166胸腺细胞与胸腺基质细胞的相互作用

胸腺内Ｔ细胞细胞依赖胸腺微环境提供的多种信号完成正常发育过程，然而研究发现无论在自然或实验条件下胸腺细胞的减少均可导致胸腺上皮细胞减少，从而提示胸腺微环境和胸腺细胞之间存在相互依赖关系。即Ｔ细胞的发育依赖于胸腺微环境同时Ｔ细胞的存在对形成和维持正常的胸腺微环境也是必需的。     

胸腺细胞对胸腺止皮细胞分泌IL-6的促进作用

为分析胸腺细胞对胸腺基质细胞功能的调节作用，将胸腺细胞与小鼠胸腺上皮细胞系（ＭＴＥＣ１）共育，分析胸腺细胞对ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６的影响。结果表明，胸腺细胞能明显促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，其促进程度与两种细胞的数量及共育时间有关。胸腺细胞（４×１０~６／孔）与ＭＴＥＣ１（１×１０~５／孔）共育４８小时，ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６达高峰。去除胸腺细胞后９６小时，ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６的量仍比单独培养的ＭＴＥＣＩ多１．７倍。经丝裂霉素Ｃ处理的胞腺细胞仍能促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，其作用程度与末经处理的胸腺细胞相似。而胸腺细胞培养上清及裂解液则不影响ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，从而证实胸腺细胞能促进ＭＴＥＣＩ分泌ＩＬ－６，其作用机制可能与细胞-细胞直接相互作用有关。     

胸腺细胞对胸腺上皮细胞分泌IL—6的促进作用

为分析胸腺细胞对胸腺基质细胞功能的调节作用，将胸腺细胞与小鼠胸腺上皮细胞系（ＭＴＥＣ１）共育，分析胸腺细胞对ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６的影响。结果表明，胸腺细胞能明显促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，其促进程度与两种细胞的数量及共育时间有关。胸腺细胞（４×１０＾６／孔）与ＭＴＥＣ１（１×１０＾５／孔）共育４８小时，ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６达高峰。去除胸腺细胞后９６小时，ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６的量仍比单独培养的     

初代培养的胸腺基质细胞对小鼠胸腺细胞的粘附和吞噬作用

目的 探讨胸腺基质细胞（TSC）对胸腺细胞的调节作用。方法 应用光镜、电镜和流式细胞术等，观察初代培养的TSC对胸腺细胞发育的调节作用。结果 光镜和电镜均可见，TSC可大量粘附和吞噬胸腺细胞，其中部分胸腺细胞发生凋亡。尽管与TSC共培养的胸腺细胞存活率高，凋亡率低，但其总数却显著减少。结论 TSC可通过粘附和吞噬作用，清除部分胸腺细胞。     

两种小鼠胸腺基质细胞对胸腺细胞凋亡的不同作用

采用两种体外建系的小鼠胸腺基质细胞（ＴＳＣ）系，即上皮样ＴＳＣ（ＭＴＥＣ１）和树突状ＴＳＣ（ＭＴＳＣ４），观察其对胸腺细胞凋亡的影响。小鼠胸腺细胞在体外培养过程中，可自发地出现细胞凋亡的特征，表现为ＤＮＡ呈梯度断裂片段，细胞经ＦＡＣＳ分析出现亚二倍体ＤＮＡ波峰，以及Ｆｅｕｌｇｅｎ′ｓ染色镜检所见的ＤＮＡ凝聚和断裂。胸腺细胞在与ＴＳＣ共育后，在ＭＴＥＣ１组可见其凋亡过程受到抑制和存活率的增加；在ＭＴＳＣ４组，仅在共育１２至１８小时时，见到胸腺细胞凋亡加强，而其存活率不受影响。结果提示在胸腺细胞发育过程中，其阴性选择作用的主要机制之一的ＰＣＤ过程受不同来源的胸腺基质细胞的调节。     

小鼠胸腺基质细胞单抗对胸腺细胞及脾细胞增殖的抑…

试验两种大鼠抗小鼠胸腺基质细胞ＭｃＡｂｓ：Ｐｆ１８－３、Ｒｓ２１－Ｃ６的生物作用。Ｐｆ１８－３ＭｃＡｂ识别分子表达于胸腺细胞、脾脏Ｔ及Ｂ细胞；Ｒｓ２１－Ｃ６只表达于ＭＴＳＣ。加Ｐｆ１８－３或Ｒｓ２１－Ｃ６于ＭＴＥＣ１与胸腺细胞或脾细胞的体外培养中，在ＣｏｎＡ存在及不存在下，均可抑制ＭＴＥＣ１诱导胸腺细胞及脾细胞的增殖作用。ＣｏｎＡ活化下，其对胸腺细胞增殖的抑制率Ｐｆ１８－３为９６％；Ｒｓ２１－Ｃ６     

胸腺基质细胞促进CD4CD8双阳性胸腺细胞排除或成熟

胸腺基质细胞 (Ｔｈｙｍｉｃｓｔｒｏｍａｌｃｅｌｌｓ ,ＴＳＣ)是胸腺微环境最重要的组成部分 ,对胸腺细胞的分化发育具有重要作用。ＴＳＣ可促进胸腺细胞的成熟分化 ,减少胸腺细胞凋亡[1] ,也可促进ＣＤ4 ＣＤ8 双阳性 (ＤＰ)胸腺细胞凋亡及克隆排除[2 ] 。本文用光镜和电     

小鼠胸腺基质细胞单抗对胸腺细胞及脾细胞增殖的抑制作用

试验两种大鼠抗小鼠胸腺基质细胞（ＭＴＳＣ）ＭｃＡｂｓＰｆ１８－３、Ｒｓ２１－Ｃ６的生物作用。Ｐｆ１８－３ＭｃＡｂ识别分子表达于胸腺细胞、脾脏Ｔ及Ｂ细胞；Ｒｓ２１－Ｃ６只表达于ＭＴＳＣ。加Ｐｆ１８－３或Ｒｓ２１－Ｃ６于ＭＴＥＣＩ与胸腺细胞或脾细胞的体外培养中，在ＣｏｎＡ存在及不存在下，均可抑制ＭＴＥＣ１诱导胸腺细胞及脾细胞的增殖作用。ＣｏｎＡ活化下，其对胸腺细胞增殖的抑制率Ｐｆ１８－３为９６％；Ｒｓ２１－Ｃ６为９１％。对脾细胞的抑制率Ｐｆ１８－３为７５％；Ｒｓ２１－Ｃ６为５１％。Ｐｆ１８－３对单纯ＣｏｎＡ活化的胸腺细胞增殖也有显著的抑制作用，而Ｒｓ２１－Ｃ６无此作用。包被于平皿的固相Ｐｆ１８－３ＭｃＡｂ，对胸腺细胞、脾细胞均有轻度但显著的促增殖作用。故Ｐｆ１８－３ＭｃＡｂ识别的抗原分子（及其配基）参与Ｔ细胞的活化过程。鉴于Ｐｆ１８－３＋细胞的分布有其特异性，分析此抗原分子的功能有重要的意义。     

胸腺基质细胞对热应激小鼠胸腺细胞亚群变化及HSP70表达的影响

目的探讨胸腺基质细胞(TSC)对热应激小鼠胸腺细胞的调节作用。方法应用光镜、电镜、流式细胞术等观察初代培养的TSC对热应激胸腺细胞发育的调节作用。结果 TSC可大量粘附和吞噬胸腺细胞,使热应激胸腺细胞数量明显减少,但尚存的胸腺细胞中活细胞比例却明显增加,凋亡率明显减少。TSC可促进热应激胸腺细胞HSP70表达增加,使热应激胸腺细胞的DP及SP细胞,尤其是DP细胞数量明显减少。结论 TSC可清除大量的热应激胸腺细胞,TSC促进热应激胸腺细胞HSP表达增高可能具有双重意义:既可保护胸腺细胞,又可促进TSC识别和吞噬已受损的或凋亡的胸腺细胞。     

宫颈癌细胞通过分泌TSLP促进自身细胞活力

目的:探讨胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)对宫颈癌细胞活力的自分泌调节作用。方法:体外培养宫颈癌细胞株HeLa和CasKi,分别收集培养24、48和72小时的培养上清,ELISA法检测培养上清中TSLP的分泌水平;流式细胞术分析HeLa和CasKi细胞表面TSLP受体(TSLPR)的表达水平;再用MTT法分别检测HeLa和CasKi细胞经人重组细胞因子TSLP(1、10和100 ng/ml)处理24、48和72小时后细胞活力的水平变化。结果:HeLa和CasKi细胞均呈时间依赖性分泌TSLP(P<0.01),且HeLa细胞在24和48小时分泌TSLP的水平高于CasKi细胞(P<0.01或P<0.05);HeLa和CasKi细胞TSLPR阳性表达率分别为23.61±1.30和27.07±2.13,前者低于后者(P<0.05);此外,10或100 ng/ml TSLP作用HeLa和CasKi细胞48小时或72小时均能上调其细胞活力(P<0.05)。结论:宫颈癌细胞可能通过TSLP自分泌作用促进自身的活力,进而利于宫颈癌细胞的生长,因而参与宫颈癌的发病和进展。     

胸腺基质细胞的抗原提呈作用

目的 研究胸腺基质细胞的抗原提呈能力。方法 应用ＯＶＡ－特异的、受Ｉ－Ａ＾ｄ分子识别限制的辅助Ｔ细胞杂交瘤（３ＤＯ．１８．３）识别提呈的ＯＶＡ的ＣＮＢｒ水解片段而被活化后产生ＩＬ－２,测定ＩＬ－２活性来分析胸腺基质细胞的抗原提呈作用。结果ＩＦＮ－γ能促进ＭＴＥＣＩ和ＭＴＳＣ４表达Ｉ－Ａ＾ｄ分子,并促进ＭＴＳＣ４表达Ｂ７－１分子。经ＩＦＮ－γ作用后,ＭＴＥＣ１和ＭＴＳＣ４均有抗原提呈能力,ＭＴＳＣ     

小鼠胸腺基质细胞系MTDC的鉴定及细胞因子对其表面分子表达的作用

目的：鉴定小鼠胸腺基质细胞系MTDC，为进一步功能研究奠定基础。方法：利用多种鉴定小鼠胸腺树突状细胞的单克隆抗体对我室建立的一株缺乏上皮细胞典型特点的胸腺基质细胞系MTDC进行鉴定；并用多种细胞因子组合对MTDC及其MTDC(10)克隆进行诱导。结果：CD40、B7.1、MHC class I在MTDC的表达阳性率分别为70%、10%、10%；MTDC不表达CD11c、MHC classⅡ及Ly5.2低表达CD8α；DEC-205这一重要的树突状细胞的表面分子在MTDC及其１４个亚克隆中有不同程度的表达，阳性率分布于5%-58%。MTDC(10)克隆细胞在GM-CSF、IL-4、IFN-γ，anti-CD40 McAb联合作用下，可上调表达MHC classⅠ、MHC classⅡ及B7.1，阳性率分别为96.3%、42.1%、52.6%，高于MTDC被诱导后表达阳性率；并且发现去除４种因子中任何一种因子，均不能上调B7.1的表达，且IFN-γ在MHCⅡ类分子上调表达中起关键作用。结论：MTDC缺乏典型树突状细胞的表达标志及上皮细胞特点，可能为一特殊的胸腺基质细胞系。     

The effect of epidermal growth factor on vascular endothelial growth factor secretion by endometrial stromal cells

Endometrial stromal cells undergo morphological and functional changes to facilitate oocyte implantation under regulation of various hormones and growth factors. We studied physiological induction by epidermal growth factor (EGF) of vascular endothelial growth factor (VEGF) in these cells. In human endometrial stromal cells, the effect of EGF, genistein, tryphostin AG1478 (a tyrosine kinase inhibitor), and wortmannin (a phosphatidylinositol 3-kinase inhibitor) on production of VEGF was examined: Total RNA was extracted and VEGF mRNA expression was quantified by Northern analysis. EGF induced production of VEGF by stromal cells in a time-dependent manner; the effect became significant after 12 h and increased further between 24 and 48 h (P<0.05). Dose dependency was also significant (P<0.01). Genistein, tryphostin AG1478, and wortmannin partially suppressed the increase in production induced by EGF (P<0.01, P< 0.01, P<0.01), respectively. Production of EGF by fertilized oocytes and trophoblasts has been reported in early pregnancy. VEGF is believed to be induced by EGF through mechanisms involving tyrosine kinase and phosphatidylinositol 3-kinase. The increase in VEGF may contribute to neovascularization that promotes proliferation of endometrium and placentation. Received: 6 September 2001 / Accepted: 21 May 2002     

胸腺细胞对胸腺上皮细胞增殖的影响

为了分析胸腺细胞在胸腺上皮细胞发育中的作用，本文作者在体外分析了胸腺细胞对小鼠胸腺上皮细胞系（ＭＴＥＣ１）增殖的作用。结果表明，不同的胸腺细胞亚群以及胸腺细胞裂解液均能促进ＭＴＥＣ１增殖，考的松耐受性胸腺细胞和ＣＤ３－４－８－细胞具有同样的促进ＭＴＥＣ１增殖的作用，其促进程度与两种细胞的数量有关，胸腺细胞和ＭＴＥＣ１为２０１或４０１时，其促进作用最强。胸腺细胞裂解液在高浓度（１２稀释）时，能促进ＭＴＥＣ１增殖，在低浓度时则不影响ＭＴＥＣ１的增殖。本实验提示，胸腺细胞可以通过细胞－细胞相互作用以及分泌细胞因子影响ＭＴＥＣ１的增殖。     

IL-7对胸腺T细胞及树突状细胞体外分化发育的影响

目的:探讨IL-7对胸腺T细胞及胸腺树突状细胞分化的影响。方法:摘取15～16日龄胎鼠胸腺进行体外器官培养(胚胎胸腺器官培养-FTOC),分别将细胞因子IL-7和培养基滴加在胸腺小叶上,12天后收集不同条件下经FTOC培养获得的胸腺细胞,流式细胞仪检测细胞表面分子CD4、CD8、CD11c、B220、Ia等的表达,通过光学显微镜观察细胞形态,通过细胞计数检测细胞数目的变化。再将经FTOC培养获得的胸腺细胞和异源的T细胞进行混合淋巴细胞反应,通过MTT法检测T细胞的增殖情况。结果:细胞计数结果表明添加外源性IL-7组的胸腺细胞数目明显减少,流式细胞仪检测结果显示其中胸腺CD4-CD8-双阴性细胞及CD8+单阳性细胞比例有所增加,而CD4+CD8+双阳性细胞比例显著下降,CD4+单阳性细胞比例没有明显变化;此外,B细胞和树突状细胞、NK细胞数量均有不同程度的增加。结论:IL-7在胸腺T细胞及胸腺树突状细胞的分化发育中发挥重要的调节作用。