Sabin株脊髓灰质炎病毒灭活疫苗的制备及免疫原性评价

目的:建立Sabin株毒种制备脊髓灰质炎灭活疫苗(inactivated poliovirus vaccine, IPV)生产工艺并评价其免疫原性。方法:采用Vero细胞培养Sabin株脊髓灰质炎Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒,制备3价Sabin株IPV(Sabin strain IPV, sIPV)。通过ELISA检测D抗原含量。...     

脊髓灰质炎灭活疫苗的免疫原性和保护性评价：预测疫苗效力的新方法

用对脊髓灰质炎病毒敏感的转基因（Tg）小鼠评价脊髓灰质炎灭活疫苗（IPV）保护性的分析方法已经建立，并针对2型IPV进行了优化。美国食品和药物管理局Dragunsky等用这种方法来比较由减毒Sabin株生产的实验性IPV（sIPV）和由野生型（wt）脊髓灰质炎病毒MEF-1株生产的传统IPV（cIPV）的免疫原性和保护性。     

从1名健康疫苗接种者分离到的重组3型/2型脊髓灰质炎病毒及其包含的嵌合核壳VP1的鉴定

从接种口服脊髓灰质炎疫苗后约 1 2周的 1名 2岁男孩的粪便标本中分离到Sabin3/Sabin2 /Sabin3( S3/2 /3)型间重组脊髓灰质炎病毒。　　由于该分离株的初步鉴定为嵌合 Sabin3/Sabin2核壳结构 ;从而使作者进一步研究了这个病毒的整个基因组序列、抗原特性和温度敏感性。　　研究表明 ,第 1个重组连接位于编码VP1核壳蛋白的基因区 ,在 32 74和 32 85位核苷酸之间 ;第 2个连接则位于 RNA聚合酶区域 ( 6 82 4和 6 82 5位核苷酸 )。重组把 6个 Sabin2衍生氨基酸引入 Sabin3核壳中的VP1羧基末端。重组病毒的全基因组与其亲代 Sabin株在 33…     

全球首个Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗获批上市

本刊讯2015年1月14日,国家食品药品监管总局批准了全球首个Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(单苗)的生产注册申请。该疫苗是由中国医学科学院医学生物学研究所研发,通过采用现行脊髓灰质炎减毒活疫苗的生产毒株(Sabin株),经在Vero细胞生物反应器培养收获病毒,结合灭活疫苗生产工艺制备而成。该疫苗主要通过注射途径用于儿童预防脊髓灰质炎病毒的感染,它的上市将对我国彻底消灭脊髓灰质炎发挥至关重要的作用。脊髓灰质炎是一种由Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒引起的急性传     

简讯

2015年1月14日,国家食品药品监管总局批准了全球首个Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(单苗)的生产注册申请。该疫苗是由中国医学科学院医学生物学研究所研发,通过采用现行脊髓灰质炎减毒活疫苗的生产毒株(Sabin株),经在Vero细胞生物反应器培养收获病毒,结合灭活疫苗生产工艺制备而成。该疫苗主要通过注射途径用于儿童预防脊髓灰质炎病毒的     

培养温度对脊髓灰质炎病毒繁殖及D抗原的影响

目的 选择脊髓灰质炎病毒繁殖的最佳温度,同时观察温度对病毒繁殖及D抗原的影响。方法   分别在25℃、33℃和37℃培养脊髓灰质炎病毒(Sabin株Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型),从24 h开始间隔12 h取样,至细胞完全病变或96 h,用ELISA检测病毒D抗原含量,绘制变化曲线;用微量细胞病变法检测感染性滴度,绘制病毒生长曲线。结果   三个型的脊髓灰质炎病毒在25℃均不繁殖;33℃和37℃均适合病毒繁殖。对于Ⅰ和Ⅲ型病毒,33℃的繁殖滴度及D抗原水平比37℃高;Ⅱ型病毒在两种温度下繁殖特性基本一致。结论   温度对脊髓灰质炎病毒繁殖起决定性作用,综合Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型病毒的温度繁殖特点,33℃培养比37℃更适合脊髓灰质炎病毒繁殖。     

常用消毒剂对Sabin株脊髓灰质炎病毒的杀灭效果

目的  评价杀孢子剂、“84”消毒液、酸性苯酚盐、碱性苯酚盐对Sabin株脊髓灰质炎病毒的杀灭效果。方法  首先采用中和剂鉴定试验鉴定消毒剂的中和剂,然后通过悬液定量病毒杀灭试验比较4种消毒剂对Sabin株脊髓灰质炎病毒Ⅱ型的杀灭效果。杀灭对数值>4.0 lg半数细胞培养感染量（50% cell culture infective dose,CCID50）/ml,表示达到消毒效果。结果  中和剂鉴定结果表明,0.5% 硫代硫酸钠可有效中和杀孢子剂和“84”消毒液对病毒的杀灭作用,10%胰蛋白胨大豆肉汤培养基可有效中和酸性苯酚盐和碱性苯酚盐对病毒的杀灭作用。杀孢子剂和1.0%“84”消毒液分别与病毒作用30 min,平均杀灭对数值均>4.0 lgCCID50/ml,达到消毒效果。0.5%“84”消毒液、酸性苯酚盐、碱性苯酚盐分别与病毒作用45 min,平均杀灭对数值仍<4.0 lgCCID50/ml,没有达到预期的消毒效果。结论  杀孢子剂和氯含量较高的“84”消毒液对Sabin株脊髓灰质炎病毒的杀灭效果远大于氯含量较低的“84”消毒液以及酸性和碱性苯酚盐。     

WHO关于脊髓灰质炎疫苗的意见书

此文介绍了脊髓灰质炎病毒的流行病学、目前国际上使用的2种脊髓灰质炎疫苗的安全性、免疫原性和效果以及WHO对脊髓灰质炎疫苗的意见.     

2013-2018年消灭脊髓灰质炎最后阶段战略计划

2013年1月,在全球消灭脊髓灰质炎行动展现胜利曙光之时,全球消灭脊髓灰质炎行动（GPEI）发布了新制订的《2013-2018年消灭脊髓灰质炎最后阶段战略计划》.此文介绍了战略计划的要点.     

RT-PCR-RFLP方法用于脊髓灰质炎病毒型内鉴定

目的：采用逆转录-聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性分析(RT—PCR—RFLP)方法对脊髓灰质炎(脊灰)病毒(pv)进行型内鉴定。方法：采用RT—PCR方法对PV的VP1区进行扩增，PCR产物分别用DdeⅠ、HpaⅡ、HaeⅢ3种限制性内切酶做RFLP分析，并与PV SabinⅠ、Ⅱ、Ⅲ3个型别疫苗株相对照判定其是否为疫苗相关株。结果：对天津市2001年～2002年分离到的9株PV阳性株进行RT-PCR-RFLP试验，全部为疫苗相关株。结论：该方法应用于PV检测，可以尽早发现脊灰野病毒、疫苗衍生株及疫苗重组株等，便于尽快采取措施阻断其传播。     

脊髓灰质炎疫苗衍生病毒循环的现状

本文介绍了脊髓灰质炎疫苗衍生病毒(VDPV)循环和引起脊髓灰质炎爆发的情况，循环VDPV(cVDPV)出现和传播的危险因素，cVDPV分离株的特性及实验室监测，cVDPV对全球消灭脊髓灰质炎策略的影响。     

动态浊度法检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗及其中间产品中细菌内毒素含量

目的 ：建立一种用于检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗及其中间产品中细菌内毒素含量的方法。方法 ：应用细菌内毒素动态试管检测仪检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗及其中间产品中细菌内毒素含量,并对方法的标准曲线可靠性、准确度、精密度和耐用性进行验证。结果 ：细菌内毒素含量在0.125～2EU/ml范围内,标准曲线回归方程为Lg Tg=2.918-0.2760Lg C（∣r∣=0.9964）;干扰试验中,供试品细菌内毒素含量回收率为62.82%～101.04%;准确度试验中,供试品细菌内毒素含量回收率为64.54%～93.74%;精密度试验中,3名实验人员测试的平均反应时间相对标准偏差（RSD）均小于4%,18次测试的平均反应时间总RSD小于8%,供试品细菌内毒素含量回收率为76.66%～149.65%;使用不同厂家鲎试剂时,供试品细菌内毒素含量回收率为76.66%～112.68%。结论 ：动态浊度法可用于Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗及其中间产品中细菌内毒素的定量检测。     

Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗宿主细胞DNA残留量检测方法研究

目的 建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞DNA残留量的检测方法.方法 提取Vero细胞基因组DNA,制备地高辛标记探针.比较样品不同处理方式的检测差异.对建立的残留DNA检测方法进行特异性、灵敏度和稳定性验证.结果 Vero细胞基因组DNA的质量浓度为295 μg/ml,260nm与280nm波长处的吸光度比值为1.88.探针灵敏度达到0.01 pg/μl.采用苯酚抽提方式处理DNA参考品,检测灵敏度为1 ng;而用碘化钠处理DNA参考品,灵敏度达到10 pg.特异性检测表明,探针与非同源DNA无杂交.灵敏度和稳定性检测结果显示,探针于-70℃保存9个月,灵敏度仍为10 pg.结论 建立了Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞DNA残留量的检测方法.采用碘化钠提取DNA,回收率高,操作简单,适用于Vero细胞的残留DNA检测.     

关于2013—2016年全球脊髓灰质炎灭活疫苗及将三价口服脊髓灰质炎疫苗更换为二价疫苗的介绍

此文介绍了目前全球使用的脊髓灰质炎疫苗、全球引入脊髓灰质炎灭活疫苗的进展和2016年4月全球同步将三价口服脊髓灰质炎疫苗更换为二价疫苗的方案及可能产生的影响。     

河北省疫苗变异脊髓灰质炎病毒1例调查分析

目的 了解河北省疫苗变异脊髓灰质炎（脊灰）病毒1例的调查情况。方法急性弛缓性麻痹（AFP）病例按个案调查表进行调查,临床分类由省级AFP专家诊断小组会诊并做出最后分类。结果2007年7月河北省发生了1例疫苗变异脊灰病毒病例,临床表现类似脊灰,在对病例及接触者所分离到的脊灰病毒株进行核苷酸序列测定时,发现VP1区与脊灰疫苗（Sabin）株脊灰病毒相比有0．77％-0．88％的核苷酸变异。患儿发病前未接种口服脊灰减毒活疫苗（OPV）,但与本村有免疫史健康儿童有接触史。结论各级卫生部门采取了包括AFP病例主动搜索、OPV强化免疫等多项措施,有效地控制了疫情的扩大和蔓延。     

Ⅰ型和Ⅱ型脊髓灰质炎减毒活疫苗的猴体神经毒力

[Marsden SA et al:J Biol Stand8(4):303,1980(英文)] 猴体神经毒力试验对脊髓灰质炎减毒活疫苗来说,仍然是一项重要的检定项目。Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎减毒活疫苗使用历史表明,它的猴体神经毒力随病毒株在细胞培养中传代水平而增高。为了确定Sabin株Ⅰ、     

接种三价OPV后影响Sabin 3型疫苗免疫原性的因素

使用三价口服脊髓灰质炎疫苗(OPV)进行免疫时,常出现Sabin 3型疫苗免疫原性不高,从而造成在免疫人群中脊髓灰质炎局部流行的问题,作者在墨西哥一乡村进行了为期三年的OPV接种比较研究。     

甲醛溶液对Sabin株脊髓灰质炎病毒灭活效果研究

 目的  验证4%甲醛溶液使Sabin株Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎（脊灰）病毒达到预期灭活效果所需要的时间。方法  用4%甲醛溶液对15批Sabin株Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊灰病毒在(36.5±1) ℃ 环境进行灭活,同时以15批未加入4%甲醛溶液的病毒纯化液作为对照组,按照企业注册标准采用微量细胞病变法测定病毒滴度。为了消除4%甲醛溶液对Hep-2细胞的影响,取4%甲醛溶液接种Hep-2细胞作为实验组,同时设置Hep-2细胞为对照组,每天观察对比两组细胞形态。对同一个Hep-2细胞悬液的总细胞数和活细胞数采用传统手工计数和全自动细胞计数仪计数,并比较分析结果。结果  实验组随着灭活时间的延长病毒滴度呈下降趋势,在灭活到第4天起,3个型别样品均检测不到病毒滴度;对照组病毒滴度在每毫升9.1～10.6 lg半数细胞培养物感染量范围内,符合企业注册标准的要求。4%甲醛溶液对Hep-2细胞生长有抑制作用,在培养观察到第3天时细胞全部失去活力死亡;对照组细胞形态良好呈多边形长成致密单层,活细胞组t值为18.098,总细胞组t值为4.005,P值均＜0.05,差异有统计学意义。结论  脊灰病毒在第4天能被彻底灭活,在进行此实验时应先消除甲醛对细胞培养的影响,避免结果出现假病变现象,确保结果的准确性;应用全自动细胞计数能提高计数结果的精确度。     

接种脊灰疫苗引起脊髓灰质炎相关性病例1例报告

患儿男性,2006年1月10日出生,3月12日在我院接种门诊口服脊髓灰质炎糖丸1粒。35天后发热,在当地一家“二级甲”医院就诊,以“上感”收入院,静脉点滴液体治疗2天,高热不退,并出现惊厥,四肢迟缓性瘫痪,转入市内一家“三级甲”医院诊治,以“急性脑炎、脑脊髓膜炎、类脊髓灰质炎”收入重症监护室抢救，并留取患儿大便标本送山东省疾病控制中心检测。肌力检查：左上肢、右下肢肌力1级，右上肢、左下肢肌力0级。山东省疾病控制中心的检查报告显示在患儿的粪便中检测出Ⅱ型脊髓灰质炎病毒毒株，并组织专家对患儿进行鉴定，诊断为“脊灰疫苗引起脊髓灰质炎相关性病例”，患儿以“类脊髓灰质炎”入康复科康复治疗。经过1周救治，患儿脱离了危险。     

口服脊髓灰质炎疫苗停用策略

一旦证实消灭了野生型脊髓灰质炎病毒,那么与口服脊髓灰质炎疫苗(oral polio vaccine,OPV)常规免疫的公共卫生利益相比,由OPV所致的疫苗相关麻痹性脊髓灰质炎或由传播的疫苗源性脊髓灰质炎病毒暴发引起的疾病的负担将日益凸显.为了确保脊髓灰质炎永久性消灭,有必要在世界范围内最终停止OPV常规免疫计划.世界正进入脊髓灰质炎的消灭及确证阶段,因此,为OPV停用所作的准备工作正在加紧进行,为其安全停用OPV的危险性管理体系也在制定中.此体系包括:所有已知的脊髓灰质炎病毒及潜在感染性物质的生物安全防护;建立国际OPV储备;确保在证实脊髓灰质炎消灭后,有一个持续的全球监测和反应机制;在决定继续使用脊髓灰质炎灭活疫苗免疫的国家中,制定相关的国家政策.为了最终达到全球同步停用OPV,需要同一水平的国际性合作与协调.