AS患者PBMCMCP-1蛋白表达及其临床意义

目的：研究单核细胞趋化因子蛋白-1（MonocyteChemoattractantProtein-1,MCP-1）在动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）患者外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuclearcells,PBMC）蛋白表达及其与疾病发生、发展的关系。方法：用蛋白质印迹法（Westernblotting）检测20例As患者和20例健康者PBMCMCP-1的蛋白表达。结果：AS患者PBMCMCP-1蛋白表达明显高于健康者,差异有统计学意义（P〈O．05o结论：MCP-1表达与As存在一定相关性,在As发病过程中起重要的作用。     

IgA肾病患者外周血单个核细胞Toll样受体4的表达及血清炎症趋化因子的水平

目的研究Ig A肾病(IgAN)患者外周血单个核细胞Toll样受体4(TLR4)的表达及血清中趋化因子MCP-1和炎症因子IL-6的水平,探讨TLR4在IgAN发病中可能的作用。方法将在本科经肾组织活检确诊为IgAN的60例患者(排除继发性和遗传性IgAN)根据蛋白尿程度进行分组,分为轻度蛋白尿组(24 h尿蛋白定量≤1.0 g),中度蛋白尿组(24 h尿蛋白定量1.0~3.0 g)和重度蛋白尿组(24 h尿蛋白定量≥3.0 g)。另取年龄性别相匹配的健康志愿者20例作为健康对照组。分别使用流式细胞仪和Realtime-PCR方法检测外周血单个核细胞(PBMC)中TLR4蛋白和基因的表达,ELISA法检测血清中趋化因子MCP-1和炎症因子IL-6的水平。结果 IgAN组患者PBMC中TLR4的蛋白和基因表达水平以及血清中MCP-1和IL-6的浓度均较健康对照组显著增加(P均0.05)。PBMC中TLR4的蛋白和基因表达水平随着蛋白尿的严重程度而逐渐增高。直线相关分析提示PBMC中TLR4 mRNA的表达水平与24 h尿蛋白定量呈显著正相关(r=0.855,P0.05),而与GFR呈负相关(r=-0.735,P0.05)。MCP-1和IL-6的水平与PBMC中TLR4 mRNA的表达水平呈显著正相关(r=0.746、0.821,P0.05)。结论 IgAN患者PBMC中存在TLR4的表达水平上调,与蛋白尿程度和肾功能水平密切相关。血清中趋化因子MCP-1和炎症因子IL-6的水平也随着PBMC中TLR4的表达水平升高而升高。TLR4可能通过调节机体趋化因子和炎症因子的释放介导了Ig A肾病中的炎症损伤。     

阿维A 对寻常型银屑病患者趋化因子RANTES 和MCP-1的影响

目的 观察阿维A 对寻常型银屑病患者血清中和外周血单一核细胞(PBMC)内RANTES 和 MCP-1 表达水平的影响.方法 分离并提取30 例健康对照者及48 例阿维A 治疗前、后银屑病患者的血清 及PBMC,血清采用ELISA 检测其中RANTES 和MCP-1 的分泌水平,PBMC 接受实时荧光定量PCR 法检测细 胞内RANTES 和MCP-1 的mRNA 的水平,并进行临床PASI 评分.结果 经ELISA 检测发现,寻常型银屑病 患者血清中RANTES 和MCP-1 水平明显高于健康对照组(P <0.01),应用阿维A 治疗后,两因子水平均显著 降低(P <0.01);QRT-PCR 检测发现,患者PBMC 中RANTES 和MCP-1 的mRNA 相对表达量均明显高于健 康对照组(P <0.01);治疗后PBMC 中RANTES 和MCP-1 均显著降低(P <0.01).治疗后患者PASI 评分明 显下降,且治疗前后银屑病患者PASI 评分差值与血清RANTES 和MCP-1 水平差值均呈正相关性(r1 ＝ 0.469,P <0.01;r2 ＝0.431,P <0.01),与PBMC 中RANTES mRNA 表达量差值呈正相关(r ＝0.484,P < 0.01).结论 阿维A 对寻常型银屑病的疗效显著,降低CC 型趋化因子RANTES 和MCP-1 的水平可能是阿 维A 治疗银屑病的机制之一.     

HLA-GmRNA在肝癌患者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的：了解肝细胞癌（HCC）患者外周血单个核细胞（PBMC）、人类白细胞抗原 G mRNA（HLA-G mRNA）的表达水平及其意义。方法收集44例 HCC患者、21例肝硬化患者和40例健康查体者的 PBMC,建立逆转录-实时荧光 PCR相对定量体系检测PBMC HLA-G mRNA相对表达量。结果 HCC组、肝硬化组和健康对照组的 HLA-G mRNA相对表达量分别为1.71±0.39,1.05±0.38和1.01±0.47,HCC组高于肝硬化组和对照组,差异有统计学意义（F＝33.657,P＜0.001）。HLA-G mRNA高表达的 HCC患者生存率低于 HLA-G mRNA低表达者,差异有统计学意义（χ2＝5.972,P＝0.015）。结论 PBMC HLA-G mRNA相对表达量与肝癌发生发展密切相关,检测 PBMC HLA-G mRNA有助于肝癌的诊断与研究。     

E法相对定量分析动脉粥样硬化患者外周血MMP-9和TIMP-1基因表达

目的通过E方法（效率法）相对定量动脉粥样硬化（AS）患者外周血白细胞基质金属蛋白酶9（MMP9）和基质金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP-1）基因表达及其临床意义。方法采用E法对动脉粥样硬化患者（男性61例,女性78例,平均年龄68岁）和健康体检者（男性19例,女性15例,平均年龄33岁）外周血白细胞MMP9和TIMP-1基因表达水平进行相对定量,数据通过SPSS 11.5统计软件进行分析,AS组与健康对照组间MMP9和TIMP-1基因表达水平差异显著性采用两样本t检验。结果 AS组TIMP-1表达水平则显著低于对照组,分别为0.78±0.06和1.14±0.26,差异具有统计学意义（P〈0.05）。而AS组MMP9表达水平为对照组的1.42倍,MMP9与TIMP-1的比值亦高于对照组,但差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论与健康组比较,动脉粥样硬化患者外周血MMP9表达水平上调,而TIMP-1表达水平下调,动脉粥样硬化患者MMP9和TIMP-1之间存在调节失衡。     

慢性肝病患者外周血单个核细胞白蛋白基因表达的临床意义

目的：探讨慢性肝病患者外周血单个核细胞（PBMC）白蛋白mRNA表达的临床意义。方法：50例慢性乙型病毒性肝炎患者（CHB组）、40例肝炎后肝硬化患者（肝硬化组）和40名肝功能正常的健康人（健康对照组）予荧光定量PCR检测血清HBVDNA,采用逆转录巢式荧光定量PCR检测PBMC白蛋白mRNA表达。结果：CHB组50例患者中,血清HBVDNA阳性30例（60％）;PBMC白蛋白mRNA阳性19例（38％）。肝硬化组40例患者中,血清HBVDNA阳性31例（78％）;PBMC白蛋白mRNA阳性14例（35％）。健康对照组PBMC白蛋白mRNA阳性2例（5％）。CHB组及肝硬化组的HBVDNA及PBMC白蛋白mRNA阳性率均明显高于健康对照组（P〈0．01）。CHB组活动期和肝硬化组失代偿期患者PBMC白蛋白mRNA阳性率明显升高。结论：PBMC白蛋白mRNA的阳性表达与肝细胞的损害程度有关,且具无创性,可考虑作为慢性肝病进展的辅助参考指标之一。     

单核细胞趋化蛋白-4在类风湿关节炎中的表达及临床意义

目的：研究CC亚族趋化因子单核细胞趋化蛋白-4（MCP-4/CCL13）在类风湿关节炎（RA）患者外周血的表达水平,并分析MCP-4的水平与疾病活动性的关系,以探讨MCP-4在RA发病机制中的作用。方法：应用酶联免疫吸附实验（ELISA）定量方法测定40例RA患者、20例其它自身免疫性疾病患者和20例正常健康对照者血清MCP-4水平。分析RA组血清MCP-4水平是否与ESR、CRP、RF及双手放射学检查等指标具有相关性。结果：RA组血清MCP-4水平为（203.79±18.64）pg/mL,其它自身免疫性疾病对照组血清MCP-4水平为（207.76±40.37）pg/mL,正常健康对照组血清MCP-4水平为（125.13±11.08）pg/mL。RA组、其它自身免疫性疾病对照组血清MCP-4水平与正常健康对照组相比均有统计学意义（P〈0.05）,RA组与其它自身免疫性疾病对照组间无统计学意义（P=0.787）,RA活动期患者血清MCP-4水平（214.86±24.46）pg/mL和非活动期患者血清MCP-4水平（190.27±29.11）pg/mL比较无统计学意义（P=0.065）。RA组血清MCP-4水平与ESR、CRP、RF及双手X片分期无相关性。结论：RA组的血清MCP-4水平高于正常健康对照组,但与ESR、CRP、RF及双手X片分期无相关性。MCP4可能参与了RA的发病过程。     

肥胖合并或不合并2型糖尿病患者血清单核细胞趋化蛋白-1浓度与胰岛素敏感性的关系

目的：比较肥胖合并或不合并2型糖尿病患者血清单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）浓度与葡萄糖钳夹试验中胰岛素敏感性的关系。方法：分别对20例正常糖耐量者和40例肥胖患者（其中合并2型糖尿病者20例,无糖尿病者20例）进行高胰岛素-葡萄糖钳夹试验,以钳夹稳态期胰岛素介导的葡萄糖利用率（Rd）来判定周围组织胰岛素敏感性。同时用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清MCP-1水平,并测定其他临床指标,分析各指标之间的相关性及与胰岛素敏感性的关系。结果：与正常体质量组相比,肥胖患者外周血MCP-1水平明显升高（P〈0.01）,Rd值明显降低（P〈0.01）,合并糖尿病者其变化明显大于无糖尿病者。两指标呈明显负相关（r=-0.440,P=0.004）。MCP-1是胰岛素敏感性的独立影响因素。结论：外周血MCP-1是胰岛素抵抗的独立影响因素,又与腰围紧密联系,促进胰岛素抵抗的发展。预防和控制腹型肥胖将有助于降低MCP-1水平,改善胰岛素抵抗。     

系统性红斑狼疮外周血单个核细胞蛋白组学的初步研究

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）外周血单个核细胞（PBMC）蛋白质组的变化。方法分别提取14例SLE患者及9例健康献血者的PBMC，采用双向电泳技术分离全蛋白质组，对部分差异的蛋白质点进行离子阱高效液相色谱／质谱分析，测定其肽质量指纹图谱，与互联网蛋白质数据库的数据进行比对。结果获得了较好的双向电泳图像，图像分析显示：1例SLE患者、4例健康献血者PBMC蛋白匹配点为1084个，其中SLE患者高表达及特异表达蛋白点为71个及17个，健康献血者高表达及特异表达蛋白点为45个及20个，与所有实验2-DE图谱逐个比对后，对表达差异重复性高的30个蛋白质点进行肽质量指纹图谱分析，经数据库检索后，鉴定出2个胞浆蛋白质酪氨酸转运核糖核酸合成酶（tyrosyl—tRNA synthetase）和斑联蛋白（zyxin）在SLE患者的PBMC中低表达。结论SLE患者PBMC蛋白组学研究可能为深入研究其发病机制、建立新的诊断指标提供一个良好的平台。     

支气管哮喘外周血单核细胞环氧化酶2的表达及临床意义

目的：检测支气管哮喘外周血单核细胞（PBMC）中环氧化酶-2（COX-2）mRNA的表达水平并探讨其意义。方法：应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测了38例支气管哮喘患者和20例正常人PBMC中COX-2的表达水平。结果：支气管哮喘发作期患者PBMC中COX-2的平均表达水平（0.82±0.13）明显高于缓解期（0.20±0.31）和正常对照组（0.17±0.06）,差异非常显著（P〈0.01）;哮喘缓解期患者PBMC中COX-2的平均表达水平与正常对照组间差异无显著性（P〉0.05）。结论：COX-2表达水平可用以评估支气管哮喘的炎症状况。     

单核细胞趋化蛋白1和骨形成蛋白7在病理性瘢痕中的表达

背景：单核细胞趋化蛋白1是新近明确的对单核/巨噬细胞有趋化和激活双重作用的趋化因子,骨形成蛋白7作为一种新发现的纤维化负性调节因子逐渐成为抗组织纤维化治疗的研究热点,但两者对病理性瘢痕形成中组织纤维化作用的研究至今鲜有报道。目的：研究单核细胞趋化蛋白1,骨形成蛋白7在病理性瘢痕中的表达水平。方法：采用免疫组织化学方法检测单核细胞趋化蛋白1、骨形成蛋白7在25例瘢痕疙瘩、30例增生性瘢痕、24例非病理瘢痕和20例正常皮肤组织中的表达水平。所有标本均来自2008-07/2010-01郑州大学第一附属医院整形外科住院患者,且均无皮肤疾病、结缔组织病、传染病、恶性肿瘤和其他重要脏器疾病,术前无射线治疗、激光治疗及免疫治疗史,其中所取瘢痕组织来自于临床诊断明确的瘢痕患者。结果与结论：单核细胞趋化蛋白1在瘢痕疙瘩、增生性瘢痕中的阳性表达率均高于非病理性瘢痕与正常皮肤组织（P〈0.05）,骨形成蛋白7阳性表达率均降低（P〈0.05）,两者阳性表达率在病理性瘢痕（瘢痕疙瘩和增生性瘢痕）中呈明显负相关（r=-0.639,P〈0.01）。结果显示,在病理性瘢痕的形成过程中单核细胞趋化蛋白1表达上调,而骨形成蛋白7表达下调。     

外源性磷酸肌酸对力竭运动小鼠的影响

目的：观察电针丰隆穴对高脂血症大鼠炎症因子细胞间粘附分子（ICAM-1）、单核细胞趋化因子（MCP-1）含量的影响。方法：SD大鼠50只,随机分为空白对照组（A组）、模型对照组（B组）、模型饮控组（C组）、模型电针组（D组）、模型饮控＋电针组（E组）各10只。干预60d后,测定血脂含量及ICAM1、MCP-1的含量。结果：与A组比较,B组大鼠血浆胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）含量明显上升（均P％0．01）,高密度脂蛋白（HDI．C）明显下降（均P％0．01）;C、D组大鼠血浆TC、LDL-C与B组比较均明显下降（P〈0．05,0．01）,但较A组均明显升高（均P〈0．01）;E组大鼠血浆中TC、LDL-C含量均较B、C组明显降低（均P〈0．01）。除E组外,其余各组大鼠腹腔巨噬细胞及ICAM1、MCP-1含量与A组比较均明显增加（P〈0．05,0．01）,且B、C组增加更为显著（均P〈0．01）;与B、C组比较,E组巨噬细胞及ICAM-1、MCP-1含量显著下降（均P〈0．01）。结论：电针丰隆穴能够明显下调高脂血症大鼠血浆中的TC、LDL-C、巨噬细胞及ICAM、MCP-1的含量,从而达到对高脂血症的治疗作用。     

CD28／CD152：CD80／CD86分子在强直性脊柱炎患者外周血淋巴细胞上的表达

目的探讨共刺激分子CD28／CD152：CD80／CD86在强直性脊柱炎（AS）患者外周血淋巴细胞上的表达及与免疫功能的关系。方法流式细胞仪检测AS患者及健康体检者T细胞表面标志CD3、CD4、CD8、CD19的表达及CD28／CD152和CD80／CD86在外周血T、B淋巴细胞上的表达水平；采用速率散射比浊法、酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清中免疫球蛋白IgG、IgA、IgM及C-反应蛋白（CRP）和白细胞介素-6（IL-6）水平。结果CD3^＋CD4^＋T细胞及CD4^＋／CD8^＋比值明显高于健康对照组（P〈0．05），而CD3^＋CD8^＋T细胞则明显低于健康对照组（P〈0．05）；CD4^＋和CD8^_T细胞上CD28和CD19^＋B细胞上CD80、CD86的表达均较健康对照组增高（P〈0．05），而CD152在CD4^＋T淋巴细胞上的表达也比健康对照组显著增加，但在CD8%＋T淋巴细胞上的表达却显著降低（P〈0.05）；血清IgG、IgA及CRP、IL-6水平均较健康对照组显著增高（P〈0．05）。结论AS患者外周血淋巴细胞CD28／CD152：CD80／CD86分子的异常表达与其免疫功能紊乱有密切关系。     

解毒通络保肾法抑制糖尿病肾病炎症发病机制的研究

目的:研究中药解毒通络保肾胶囊对糖尿病(DM)大鼠肾脏病变的保护作用及其机制。方法:将实验动物分为正常对照组、DM组、解毒通络保肾胶囊中药实验组和苯那普利阳性对照组。检测各组第12周的血糖、尿素氮、血肌酐、尿白蛋白排泄率(UAER)、血脂、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量和肾脏肥大指标的变化,应用RT-PCR检测MCP-1mRNA,免疫组化检测肾内纤维连接蛋白(FN)和Ⅳ型胶原(ColⅣ)蛋白、PCNA蛋白、NF-κBp65蛋白、MCP-1蛋白、ED-1蛋白表达水平。结果:中药实验组较DM组血糖水平显著降低(P<0.01),UAER明显减少(P<005),尿素氮和血肌酐水平下降,肾脏肥大指标改善(P<0.01);明显降低AngⅡ含量,PCNA、FN和ColⅣ蛋白表达显著低于DM组(P<001)。RT-PCR结果表明,DM大鼠肾皮质MCP-1mRNA表达升高,中药实验组MCP-1mRNA低于DM组(P<0.05)。结论:解毒通络保肾胶囊对DM肾脏病变有保护作用,其机制可能是通过减少肾组织中AngⅡ含量,下调DM大鼠NF-kB,减少MCP-1表达,从而抑制肾内炎症的反应。     

急性早幼粒细胞性白血病患者Livin、PTEN基因的表达及其意义

目的：探讨Livin、PTEN基因在急性早幼粒细胞性白血病患者中的表达及其临床意义。方法：采用PCR方法检测急性早幼粒细胞性白血病患者的Livin、PTEN基因表达情况，并与缺铁性贫血患者相比较。结果：30例AML-M3患者当中Livin基因的阳性率为63.3%（19/30），对照组为15.0%（3/20）。AML-M3患者当中PTEN基因的阳性率为43.3%（13/30），对照组为85.0%（17/20），与对照组相比较，AML-M3的Livin和PTEN基因表达异常有显著意义（P＆lt;0.01）。结论：Livin、PTEN基因在AML-M3呈异常表达，对疾病的发生发展有重要作用，Livin和PTEN有可能成为AML-M3重要诊断指标和基因治疗靶点。     

强直性脊柱炎患者血清HVEM和IL-17含量测定及意义

目的：检测强直性脊柱炎（AS）患者血清中可溶性HVEM和IL-17含量并探讨其临床意义。方法：ELISA检测33例AS患者和42例健康自愿者血清可溶性HVEM和IL-17含量。结果：AS患者血清可溶性HVEM含量为（102．8±69．4）肛g／L,健康自愿者血清可溶性HVEM为（53．5±24．1）恤g／L,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。强直性脊柱炎患者血清IL-17含量（267．31±53．50）pg／ml明显高于健康对照组（201．43±47．52）pg／ml,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：检测血清HVEM和IL-17水平对As的辅助诊断及疗效评估有一定的参考价值。     

急性脑梗死患者血浆单核细胞趋化蛋白-1和组织因子水平的变化

目的：探讨急性脑梗死患者血浆单核细胞趋化蛋白-1和组织因子的变化及临床意义。方法：对56例急性脑梗死患者脑梗死组和30例健康者对照组应用酶联免疫吸附双抗体夹心法（EL ISA法）定量测定血浆单核细胞趋化蛋白-1和组织因子的水平。结果：与正常对照组相比,脑梗死组血浆单核细胞趋化蛋白-1含量（128.49±76.97）ng/L和组织因子含量（424.23±189.87）ng/L明显高于对照组的单核细胞趋化蛋白-1含量（49.21±29.36）ng/L和组织因子含量（109.25±42.98）ng/L,差异具有显著性（P〈0.01）。随急性脑梗死患者病情严重程度的加重,血浆单核细胞趋化蛋白-1的含量增高越明显。结论：急性脑梗死患者血浆单核细胞趋化蛋白-1和组织因子的水平明显升高,并且与急性脑梗死患者的病情密切相关。     

X射线对体外培养星形胶质细胞增殖的影响及机制研究

目的：观察X射线照射对培养星形胶质细胞（AS）增殖的影响,为X射线的广泛应用提供理论依据。方法：将体外培养80%汇合的AS,在AS无血清培养基继续培养48h后分为对照组和放疗组,对照组更换含10%FBS的DMEM-F12培养基,放疗组更换含10%FBS的DMEM-F12培养基,并同时给与X射线照射,利用western印迹分析各组PCNA、p53、cyclinE的表达。结果：X射线照射后能降低S期细胞比率,呈剂量依赖性,但并不增加AS的凋亡率。通过对AS无血清培养48h后,大部分细胞周期同步于G0期,对照组更换培养基后12h出现PCNA、cyclinE表达水平增高;放疗组p53表达水平较对照组显著增高,PCNA、cyclinE表达水平较对照组显著降低。结论：X射线照射可以通过调控细胞周期有效抑制AS的增生。