氯化甲基汞对成年大鼠脑组织中GFAP和MBP的影响

目的探讨不同剂量氯化甲基汞蓄积对成年大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)的影响。方法 120只SD大鼠随机分为正常对照组、氯化甲基汞小剂量组(0.5mg/kg)、氯化甲基汞中剂量组(1.0mg/kg)、氯化甲基汞大剂量组(2.0mg/kg)。每天灌胃1次,连续染毒,各组染毒时间分别为1、2、4周。采用免疫组织化学方法观察不同时间点各组大鼠脑组织中GFAP、MBP的变化。结果各染毒时间组中氯化甲基汞剂量增加,大鼠脑组织GFAP表达升高和MBP表达降低,差异均有统计学意义(P0.01)。同一剂量组不同染毒时间比较,随染毒时间延长,GFAP表达升高;MBP表达降低,差异均有统计学意义(P0.01)。结论氯化甲基汞促进星形胶质细胞增殖,破坏髓鞘,并与汞的蓄积量与染毒时间相关。     

颅内注射Aβ1-42单抗对阿尔茨海默病大鼠模型疗效的实验观察

目的:观察淀粉样蛋白(Aβ)1-42诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠模型经颅内注射Aβ1-42单克隆抗体(mAb)后其行为及脑组织病理的改变。方法:利用Aβ1-42蛋白片段诱导建立AD大鼠模型后,侧脑室内注入Aβ1-42 mAb,记录Morris水迷宫试验逃生时间作为行为学指标,同时取脑组织作切片染色,观察其病理改变。结果:AD大鼠模型颅内注射Aβ1-42 mAb后,水迷宫试验逃生时间明显缩短,表明其学习记忆能力明显改善;病理切片染色观察到脑组织内Aβ沉积斑块消失。结论:颅内注射Aβ1-42 mAb对AD动物模型有明显疗效。     

叶酸对阿尔茨海默病模型大鼠的影响

目的观察铝致AD模型大鼠脑组织内Aβ神经元的分布，探讨叶酸对AD模型大鼠学习记忆力、Aβ42影响。方法所有大鼠均采用30％AlCl3灌胃4个月诱导建立AD大鼠模型。治疗组用叶酸治疗6个月。在模型建立前后及治疗后通过一次性被动回避试验分别测试大鼠的潜伏期和受电击次数以观察大鼠的学习记忆能力；免疫组织化学Power—Version^TM二步法测定脑组织内沉积的β-淀粉样蛋白。结果（1）大鼠用叶酸治疗6个月后，潜伏期较对照组明显延长（P〈0．01），受电击次数减少（P〈0．01）；（2）AlCl3诱导大鼠成功出现了AG在脑组织中的沉积；以海马CA1的锥体细胞层及齿状回多形细胞层、内嗅区外主层、颞顶叶Ⅲ、Ⅳ，Ⅴ层明显。叶酸组Aβ42阳性神经元数目明显减少，与AlCl3组比较，有显著性差异（海马P〈0．05，内嗅区P〈0．05，颞顶叶P〉0．05）。结论叶酸可以改善AD大鼠的学习记忆，其机制是通过直接或间接抑制或清除海马、内嗅区内Aβ的沉积来实现的。     

母鼠低剂量接触甲基汞所致仔鼠学习能力及脑海马超微结构的变化

[目的]研究ICR母鼠饮水暴露低剂量氯化甲基汞(MeHgCl)后,仔鼠脑组织的病理组织学变化和脑海马超微结构变化,评价低剂量饮水暴露甲基汞的安全性。[方法]ICR孕鼠随机分为对照组、低剂量组和高剂量组,每组各8只,各组于怀孕第6天起,分别自由饮用蒸馏水和氯化甲基汞含量为0.01、0.1mg/L的蒸馏水,直至哺乳期结束。测试各组仔鼠学习能力,观察仔鼠脑组织病理组织学变化及脑海马超微结构变化。[结果]在对仔鼠进行学习能力测试的水迷宫实验中,对照组、低剂量组和高剂量组成功率分别为81.67%、59.09%和70.00%,低剂量组和高剂量组成功率显著低于对照组(P<0.05)。低剂量组和高剂量组仔鼠脑组织有明显的病理学改变,随着甲基汞染毒剂量的增加,海马区大锥体细胞、大脑神经元和小脑浦肯野细胞嗜酸性增强。电镜结果显示,低剂量和高剂量组脑海马神经细胞有变性,严重者呈暗细胞表现。[结论]实验剂量甲基汞可使仔鼠脑组织发生病理组织学改变,脑海马区超微结构改变,实验剂量甲基汞对于仔代是不安全的。     

甲基汞对大鼠脑组织脂质过氧化作用的影响

通过对大鼠进行皮下注射氯化甲基汞的染毒方式．观察氯化甲基汞对大鼠脑组织脂质过氧化作用的影响。结果表明：氯化甲基汞可使大鼠脏器（大脑、小脑、肝）的GSN含量下降．LPO水平上升．SOD活力下降,且有一定的剂量反应关系。提示甲基汞的中毒可能与膜脂质过氧化作用有关。     

甲基汞在脑组织中的积累和脂质过氧化作用

[目的]通过对SD大鼠进行腹腔注射氯化甲基汞,研究不同时间、不同剂量氯化甲基汞在大鼠脑组织中的积累情况和对大鼠脑组织的脂质过氧化作用及两者之间可能存在的关系.[方法]将SD大鼠在不同剂量(0,0.05,0.5,5mg/kg)下分别暴露20min和24h.处死后测定脑组织汞含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.[结果]20min时,0.5mg/kg剂量下脑组织汞含量为(0.0173±0.0230)μg/g,表明甲基汞已到达脑组织;20min时,各剂量下各脂质过氧化指标与对照组相比均未见显著差异.24h时,5mg/kg剂量下,GSH-Px活性为(19.13±4.49)U/mgprot,SOD活性为(89.09±13.55)U/ml,MDA含量为(3.53±0.70)nmol/ml,与对照相比差异显著,表明已有脂质过氧化发生.[结论]甲基汞对脑组织有极大的亲合性,在0.5mg/kg剂量下,20min即可迅速穿过血脑屏障进入脑组织并逐渐积累.脂质过氧化作用是在甲基汞积累到一定程度后发生,可能与组织中汞的含量有一定关系.     

地卓西平马来酸盐和牛磺酸对甲基汞致大鼠脑谷氨酸代谢的影响

目的研究地卓西平马来酸盐(dizocilpine maleate,MK-801)和牛磺酸对大鼠甲基汞中毒所致的谷氨酸代谢紊乱的影响。方法将健康清洁级Wistar大鼠40只按体重随机分为对照组、低剂量甲基汞染毒组、高剂量甲基汞染毒组、MK-801+甲基汞染毒组和牛磺酸+甲基汞染毒组。,每组8只。对照组和低、高剂量甲基汞染毒组皮下注射生理盐水,MK-801+甲基汞染毒组和牛磺酸+甲基汞染毒组分别皮下注射0.3μmol/kgMK-801和1mmol/kg牛磺酸。注射2h后,对照组腹腔注射0.9%生理盐水,低剂量甲基汞染毒组腹腔注射4μmol/kg氯化甲基汞,高剂量甲基汞染毒组、MK-801+甲基汞染毒组和牛磺酸+甲基汞染毒组腹腔注射12μmol/kg氯化甲基汞。连续进行4周,每周5天,每天染毒氯化甲基汞1次,每周一、三、五注射MK-801和牛磺酸。测定各组大鼠大脑皮质汞含量、谷氨酸(Glu)和谷氨酰胺(Gln)含量以及谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酰胺酶(PAG)活力。结果与对照组比较,高、低剂量甲基汞染毒组和MK-801+甲基汞染毒组、牛磺酸+甲基汞染毒组大鼠大脑皮质中汞含量均升高;高剂量甲基汞染毒组大鼠大脑皮质中Glu含量较高,GS活力较低;高、低剂量甲基汞染毒组大鼠大脑皮质中Gln含量较低,PAG活力较高,差异有统计学意义(P0.01)。与高剂量甲基汞染毒组比较,MK-801+甲基汞染毒组和牛磺酸+甲基汞染毒组大鼠大脑皮质中汞含量无明显差异,Glu含量和PAG活力较低,Gln含量和GS活力较高,差异有统计学意义(P0.01)。结论MK-801和牛磺酸对甲基汞所致大鼠谷氨酸代谢紊乱有一定的拮抗作用。     

妊娠期甲基汞暴露对大鼠的母体毒性

目的　探讨妊娠期甲基汞暴露对大鼠的母体毒性效应。方法　用不同剂量甲基汞〔0 .0 0、0 .0 1、0 .0 5、2 .0 0mg/ (kg·d)〕于 Wistar大鼠孕 6～ 9天时连续 4天灌胃染毒 ,观察母鼠妊娠期、哺乳期的各种生理、生育过程 ,脑组织形态学和单胺类神经递质 (去甲肾上腺素、多巴胺、5 -羟色胺 )等指标。结果　与对照组相比 ,暴露组母鼠脑组织中单胺类神经递质的含量明显增高 (P<0 .0 1) ,呈现出剂量 -效应关系 (等级相关系数 rs分别为 0 .712 ,0 .90 3,0 .92 6 ) ,P均 <0 .0 1;其余指标未见明显异常。结论　本实验剂量下 ,妊娠期甲基汞暴露对大鼠的母体毒性尽管十分微弱 ,但母体脑组织的化学损伤已经发生。     

甲基汞急性暴露大鼠脑中汞蓄积及胆碱能神经递质改变的研究

目的 研究低剂量甲基汞短期暴露的神经毒性作用,为进一步探讨甲基汞早期神经毒性机制提供实验依据。方法 采用SD大鼠腹腔注射甲基汞,剂量分别为0．05、0．50及5．00mg／kg,并设对照组,分别暴露20min、1、4、24h时测定大鼠脑组织总汞含量、乙酰胆碱(ACh)含量及乙酰胆碱酯酶(AChE)活力。结果 除0．05mg／kg剂量组外,其余两组大鼠脑组织中汞含量在暴露20min就显著升高;0．05mg/kg组大鼠暴露4h后,脑汞含量也出现显著升高。各剂量组大鼠脑组织ACh及AChE都在暴露20min后就出现显著变化,并显示一定的剂量——效应和时间——效应关系。结论 甲基汞低剂量(0．05mg／kg)短时间暴露(20min)时脑组织ACh和AChE的改变表明此时可能启动了中枢神经系统某种调控机制。随暴露剂量和暴露时间增加,甲基汞蓄积于大鼠脑组织中,可引起脑组织ACh含量和AChE活力显著变化。     

硒拮抗甲基汞神经毒性的实验研究

目的 探讨硒对甲基汞诱导的脑组织脂质过氧化的拮抗作用。方法 通过灌胃方式给予甲基汞和硒,观察甲基汞对大鼠脑组织脂质过氧化作用的影响及硒的拮抗作用。结果 硒通过降低脑组织甲基汞的蓄积,增加脑组织谷胱甘肽过氧化物酶活性和还原型谷胱甘肽含量而抑制甲基汞引起的脂质过氧化,从而降低脑组织脂质过氧化物水平。结论 一定剂量的硒对甲基汞诱导的大脑组织脂质过氧化具有明显的拮抗作用,其机理与硒降低脑组织中甲基汞的蓄积和抗脂质过氧化作用有关。     

氯化铝染毒对大鼠海马APP基因甲基化的影响

目的观察氯化铝(AlCl_3)对大鼠海马淀粉样前体蛋白(APP)启动子区甲基化及β淀粉样蛋白(Aβ)含量的影响。方法健康6月龄雄性SPF级SD大鼠40只,分成4组(正常对照组和AlCl_3低、中、高剂量组),每组10只,各组分别腹腔注射AlCl_30、10、20和30 mg/kg组,正常对照组注射相应体积生理盐水,连续5天,休息2天,共8周。甲基化特异性PCR法(MSP)检测海马APP启动子区的甲基化状态,实时荧光定量PCR(RT-PCR)测定APP mRNA表达水平,ELISA法测APP、Aβ_(42)蛋白表达量。结果随着AlCl_3浓度的增加,大鼠平均逃避潜伏期明显延长(P0.05),AlCl_3中、高剂量组穿越平台的次数明显减少(P0.05);AlCl_3染毒组海马APP启动子区甲基化检出率降低(χ~2=27.61,P0.05),其中,高剂量组APP甲基化的检出率低于其余3组(P0.01),APP甲基化的检出率随AlCl_3染毒剂量增加而降低的趋势(趋势χ~2=19.08,P0.01)。各AlCl_3染毒组APP mRNA的表达水平高于生理盐水组(F=8.973,P0.05)。与正常对照组比较,各AlCl_3染毒组大鼠海马APP、Aβ_(42)蛋白浓度均增高(F=11.14,P=0.032;F=17.82,P=0.018)。与低剂量组相比,中剂量组APP蛋白表达量增加,高剂量组APP、Aβ_(42)蛋白表达量增加,差异均有统计学意义(P0.05)。Aβ_(42)蛋白免疫组化法检测结果示,中、高剂量组海马神经细胞内外出现棕黄色物质,考虑有Aβ的沉积。结论氯化铝染毒可引起大鼠海马APP启动子甲基化水平降低,进而影响APP mRNA表达水平增高,海马组织APP表达量增多,从而导致Aβ产生增多而沉积。     

miR - 107在铝引起学习记忆下降及Aβ1 - 42沉积中的作用

目的 探讨miR - 107在麦芽酚铝染毒致大鼠学习记忆下降及Aβ1 - 42表达升高中的作用机制。方法 细胞实验:麦芽酚铝染毒HEK293细胞,对照组、低剂量组（100 μmol/L）、中剂量组（200 μmol/L）、高剂量组（400 μmol/L）染毒24 h, RT - qPCR检测 miR - 107表达水平,ELISA检测 BACE1、Aβ1 - 42表达量。动物实验:健康2月龄雄性SD大鼠,按体重随机分为对照组（生理盐水）、低剂量组（10 mM/kg）、中剂量组（20 mM/kg）、高剂量组（40 mM/kg）,采用腹腔注射染毒45 d,Morris水迷宫实验测定大鼠的学习记忆能力, RT - qPCR检测大鼠海马miR - 107的相对表达量。结果 不同剂量麦芽酚铝染毒HEK293细胞24 h后,与对照组相比,低、中、高剂量组miR - 107相对表达量降低（F = 11.385,P＜0.001）;中、高剂量组BACE1和Aβ1 - 42表达量均升高（P＜0.05）。Morris水迷宫实验结果:定位航行实验表明大鼠逃避潜伏期没有变化（F = 0.662, P＞0.05）;空间探索实验表明大鼠穿越平台次数（F = 0.069,P＞0.05）和目标象限停留时间(F = 0.779,P＞0.05)均没有变化。RT - qPCR结果:与对照组相比,中、高剂量组大鼠海马miR - 107相对表达量降低（F = 16.654,P＜0.01）。结论 麦芽酚铝染毒后,miR - 107相对表达量在染铝早期即出现降低:BACE1、Aβ1 - 42表达量升高,提示铝染毒致大鼠学习记忆能力下降及BACE1、Aβ1 - 42表达升高可能与早期miR - 107表达降低有关。     

甲基汞暴露对出生后大鼠学习记忆及NMDA受体表达的影响

[目的]研究甲基汞暴露对出生后不同生长期大鼠学习记忆能力及N-甲基0．天冬氨酸（NMDA）受体mRNA水平表达的影响。[方法]将出生后大鼠随机分组,即5mL／kg生理盐水组和5mg／kg氯化甲基汞（MMC）染毒组,其中染毒组按生后不同生长时期分4个亚组,即PND7、PND14、PND28和PND60组,连续7d灌胃染毒。采用Morris水迷宫试验检测大鼠学习记忆功能的改变,用原子荧光光度计检测脑组织汞含量、用逆转录一聚合酶链式反应（RT-PCR）特异性扩增受体NMDA的2A、2B、2C亚基,半定量分析PCR产物凝胶电泳结果。[结果]各染毒亚组在染毒后脑组织中汞含量明显高于对照组（P〈0．01）,水迷宫试验后,PND28皮质组织及PND60脑组织中汞含量明显高于对照组（P〈0．01）;Morris水迷宫试验结果显示,PND7、PND14染毒大鼠水迷宫测试潜伏期明显长于对照组（P〈0．01）;PND14染毒亚组海马和皮质中NR2AmRNA的表达明显低于对照组（P〈0．05）;PND14染毒亚组海马中NR2BmRNA表达明显低于对照组（P〈0．01）;PND14染毒亚组海马和皮质以及PND28亚组皮质中NR2CmRNA表达明显高于对照组（P〈0．01）.[结论]甲基汞对出生后1、2周的大鼠学习记忆功能有明显影响,其影响与脑组织NMDA受体2亚基mRNA表达变化有关。     

甲基汞的毒性:对不同年龄大鼠的作用

作者以雄性Sprague-Dawley种大鼠按年龄8、10、12、15、19.5和24.5周,俸重分别为200、300、350、400、450和500克,分为6组,以观察汞的毒性和排出与年龄之间的关系。各组动物按每100克体重给予1毫升含不同浓度的氯化甲基汞玉米油溶液灌胃一次,单笼喂饲,自由进食。十天后测得各组的LD_(50)分别为39.6±2.3、33.1±2.1、30.3±1.0、27.1±1.0、24.7±1.5和23.9±1.1毫克汞/公斤。可见氯化甲基汞的LD_(50)随年龄增长而下降。200、350、450克三组继续观察20天,发现给予一次剂量25毫克汞/公斤氯化甲基汞的大鼠,除有体重变化外,尚有氯化甲基汞中毒的临床体征。如:腹泻、乏力、竖毛、失去食欲和中枢神经系统紊乱征候突然发作     

急性氯化甲基汞染毒大鼠脑某些抗氧化指标的变化

目的 对SD大鼠经腹腔注射氯化甲基汞(MeH必)的急性染毒方式，观察其对大鼠脑组织和血清某些抗氧化指标的变化。方法 用甲基汞对大鼠染毒24h后，断头处死，取血清和脑组织检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果 染毒24h后，5．00mg／kg和10．00mg／kg剂量的大鼠脑组织匀浆和血清中的GSH—Px活性和S0D活性下降，MDA含量上升。结论 甲基汞染毒24h后，GSH—Px和SOD活性下降，MDA含量上升，表明这种作用对MeHgCl引起的神经毒性有一定的敏感性。MeHgCl可使脑组织和血清中某些抗氧化指标发生变化。     

丙烯腈对大鼠神经行为和脑组织中生化指标的影响

目的探讨丙烯腈(acrylonitrile,ACN)对大鼠的神经行为及脑组织生化指标的影响,为ACN神经毒性的研究提供线索。方法将40只SPF级SD大鼠按体重随机分为4组:3个ACN染毒组(12.5、25、50 mg/kg)、对照组(玉米油)灌胃染毒,1次/d,6天/周,连续13周。末次染毒后,使用Video Track动物行为分析系统对其自主活动度进行检测,同时检测大鼠脑组织中乙酰胆碱酯酶(ACh E)活力、乳酸和葡萄糖含量及血糖含量。结果染毒6周后,高剂量组出现明显流涎。各组之间脑组织脏器系数比较,差异均无统计学意义(P0.05)。大鼠脑组织中ACh E活力低、中、高剂量组与对照组相比降低(P0.05);乳酸含量中、高剂量组与对照组和低剂量组相比降低(P0.05);葡萄糖含量各组间比较,差异均无统计学意义(P0.05)。大鼠血糖含量高剂量组明显低于对照组、低和中剂量组(P0.05)。平面翻正和断崖回避试验中,染毒前和染毒后各组大鼠结果均为阳性。Openfield试验中各组大鼠在每个时间段的运动距离比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论在该试验条件下ACN能够引起脑组织ACh E活力、乳酸含量及血糖含量的变化,但未引起大鼠自主活动功能和活动量的变化。     

氯化甲基汞对体外培养胚胎的发育毒性实验研究

用体外全胚胎培养模型并结合电镜技术探讨了氯化甲基汞对大鼠胚胎的发育毒性。结果表明：氯化甲基汞的体外最小致畸剂量为０．２μｇ／ｍｌ，除ＶＹＳ直径和ＶＹＳ血管形成２项指标外，其它各指标值均明显低于对照组（Ｐ＜０．０５）。随着染毒剂量增加，氯化甲基汞对体外培养胚胎的发育毒性作用明显增强，呈剂量－反应关系，浓度达１．６μｇ／ｍｌ时全部胚胎均死亡。氯化甲基汞在＜０．８μｇ／ｍｌ时并不影响ＶＹＳ胎盘的生长发育，表现在ＶＹＳ直径、ＶＹＳ血管形成和电镜观察ＶＹＳ的超微结构均与对照组无显著性差异，说明氯化甲基汞能迅速透过胎盘，直接攻击胚胎细胞。提示氯化甲基汞的直接细胞毒作用，可能是其体外致畸作用、胚胎毒性作用的一个重要机制。     

1,2-二氯乙烷急性吸入染毒脑组织损伤形态学研究

为了研究 1 ,2 二氯乙烷 (1 ,2 -DCE)在静式吸入染毒条件下对脑组织的急性损害。采用连续静式吸入染毒大鼠 1 2h后 ,观察不同染毒剂量下受试动物脑组织的形态学变化 ;测定脑组织干湿重及含水量。结果显示 :染毒剂量为 2 .5g m3 时 ,脑组织在形态学上无明显变化 ,含水量为 80 .41 % ,与对照组 (79.82 % )相比 ,无明显差异 ;5 .0g m3 染毒组在形态学上出现轻微脑水肿 ,脑组织含水量为 82 .1 4 % ,与对照组相比有显著性差异 (P <0 .0 5) ;1 0 .0g m3 组脑组织在形态学上水肿明显 ,其含水量 (83 .65 % )与各组之间差异显著 (P <0 .0 5)。结果提示 :1 ,2 -DCE在短期大量吸入的情况下可导致动物出现脑水肿。     

甲基汞对大鼠小脑的脂质过氧化作用

研究了氯化甲基汞经口染毒不同剂量及不同时间对大鼠小脑中脂质过氧化产物及还原型谷胱甘肽的影响。小脑中ＬＰＯ的含量随着染毒剂量的增加和染毒时间的延长而升高，且有剂量－效应关系和时间－效应关系；ＧＳＨ含量降２．５ｍｇ／ｋｇ剂量组外，其它各组随着染毒剂量的增加和染毒时间的延长而降低，亦有剂量－效应关系和时间－效应关系。     

替普瑞酮诱导阿尔茨海默病模型大鼠海马热休克蛋白70表达及对其学习记忆能力的影响

目的双侧海马注射Aβ1-42建立阿尔茨海默病大鼠模型，观察替普瑞酮诱导大鼠海马热休克蛋白70表达及对其行为学的影响。方法72只SD大鼠随机分为替普瑞酮组、模型组与对照组，双侧海马注射Aβ1-42建立阿尔茨海默病大鼠模型，对照组海马注射等量生理盐水。替普瑞酮组予替普瑞酮800mg／kg／d灌胃，余两组予等量生理盐水灌胃。术后1、7、14和21d并于Y迷宫行为学测试后处死大鼠。采用RT—PCR和western—blot方法，观察各组大鼠海马HSP70表达的变化。结果术后14和21d模型组学习记忆能力较对照组明显减退（P〈0．01），而替普瑞酮组大鼠较模型组有所改善（P〈0．01）。术后7、14和21d模型组大鼠海马HSP70表达较对照组逐渐减少（P〈0．05），替普瑞酮组HSP70表达明显增加（P〈0.05）。结论替普瑞酮能够诱导AD模型大鼠海马HSP70表达，从而减轻神经元损害，改善大鼠的学习记忆能力。