HBsAg ELISA试剂盒筛检结果的评估

目的 评估部分国产与进口HBsAg ELISA试剂盒筛查血源的价值.方法 选用部分国产和进口HBsAg ELISA试剂,对中国生物制品检定所120份HBsAg临床科研组合血清样本及随机抽取400份东莞市无偿献血者血清标本为验证样本进行同步平行检测,以中国生物制品检定所组合血清及献血者HBsAg阳性并经中和试验证实者为金标准.结果采用四格表法计算两者对等指标并进行评价.结果 国产HBsAg ELISA试剂和进口HBsAg ELISA试剂的灵敏度分别为85.71%（72/84）和100%（84/84）;特异性分别为100%（436/436）和96.55%（421/436）;尤登指数分别为0.86、0.97;两种试剂重复合格率均为100%.结论 试剂的灵敏度以进口HBsAg ELISA试剂较好,但特异性比国产试剂差,两种试剂的重复性均好,两种试剂联合筛检献血者血样标本可提高临床输血的安全性.     

ELISA法和胶体金试纸条法在乙肝表面抗原 检测中的应用研究

目的 研究ELISA法和胶体金试纸条法（GICA）在乙肝表面抗原检测中的准确度和特异性,分析方法的应用价值。方法 选取本院妇幼保健院检验科在2016年5月~2017年12月收集的共计460例血样标本,分别运用ELISA法及GICA法进行检测,比较检测结果。结果 ELISA法乙肝表面抗原阳性率为47.61%,GICA法阳性率为41.96%,差异有统计学意义（P＜0.05）。ELISA法及GICA法在对乙型病毒性肝炎表面抗原检测结果上具有密切的相关性（P＜0.05）。ELISA法灵敏度和特异度均高于GICA法（P＜0.05）。结论 ELISA法在阳性率、特异度及灵敏度等指标上均较GICA法高,但由于GICA法器材更为小巧、简洁直观,且无需大型设备辅助,较为广泛地应用于普查及急诊前检查中。     

免疫酶法与ELISA法检测EB病毒VCA-IgA的比较

为探讨免疫酶法与ELISA在鼻咽癌诊断中的临床价值,检测鼻咽癌组患者与健康对照组血清EB病毒壳抗原抗体,并对两种检测方法的结果进行分析。结果表明：177例鼻咽癌患者中,免疫酶法检测EB-VCA-IgA阳性率高92．1％（163／177）,而国产试剂和进口试剂ELISA法检测结果阳性率都较低,分别为65．0％（115／177）和67．2％（119／177）,有显著性差异（P〈0．005）;在90名对照组血清EB-VCA-IgA,免疫酶法的阴性率为100％（90／90）,ELISA法中的国产和进口试剂的阴性率分别为：98．9％（89／90）和95．6％（86／90）,无显著性差异（P〉0．05）。为此免疫酶法检测EB-VCA-IgA的灵敏度较高,更适合用于鼻咽癌的普查、协助诊断等,具有实际临床意义。     

几种快速检测新生儿粪便中轮状病毒方法的比较

采用快速聚丙烯酰胺凝胶电冰（PAGE）技术、酶联免疫吸附试验（ELISA）和ELISA一步法检测新生儿233份粪便标本中轮状病毒。结果：快速PAGE技术准确，可区分病毒亚群和对流行毒株进行追踪分析，但该法需较昂贵的仪器，操作过程较繁琐，一般基层单位难以开展。常规ELISA法和ELISA一步法具有敏感、特异、快速、简便的特点。二者与快速PAGE结果比较符合率、无显著差异，常规ELISA与ELISA一步法阳性符合率，阴性符合率差别无显著意义，常规ELISA全程需8至12小时．ELISA一步法只需15分钟，且不需任何仪器，可以取代常规ELISA法，适合于基层单位临床早期诊断和现场调查中大批标本的筛检。     

三种促甲状腺素受体抗体检测试剂的比较

目的：评价某国产促甲状腺素受体抗体（TRAb）检测试剂的临床诊断性能,为临床应用提供指导。方法：应用国产TRAb试剂与两种进口同种试剂（德国Roche和英国RSR）同时检测77份临床样本,对比分析三种试剂检测结果的相关性、符合率,并结合历史资料回顾,计算国产试剂对Graves’病的诊断敏感性。结果：两种进口试剂所测TRAb在Graves’病的阳性比例均为13/15,对本文样本阴、阳性分类符合率为89.6%,总体相关系数为0.767（P〈0.001）。国产TRAb试剂在本文Graves’病阳性比例为2/15,在历史回顾病例的阳性比例为5/31;与两种进口试剂比较符合率〈60%、检测浓度相关系数〈0.2（P〉0.1）。结论：两种进口TRAb试剂对Graves’病具有较高的临床诊断性能并相互吻合,某国产TRAb试剂缺乏临床应用价值,建议摒弃。     

血液筛查实验室HBsAg检测的室间质量评价

目的评价我国采供血机构ELISA检测乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen, HBsAg)的检测能力以及所使用的不同试剂盒的检测性能。方法统计分析2018—2021年国家卫生健康委临床检验中心对全国采供血机构实验室开展的HBsAg室间质量评价数据, 评估参评实验室检测能力, 分析和比较各检测试剂的检测精密度以及检测灵敏度等。结果 2018—2021年参与室间质评的单位数量有稳步的增加, 4种国产试剂和2种进口试剂的使用单位数在每年度均超过10家, 两种进口试剂检测adw血清型样本时, 批内CV<7%的实验室比例相对较高(>75%), 而三种国产试剂的批内CV<7%的实验室比例均在50%左右, 说明国产试剂的批内精密度有待提高。3种国产试剂检测0.2 IU/mL的adw2型样本时, S/CO值≥2的实验室为小于50%, 表明这些试剂检测HBsAg弱阳性标本时存在漏检风险;当检测血清型为ayw1时, 两种进口试剂均100%实验室检测正确, 但B试剂和C试剂正确率相对较低(84.4%和60.9%)。结论我国采供血机构实验室ELISA检测HB...     

快速乙肝表面抗原胶体金免疫层析测定法的建立及应用

建立乙肝表现抗原胶体金免疫层析测定法，用于乙肝病毒感染检测。采用亲和力强、特异笥高的自制抗－ＨＢｓ单克隆抗体及胶体金标记和硝酸纤维膜包被技术，制备乙肝表面抗原胶体金免疫层析快速测定试条，并进行了初步临床应用。该法的灵敏度为５ｎｇ／ｍＬ，与目前广泛使用的ＥＬＩＳＡ法对照检测５１３份血清标本，符合率为９９．２％。该法快速、准确、特异、灵敏、简便，基本符合临床应用要求，可用于乙肝表面抗原的检测。     

新生儿苯丙酮尿症筛查国产与进口试剂应用性探讨

目的对比新生儿苯丙酮尿症筛查国产与进口试剂的应用性。方法采用国产广州丰华生物工程公司与进口芬兰Labsystems公司的茚三酮荧光法苯丙氨酸检测试剂盒对6011例新生儿标本进行平行检测。通过实验观察试剂盒的方法学特性,并使用串联质谱法对两试验的阳性标本进行确诊实验。结果 (1)经实验方法学鉴定,国产与进口试剂高低浓度批内变异系数分别为3.9%、4.7%及5.4%、6.3%;高低浓度批间变异系数分别为6.9%、5.8%和7.6%、8.3%;平均重现率分别为103.3%、99.8%,两种检测试剂相关性良好r=0.99,测定结果无明显差别P=0.738。(2)国产与进口试剂平行检测6011例新生儿筛查标本初查阳性分别为21、43例,初筛阳性率分别为3.49‰、7.04‰。新生儿苯丙氨酸含量99%分位值分别为1.31mg/dl、1.44mg/dl。结论两种检测试剂盒均能满足对新生儿苯丙酮尿症筛查。国产丰华试剂盒的精密度高、重现性良好、假阳性率低,有效缓解新生儿家庭的精神压力并降低筛查成本,更适合用于PKU筛查。     

丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）诊断试剂盒质检评价分析

目的:对进口、国产2个厂家的6个不同批次试剂盒进行抽检,以保证试剂的质量,预防不合格试剂用于标本检测.方法:采用抽检的不同批次的试剂盒检测国家标准品考核血清盘,30份阳性血清,30份阴性血清和4份灵敏度血清,计算其灵敏度,特异性,相对符合率等指标.结果:进口抗丙型肝炎病毒(HCV)诊断试剂盒的6个不同批次试剂盒的特异性为99.6%,灵敏度为100%,相对符合率为98.33%;国产抗-HCV诊断试剂盒的6个不同批次,有1个批次的特异性为90.00%,灵敏度为86.66%,相对符合率为88.33%;其他5个批次的特异性为100%,灵敏度为96.66%,相对符合率为98.33%.结论:进口试剂所有批次全部合格,国产试剂有1个批次不合格,退回厂家.影响试剂质量的因素是多方面的,经国家有关部门检定合格的试剂,在投入使用之前必须进行抽检,确保检测结果可靠.     

MCV和红细胞脆性试验在地中海贫血筛查中的诊断价值

目的 探讨MCV（平均红细胞体积）、红细胞脆性在筛查轻型地中海贫血的诊断价值.方法 以MCV与红细胞脆试验,对福田区户籍103例生育期夫妇进行地中海贫血筛查并以地贫基因检测做对照.结果 基因诊断正常与异常组MCV、与异常组脆性值t检验,t值分别为4.157和3.913,P值均＜0.001,两种方法存在统计学差异.MCV法灵敏度100%,筛查试验阳性预测值42.57%,筛查试验阴性率预测值100%,特异度3.33%;脆性法灵敏度16.28%,筛查试验阳性预测值77.78%,筛查试验阴性率预测值61.70%,特异度96.67%;MCV与脆性联合筛查法灵敏度16.28%,特异度98.33%.结论 MCV与RBC脆性试验这两种方法进行地贫筛查,都具有统计学差义,均可用于地贫筛查.MCV筛查法的灵敏度已为100%,因此联合筛查法的灵敏度100%也就无法显示提高.我们认为MCV及红细胞脆联合法的检出率和准确率较高,能有效地检出轻型地中海贫血患者且可互相弥补两法的不足,以降低地贫筛查的漏诊率.当联合筛查有一项指标低于正常参考值时,应做地贫基因诊断.     

应用ROC曲线评价化学发光法及酶联免疫法对HCV感染的诊断价值

目的 探讨国内五种主流丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)酶联免疫法(ELISA)试剂与进口化学发光法(CLIA)检测性能的可比性及其对HCV感染的诊断价值.方法 应用CLIA及五种ELISA(编号为A、B、C、D、E),同时检测免疫印迹法(RIBA)确认的抗-HCV阳性、阴性血清样本各68例,应用受试者工作特征曲线(ROC)评价其性能指标.结果 CLIA及A、B、C、D、E五种ELISA试剂ROC曲线下面积(AUC)分别为:0.989、0.784、0.945、0.841、0.890、0.883(P ＜0.05),差异有统计学意义;CLIA的敏感性大于五种ELISA试剂(P＜0.05),差异有统计学意义,差异主要在于CLIA 8＞S/CO值≥1标本的符合率较低;几种试剂间特异性无显著性差异(P=0.75).结论 国内五种主流HCV抗体ELISA试剂与进口CLIA对HCV感染均具有较高的诊断价值,利用CHA高敏感性及ELISA的高特异性联合检测抗-HCV,可提高HCV感染的诊断效率.     

深圳地区2003—2012年献血者HBsAg／NAT检测结果情况分析

目的分析深圳地区2003—2012年期间献血者HBV感染的流行走势情况。方法所有献血者血样均使用进口与国产酶联免疫试剂,以及血液病毒核酸检测（NAT）方法筛查HBsAg和HBVDNA,采用X^2检验进行统计分析献血者感染HBV的流行趋势。结果深圳地区2003—2012年采血量稳步增长,HBsAg阳性检出率总体呈下降趋势。HBsAg＋／NAT＋与HBsAg＋／NAT-检出率结果相当（1．2：1）;献血者中HBsAg-／HBVDNA＋阳性率呈升高趋势。不同年龄组献血者HBV感染率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论酶联免疫与NAT方法为重要的互补检测手段,能进一步确保输血安全,而隐匿性乙型肝炎病毒感染呈升高态势,应引起高度重视。     

乙肝病毒表面抗原可疑阳性标本确认方法的建立

目的 建立基于酶联免疫吸附试验（ELISA）的乙肝病毒表面抗原（HBsAg）确认方法,避免错误诊断。方法收集ELISA检测HBsAb〉15COI的血清,取HBsAb阳性;HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性;HBsAb、HBcAb阳性三种模式的血清各20份混合,与HBsAgELISA结果浓度〉20COI的血清中和以确认HBsAb的中和活性,制成确认试剂。确认试剂与30例HBsAg弱阳性阳性患者血清中和,HBsAgCOI下降率〉50％判定为阳性,其结果与罗氏确认试剂盒进行比对。结果确认试剂可以很好的中和HBsAg,对30例HBsAg弱阳性标本的判定结果为24例阳性,6例阴性,与罗氏确认试剂盒结果完全一致。结论成功建立HBsAg确认方法,适用于对HBsAg弱阳性样本进行确认,并且简单经济。     

一种灵敏的干血斑葡萄糖-6-磷酸脱氢酶荧光分析法的建立

目的建立葡萄糖-6-磷酸盐脱氢酶（G6PD）荧光分析方法,用于新生儿足跟干血斑中G6PD酶活性的定量测定。方法选择干血斑配制基质,优化底物、复溶物和铜试剂组分,建立G6PD荧光分析法定量检测方法,并对该试剂的各项性能指标进行评价。结果自制试剂分析灵敏度为0.05U/gHb;分析内和分析间精密度分别为4.12%～8.93%、4.75%～9.86%;试剂的cutoff值为2.23U/gHb;1066份样本用该试剂与PerkinElmer（PE）公司同类试剂平行检测,两种试剂测值具有显著相关性（P=0.000）,相关系数为0.960;以PE公司试剂为对照,本试剂的阳性符合率为99.4%,阴性符合率为98.93%。结论该试剂灵敏度高、操作简便快捷,具有良好的精密度,临床检测性能良好,可以满足临床应用的需要。     

一种新型沙眼衣原体核酸检测试剂的临床应用探讨

目的通过对比实验,对新型沙眼衣原体(CT)核酸检测试剂(以下简称"一步法试剂")的临床使用进行评估。方法用1例CT强阳性样本进行梯度稀释,用新型沙眼衣原体免核酸提取的荧光定量PCR检测试剂和市场上最为稳定的煮沸法试剂分别进行检测,考评其精确度与灵敏度。用一步法试剂与煮沸法试剂对345例临床收集的样本进行CT DNA定性检测并对比其结果。结果强阳性样本梯度稀释实验显示,一步法试剂的检测结果重复性好,灵敏度高;一步法试剂与煮沸法试剂的阳性一致性百分比为98.78%,阴性一致性百分比为99.24%,总一致性百分比为99.13%。对此结果进行Kappa检验一致性分析,结果 Kappa值=0.976,表明一步法试剂与煮沸法试剂检测的结果具有很好的一致性。结论一步法试剂与已上市的煮沸法试剂检测结果具有很好的一致性,并且操作简单、结果准确,符合临床检测要求,具有较高的临床应用价值。     

两种巨细胞病毒IgG抗体ELISA诊断试剂性能评价

目的对国内两种巨细胞病毒IgG抗体ELISA诊断试剂进行评价。方法用两种试剂对BBI公司的质控盘QTC711,血清转化盘PTC901,BIOMEX公司血清转化盘SCP—CMV-001（RP-003）、SCP—CMV-002（RP-019）,儿童、孕妇和门诊患者2163份标本进行检测,对不一致的样本用DiasorinELISA试剂盒和Mikrogen重组免疫印迹试剂盒进行复测,比较两种试剂的灵敏度、特异性和对不同人群的检测差异。结果A试剂对3个血清转化盘的检出时间均早于B试剂,平均提前25d,与AbbottImxCMVIgG检测灵敏度一致。两种试剂检测孕妇样本607份,8份不一致,总符合率98．68％;门诊样本512份,7份不一致,总符合率98．63％;儿童样本1044份,74份不一致,总符合率92．91％,两试剂对儿童人群的符合率低于孕妇和门诊人群。两试剂对三个人群检测均为阴性的161份样本,和A试剂检测为阳性B试剂检测为阴性的89份样本,用意大利Diasorin公司CMV—IgGELISA试剂复测,A试剂与Diasorin的阳性符合率为100％,阴性符合率为93．06％,总符合率为95．22％;B试剂与Diasorin的阴性符合率为100％,78份阳性未检出,总符合率为68．92％。选择A试剂与Diasorin结果不一致的样本12份,一致的样本6份,用重组免疫印迹复测,其中14份阳性,4份阴性。结论国内A试剂对血清转化盘的检测窗口期较B试剂显著提前。两试剂对孕妇和门诊人群的符合率高于儿童人群。两试剂不符合的样本用进口试剂盒复测,A试剂与进口试剂盒的符合率高于B试剂,显示了较高的灵敏度。     

双标记AFP及Free-β-HCG时间分辨荧光免疫分析法的建立

目的：研制能同时检测人血清AFP和Free-β-HCG的双标记时间分辨荧光免疫分析（TrFIA）试剂盒。方法：铕（Eu3＋）标记抗AFP单克隆抗体,用钐（Sm3＋）标记抗Free-β-HCG单克隆抗体,采用双抗体夹心法建立AFP/Free-β-HCG双标记TrFIA试剂,对试剂的各项性能指标进行评价。结果：AFP分析灵敏度为0.1U/ml,分析内和分析间的精密度分别为1.2%～5.9%和2.8%～6.3%,检测试剂的测量范围为（0.1～500）U/ml;Free-β-HCG分析灵敏度为0.25ng/ml,分析内和分析间的精密度分别为1.5%～6.2%和3.5%～5.6%,检测试剂的测量范围为（0.25～200）ng/ml。孕妇血样用本试剂盒与进口的同类试剂盒同时检测,AFP和Free-β-HCG的相关系数分别为0.987、0.968,具有较好的一致性。结论：自制AFP/Free-β-HCG双标记TrFIA试剂盒的各项性能指标均能达到临床检测要求,可替代国外同类产品。     

双抗夹心化学发光免疫分析定量检测Ⅳ型胶原方法的建立

目的 建立基于双抗夹心微孔板化学发光酶免疫分析的人血清Ⅳ型胶原定量检测方法.方法 应用Ⅳ型胶原多抗进行包被,辣根过氧化物酶标记Ⅳ型胶原单抗,以鲁米诺化学发光体系检测,调整优化各种反应液的工作浓度和各类反应条件后建立双抗体夹心的检测方法;评价所建立方法的线性范围、特异性、灵敏度、稳定性等性能指标;应用肝纤维化患者血清与进口试剂进行比对实验.结果 所建立方法的灵敏度为15.5 ng/ml,线性范围25 ～ 850 ng/ml,批内、批间变异均小于8％.检测Ⅳ型胶原的临床高、中、低值血清回收率分别为98.5％、94.3％和102.6％;在4℃和37℃条件下分别进行了3、5、7d的稳定性考察,线性相关系数均＞0.99,标准偏差＜7％;比对实验分析显示与进口试剂相关性具有统计学意义.结论 成功建立了定量Ⅳ型胶原化学发光酶免疫分析方法,该方法有较好的准确性、灵敏度、重复性,与进口试剂检测结果等效.     

斑点金免疫渗滤法检测血清抗精子抗体

目的建立检测血清抗精子抗体的斑点金免疫渗滤法 (dot im munogold filtration assay,DIGFA)。方法　采用经 Sephadex G- 75 -抗人全血清柱亲和层析纯化的人精子抗原和胶体金标记的 SPA,根据免疫渗滤原理 ,建立抗精子抗体(ASAb)的斑点金免疫渗滤法检测法。结果　纯化的人精子抗原具有较好的特异性 ;斑点金免疫渗滤法与 EL ISA法比较 ,符合率为 97.7%。特异性为 96 .2 % (TN/ TN+ FP× 10 0 % ) ,敏感性为 88.9% (TP/ TP+ FN× 10 0 % ) ,阳性预测值 84.2 % (TP/TP+ FP) ,阴性预测值 97.2 % (TN/ TN+ FN) .结论　斑点金免疫渗滤法方法检测血清抗精子抗体有较好的特异性和敏感性 ,重复性好 ,试剂稳定 ,操作简便快速 ,具有临床应用价值