钙激活钾通道在 EDHF 介导的血管内皮源性舒张中的作用

目的探索猪的冠状动脉中,钙激活钾通道（Calcium-activated potassium channels,Kca）在内皮源性超极化因子（Endothelium-Derived Hyperpolarizing Factor,EDHF）介导的血管舒张中的作用。方法Kca通常分为三类：大电导Kca（Large-Conductance Kca BKca）,中电导Kca（Intermediate-Conductance Kca,IKca）和小电导Kca（Small-Conductancekca,SKca）,因此根据加入Kca阻滞剂的不同,将血管环分为对照组（不加入KCa阴滞剂）,charvhodntoxin（BKca和IKca通道阻断剂）组,Apamin（SKca通道阻断剂）组．charybodotoxin＋Apamin组,Iberiotoxin（BKCa通道阻断剂）组,每组血管环n=6。采用器官槽法．所有血管环平衡1h后,对照组加入7umol/t．环加氧酶阻滞剂吲哚美辛（Indomethacin．Indo）和300umol/L一氧化氮合酶阻滞剂N-硝基-L-精氰酸（N-nitro-L-arginine,L-NNA）,实验组在加入Indo和L-NNA的基础上分别或联合应用BKca、IKca和SKca的阻断剂,水浴30min后,记录由前列腺素F2α（ProstaglandinF 2α,U46619）及缓激从（Bradykinin,BK）引起的血管收缩和舒张反应。结果Charybodotoxin组,Charybodotoxin＋Apamin绀和Iberiotoxin组中EDHF介导的内皮依赖性血管最大舒张百分比与对照组相比显著下降．且Charybodotoxin组的最大舒张百分比较Charybodotoxin＋Apamin组更低,但Apamin组血管环最大舒张百分比与对照组相比无统计学意义。结论研究证明BKca和SKca通道均在EDHF介导的舒张功能中发挥一定作用,且以协同的方式作用于血管,IKca通道也可能发挥了一定的作用。     

血管平滑肌钙激活钾通道及其调控

血管平滑肌钙激活钾通道及其调控桂培春（中国协和医科大学基础医学院生理研究室，北京１００００５）ＭｏｄｕｌａｔｉｏｎｏｆＣａｌｃｉｕｍＡｃｔｉｖａｔｅｄＰｏｔａｓｓｉｕｍＣｈａｎｎｅｌｉｎＶａｓｃｕｌａｒＳｍｏｏｔｈＭｕｓｃｌｅＧｕｉＰｅｉｃｈｕｎ（Ｄ...     

内皮源性舒张因子与高血压

内皮源性舒张因子与高血压蚌埠医学院附属医院张弘综述刘霞秋审校高血压是人类死亡的主要原因之一，然而，其发病机理仍未阐明。近年的研究表明，血管内皮细胞释放的内皮源性舒张因子（Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ－ｄｅｒｉｖｅｄｒｅｌａｘｉｎｇｆａｃｔｏｒ，Ｅ－ＤＲＦ）...     

原发性高血压患者血压参数与血管平滑肌细胞钙激活钾通道活性的相关性研究

目的:探讨原发性高血压患者血压参数与血管平滑肌细胞钙激活钾通道(KCa)活性的相关性。方法:切取21例原发性高血压患者(高血压组)及18例非高血压者(血压正常组)的肠系膜动脉小分支节段,用酶消化法获取血管平滑肌细胞,以膜片钳技术检测KCa通道的活性,通过Pclamp专用软件实时采样记录其平均开放时间(To),平均关闭时间(Tc),平均开放概率(Po)等。采用美国Meditech公司的ABPM-04动态血压监护仪,记录24h平均收缩压、24h平均舒张压、24h平均脉压、白昼血压、夜间血压、脉压变异性。结果:①两组血压参数:高血压组24h平均收缩压与平均舒张压、白昼平均收缩压与平均舒张压、夜间平均收缩压与平均舒张压、24h平均脉压、脉压变异性均显著高于血压正常组;②两组KCa通道活性变化:两组于细胞内面向外膜片下,不同浓度Ca2+较Ca2+浓度为0时Po、To增加,Tc缩短,有显著性差异;③高血压组血管平滑肌KCa活性与血压参数的相关性:24h平均舒张压、白昼及夜间平均舒张压、24h平均脉压升高时,Po显著增加,To显著延长,Tc显著缩短。但24h平均收缩压、白昼及夜间平均收缩压、脉压变异性变化与Po、To、Tc关系不明显。结论:原发性高血压患者肠系膜动脉平滑肌KCa通道活性明显高于非高血压者,但对Ca2+的敏感性降低。原发性高血压患者舒张压、     

气道平滑肌钙激活钾通道与支气管哮喘研究进展

钙激活钾通道是气道平滑肌细胞上重要的离子通道之一,它与气道张力调控,气道平滑肌的增殖迁移有一定联系,深入的了解它们的结构功能以及调控因素,有助于揭示哮喘的发病机制,并为临床治疗提供依据.     

气道平滑肌钙激活钾通道与支气管哮喘研究进展

钙激活钾通道是气道平滑肌细胞上重要的离子通道之一,它与气道张力调控,气道平滑肌的增殖迁移有一定联系,深入的了解它们的结构功能以及调控因素,有助于揭示哮喘的发病机制,并为临床治疗提供依据。     

大电导钙激活钾通道介导血管平滑肌细胞增殖及其机制

目的探讨大电导钙激活钾通道(BKca)是否通过Ras-Raf-MEK1/2-ERK1/2信号途径影响兔主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)的增殖。方法用低浓度的四乙胺(TEA)处理体外传代培养的家兔胸主动脉VSMC。采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)和流式细胞术(FCM)检测TEA对VSMC的增殖和细胞周期的影响,分别采用免疫组化法和免疫印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(P-ERK1/2)蛋白表达。结果 (1)MTT法检测结果显示,TEA能够呈时间依赖性和剂量依赖性地降低吸光值、增加细胞抑制率(P0.05);(2)流式细胞术分选结果显示,TEA处理48 h后能够呈剂量依赖性地增加G1期细胞比例,减少S期、G2期细胞比例(P0.05);(3)免疫组化检测结果显示,随着TEA浓度的增加,VSMC的PCNA阳性表达率逐渐下降(P0.01);(4)免疫印迹法结果表明,经400μmol/L的TEA处理48 h后,ERK1/2、P-ERK1/2蛋白表达,ERK活化率与未经处理的对照组比较,均无统计学意义(t=0.354~1.035,P0.05)。结论 TEA可呈浓度依赖性地阻止细胞周期由G1向S期推进,抑制VSMC增殖;该过程的分子机制不经由Ras-Raf-MEK1/2-ERK1/2信号途径介导。     

血管活性剂对高血压患者肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾通道活性的调控作用

肥胖是心脑血管病的危险因素，而关于肥胖与颈动脉粥样硬化的关系尚不清楚。方法：通过多普勒超声检查高血压病患者颈动脉粥样硬化的方法，选择82例高血压病患者血压一直控制较好，其中男性66例，女性16例，年龄52～80岁，不伴冠心病、糖尿病、脑血管疾病，总胆固醇〈5．7mmol／L，甘油三酯〈1．7mmol／L，低密度脂蛋白〈3．1mmol／L。观察体重指数与颈动脉粥样硬化斑块的发生率及内中膜厚度的相互关系。结果：体重指数高的患者其颈动脉粥样硬化斑块的发生率及内中膜的厚度也高（P〈0．05，P〈0．01）。结论：体重指数与颈动脉粥样硬化斑块和内中膜厚度相关。肥胖可能参与动脉粥样硬化的形成和发展。     

钙激活钾通道在血管平滑肌细胞增殖中的作用

在人体血管生理性生长的各个阶段，均存在血管平滑肌正常增殖，而在高血压、动脉粥样硬化等病理过程中，则表现出血管平滑肌的异常增生。在这些病理变化中，血管平滑肌细胞的增生受许多因素的调节，其中钙激活钾通道（KCa）的活性改变是最重要的影响因素之一，KCa已被证实在细胞增殖中扮演重要角色。研究发现，中电导KCa（IKCa）在增生型血管平滑肌中的表达显著增加，一些研究还发现大电导KCa（BKCa）活性改变在血管平滑肌增殖的早期起作用，现对KCa在血管平滑肌增殖中的研究进展做一综述。     

长期高盐所致高血压大鼠主动脉血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的变化

目的观察高盐饮食后大鼠血压水平及主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)大电导钙激活钾通道(BKCa)电流的变化。方法 3周龄雄性Wister大鼠随机分为2组:对照组和模型组,每组24只大鼠;对照组予以正常(含0.5%Na Cl)饮食,模型组予以高盐(含4%Na Cl)饮食。采用尾动脉测压法测量大鼠血压,全细胞膜片钳技术记录大鼠主动脉VSMC膜BKCa电流。结果模型组从第8周开始血压明显升高,随着高盐饮食时间延长,血压逐渐增加;在第10、12、14、16周时血压较对照组均显著升高(P0.01)。模型组大鼠主动脉VSMC膜BKCa电流和电流密度随高盐饮食时间延长而显著增大;在第8、12、16周时,BKCa峰电流密度较对照组明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论高盐饮食可导致大鼠血压升高;大鼠BKCa电流密度随着高盐饮食所致血压的升高而逐渐增加。     

雌激素对高血压人体肠系膜动脉平滑肌细胞大电导钙激活钾通道的作用研究

目的 研究雌激素（E）对非高血压（NH）及原发性高血压（EH）人体肠系膜动脉平滑肌细胞（HMASMC）大电导钙激活钾通道（BKCa channels）及自发性瞬时外向电流（STOCs）的作用,探讨雌激素在NH及EH下对该通道作用的差异性.方法 急性酶分离法分离获取单个HMASMC,采用全细胞穿孔膜片钳技术记录该细胞上的BKCa和STOCs.结果 雌激素可明显激活NH组HMASMC上的BKCa和STOCs,在测试电压范围内,雌激素使膜电位从0到＋60 mV时BKCa的电流密度均显著性增加,在0和＋60 mV时其电流密度分别从（1.95±0.39）pA/pF、（15.40±4.27）pA/pF增加到（2.81±0.84）pA/pF（P＜0.05,25例）、（26.55±6.24）pA/pF（P＜0.01,25例）,其中0 mV时增加了0.44倍,＋60 mV时增加了0.72倍;电位为-20 mV时STOCs的幅度和频率分别从（7.920±2.031）pA、（3.15±0.79）Hz增加到（12.92±3.41）pA（P＜0.05,25例）、（4.41±0.96）Hz（P＜0.01,25例）,其中幅度增加了0.63倍,频率增加了0.40倍.而EH组在测试的-60到＋50 mV电压范围,雌激素没有这种显著性激活作用,在0和＋60 mV时其电流密度分别从（1.34±0.43）pA/pF、（4.91±1.40）pA/pF增加到（1.53±0.55）pA/pF（P＞0.05,14例）、（8.04±2.0）pA/pF（P＜0.05,14例）,其中0 mV时增加了0.14倍,＋60 mV时增加了0.63倍;在电位为-20 mV时STOCs的幅度和频率分别从（5.39±1.93）pA、（0.75±0.37）Hz增加到（6.70±1.06）pA（P＞0.05,14例）、（2.34±0.98）Hz（P＜0.05,14例）,其中幅度增加了0.24倍,频率增加了2.12倍.结论 雌激素对NH组HMASMC上的BKCa和STOCs有明显的激活作用,而在EH组这种激活作用显著降低,由此推测EH组HMASMC对雌激素的反应性较NH组低,这种差异性将为雌激素合理应用于临床提供有力的实验依据. 关键词：高血压;雌激素;人体肠系膜动脉;平滑肌细胞;自发性瞬时外向电流;大电导钙激活钾通道     

槲皮素对人肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的激活作用

目的:观察槲皮素对人肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾通道(KCa)的影响,以探讨槲皮素在分子水平扩张血管的作用机制.方法:选取需择期行腹部手术并且血压正常的患者14例,取肠系膜动脉小分支,用急性酶消化法获得单个肠系膜动脉平滑肌细胞.然后应用单通道细胞膜片钳技术观察不同浓度槲皮素对肠系膜动脉平滑肌细胞KCa通道开放概率(NPo)、电流幅度值(Am)、平均开放时间(To)、平均关闭时间(Tc)等各指标的影响.结果:在内面向外式方式下,随着浴液中槲皮素浓度的增高,通道NPo明显增高:槲皮素浓度100μmol/L时,NPo由用药前(即0 μmol/L)的0.028 62±0.011 99增高到0.147 03±0.058 17(P＜0.01);通道Am、To变化不大(P＞0.05);而通道Tc明显缩短:由用药前(477.650±376.650)ms缩短到(112.643±114.365)ms(P＜0.01).结论:槲皮素能直接激活人类血管平滑肌细胞KCa通道而实现降血压效应.     

灯盏花素对鼠主动脉平滑肌钙激活钾通道的激活作用

目的:观察灯盏花素对大鼠主动脉平滑肌钙激活钾通道(KCa)的影响,揭示灯盏花素在分子水平的作用机制。方法:采用Wistar大鼠20只,应用膜片钳技术,研究灯盏花素对大鼠主动脉平滑肌KCa的作用。结果:细胞贴附式膜片上,应用浓度分别为5×10-4、10-3、1.85×10-3mol/L的灯盏花素后,大鼠的通道开放概率(Po)及通道电导明显增大:Po分别由用药前的0.012±0.047增加至0.427±0.364,0.609±0.312(P<0.05),0.839±0.192(P<0.01);通道电导分别由用药前的(124±59)pS增大至(174±83)pS,(199±41)pS(P<0.05),(269±85)pS(P<0.01)。结论:灯盏花素可激活KCa,从而起到舒张血管的作用。     

高血压病患者肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾通道变化及前列腺素E_1对通道活性的影响

目的　探讨高血压病患者肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾 (KCa)变化及前列腺素 (PG)E1 对通道活性的影响。方法　用酶消化法获取血管平滑肌细胞 ,以膜片钳技术检测KCa通道的活性 ,通过Pclamp专用软件实时采样记录其平均开放时间 (To) ,平均关闭时间 (Tc) ,平均开放概率 (Po)等。然后分别加入不同浓度的Ca2 +(10 - 8、10 - 7、10 - 6mol L)及PGE1 (10、2 0、40、10 0、2 0 0、40 0nmol L)后 ,再观察上述参数变化。结果　高血压病组肠系膜动脉平滑肌细胞KCa通道活性显著高于非高血压组 ,加入Ca2 +后 ,两组KCa通道均被明显激活 ,与加Ca2 +前比较 ,非高血压组Po增加了 18.4倍 ,而高血压病组Po仅增加了 1.7倍。PGE1 可使高血压病患者肠系膜动脉平滑肌细胞KCa通道To延长 ,Tc缩短 ,Po增加。结论　高血压病患者肠系膜动脉平滑肌细胞KCa通道活性明显高于非高血压者 ,但对Ca2 +的敏感性降低 ,PGE1 可明显激活高血压病患者肠系膜动脉平滑肌细胞KCa通道。     

血管活性剂对高血压患者肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾通道活性的调控作用

目的　探讨血管活性剂内皮素 1(ET 1)及前列腺素E1(PGE1)对高血压病患者肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾 (KCa)通道活性的调控作用。方法　切取 2 1例老年高血压病患者及 18例老年非高血压者肠系膜动脉小分支节段 ,用酶消化法获取血管平滑肌细胞 ,以膜片钳技术检测KCa通道的活性 ,通过Pclamp专用软件实时采样记录其平均开放时间 (To) ,平均关闭时间 (Tc) ,平均开放概率 (Po)等。结果　 (1)高血压病患者KCa通道活性变化 ,于细胞内面向外膜片下 ,高血压病组与血压正常组比较 ,前者KCa通道Po增加 ,Tc延长 ,To缩短。在浴液中分别加入Ca2 + 后 ,两组KCa通道均被明显激活 ,与加Ca2 + 前比较 ,血压正常组Po的增加显著高于高血压病组 (P <0 0 0 1) ,说明高血压病组KCa通道对Ca2 + 的敏感性显著低于血压正常组。 (2 )两组溶液中加入ET 12～ 8× 10 9mol/L后 ,在内面向外式膜片下 ,血压正常组Po先增加后降低 ,Tc缩短 ,然而高血压病组患者肠系膜血管平滑肌KCa通道对ET 1则缺乏显著反应。 (3)溶液中加入PGE1后 ,在内面向外膜片下 ,高血压病患者血管平滑肌细胞KCa通道的通道电导增加 ,To显著延长 ,Tc显著缩短 ,Po显著增加 ,并呈浓度依赖性。结论　 (1)高血压病患者肠系膜动脉平滑肌细胞KCa通道活性明显高于非高血压者     

高血压病患者动脉平滑肌细胞钙激活钾通道变化及意义

目的　研究高血压病 (essential hypertension,EH )患者肠系膜动脉平滑肌 (mesenteric arterial sm oothmuscle,MASM)细胞钙激活钾通道 (Ca2 + activated K+ channel,KCa)改变及意义。方法　利用膜片钳单通道记录技术记录胞内和胞外 Ca2 +对无 EH家族史的正常血压者 (Nn 组 ) ,有 EH家族史的正常血压者 (Nf组 ) ,无 EH家族史的 EH患者 (En 组 ) ,有 EH家族史的 EH患者 (Ef组 )肠系膜动脉平滑肌 (MASM)细胞 KCa开放概率 (Po) ,平均开放时间 (To) ,平均关闭时间 (Tc)及电流幅值 (Am)的影响。结果　 (1)人动脉平滑肌 KCa开放具有明显的电压和 Ca2 +依赖性 ,其电导值大。 (2 )胞内 Ca2 + 浓度≥ 5× 10 - 7m ol/ L时 ,En 组、Ef 组 MASM细胞 KCa的 Po 分别低于 Nn 组、Nf组 ,To 缩短。(3)胞外 Ca2 +浓度≥ 1.8× 10 - 3m ol/ L 时 ,En 组、Ef 组 MASM细胞 KCa的 Po 分别高于 Nn 组、Nf组 ,To延长 ,Tc缩短。结论　 (1) EH患者 MASM细胞 KCa对胞内 Ca2 + 敏感性降低 ,这可能是促进高血压发生的机制之一。(2 ) EH患者 MASM细胞对胞外 Ca2 +敏感性增加 ,可能与胞外 Ca2 +内流增加导致胞内 Ca2 +增加有关     

跨膜蛋白16A在原发性高血压患者肠系膜动脉血管平滑肌细胞中的表达和意义

目的探讨跨膜蛋白16A（TMEM16A）在原发性高血压患者肠系膜动脉血管平滑肌细胞中的表达和意义。方法运用westernblot技术对比检测高血压组和正常组的肠系膜动脉平滑肌细胞上TMEME16A的表达情况。结果①人的肠系膜动脉血管平滑肌细胞存在TMEM16A;②高血压组患者TMEM16A表达明显下降（IOD：1．228±0．108,P=0．009）。结论原发性高血压患者的肠系膜动脉血管平滑肌的TMEME16A表达下降,提示TMEME16A可能参与原发性高血压的发生过程。