九节龙皂甙体内的抗肿瘤作用

[目的]观察川产九节龙皂甙二种新化合物(AR1，AR2)在动物体内的抗肿瘤作用。[方法]体内接种4株小鼠移植性肿瘤细胞(S180，EAC，B16，HEPA)于腋部皮下，次日分组给药，10日内每天腹腔注射给药一次，计算各组小鼠平均瘤重和抑瘤率。[结果]九节龙皂甙能抑制小鼠肉瘤和小鼠艾氏腹水癌肿瘤细胞的生长，抑瘤率25％～3896；AR1对小鼠黑色素瘤和AR2对小鼠肝癌有一定的抗肿瘤作用。[结论]川产九节龙皂甙能抑制S180、EAC、B16和HEPA小鼠移植性肿瘤的生长，具有抗肿瘤作用。     

川产九节龙皂甙对小鼠免疫功能的影响

目的　观察川产九节龙皂甙对动物免疫功能的影响。方法　采用腹腔注射给药进行碳粒廓清试验、巨噬细胞吞噬试验、E花结形成试验和迟发超敏反应试验。结果　九节龙皂甙明显增强小鼠单核细胞和腹腔巨噬细胞的吞噬能力 ;促进血清溶血素的生成和玫瑰花细胞的形成。结论　九节龙皂甙能增强小鼠的免疫功能。     

九节龙皂甙对Hela细胞生长的抑制作用

目的　观察九节龙皂甙 (Ardiusilloside)对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用。方法　九节龙皂甙 6 2 5mg·L-1处理Hela细胞 0～ 72h ,在不同时间点采用光镜观察Hela细胞形态 ,以琼脂糖凝胶电泳检测Hela细胞凋亡DNA的梯形带 ;应用特异性Ca2 + 荧光探测剂Fluo 3 /AM在LSCM条件下检测不同时期细胞内Ca2 + 分布情况。结果　光镜下体外培养的Hela细胞在九节龙皂甙作用 2 4h开始出现细胞质皱缩和细胞核凝缩等凋亡的形态学特征。 60、72h均检测出DNA梯形带等凋亡的生物化学特征。诱导Hela细胞48、60、72h内Ca2 + 严重超载且维持在较高浓度水平。结论　九节龙皂甙对体外培养的Hela细胞具有明显的抑制作用且诱导Hela细胞凋亡发生 ;细胞凋亡时细胞内 [Ca2 + ]增加且维持在较高水平     

川产九节龙皂甙Ⅰ在小鼠体内的抗肿瘤作用

0　引言　川产九节龙皂甙 系从紫金牛科紫金牛属植物川产九节龙 (Ardisia pusilla A.DC)全草中提取得到的三萜皂甙单体 [1 ] .现就其急性毒性、抗肿瘤作用做了初步探讨 .1　材料和方法1.1　材料　九节龙皂甙 由本所植化室提供 ,用生理盐水配成适当浓度的溶液备用 (以下简称皂甙 ) ;氟尿嘧啶 (5 -FU) :天津市氨基酸公司人民制药厂生产 ,批号 970 815 ;动物 :昆明种小鼠 170只 ,BAL B/ c小鼠 30 0只 ,体质量 18～ 2 2 g;S1 80 ,S37系实体肉瘤 ,动物和瘤株均由本校实验动物中心提供 .1.2　方法　用改良寇氏法 [2 ]对皂甙 进行小鼠半数…     

流式细胞术检测九节龙皂甙对Hela细胞凋亡的诱导作用

0　引言　细胞凋亡 (Apoptosis)是一种生理性细胞程序化死亡 ,与肿瘤的发生、发展密切相关 ,已成为当前肿瘤研究的新热点 .九节龙皂甙是从川产九节龙全草中提出的单体[1 ] ,我们观察九节龙皂甙诱导 Hela细胞凋亡 ,采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)进行分析 ,结果如下 :1　材料和方法1.1　细胞系及细胞培养　人宫颈癌细胞株 (Hela)为上皮样癌细胞 ,本校 40 3研究所提供 .细胞培养方法见参考文献[2 ].1.2　细胞凋亡的诱导和分析　实验组分别以 1.5 6～ 5 0 .0μg· m L- 1九节龙皂甙 (本校药物研究所提供 )作用 Hela细胞(10 6 · m L- …     

薏苡仁酯对人鼻咽癌细胞生长的抑制作用

采用ＭＴＴ法和活细胞计数法观察薏苡仁酯（Ｃｏｉｘｅｎｏｌｉｄｅ,ＣＸＬ）对人鼻咽癌细胞ＣＮＥ－２Ｚ生长的影响。结果表明ＣＸＬ对ＣＮＥ－２Ｚ的生长呈剂量依赖性抑制,ＩＤ５０为１０－４．９５０ｍｏｌ／Ｌ,相对效力是顺铂（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ,ＤＤＰ）的１８．６％（在ＩＤ５０水平比较）。时效曲线显示,加药１２ｈ即见效,且随时间的延长而增强,但３６ｈ后抑制作用不再加强。ＣＸＬ还能使ＣＮＥ－２Ｚ的倍增时间（ＴＤ）延长４０．０％,对正常骨髓造血细胞未见毒性作用。以上实验结果提示ＣＸＬ选择性地抑制ＣＮＥ－２Ｚ的生长,其机理可能与肿瘤细胞增殖能力减弱有关。     

正交试验优选九节龙皂苷Ⅰ的提取工艺研究

目的筛选九节龙中九节龙皂苷Ⅰ的最佳提取工艺,并建立HPLC-ELSD法对九节龙皂苷Ⅰ的测定方法。方法采用L_3(3～4)正交试验,以九节龙皂苷Ⅰ提取率和干浸膏得率为检测指标。HPLC-ELSD色谱条件:Phe-nomenexC_(18)(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水(75:25);体积流量:1.0mL/min;检测器漂移管温度:73.8℃;载气体积流量:2.0L/min。结果最佳提取工艺为75%乙醇,第1次8倍量提取4h,第2次6倍量提取3h。九节龙皂苷Ⅰ在0.88-4.42μg范围内线性关系良好(r=0.9999);样品平均回收率为100.37%,RSD为1.88%(n=6)。结论建立的正交试验优选九节龙的提取方法可行,采用的HPLC-ELSD法测定九节龙皂苷Ⅰ的方法可用于九节龙皂苷Ⅰ的质量控制。     

高效液相色谱分离纯化九节龙皂苷I

目的 采用制备色谱系统从九节龙皂苷粗品中分离纯化九节龙皂苷I,建立其纯化工艺.方法 九节龙皂苷粗品采用柱色谱分离,然后采用制备色谱系统,收集对应峰的回收液,即得九节龙皂苷I,并对产品进行了TLC定性和质量分数定量分析.结果 产品经HPLC检测,为九节龙皂苷I,质量分数达99％以上.结论 用制备色谱系统进行九节龙皂苷I的分离和纯化,具有简便、快捷、周期短、自动化程度高、收集全面等优点.     

高效液相色谱分离纯化九节龙皂苷Ⅰ

目的采用制备色谱系统从九节龙皂苷粗品中分离纯化九节龙皂苷Ⅰ,建立其纯化工艺。方法九节龙皂苷粗品采用柱色谱分离,然后采用制备色谱系统,收集对应峰的回收液,即得九节龙皂苷Ⅰ,并对产品进行了TLC定性和质量分数定量分析。结果产品经HPLC检测,为九节龙皂苷Ⅰ,质量分数达99%以上。结论用制备色谱系统进行九节龙皂苷Ⅰ的分离和纯化,具有简便、快捷、周期短、自动化程度高、收集全面等优点。     

九节龙皂苷对胃肠平滑肌功能的兴奋作用

目的 考察九节龙皂苷对大鼠及小鼠不同状态下胃肠功能的兴奋作用。方法 给予正常小鼠及阿托品导致胃肠功能障碍小鼠九节龙皂苷后测定其胃排空及肠推进,分别测定在正常克氏液和低钙克氏液中孵育的大鼠离体小肠收缩性,并用Western blot法检测九节龙皂苷对便秘大鼠肠肌球蛋白轻链激酶（MLCK）表达的影响。结果 九节龙皂苷可促进正常及胃肠功能障碍小鼠的胃排空及肠推进,增强大鼠离体小肠收缩性,且可刺激便秘大鼠MLCK的表达。结论 九节龙皂苷可促进平滑肌MLCK的表达,进而增强胃肠平滑肌运动功能。     

蜂胶对人子宫内膜腺癌细胞株体外增殖的影响

目的检测蜂胶对人子宫内膜腺癌细胞株（jEc）细胞体外增殖的影响。方法将细胞接种于96孔板,用不同浓度的商品蜂胶液分别作用24,48,72,96小时后,用MTr法检测细胞增殖的情况。结果蜂胶在浓度为100μl／ml和10μl／nd时对JEC细胞有较强的抑制作用,在浓度为1μl／ml时则随时间的增加其抑制作用增强（其抑制作用具有时间／浓度依赖性）。结论蜂胶在体外能有效地抑制JEC细胞的增殖。     

蝙蝠葛碱对人膀胱癌T-24细胞株生长增殖的抑制作用

目的 探讨中药北豆根提取物蝙蝠葛碱(dauricine,Dau)对人膀胱癌T-24细胞株的增殖抑制作用及其作用机制.方法 应用MTT法测定了蝙蝠葛碱对泌尿系肿瘤细胞增殖反应的影响;采用流式细胞技术、荧光染色法、琼脂糖凝胶电泳等技术测定和观察了蝙蝠葛碱对诱导肿瘤细胞凋亡的影响.结果 蝙蝠葛碱对膀胱癌T-24细胞株的增殖有较强的抑制作用,具有浓度依赖性特点.T-24细胞DNA琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡特征性梯形条带.流式细胞分析,浓度为5～30μg/ml的蝙蝠葛碱具有诱导人膀胱癌细胞凋亡的作用,且随着药物作用时间延长凋亡率逐渐增加,随药物浓度的增高细胞周期被阻滞在G0/G1期.T-24细胞的bcl-2基因表达受抑,而bax基因的表达上调.结论 蝙蝠葛碱可有效抑制人膀胱癌T-24细胞株的生长增殖,阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡可能起重要作用.     

趋化因子受体CXCR4小干扰RNA对人大肠癌细胞株迁移的抑制作用

目的:探讨趋化因子受体CXCR4小干扰RNA(siRNA)对人大肠癌细胞株迁移的抑制作用.方法:采用RT-PCR、Western印迹和体外迁移实验检测趋化因子受体CXCR4在大肠癌细胞株SW480、SW620、LoVo 细胞的表达及迁移能力.将与CXCR4 mRNA互补的 siRNA及非抑制性双链RNA(Non-silencing dsRNA),在脂质体介导下以150 nmol/L终浓度转染大肠癌细胞SW480,以RT-PCR和Western印迹法检测CXCR4表达的变化,Transwell迁移实验检测大肠癌细胞SW480迁移的变化.结果:大肠癌细胞SW480高表达CXCR4,大肠癌细胞LoVo低表达CXCR4,SW620的CXCR4表达水平介于二者之间.与LoVo 细胞相比,SW480和SW620迁移细胞明显增多(P＜0.01).与对照组、脂质体组和Non-silencing dsRNA组相比,siRNA组SW480细胞内CXCR4 mRNA和蛋白均明显降低,细胞迁移被明显抑制 (P＜0.01).结论:CXCR4 siRNA可通过下调CXCR4的表达抑制人大肠癌细胞SW480的迁移.     

染料木黄酮对卵巢癌HO-8910PM裸鼠移植瘤的抑制作用

目的：观察植物雌激素染料木黄酮（GEN）与顺铂（DDP）联合应用治疗人卵巢癌裸鼠移植瘤的效应及其机制．方法：建立20只人卵巢癌裸鼠移植瘤模型,随机分成4组,分别为对照组、GEN组、DDP组及GEN＋DDP组．4wk后处死裸鼠,计算抑瘤率,用Ⅷ因子抗原多克隆抗体测定肿瘤内微血管密度（MVD）,用细胞增殖指数（PI）反映细胞增殖状态,并进行形态学观察．结果：DDP组及GEN组均可有效抑制卵巢癌移植瘤生长,二者联合应用有协同作用．GEN＋DDP组MVD和PI低于GEN组和DDP组（P〈0．01）,3组均显著低于对照组（P〈0．01）．形态学观察可见GEN组和GEN＋DDP组细胞凋亡、凋亡小体及变性坏死增多,而对照组少见．结论：GEN对人卵巢癌HO-8910PM细胞裸鼠移植瘤有明显抑制作用,且与DDP有协同作用;GEN对肿瘤细胞的作用,与抑制肿瘤细胞的增殖和肿瘤区新生血管的生长、阻断肿瘤血供有关．     

薯蓣皂苷元对人低分化胃腺癌细胞株生长的抑制作用

目的：观察薯蓣皂苷元（diosgenin, Dio）对人低分化胃腺癌细胞株（MGC-803）的细胞分裂和集落形成的影响,初步探讨其杀伤肿瘤细胞的机制。 方法：采用四唑蓝（MTT）比色法、平板集落形成实验以及［³H］-TdR掺入实验。结果：MTT法检测Dio作用24、48、72 h的半数抑制浓度(IC₅₀)为56.290、27.837、17.723 mg•L^-1;平板集落形成实验显示Dio半数集落形成抑制浓度为5.486 mg•L^-1;Dio在较低浓度（3.750和7.500 mg•L^-1）下,可直接抑制MGC-803细胞DNA的合成。结论：Dio能够明显抑制MGC-803的细胞分裂和集落形成。     

丙酮酸乙酯对人胰腺癌细胞的抑制作用

目的观察丙酮酸乙酯(ethyl pyruvate,EP)对人胰腺癌细胞PANC-1和AsPC-1增殖、凋亡及高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)mRNA表达水平的影响。方法采用MTT和FCM法分别检测EP与5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)单独及联合作用(EP组,E组;5-FU组,F组;联合组,EF组)对PANC-1和AsPC-1细胞增殖和凋亡的作用;通过Real Time-PCR(RT-PCR)观察各用药组对PANC-1和AsPC-1细胞HMGB1mRNA表达水平的影响。结果随着药物浓度的增加,各用药组细胞增殖活性及HMGB1mRNA表达水平逐渐降低,凋亡率逐渐增高。E0.5225F10、E1.0450F20、E2.0900F40、E3.1350F80组的胰腺癌细胞抑制率均比相应E组高(P<0.05),EF组的胰腺癌细胞凋亡率均比相应E组高(P<0.05),E3.1350F80、E4.1800F160组均比相应E组的胰腺癌细胞HMGB1mRNA表达水平高(P<0.05)。结论 EP可能通过对HMGB1表达的影响,抑制胰腺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡,从而起到抗胰腺癌作用,但是其具体机制及在体内的作用有待进一步深入研究。     

miRNA-29c抑制前列腺癌细胞系LNCaP的增殖和侵袭

目的观察miRNA-29c(miR-29c)对前列腺癌细胞系LNCaP增殖和侵袭能力的影响,探讨其潜在的应用价值。方法采用qRT-PCR观察雄激素依赖性(LNCaP)与雄激素非依赖性(LNCaP-AI)前列腺癌细胞中miR-29c的表达差异;采用miR-29c抑制物(anti-miR-29c)下调LNCaP细胞中miR-29c的表达量,绘制LNCaP细胞生长曲线,利用流式细胞仪测定细胞周期;Transwell侵袭实验分析miR-29c抑制前后LNCaP细胞的体外侵袭能力。结果 qRT-PCR显示LNCaP-AI细胞中miR-29c水平明显低于LNCaP细胞(P<0.05);下调LNCaP细胞中miR-29c的表达量,可明显促进LNCaP细胞体外增殖及侵袭能力(P<0.05)。结论 miR-29c的正常表达有利于抑制LNCaP细胞的体外增殖和侵袭,有望成为前列腺癌生物治疗的潜在靶点。     

小剂量紫杉醇联合重组人血管内皮抑素对乳腺癌MCF-7细胞抑制作用的实验研究

目的:观察小剂量(40 μg/ml)紫杉醇(Paclitaxel,PTX)联合重组人血管内皮抑素(Recombinant human endostatin,rhES)对人乳腺癌MCF-7细胞生长及其血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的抑制作用.方法:实...     

阿斯匹林对胃癌细胞株SGC—7901的体外细胞毒作用

近年研究表明非甾体类抗炎药物对某些肿瘤具有抑制作用。本文采用噻唑蓝体外细胞毒试验（MTT）,观察阿斯匹林对人胃癌细胞株SGC－7901的生长抑制作用。结果表明：阿斯匹林对SGC－7901生长有明显的抑制作用,其抑制率与阿斯匹林浓度和作用时间呈正相关性（r分别为0．8873和0．8256,P值均小于0．001）。小剂量阿斯匹林联合5－Fu作用于SGC－7901,其生长抑制率有明显提高。结论：阿斯匹林具有抑制人胃癌细胞株SGC－7901生长的作用,与5－Fu联用效果更佳。     

Inhibitory effect of mycophenolate mofetil on human hepatocellular carcinoma cell line HepG-2

To investigate the inhibitory effect of mycophenolate mofetil on human hepatocellular carcinoma cell line HepG-2. Methods： HepG-2 cells were cultured in the presence of the different concentrations of mycophenolate mofetil in vitro. MTT assay was used to analyze the inhibition of cell viability conferred by mycophenolate mofetil. Cell apoptosis was observed using Hoechst33258 staining, and the percentage of HepG-2 cells at different cell cycles was determined through flow cytometry. The ability of cell adhesion was evaluated by in vitro adhesion assay. Gene expressions of factors （ICAM-1 and VCAM-1） were detected by RT-PCR. Results： Mycophenolate mofetil significantly inhibited the growth of HepG-2 cells by inducing the apoptosis of cells and this drug also inhibited the adhesion of HepG-2 cells in a dose-dependent manner. Marked morphological changes characterized in cell apoptosis were demonstrated through Hoechst33258 staining. In addition, mycophenolate mofetil decreased the proportion of S phase cells and increased that of G0/G1 phase cells. [^3H]-Thymidine uptake assay indicated that the application of mycophenolate mofetil at different concentrations significantly inhibited the cell proliferation. RT-PCR identified the expression levels of ICAM-1 and VCAM-1 genes in liver cancer cells after cultured for 72 h with different concentrations of drug. An inverse relationship was found between the expressions of ICAM-1 and VCAM-1 and drug concentrations. Conclusion： Mycophenolate mofetil has remarkable inhibitory effect on hepatocarcinoma HepG-2 cells.