肺损伤中的作用。方法 :对盐酸内毒素造成的大鼠ALI模型行肺泡灌洗术 ,将其中的PMN及正常外周血PMN分别与ALI组及对照组的肺泡灌洗液 (BALF)孵育 ,用AnnexinV及形态学方法测其凋亡率 ,并观察白细胞介素 - 1β(IL - 1β)的表达情况。 结果 :同ALI的BALF孵育的PMN凋亡明显延迟 ,其IL - 1β的表达亦升高 ,IL - 1β与PMN的凋亡呈负相关。 结论 :ALI时 ,肺泡内PMN的渗出增加 ,凋亡延迟 ,可能与IL - 1β表达升高有关。     

Adipolin/CTRP12对LPS致ARDS小鼠的保护作用及肺泡上皮钠离子通道的调节

目的:探讨adipolin/CTRP12对LPS致ARDS小鼠的作用及肺泡上皮钠离子通道(ENaC)的调节。方法:40只C57BL/6J小鼠按随机数字表分为对照组、LPS组、adipolin组和wortmannin(PI3K抑制剂)组,每组10只。苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理改变;伊文氏蓝标记蛋白检测肺水清除率(AFC),BCA法测支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量,评估肺组织通透性改变;ELISA检测BALF中白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,髓过氧化物酶(MPO)试剂盒检测MPO活性,吉姆萨染色计数BALF总细胞数和多形核白细胞数,Western blot法检测肺组织α-ENaC蛋白表达和Akt磷酸化水平,实时荧光定量PCR检测肺组织α-ENaC的mRNA转录水平。结果:与control组相比,LPS组表现出典型的ARDS病理改变,肺损伤明显(P0.05),湿干重比(W/D)和BALF蛋白含量明显增高而AFC明显减弱(P0.05),BALF细胞计数、MPO活性、IL-1β含量和TNF-α含量明显升高(P0.05),而肺α-ENaC表达和Akt磷酸化水平显著下调(P0.05)。与LPS组相比,adipolin组肺损伤明显减轻(P0.05),W/D和BALF蛋白含量明显降低而AFC明显增强(P0.05),且BALF细胞计数、MPO活性、IL-1β含量和TNF-α含量均较LPS组显著降低(P0.05),伴α-ENaC表达和Akt磷酸化水平显著上调(P0.05)。而PI3K抑制剂wortmannin组与adipolin组相比,其肺损伤明显加重(P0.05),W/D和BALF蛋白含量明显增高,AFC明显减弱(P0.05),BALF细胞计数、MPO活性、IL-1β含量和TNF-α含量明显升高(P0.05),同时伴α-ENaC表达和Akt磷酸化水平显著下调(P0.05)。结论:Adipolin/CTRP12可通过PI3K/Akt信号通路介导的α-ENaC上调机制,增强肺水肿液清除能力,从而对LPS所致ARDS小鼠发挥保护性调控作用。