重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a(rh-TNFαD3a)联合化疗药物治疗晚期恶性肿瘤临床研究

天然肿瘤坏死因子(natural tumor necrosis factor,nTNF)是激活的单核-巨噬细胞所产生的一种细胞素.由于nTNF的用量大和毒性作用强,其在临床的应用受到限制[1],因此国内外学者均广泛应用基因或蛋白工程技术对天然肿瘤坏死因子(nTNF)进行改造构以期降低其毒副作用,增加临床疗效.第二军医大学应用蛋白质工程技术改造nTNF制成的重组改构人肿瘤坏死因子α衍生物3a(rhTNFαD3a)为具有高活性,低毒性的基因工程TNF.根据国家卫生部(98)制申体第09号文件批示,由天津市肿瘤医院临床药理基地组织对常州药业股份有限公司申报的rh-TNFαD3a进行Ⅲ期临床观察.现将我们3家医院研究结果报告如下.     

小剂量rh-TNFαD3a协同阿霉素对人肺癌细胞株抑瘤率的影响

目的研究小剂量重组人肿瘤坏死因子α衍生物3a(rh-TNFαD3a)对人肺癌低转移表型(AGZY)和高转移表型(Anip973)细胞株的毒性作用及其与阿霉素(ADM)联合的协同效应.方法采用MTT比色法检测小剂量rh-TNtα D3a及与ADM联合后对AGZY和Anip973细胞株的毒性作用.结果ADM加TNF后,在两细胞株中均可明显降低ADM的半数致死浓度.在Anip973细胞株中,ADM各浓度组加TNF后,其抑制率均明显增加(P＜0.05).而在AGZY细胞株中只有ADM浓度在2.00μg/ml时其抑制率明显增加(P＜0.05),其它浓度组变化不大.结论小剂量rh-TNFαD3a可降低ADM的半数致死浓度,增加ADM对人肺癌细胞株的抑瘤率.     

Chemopreventive effects of 13α,14α-epoxy-3β-methoxyserratan-21β-ol (PJJ-34), a serratane-type triterpenoid,in a rat multi-organ carcinogenesis bioassay

A novel serratane-type triterpenoid, 13α,14α-epoxy-3β-methoxyserratan-21β-ol (PJJ-34) derived from cuticles of Picea jezoensis Carr. var. jezoensis, has proved to be highly effective at suppressing carcinogenesis both in vitro and in vivo. To investigate possible anti-carcinogenic efficacy at the whole-body level, male Fischer 344 rats were subjected to an established rat multi-organ carcinogenesis bioassay (DMBDD model). After initiation with five carcinogens, groups 1–3 (20 in each) were intragastrically (i.g.) administered PJJ-34 dissolved in 1 ml of 0.5% CMC (5 times/week) at doses of 0, 5 and 10 mg/kg body weight (b.w.), respectively, until the end of week 30. PJJ-34 did not show apparent toxicity. Incidences of adenomas (100 → 75%) and carcinomas (63 → 30%) in the lung were significantly decreased in the 5 mg/kg b.w. group, and multiplicity of alveolar hyperplasias and total lung tumors (adenomas + carcinomas) were significantly reduced by both 5 and 10 mg/kg. The incidence of colorectal tumors was also significantly decreased in the 10 mg/kg group (63 → 28%) along with the multiplicity. Rat liver pre-neoplastic lesions, glutathione S-transferase placental form (GST-P) foci, and tumor development in the other organs were not affected. Immunohistochemical indices for proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and cyclin D1 in normal alveolar epithelium of the lung were significantly suppressed at both doses. In conclusion, PJJ-34 is chemopreventive against lung and colon carcinogenesis without exerting apparent toxicity, and suppression of cell proliferation could play a key role in the underlying mechanisms.     

基因工程IFNα2a和IFNα2b对肿瘤细胞生长的抑制作用

为了研究不同品牌不同亚型基因工程α干扰素的抗肿瘤效应,采用ＭＴＴ法将不同浓度的α干扰素分别对５种肿瘤细胞进行生长抑制实验。结果表明不同品牌的１００００ＩＵ／ｍｌ,１０００ＩＵ／ｍｌ,１００ＩＵ／ｍｌ的ＩＦＮα２ａ或ＩＦＮα２ｂ对人脑胶质瘤细胞（ＳＨＧ４４）,人骨肉瘤细胞（ＨＯＳ８６０３）,人白血病细胞（ＨＬ６０）,红白血病细胞（Ｋ５６２）和淋巴瘤细胞（Ｒａｊｉ）的生长均有不同程度的抑制作用。其抑制率分别为２０％,１０％,５％左右。进口和国产的不同品牌ＩＦＮα２ａ和ＩＦＮα２ｂ对上述５种肿瘤细胞株均有较明显的生长抑制效应,而且抑制的百分率均相近。     

缺氧诱导因子-3α（HIF-3α）对肝癌细胞生物钟基因表达的影响

目的:研究缺氧诱导因子-3α(HIF-3α)对肝癌细胞生物钟基因表达的影响。方法:将HIF-3α过表达的慢病毒载体感染HepG2细胞，构建稳定过表达HIF-3α肝癌细胞系，同时通过siRNA干扰HepG2细胞中HIF-3α的表达。然后通过Real-time PCR和Western Blot检测HIF-3α感染前后肝癌细胞中生物钟基因Clock、Bmal1、NPAS2、Per1、Per2、Per3、Timeless、Cry1、Cry2、REV-ERBA、Rora、CKIε的表达水平。结果:Real-time PCR结果显示HIF-3α使Per3、CKIε mRNA表达升高(P均<0.05)，Bmal1、Per1、Per2、Cry1、REV-ERBA、Rora mRNA表达降低(P均<0.05)，HIF-3α对Clock、NPAS2、Timeless、Cry2 mRNA的表达无明显影响(P均>0.05)。Western Blot结果与PCR结果相一致。结论:HIF-3α可引起肝癌细胞生物钟基因的紊乱，可能是肝癌生物钟基因表达异常的原因之一。     

FOXO3a在乳腺癌中的研究进展

FOXO3a是FOX(forkhead box)蛋白家族的一个重要成员,与细胞转化、肿瘤的发生发展及其血管生成有关.FOXO3a通过上调凋亡前基因Bim和p27Kip1及上调肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumornecrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)发挥抑癌作用,FOXO3a活性受蛋白激酶Akt和IκKβ及氧化应激调节,FOXO3a与一些乳腺癌公认的预后因子关系密切,有可能成为判断乳腺癌预后的一个新指标.本文就FOXO3a的结构、抑癌机制、FOXO3a在乳腺癌中的表达及FOXO3a与乳腺癌公认预后因子的关系等方面作一综述.     

LMTK3在ERα阳性乳腺癌中的研究进展

LMTK3是最新发现的在乳腺癌中调控雌激素受体α(estrogen receptor-α,ERα)最有效的转录因子.LMTK3通过多种信号通路发挥生物学功能,不仅可以促进肿瘤细胞的增殖、侵袭及转移,而且与患者的临床分期、预后及耐药息息相关.虽然,目前对LMTK3的研究不多,但已展示出其在雌激素靶器官肿瘤的发生与治疗中的主要地位.本综述主要针对LMTK3在ERα阳性乳腺癌治疗中介导的效应以及机制的研究进行总结.     

全反式维甲酸联合干扰素α-2a治疗膀胱癌

目的 观察联合应用全反式维甲酸(ATRA)和干扰素d-2a(IFN-α-2a)治疗大鼠膀胱肿瘤的疗效并探讨其机制.方法 建立大鼠膀胱肿瘤模型50只,44只存活的大鼠随机分为A(11只)、B(11只)、C(11只)、D(11只)4组,膀胱内分别灌注DMSO、IFN-α-2a、ATRA和ATRA+IFN-α-2a治疗.显微镜观察病理分期及分级,流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞的凋亡和细胞周期.结果 D组大鼠体重(277.4±18.5)g高于其他3组,膀胱重量(0.19±0.05)g低于其余3组,并且D组病理分期和分级均有显著降低.D组肿瘤细胞凋亡率(13.43±3.06)%较其他三组明显增加,而增生指数(19.95±4.17)%则明显降低.结论 ATRA和IFN-α-2a联合应用能显著促进肿瘤细胞凋亡,对膀胱肿瘤有更好的疗效.     

FOXO3a基因在癌症中的研究进展

FOXO家族是重要的转录调节因子,通过调节靶基因的转录,参与细胞代谢、细胞周期/凋亡的调控、肿瘤发生等,成为抗肿瘤治疗研究的新热点.FOXO3a是其家族中的重要一员,在多种类型肿瘤中的表达都有所下调或缺失,表明多种机制导致的FOXO3a失活可能促进肿瘤的发生.该文就FOXO3a在各组织肿瘤中的研究进展进行了综述.     

miR-33a functions as a tumor suppressor in melanoma by targeting HIF-1α

Background: Our previous findings showed that miR-33 expressed abnormally in clinical specimens of melanoma, but the exact molecular mechanism has not been elucidated. Object: To determine miR-33''s roles in melanoma and confirm whether HIF-1α is a direct target gene of miR-33a. Methods: First miR-33a/b expression levels were detected in HM, WM35, WM451, A375 and SK-MEL-1. Then lentiviral vectors were constructed to intervene miR-33a expression in melanoma cells. Cell proliferation, invasion and metastasis were detected. A375 cells mice model was performed to test the tumorigenesis of melanoma in vivo. Finally the dual reporter gene assay was carried out to confirm whether HIF-1α is a direct target gene of miR-33a. Results: MiR-33a/b exhibited a lower expression in WM35, WM451, A375 and SK-MEL-1 of the metastatic skin melanoma cell lines than that in HM. Then inhibition of miR-33a expression in WM35 and WM451 cell lines could promote cell proliferation, invasion and metastasis. Conversely, increased expression of miR-33a in A375 cells could inhibit cellproliferation, invasion and metastasis. In vivo tests also confirmed that overexpression of miR-33a in A375 cells significantly inhibited melanoma tumorigenesis. Finally, we confirmed that HIF-1α is a direct target gene of miR-33a. Conclusion: The newly identified miR-33a/HIF-1α axis might provide a new strategy for the treatment of melanoma.     

干扰素α2a致阵发性室上性心动过速一例报告

干扰素是免疫增强剂 ,常用于肿瘤的辅助治疗。最近我院遇到 1例干扰素α 2ａ致阵发性室上性心动过速 ,现报告如下。患者　女性 ,46岁 ,因患小细胞肺癌肌注干扰素α 2ａ 30 0万单位 ,注射后 3小时出现心悸、气短、胸闷 ,心率 180次 /分 ,血压 80 / 5 0ｍｍＨｇ ,心电图检查示阵发性室上性心动过速合并完全性右束支传导阻滞 ,在心电监护下立即静脉注射心律平 35ｍｇ +10 %葡萄糖 2 0ｍｌ缓慢注射 ,时间不小于 5分钟 ,在静脉注射过程中心室率逐渐降低 ,约 4～ 5分钟后转为窦性心律 ,血压回升到 110 /80ｍｍＨｇ ,患者症状消失 ,此后心律稳定。…     

重组IFN-α2a与HSV-tk/GCV系统协同作用增强对于卵巢癌细胞系SKOV3杀伤作用的体外研究

目的：在原核系统中表达并纯化人血管生成抑素（angiostatin),制备鼠抗人血管生成抑素多克隆抗体。方法：设计引物扩增angiostatin的cDNA,然后亚克隆入原核表达载体pQE,并转化入大肠杆菌BL21中诱导表达并纯化,再用纯化的人血管生成抑素免疫小鼠并制备多抗。结果：通过重组质粒酶切和测序分析等方法,筛选出重组阳性克隆,转化入大肠杆菌BL21中诱导表在并纯化成功,再利用纯化的人血管生成抑素制备成功鼠抗人血管生成抑素多克隆抗体。结论：表达产物及多克隆抗体为下阶段深入研究提供了重要的实验材料。     

脑膜瘤中整合素α3mRNA表达及其生物学意义

背景与目的在肺癌、黑色素瘤及脑胶质瘤等肿瘤的研究中,已证实整合素表达的改变对肿瘤的分化、增殖及侵袭性起极其重要的作用,而到目前为止国内尚未见有关脑膜瘤的整合素表达的报道.本文旨在探讨脑膜瘤中整合素α3的表达及其生物学意义.方法用原位杂交的方法检测36例脑膜瘤组织、2例正常硬脑膜及3例蛛网膜组织中的整合素α3mRNA的表达;用SABC免疫组化方法观察脑膜瘤中Ki-67的表达.结果整合素α3mRNA在良性脑膜瘤、不典型脑膜瘤、恶性脑膜瘤中的表达分别为2.52±0.362,1.75±0.316,1.42±0.633,不典型脑膜瘤和恶性脑膜瘤的表达明显低于良性脑膜瘤的表达(P<0.05,P<0.01),侵袭性脑膜瘤的整合素α3mRNA的表达明显低于非侵袭性脑膜瘤的表达(1.63±0.462vs2.61±0.526,P<0.01),脑膜瘤中整合素α3mRNA的表达与Ki-67标记指数相关.结论整合素α3亚单位参与脑膜瘤的生长控制过程,随着整合素α3mRNA表达的减少,肿瘤细胞的增殖活性升高,恶性程度增加.整合素α3mRNA的表达的下调与脑膜瘤的侵袭性生物学行为有关.     

靶向整合素α_Vβ_3的分子影像探针

整合素αvβ3作为整合素家族中的重要成员,介导了细胞和细胞外基质、细胞和细胞之间的相互黏附,具有调控细胞增殖、分化、细胞形态和迁移等多种功能,在肿瘤血管生成的过程中发挥重要的作用.作为靶向肿瘤的受体,利用核素、核磁共振、超声波和光学等影像技术,结合靶向整合素αvβ3分子成像探针非侵入性的检测整合素αvβ3在肿瘤组织和肿瘤新生血管中的表达,具有潜在的临床应用价值,可用于临床肿瘤诊断和抗肿瘤药物的临床治疗后观察.本文主要针对现有靶向整合素αvβ3的分子探针及其影像技术作-简要综述.     

黏附分子αvβ3和αvβ5介导肿瘤细胞与肿瘤内皮细胞的黏附

目的 体外分析黏附分子αvβ3和αvβ5及其配体Del-1、L1在肿瘤细胞-内皮细胞黏附中的作用.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和流式细胞分析比较正常肝窦内皮细胞(LSEC)和肝癌的血管内皮细胞T3A上细胞间黏附分子1(ICAM-1)、αvβ3和αvβ5的表达以及缺氧对其表达的调控.分别用RT-PCR和Western blot方法分析6种肿瘤细胞Del-1和L1的表达及缺氧对其表达的调控.使用连续光谱荧光测定仪定量肿瘤细胞在LSEC和T3A上的黏附,并分析抗不同黏附分子的抗体和siRNA对肿瘤细胞一内皮细胞黏附的阻断作用.结果 T3A细胞αvβ3和αvβ5的基础表达高于LSEC,而ICAM-1的基础表达低于LSEC.缺氧上调两种内皮细胞αvβ3和αvβ5的表达,而ICAM-1表达仅在LSEC中升高.在不同肿瘤细胞中,Del-1和L1的基础表达存在明显差异,并且在缺氧条件下受到明显不同的调节.Del-1和L1高表达的肿瘤细胞在T3A细胞的黏附明显高于LSEC,并且在缺氧条件下黏附明显增加,这种黏附可以被抗αvβ3、αvβ5的抗体或沉默β3和β5的小干扰RNA(siRNA)阻断.结论 细胞黏附分子αvβ3、αvβ5及其配体在肿瘤细胞-肿瘤内皮细胞的黏附过程中起重要介导作用.     

PRL-3: a phosphatase for metastasis?

The PRL-3 phosphatase has joined the cancer arena very recently but is rapidly gaining interest both as a putative prognostic factor and as a therapeutic target for metastatic tumors. In this issue Guo and colleagues provide another key piece of information by showing that the catalytic activity of PRL-3 is required for experimental metastasis formation in mouse models. Here we summarize the current knowledge and discuss what remains to be done before PRL-3 could be considered as a target for diagnostics or therapeutics in the clinical setting of human cancer.