苦地丁对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的探讨苦地丁对小鼠免疫功能的影响。方法实验组小鼠灌胃给苦地丁水煎剂(0．2g／ml)，每次0．5ml，每日1次；对照组小鼠灌胃给同等量生理盐水；7d后两组小鼠同时测定脾、胸腺重量，腹腔巨噬细胞吞噬功能，脾淋巴细胞增殖反应及IL-2活性。结果苦地丁可使脾和胸腺萎缩，巨噬细胞吞噬功能降低，淋巴细胞增殖反应受到抑制，IL-2活性减弱，与对照组比较具有非常显著性差异(P＜0．01)。结论苦地丁对小鼠免疫功能有明显的抑制作用。     

褪黑素对环磷酰胺地塞米松所致免疫低下的对抗作用

目的：研究褪黑素(melatonin，MT)对环磷酰胺(cyclophosphamide，CY)、地塞米松(dexamethasone，DEX)所致免疫低下的对抗作用。方法:在CY、DEX处理的免疫低下动物模型上测定脾指数及胸腺指数、碳粒廓清指数，抗体形成细胞及血清溶血素水平，迟发超敏反应，淋巴细胞增殖能力。结果:对于CY所致免疫低下小鼠，MT能显著升高脾指数及胸腺指数，提高碳粒廓清能力，促进血清溶血素生成，增强抗体形成细胞溶血能力。MT能明显促进DEX处理小鼠的迟发超敏反应。体外实验，MT可显著增强CY处理小鼠的脾淋巴细胞增殖反应，呈剂量依赖性。结论:MT对CY、DEX所致免疫低下有对抗作用，使免疫功能部分或全部恢复正常。     

玉津酒对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的探讨玉津酒对机体免疫功能的影响。方法玉津酒0．2ml／d小鼠灌胃给药8d后，测定小鼠淋巴细胞增殖反应及IL-1活性。结果玉津酒可抑制T淋巴细胞增殖反应，降低IL-1活性，与对照组比较差异显著(P<0．01)，B淋巴细胞增殖反应低于对照组，但无显著差异(P>0．05)。结论玉津酒具有抑制细胞免疫功能的作用。     

苦地丁对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的　探讨苦地丁对小鼠免疫功能的影响。方法　实验组小鼠灌胃给苦地丁水煎剂 (0 .2g ml) ,每次 0 .5ml,每日 1次 ;对照组小鼠灌胃给同等量生理盐水 ;7d后两组小鼠同时测定脾、胸腺重量 ,腹腔巨噬细胞吞噬功能 ,脾淋巴细胞增殖反应及IL 2活性。结果　苦地丁可使脾和胸腺萎缩 ,巨噬细胞吞噬功能降低 ,淋巴细胞增殖反应受到抑制 ,IL 2活性减弱 ,与对照组比较具有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　苦地丁对小鼠免疫功能有明显的抑制作用     

肉苁蓉多糖的纯化及其对T细胞功能调节的研究

研究肉苁蓉主要成分之—─—多糖对小鼠胸腺T细胞的功能调节。方法：采用沉淀法获肉苁蓉粗多糖，以DEAE－SephadexA－50和SephacrylS－200柱层析，获得肉苁蓉多糖（CDPS）。再采用噻唑蓝比色法（MTT）观察CDPS对小鼠脾、胸腺淋巴细胞增殖反应的影响及对正常小鼠脾淋巴细胞分泌IL－2的影响。结果：CDPS纯化后经SephacrylS－200鉴定为单一对称峰。CDPS体外实验，在12．5～200μg／ml浓度范围内，有单独和协同ConA、PHA促进小鼠胸腺淋巴细胞增殖的作用（P＜0．01）。CDPS在100μg／ml浓度时，能显著提高小鼠脾淋巴细胞分泌IL－2的能力．其IL－2活性明显高于对照组（P＜0．01）。结论：肉苁蓉多糖能增加小鼠脾、胸腺淋巴细胞的增殖反应，且与ConA、PHA有协同刺激小鼠胸腺淋巴细胞增殖的作用；并能显著提高小鼠脾脏T淋巴细胞分泌IL－2。     

参藿口服液对动物免疫系统的影响

目的研究参藿口服液对动物免疫系统的影响。方法小鼠脾淋巴细胞增殖实验、小鼠溶血素(HC50)和单核巨噬细胞吞噬功能测定,小鼠皮肤迟发型过敏反应(DCH)实验。结果参藿口服液10～20mlkg连续口服6d,可显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖反应,参藿口服液25～10mlkg连续口服6d,明显恢复免疫抑制小鼠单核巨噬细胞的吞噬活性和抗体产生能力,参藿口服液25～10mlkg连续口服10d,明显增强免疫抑制小鼠DCH反应,促进机体细胞免疫功能。结论参藿口服液能明显增强小鼠的体液免疫和细胞免疫功能。     

褪黑素对老龄动物免疫功能的影响

目的研究衰老时动物免疫功能的变化，以及褪黑素(melatonin，MT)对老龄动物免疫功能的影响。方法在衰老动物模型(16月龄老年小鼠)上测定碳粒廓清指数、抗体形成细胞(PFC)溶血实验，血清溶血素水平、淋巴细胞增殖实验、白细胞介素-2(IL-2)活性、迟发超敏反应、脾指数及胸腺指数。结果老龄小鼠碳粒廓清指数降低，抗体形成细胞的溶血能力下降，血清溶血素水平下降，脾指数及胸腺指数降低。MT使老龄小鼠降低的碳粒廓清指数显著升高，使抗体形成细胞的溶血能力回升，使血清溶血素水平回升，使迟发免疫功能增强，上调脾指数；对胸腺指数无显著性影响；体外实验，MT可使16月龄老年小鼠低下的淋巴细胞增殖功能明显恢复，并促进其IL-2的生成，呈剂量依赖性。结论MT使衰老所致免疫低下明显改善。     

创伤应激对正常和糖尿病大鼠脾淋巴细胞免疫功能的影响

目的：观察创伤应激对正常和糖尿病大鼠脾淋巴细胞免疫功能的影响．方法：采用MTT法、ELISA法分别观察正常大鼠和糖尿病大鼠创伤应激前后脾淋巴细胞增殖反应和ConA诱生的脾淋巴细胞TNF-α、IL-6分泌水平．结果：与正常组大鼠比较，糖尿病大鼠脾淋巴细胞增殖反应被显著抑制，ConA诱生的脾淋巴细胞TNF-α、IL-6分泌水平增高：创伤应激后，正常及糖尿病大鼠脾淋巴细胞增殖反应均被显著抑制，ConA诱生的脾淋巴细胞TNF-α、IL-6分泌水平增高．结论：创伤应激可损伤正常大鼠的脾淋巴细胞免疫功能，并使糖尿病大鼠已低下的细胞免疫功能进一步受损．     

新疆紫草对环磷酰胺所致小鼠免疫功能影响的实验研究

目的：研究和探讨新疆紫草对环磷酰胺所致小鼠免疫功能低下的防治作用的影响。方法：以腹腔注射环磷酰胺建立小鼠免疫功能低下模型。随机分为5组：正常组（给予生理盐水0．5ml）、模型组、新疆紫草高剂量组（16％的新疆紫草水提取物0．5ml）、中剂量组（8％的新疆紫草水提取物0．5ml）、低剂量组（4％的新疆紫草水提取物0．5ml）,每组连续灌胃10d,第11天处死各组小鼠,观察小鼠外周白细胞计数、免疫器官重量、小鼠脾淋巴细胞增殖功能（MTT法）及体外抗体形成细胞（溶血空斑实验）。结果：同模型组比较,新疆紫草高、中、低剂量治疗组均可明显提高环磷酰胺所致小鼠外周白细胞计数、鼠免疫器官重量,促进脾淋巴细胞的增殖,增加溶血空斑数。结论：新疆紫草对环磷酰胺所致的小鼠免疫功能低下有预防作用,对体液免疫、细胞免疫等功能都有上调作用。     

广西灵芝对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的：探讨广西灵芝水煎剂对正常小鼠和免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。方法：用不同剂量灵芝液给正常小鼠和环磷酰胺免疫抑制小鼠灌胃，检测小鼠免疫器官重量、巨噬细胞吞噬功能、T淋巴细胞增殖及NK细胞的活性。结果：灵芝水煎剂对正常小鼠免疫功能无明显影响，但能显著增加环磷酰胺免疫抑制小鼠的胸腺和脾脏重量及胸腺指数和脾指数，增加巨噬细胞吞噬功能，促进T淋巴细胞增殖和NK细胞活性。结论：灵芝水煎剂对正常小鼠免疫功能无明显影响，对环磷酰胺免疫抑制小鼠的免疫功能具有正调节作用。     

三七总皂苷对HB-EGF诱导的系膜细胞增殖作用研究

目的：观察三七总皂苷对肝素结合性表皮生长因子样生长因子（HB-EGF）诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖的作用。方法：以原代培养大鼠肾小球系膜细胞为细胞模型,以400ng／mL三七总皂苷和100ng／mLHB-EGF为干预因素,实验分对照组、100ng／mLHB-EGF纽和400ng／mL三七总皂苷＋100ng／mLHB-EGF组,刺激系膜细胞24、36、48h,采用MTT方法,观察三七总皂苷对重组HB-EGF诱导系膜细胞增殖的作用情况。结果：HB-EGF刺激36h时,系膜细胞明显增殖,与对照组比较,P〈0．05;三七总皂苷能抑制HB-EGF诱导的系膜细胞的增殖,与HB-EGF组比较,P〈0．05。随着刺激时间的延长,三七总皂苷对HB-EGF诱导系膜细胞增殖的抑制作用增强,但36h与24h比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;与48h比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：三七总皂苷能抑制HB-EGF诱导的系膜细胞增殖作用,且作用随着刺激时间延长而增强。三七总皂苷可能通过抑制HB-EGF对系膜细胞增殖作用而延缓肾小球硬化。     

复方别敏中黄芩苷、淫羊藿苷和黄芪甲苷配伍比例的优化

目的：探讨复方“别敏”中黄芩苷、淫羊藿苷与黄芪甲苷3种成分合用的优化配伍比例。 方法：采用卵清蛋白腹腔注射建立变应性鼻炎小鼠模型,以脾淋巴细胞增殖反应为指标,利用四唑氮氢氧化物法确定黄芩苷、淫羊藿苷、黄芪甲苷各成分的有效剂量范围;选用U＊10（108）表组方设计所得的3种成分的10种组合进行干预,考察其对脾淋巴细胞增殖的抑制效应,经逐步回归统计分析,获得3种成分合用的最佳配比;通过淋巴细胞增殖反应和对淋巴细胞培养上清液中细胞因子含量检测,验证3种成分的最佳配伍效应是否优于各单一成分。 结果：2~10 μmol/L黄芩苷、2~10 μmol/L淫羊藿苷和1~10 μmol/L黄芪甲苷明显抑制致敏小鼠脾淋巴细胞增殖;当黄芩苷、淫羊藿苷、黄芪甲苷以1∶2.14∶2.65比例配伍时,抑制细胞增殖的效应最明显;进一步的验证研究证实,该配伍对ConA刺激的淋巴细胞增殖的抑制效果及对淋巴细胞上清液中白细胞介素4（interleukin-4,IL-4）、IL-5和γ干扰素（interferon-gamma, IFN-γ）的调节作用明显优于黄芩苷、淫羊藿苷、黄芪甲苷单用的效果（P〈0.05,P〈0.01）。 结论：复方“别敏”中主要有效成分黄芩苷、淫羊藿苷、黄芪甲苷按优化比例合用可最有效地抑制致敏小鼠脾淋巴细胞增殖,调节因变态反应引起的Th1、Th2型细胞因子失衡。     

利福平对U20S细胞增殖和代谢的影响

目的：观察利福平对U20S细胞增殖和代谢的影响。方法：常规培养人U20S细胞株,分别加入不同浓度的利福平（50、250、500、750、1000μg/mL）,分别采用四唑盐（MTT）法测定24h、48h细胞增殖率,测定24h细胞外液LD含量、LDH活性,ELISA法测定细胞5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）摄取量。结果：利福平可以剂量依赖性地抑制细胞增殖（P〈0.01）,增加细胞外液LD含量和LDH活性（P〈0.05,P〈0.01）,降低细胞DNA合成量。结论：高浓度利福平明显抑制U20S细胞的增殖和DNA合成,并影响细胞的代谢能力,提示在骨关节结核局部用药时需注意控制药物浓度。     

三七总皂甙对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨三七总皂苷（panaxnonginsengsaponins,PNS）对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用,并研究其对氧化应激及炎症反应相关因子的影响。方法 30只健康雄性SD大鼠,体质量250～300g,随机分为假手术组（Sham组）、肝缺血再灌注组（HIR组）和三七总皂苷治疗组（PNS组）,各10只。HIR组和PNS组构建肝缺血再灌注模型,PNS组术前1h予50mg/kg PNS生理盐水溶液（5mg/mL）腹腔注射,Sham组及HIR组于术前1h给予相同剂量的生理盐水腹腔注射。预处理3h后处死大鼠,检测并比较三组肝组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、髓过氧化物酶（MPO）、细胞间黏附因子-1（ICAM-1）及血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）水平。结果 PNS组肝缺血再灌注损伤后肝组织中MDA水平、MPO活性、ICAM-1含量及血清TNF-α、IL-1β低于HIR组（P〈0.05）,SOD活性则高于HIR组（P〈0.05）。结论三七总皂苷可通过减少氧化应激水平和炎症因子表达,减轻肝缺血再灌注损伤,达到肝脏保护作用。     

5-羟色胺在胆管上皮细胞与门管成纤维细胞自分泌／旁分泌中的作用

目的探讨5-羟色胺（5_hydmxytryptamine,5-HT）在胆管上皮细胞（biliary epithelia cells,BECs）与门管区成纤维细胞（portal fibroblasts,PFs）之间自分泌／旁分泌效应中的意义,阐述两种细胞之间的相互作用。方法体外细胞培养分为6组：1）BECs组单独培养;2）BECs＋TGF—β1组,BECs单独培养,用2ng／ml重组TGF—β1干预24h后更换培养液;3）BECs＋5-HT组,BECs单独培养,以60ng／ml的5-HT干预48h后更换培养液;4）PFs组单独培养;5）PFs＋5-HT组,PFs单独培养,以60ng／ml的5-HT干预48h后更换培养液;6）BECs＋PFs,共同培养。各组均在培养72h后,以酶联免疫吸附分析法（ELISA）检测培养介质内5-HT、TGF—β1含量;实时荧光定量多聚酶链反应（QRT—PCR）检测BECs内色氨酸羟化酶（TPHl、TPH2）和5-HT受体1A、1B表达;以BrdU、α—SMA分别作为BECs增殖及PFs转化为肌纤维母细胞（myofibroblasts,MFs）的标志,免疫细胞化学检测。结果单独培养的BECs表达5-HT合成限速酶TPH1、TPH2及5-HTRIA、5-HTR1B,5-HT分泌较高而BECs增殖不明显;经TGF—β1处理或与PFs共培养后,TPH1、TPH2表达各减少80％和87％,5-HTR1A、5-HTR1B表达分别减少75％和85％,BECs增殖明显。单独培养的PFs分泌TGF—β1,部分呈α—SMA阳性的MFs;经5-HT处理或与BECs共培养后,TGF—β1表达及MFs显著增加。结论BECs来源的5-HT以及PFs来源的TGF—β1介导BECs与PFs之间的自分泌与旁分泌效应,维持BECs增殖和PFs向MFs的转化,在胆管病发病机制中可能具有重要意义。     

三七总皂苷对佐剂性关节炎大鼠的抗炎及免疫调节作用

目的：研究三七总皂苷（panaxnotoginsengsaponins,PNS）对佐剂性关节炎（rheumatoidarthritis。AA）大鼠的抗炎及免疫调节作用。方法：大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂诱发大鼠AA模型,进行多发性关节炎评分,放射免疫法检测大鼠血清肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor。TNF）、白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）含量,同时对脂多糖（1ipopolysaccharide,LPS）诱导的AA大鼠腹腔巨噬细胞（peritonealmacrophages,PM）产生的TNF、IL-1β进行检测。结果：大鼠免疫后2周,PNS腹腔注射给药2周,可降低AA大鼠多发性关节炎指数（P〈0．05）,抑制血清TNF（P〈0．01）、IL-1β（P〈0．05）产生;PNS体外分别恰药0．8,0．4．o．2mg／ml,作用24h,可不同程度抑制LPS诱导的AA大鼠PM产生TNF（P〈0．05,P〈0．01）和及IL-1β（P〈0．05）。结论：PNS可能通过抗炎及抑制血清、PM释放炎性细胞因子TNF、IL—1β对AA大鼠发挥治疗作用。     

曲古菌素A联合5-氮基-2-脱氧胞苷对人胃癌SGC-7901细胞生长及其TESTIN基因表达的影响

目的探讨曲古菌素A（TSA）联合5-氮基-2-脱氧胞苷（5-aza-dC）对人胃癌细胞（SGC-7901）生长及其TESTIN（TES）基因表达的影响。方法将实验分为空白对照组（不加任何药物处理）、TSA（150ng/ml）、5-aza-dC（5μmo1/L）、TSA（150ng/ml）＋5-aza-dC（5μmo1/L）共4组,用MTT法测定各组药物作用对SGC-7901细胞生长的影响,用流式细胞仪分析细胞周期,AnnexinV/PI检测细胞凋亡,RT-PCR分析SGC-7901细胞TESmRNA表达。结果曲古菌素A和（或）5-aza-dC分别作用24h、48h、72h后均能抑制细胞生长,联合组较单药组抑制率显著增强,且随着药物作用时间的延长,抑制率增强更明显;流式细胞仪分析及AnnexinV/PI凋亡检测发现干预胃癌细胞48h后,联合组G0/G1期比率为（85.23±2.17）%,较单药组显著增多（P〈0.05）;同时诱导细胞凋亡,联合组细胞凋亡率达到（32±3.25）%,比单药组明显增加（P〈0.05）;TSA和（或）5-aza-dC干预胃癌细胞48h后,联合组较单药组显著增强TESmRNA的表达（P〈0.05）。结论曲古菌素A联合5-aza-dC干预可抑制SGC-7901细胞生长,阻止细胞周期于G0/G1期并促进细胞凋亡,抑癌基因TESmRNA表达增多均较单药组明显。     

苦碟子对人脐静脉血管内皮细胞株HUVEC生长的影响

目的:通过观察苦碟子对人脐静脉血管内皮细胞株HUVEC增殖的影响,探讨苦碟子治疗糖尿病周围神经病变的机制.方法:以不同浓度(0μ l/ml、3.125μl/ml、6.25μl/ml、12.5μl/ml、25μl/ml、50μ/ml、100μl/ml)的苦碟子处理HUVEC细胞,分别于24小时、48小时后用四甲基偶氮唑盐...     

姜黄素对bFGF诱导的人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的影响

目的 通过观察姜黄素（Cur）对碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导人乳腺癌细胞（MDA-MB-231）增殖的影响,探讨Cur治疗乳腺癌的作用机制.方法 将人乳腺癌细胞MDA-MB-231用含10%胎生血清的RPMI-1640培养基培养.同时根据加入Cur的不同浓度将实验分为7组：空白对照组、bFGF组（bFGF 5 ng/ml）、干预1组（bFGF 5ng/ml＋Cur 1 μmol/L）、干预2组（bFGF 5ng/mI＋Cur 2.5 μmol/L）、干预3组（bFGF 5 ng/ml＋Cur 5 μmol/L）、干预4组（bFGF 5ng/ml＋Cur 10 μmol/L）、干预5组（bFGF 5 ng/ml＋Cur 20 μmol/L）,并在倒置显微镜下观察各组细胞形态,通过MTT法检测Cur对细胞增殖的影响.结果 bFGF组可显著促进人乳腺癌细胞（MDA-MB-231）的增殖,与对照组的差异有统计学意义（P〈0.05）,且其作用随着处理时间的延长而增强.各干预组均可显著抑制人乳腺癌细胞（MDA-MB-231）的增殖,且呈时间和浓度依赖性.结论 Cur可有效抑制bFGF诱导的人乳腺癌细胞增殖,可能为其用于乳腺癌治疗的机制所在.     

SEB基因定位突变体构建及其重组表达产物生物学活性研究

目的 构建葡萄球菌肠毒素B（SEB）基因及其突变体原核表达系统,了解突变前、后重组表达产物的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤生长活性的变化.方法 采用突变引物PCR构建SEB基因定位突变体,建立SEB基因及其定位突变体原核表达系统;同时采用Ni-NTA亲和层析法提纯表达的目的 重组蛋白;采用TCID50法测定目的 重组蛋白对Vero细胞的毒性;采用MTT比色法分别检测不同浓度的目的 重组蛋白促使小鼠脾细胞增殖及对抑制KB和HL-60癌细胞株生长的作用.结果 所克隆的SEB基因核苷酸序列与各项研究报道的相似性为100%,3种突变体均在既定位置获得预期的密码子突变.rSEB和各突变体重组蛋白表达量约为细菌总蛋白的40%;rSEB对Vero细胞TCIC50为3.4μg,其突变体重组蛋白分别为3.2～16.8μg;1和5μg/ml的rSEB及突变体重组蛋白rSEB/D9N对小鼠脾细胞均有明显的促增殖作用（P＜0.05）,10和20μg/ml的rSEB及rSEB/D9N促进小鼠脾细胞增殖活性与100μg/ml植物血凝素PHA相似（P＞0.05）.5～20μg/ml的rSEB及rSEB/D9N作用的小鼠脾细胞上清液及其上清液与脾细胞混合物均能有效抑制KB和HL-60细胞生长（P＜0.05）.结论 本研究成功构建了SEB基因突变体及其高效原核表达系统;其中突变体重组蛋白rSEB/D9N细胞毒性较低,促脾细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长活性较强,可作为研制升高白细胞、抗肿瘤的SEB相关药物的候选突变体.