对呼吸道合胞病毒亚单位疫苗局部免疫的体液、粘膜和细胞免疫应答

本文用霍乱毒素B链(CTB)作为佐剂在小鼠体内评价了呼吸道合胞病毒(RSV)融合(F)蛋白局部免疫作用.免疫4周龄CD1小鼠、每组4～6只,亚单位疫苗鼻内接种(inl)10μl(含F蛋白2μg和CTB5～10μg),肌肉接种(im)100μl(只含F蛋白2μg),在0和4周各免疫1次,活病毒疫苗inl 50μl[含5×10~5蚀斑形成单位(pfu)],只免疫1次.最后一次免疫后4周用RSV10~6pfu inl攻击,取攻击前的血清检测抗体,攻击后5天的鼻洗液(NW)和支气管肺泡灌洗液(BAL)滴定病毒效价和抗体.     

流感HA和霍乱毒素B亚单位联合疫苗经鼻内、口腔或非肠胃途径免疫的比较

本文用不同剂量流感病毒A/PR/8/34HA疫苗和霍乱毒素B亚单位(CTB)联合免疫小鼠,比较了鼻内、非肠胃、腹腔或皮下接种小鼠4周后的抗体应答和用A/PR/8/34小鼠适应株鼻腔攻击3天后的保护作用的观察。作者首先检测呼吸道洗液和血清中抗PR8病毒IgA抗体,发现鼻内接种比其它途径产生较高水平的抗病毒IgA抗体。同时,分析呼吸道洗液和血清中抗PR8病毒IgG抗体,发现当CTB的剂量为0.1μg时,鼻内与非肠胃接种产生的IgG抗体水平相似;当     

DNA免疫能保护小鼠抵抗2型单纯疱疹病毒阴道内攻击

本文报道已构建的1型单纯疱疹病毒(HSV-1)糖蛋白D(gD1)基因表达质粒pK-TS 153在小鼠中的免疫原性和对HSV-2粘膜攻击的抵抗作用.将DNA疫苗间隔3周肌肉接种体重为18～21g的雌性小鼠3次,每次接种含gDl质粒DNA 200μg的无菌盐水0.1ml,取第3次接种后3周的血清和用PBS冲洗的阴道分泌物,用ELISA测定抗体.对照组为年龄配对的未处理小鼠.结果从免疫的两组Swiss Webster小鼠和一组BALB/c小鼠的血清中均测到HSV特异性IgG,平均滴度为3.5～3.6log_(10).9只Swiss Webster小鼠中有7只阴道分泌物中测到HSV IgG,3组平均滴度分别为1.9、1.6和2.8log_(10).未从3     

联合接种流感疫苗和霍乱毒素B亚单位对流感病毒感染的防御作用

霍乱毒素B亚单位(CTB)是一种无毒性的霍乱毒素成分.CTB不仅是有效的肠道免疫原,也是一种肠粘膜佐剂.鼻内联合接种单剂流感病毒与CTB可诱导鼻分泌物中高水平IgA和血清中血凝抑制(HI)抗体.本文作者先给Balb/c小鼠鼻内联合接种甲型流感病毒HA疫苗和CTB,4周后再单独接种甲型流感病毒HA疫苗,观察接种后的免疫应答.小鼠接种两剂较高剂量(1.5μg)的A/PR/8/34(PR-8,H1N1)HA疫苗(第1剂与CTB联合接种)后,鼻洗液中的抗病毒IgA抗体和血清中的HI抗体应答都比第1次接种     

Balb/c小鼠接种呼吸道合胞病毒融合蛋白后的肺免疫应答

为了确定局部浸润的肺单个核细胞（PMC）在清除下呼吸道病毒中的作用,作者研究了与氢氧化铝佐剂混合的纯化呼吸道合胞病毒（RSV）融合(F）蛋白（5μg）接种Balb/c小鼠的效果。 作者在0及3周对小鼠肌肉接种F蛋白以诱导保护性免疫力,同时与实验感染RSV（1～2×10~6 pfu）的小鼠进行比较,末次免疫或感染后3或4周用1×10~7pfu病毒作鼻内攻击,测定攻击后4和8天每克肺组织的病毒效价,并检测初次免疫后3和6周混合血清样本的中和抗体效价。 结果表明,F蛋白诱生的免疫应答与实验感染相似,能抑制攻击后4～8天的病毒复制,而未免疫对照小鼠在攻击后8天才有抑制作用。接种组和实验感染组于6周后查到抗RSV中和抗体。作者用~(51)Cr释放试验检测了初次接种后3周及RSV攻击后5和7天肺组织中浸润PMC的杀细胞作用,发现有抗原依     

鼠疫组分疫苗免疫后小鼠血清抗体滴度检测与豚鼠效力观察

目的 根据对小鼠血清抗体滴度检测和对豚鼠的保护力观察,评估鼠疫组分疫苗的免疫效果.方法 通过氢氧化铝佐剂吸附15μg F1、15μg rV、15μg F1+15μg rV抗原,分别制成鼠疫单组分疫苗和双组分疫苗.采用2剂(0、2周)皮下接种途径,分别免疫NIH小鼠和豚鼠.以皮上划痕人用鼠疫活疫苗1剂免疫作为对照.免疫6周后,采用间接ELISA法检测小鼠血清IgG滴度,采用t检验作组间比较.与此同时,使用强毒鼠疫杆菌141株对豚鼠进行皮下攻击,以观察疫苗效力.结果 小鼠血清抗体检测结果表明,鼠疫组分疫苗组血清F1抗体或/和rV抗体滴度均高于鼠疫活疫苗组,差异有统计学意义(t=3.041、3.472、15.958、16.264,P值均＜0.01).豚鼠攻击试验结果显示,F1+rV组的存活率可达到90%(9/10),而F1组和rV组分别为50%(5/10)和20%(2/10).结论 鼠疫F1+rV双组分疫苗是有效的抗鼠疫疫苗,而单组分F1或rV鼠疫疫苗不能有效防御鼠疫杆菌攻击.     

HIV-1 DNA-单磷酰脂质A佐剂疫苗鼻内与肌肉免疫的比较

最近作者对1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)DNA疫苗接种的研究证明,从细菌脂多糖取得的单磷酰脂质A(MPL)免疫佐剂可有效增强抗原特异性免疫力.免疫对象为BALB/c小鼠,DNA疫苗用pCMV160ⅢB和pCREV(ⅡB/REV)构建,使用稳定乳剂中的MPL(MPL-SE)作佐剂.肌肉免疫方法为:ⅢB/REV各2μg(总量4μg)溶于灭菌PBS,加(或不加)50μl MPL-SE,在小鼠股二头肌注射100μl疫苗.鼻内免疫的DNA剂量相同,仅MPL-SE改为5和20μl.用乙醚麻醉小鼠后,将30μl疫苗渐渐滴入小鼠鼻孔,让小鼠用自然方式吸入.肌肉和皮内途径均只接种1次.用ELISA检测血清IgG、IgG1和IgG2a及粪便中分泌性IgA(SIgA)滴度;用小鼠足垫试验评估迟发型超敏(DTH)反应;用标准~51Cr释放试验测定免     

超声粉碎抗原免疫预防鼠幽门螺杆菌感染的研究

目的研究幽门螺杆菌超声粉碎抗原与霍乱毒素B亚单位组成的口服疫苗预防HP感染的作用,探讨其保护性免疫应答机制。方法用HP超声粉碎抗原2mg加CTB10μg作为免疫预防组,另设单纯HP超声粉碎抗原组、单纯CTB组和PBS组为对照组。免疫4周后以活菌攻击,观察各组小鼠的免疫保护率。攻击前后测定血清中IgA、IgG1和IgG2a抗体的变化,小鼠胃黏膜分泌性IgA抗体变化情况。结果免疫预防组小鼠免疫保护率为73.33%,而对照组全部感染HP(P<0.001);攻击前免疫预防组小鼠IgA、IgG1和IgG2a抗体均轻度升高,攻击后IgA、IgG1和IgG2a抗体进一步升高,以IgG2a抗体增高更为明显,IgG1/IgG2a比值从0.67下降至0.59。结论HP超声粉碎抗原加CTB可预防HP感染,并诱导出以Th1反应为主的保护性免疫应答。     

优化口服菌苗:霍乱毒素作为佐剂可诱发对破伤风类毒素的全身和粘膜B细胞和抗体应答

霍乱毒素（CT）是一种有效的粘膜抗原,与不同抗原同时口服时,具有佐剂作用。作者用CT作佐剂,评估口服破伤风类毒素（TT）的B细胞抗原特异性应答,并检验CT和TT的免疫保护性。 取8～12周龄C57BL/6小鼠,分为4组,分别于0、7和14天给予口服免疫:第1组口服10μg TT和10μg CT;第2组口服100μg TT和10μg CT;第3组口服250μg TT和10μgCT;第4组仅口服250μgTT。 用ELISA检测小鼠粪便浸出物和血清中IgG、IgA、IgM抗TT,CT抗体水平。第2和第3组小鼠粪便浸出物中IgA抗TT抗体滴度分别为1:32和1:128,其余两组不产生抗TT抗体应答。口服CT后,小鼠粪便浸出物中均有IgA抗CT抗体应答。TT剂量不影响CT应答。第4组小鼠不产生抗CT抗体。仅在21天时诱发出弱血清IgG抗TT抗体应答。第2组小鼠,血清IgG抗TT抗体水平较高,第3组小鼠血清IgA抗TT抗体水平较高。血清抗CT应答IgG类最高,IgA类次之。第3组小鼠首剂免疫后,血清中无抗TT抗体,但2剂免疫后,可检出IgM和IgG抗     

用加入脂质体的病毒亚单位疫苗肺部免疫雌鼠后能诱导泌尿生殖道产生分泌型IgA应答

作者将流感病毒血凝素(HA)亚单位疫苗〔由甲型流感病毒NIB26(H3N2)制备〕与脂质体(蛋黄卵磷脂:胆固醇:三十二烷磷酸盐=4:5:1)混合,经下呼吸道免疫雌性小鼠,能诱导泌尿生殖道产生分泌型IgA抗体。 实验分4组进行。每组5只8～10周龄的雌性Balb/c小鼠。第1组于麻醉状态下鼻腔滴注50μl脂质体疫苗(全呼吸道免疫);第2组于未麻醉状态下鼻腔滴入20μl脂质体疫苗(上呼吸道免疫);第3组于麻醉状态下作气管切口,直接将50μl脂质体疫苗注入肺中;第4组肌肉注射或口服50μl疫苗作为对照组。肌肉或鼻腔接种的HA抗原均为5μg,脂质体剂量为1mg。免疫后4周,收集支气管洗液。连续三天以PBS冲洗阴道,收集洗液,合并每只小鼠的冲洗物。最后一次冲洗后,处死小鼠采血。用ELISA检测血清中抗HA特异性     

纯化的RSV融合糖蛋白(PFP)疫苗的安全性和免疫原性

本文报告了呼吸道合胞病毒(RSV)感染Vero细胞后经亲和层析提取的PFP-1疫苗在RSV血清阳性幼儿中的安全性和免疫原性。同时,作者认为蛋白印迹法(WB)对区别由PFP疫苗和RSV感染诱导的抗体滴度增高是一种有用的手段。 作者选择47名18～36月龄RSV血清阳性的健康幼儿,随机分为三组,比例为3:3:4,第1组接种含50μg蛋白的PFP-1疫苗,第2组接种含20μg蛋白的PFP-1疫苗,第3组接种三价流感病毒灭活(TIV)疫苗作为对照。分别于接种前、接种后4周及RSV流行季节末静脉采血,检测抗RSV抗体。根据注射部位     

呼吸道合胞病毒亚单位疫苗在18～36月龄血清阳性儿童中的免疫原性和安全性

作者用主要含呼吸道合胞病毒(RSV)F蛋白的亚单位疫苗或盐水安慰剂随机接种曾感染过RSV的18～36月龄健康儿童,以评价疫苗的免疫原性及安全性。采集接种前及接种后1和6个月的血清用ELISA检测抗RSV F、A亚型G糖蛋白(Ga和B亚型G糖蛋白(Gb)IgG抗体和中和抗体(nAb)。同时取鼻咽分泌物检测粘膜抗     

呼吸道合胞病毒疫苗

任何成功的呼吸道合胞病毒(RSV)疫苗,都必须能对2～6月龄婴儿和小牛提供保护作用,以防止再感染.目前已研制的3种疫苗(灭活抗原加佐剂、活的减毒病毒和活的突变株)虽各有优点,但都未被普遍采用.最早的RSV疫苗是用人MK5株在grivet猴肾细胞内培养,经甲醛灭活,明矾浓缩制备的.对5～11岁儿童肌肉接种疫苗后,中和抗体的几何平均滴度升高2倍,4名血清阴性儿童的抗体滴度显著增加.对199名3～5岁儿童接种含该抗原的7价疫苗,接种前血清阴性者占35%,接种后20%的血清阴性儿童对疫苗有显著应答.接种后10周内,从28名儿童中分离出RSV,严重呼吸道疾患发病率降低36%.因疫苗含有其他6种呼吸道     

脂质体的粘膜免疫佐剂活性

本文报告了小鼠鼻腔接种流感亚单位疫苗时脂质体的免疫佐剂活性.作者将流感亚单位疫苗掺入脂质体,采用鼻腔单剂接种或两剂接种(间隔4天)两种方案免疫Balb/c 小鼠.接种后,采集血清、肺及呼吸道粘膜洗液样品,用ELISA方法检测血清抗原持异性抗体(IgG和IgM)及粘膜分泌性IgA     

用复制缺陷型痘苗病毒MVA株重组体进行抗RSV的初次和加强免疫

作者选用经过修饰、高度减毒的复制缺陷型痘苗病毒 MVA株为载体 ,构建了含有呼吸道合胞病毒 (RSV) F和 /或 G糖蛋白基因的重组体 ,分别为 MVA/ RSV F、MVA/RSV G、MVA/ RSV FG。各 MVA重组体都能在鸡胚成纤维细胞中很好繁殖。表达 F或G蛋白的单重组病毒的滴度比表达两种蛋白的双重组病毒高 3～ 5倍。用放射免疫沉淀法及十二烷基硫酸钠 -聚丙烯酰胺凝胶电泳证实其表达产物为 RSV F和 G蛋白。　　作者对每组 7只 BALB/ c小鼠在 0和 2 8天于鼻内和肌内接种 5× 1 0 7感染单位的MVA或重组 MVA,剂量为 0 .1 ml。另一组于0天…     

豚鼠鼻内接种重组HSV-2 gD2蛋白可降低HSV-2生殖道攻击后的疾病严重性和死亡率

本文报道了以遗传学方法脱毒的大肠杆菌不耐热肠毒素（ＬＴＫ６３）作佐剂的重组２型单纯疱疹病毒（ＨＳＶ－２）糖蛋白ｇＤ２疫苗,鼻内（ＩＮ）接种豚鼠后诱导的抗体应答和对ＨＳＶ－２阴道内攻击的防御作用。在２５０μｌ含ＬＴＫ６３５０μｇ的ＰＢＳ中分别加入ｇＤ２２５和１００μｇ,ＩＮ接种豚鼠,对照组仅接种１００ｕｇｇＤＺ,并与肌肉（ＩＭ）接种２５μｇｇＤ２加ＭＦ５９乳剂的疫苗进行比较。末次免疫后２周,麻醉动物取粘膜标本（鼻洗液、唾液和阴道洗液）和血清,用急骤化学发光ＥＬＩＳＡ检测ＩｇＧ和ＩｇＡ抗体,结果表明…     

通过无针头粉末接种技术进行表皮免疫:流感疫苗的免疫原性和对小鼠的保护作用

本文介绍一种新的表皮免疫 ( EI)技术 ,即通过氦动力装置将粉末疫苗有效接种入有活力的表皮的无针头粉末接种技术。　　为了比较 EI与肌肉、皮下、腹腔等途径针头注射的效果 ,作者用福尔马林灭活的Aichi/6 8流感疫苗免疫 BAL B/c小鼠 (每组8只 )。 EI组接种的粉末疫苗是用疫苗和海藻糖制成的直径为 2 0～ 53μm的微粒粉末 ,经氦动力粉末注射装置将含 5μg疫苗 (全病毒蛋白 )的 1 mg粉末接种于小鼠刮毛后的腹部皮肤。ELISA测定表明 ,EI组的血清 Ig G抗体明显高于肌肉和皮下注射组。EI加强免疫使血清抗体滴度升高 1 2 0 0 0 %。对加…     

纯化的融合蛋白疫苗在RSV流行季节保护囊性纤维变性患儿抵抗下呼吸道疾病的效果

本文作者评价了经离子交换层析法纯化的呼吸道合胞病毒(RSV)融合蛋白(PFP-2)疫苗在RSV血清阳性的囊性纤维变性(CF)患儿中的免疫原性和安全性,并评价了PFP-2免疫接种对RSV流行季节发生RSV感染和疾病的影响.流行开始时对34名1.6～8岁的RSV血清阳性CF患儿童接随机双百法分别肌肉接种1剂0.5ml PFP-2疫苗或生理盐水,每组各17人,平均年龄分别为4.5岁和5.8岁.每天记录接种后局部和全身反应,共7天.每周调查儿童急性呼吸道疾病并取患儿鼻咽洗液/咽拭子标本作RSV分离和快速抗原检测.取接种前、接种后1个月和RSV流行结束时的血清.测定RSV/A和RSV/B微量中和抗体效价.用ELISA测定血清抗F蛋     

用复制缺陷性腺病毒重组体诱导粘膜免疫

作者将表达狂犬病病毒ＥＲＡ株糖蛋白的Ｅ１缺陷性腺病毒重组体在转染Ｅ１的２９３细胞上增殖３天后,取冻融上清液作为疫苗免疫小鼠,研究不同途径接种诱导全身和局部粘膜免疫应答的差异。 选６～１０周龄Ｃ３Ｈ／Ｈｅ雌性小鼠,分别于鼻内、皮下、直肠和阴道途径接种重组体,每鼠接种 ２ × １０６Ｐｆｕ。 １个月后,后眼窝穿刺收集血清,并取阴道灌洗液和新鲜粪便检测抗狂犬病病毒抗体,用ＥＬＩＳＡ鉴定其亚型。 结果表明,鼻内和皮下免疫组的血清抗狂犬病病毒抗体滴度较高,以ＩｇＧ２ａ为主;直肠或阴道接种组只有可检出的血清抗体。…     

佐剂和母体抗体对新生鼠接种RSVBBG2Na疫苗后保护效果的影响

本文报道了重组Ａ亚型呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）融合蛋白ＢＢＧ２Ｎａ疫苗,在不同佐剂组成、不同免疫途径和高水平母体抗体存在的情况下对新生小鼠的保护作用。将１剂ＡＩＰＯ＿４－ＢＢＧ２Ｎａ（２０μｇ）腹腔或肌肉接种卫周龄新生小鼠,４周后取血用ＥＬＩＳＡ测定ＢＢＧ２Ｎａ和ＲＳＶ－Ａ特异性抗体滴度。结果试验组２３只小鼠中有２２只产生较强的疫苗特异性及ＲＳＶ－Ａ特异性ＩｇＧ抗体应答（与接种途径无关）。接种ＰＢＳ的时照组全部抗体阴性。接种后４周,用ＲＳＶ－Ａ攻击,结果显示对照组小鼠肺部病毒滴度很高（３．５ｌｏｇ…