日本血吸虫循环抗原定位的研究

近年来国内外研究证明:在感染血吸虫的宿主血液内,可检出循环抗原(Circulatingantigen),此种抗原对免疫诊断和免疫病理研究具有重要意义。实验表明此抗原来自血吸虫成虫,国外1974年用间接免疫荧光染色法均确定曼氏血吸虫循环抗原的位置是在肠坒的上皮细胞,说明它来自成虫的肠辺。但日本血吸虫循环抗原是否亦来自肠道?未见     

日本本血吸虫患者尿液中32kD循环抗原的免疫生物学特征

目的研究日本血吸虫感染者尿液中特异性的诊断抗原，以尿液为样本诊断日本血吸虫病。方法用IgG的亲和层析柱分离和纯化抗日本血吸虫循环抗原抗体并用生物素标记分离纯化的IgG抗体；Western blot检测日本血吸虫虫卵可溶性抗原和日本血吸虫感染者尿液中存在的日本血吸虫主要的循环抗原分子。结果日本血吸虫患者尿液中存在日本血吸虫的特异性循环抗原，Western blot显示其尿液中主要循环抗原分子与虫卵可溶性32kD抗原分子相同。结论日本血吸虫感染者尿液中的32kD循环抗原分子可能来自日本血吸虫虫卵可溶性抗原，可作为血吸虫感染的诊断。     

日本血吸虫成虫多糖循环抗原的免疫分析与酶联检示

琼脂糖免疫电泳对日本血吸虫成虫三氯醋酸可溶部分(AWAj-TCA)的分析共检示出8个抗原成分。循环抗原中的主要成员为具有高泳度的阳极循环抗原(CAA)。抗原的来源定位分析表明循环抗原均属肠相关抗原。只有一个非循环的阳极抗原(2号带)主要来源于虫体实质,且为日本血吸虫所特有。以双抗体法过氧化物酶酶标技术(ELISA)检测感染日本血吸虫家兔血清中的CAA,其低限检出水平达每毫升血清100ng左右。对感染不同尾蚴数量的家兔(分别为50,100,500,2000,5000条)及田鼠(60～500条不等)血清,于感染后7—8周检测CAA水平分别与感染度和虫荷数呈显著的正相关关系(r>0.9)。     

不同时期日本血吸虫感染动物血清与血吸虫各期抗原的反应性

为了解不同时期日本血吸虫感染动物血清与血吸虫各期抗原的反应性,寻找用于免疫荧光抗体试验的特异性强、敏感性高并有较高经济价值的血吸虫抗原,进行了本项研究。1.实验方法(1)实验动物选健康家兔28只,随机分作4组,每组7只。组Ⅰ     

日本血吸虫循环免疫复合物中抗原的鉴定

用低浓度ＰＥＧ（ＭＷ６０００）提取的日本血吸虫感染兔血清中循环免疫复合物（ＣＩＣ）直接免疫家兔，制备ＣＩＣ兔血清。采用酶联免疫印迹技术（ＥＩＴＢ）分析鉴定日本血吸虫ＣＩＣ中抗原成份。结果表明，ＣＩＣ中成虫及其排泄分泌物源性抗原成份有１７种，虫卵源性抗原成份有５种。且ＩＦＡＴ方法分析ＣＩＣ中抗原成份定位于成虫表膜及肠腔上皮。     

日本血吸虫循环免疫复合物中抗原的鉴定

用低浓度ＰＥＧ（ＭＷ６０００）提取的日本血吸虫感染兔血清中循环免疫复合物（ＣＩＣ）直接免疫家兔，制备抗ＣＩＣ兔血清。采用酶联免疫印迹技术（ＥＩＴＢ）分析鉴定日本血吸虫ＣＩＣ中抗原成份。结果表明，ＣＩＣ中成虫及其排泄分泌物源性抗原成份有１７种，虫卵源性抗原成份有５种。用ＩＦＡＴ方法分析ＣＩＣ中抗原成份定位于成虫表膜及肠腔上皮。     

日本血吸虫纯净活虫卵的制备

日本血吸虫活虫卵的大量制备和纯化是有关日本血吸虫研究的重要一环,血吸虫虫卵抗原的制备及研究、建立动物的肺或肝脏组织血吸虫卵肉芽肿模型、血吸虫卵体外培养及血吸虫卵的发育过程或其影响因素的研究以及血吸虫卵RNA和DNA提职等都涉及血吸虫卵的分离和纯化。我们参照陈佩惠’“’、Cho。ozynski等“’和曹建平等’”’方法进行改进,建立了分离和纯化日本血吸虫卵的方法,现报道如下。1材料和方法11动物感染不同的动物种类以及不同的实验自的,感染日本血吸虫尾蛐的数量有所不同’“‘。制备虫卵通常用小鼠和家兔,小鼠均是不同品系日本…     

不同时期日本血吸虫感染动物组织内免疫物质的定位研究

本文应用直接法和间接法免疫荧光抗体试验(DFA和IFA),观察了不同时期日本血吸虫感染动物组织内特异性抗原和抗体的定位情况及其动态变化。以了解日本血吸虫感染动物组织内免疫物质与日本血吸虫病变的关系,并探讨其发病机理。     

不同时期日本血吸虫感染动物免疫物质的动力学研究

本文应用双向普通对流免疫电泳(TDCIEP)、双向酶标记抗原和抗体对流免疫电泳(TD-ELACIEP)、聚乙二醇(PEG)沉淀试验、CIC解离测定法(CICD)及免疫双扩散(ID),检测了日本血吸虫感染家兔在不同时期的循环抗体和抗原(CAb和CAg)、总IgG、循环免疫复合物(CIC)及CIC中的CAg、CAb和IgG的水平,并观     

诊断日本血吸虫病双特异性抗体的制备和应用

目的 制备抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)/辣根过氧化物酶(HRP)双特异性抗体,并应用于日本血吸虫病的诊断.方法杂交瘤方法制备抗SEA和抗HRP单克隆抗体,分别用化学交联剂DTNB和SPDP将IgG1亚类的两种单克隆抗体经消化、还原氧化获得杂合抗体片段F(ab')2,应用于Dot-ELISA检测日本血吸虫患者血清中的循环抗原.结果杂合抗体片段F(ab')2具有同时识别SEA和HRP的双特异性,在Dot-ELISA试验中检测急性日本血吸虫患者,慢性日本血吸虫患者和晚期日本血吸虫患者血清中循环抗原的结果与同株二价抗SEA单克隆抗体的检测结果经统计学处理显示差异无显著性(P＞0.05).结论 IgG1亚类的单克隆抗体可用化学交联法制备出相应的双特异性抗体片段,应用于Dot-ELISA检测日本血吸虫患者血清中的循环抗原,显示了较好的特异性和敏感性;并可减少实验步骤,节约实验时间,为诊断日本血吸虫病提供了快捷的手段.     

单克隆抗体夹心ELISA定量检测日本血吸虫循环抗原

目的反映日本血吸虫病活动性感染程度,探讨建立定量测定循环抗原的方法。方法筛选和制备单克隆抗体,将其进行优化组合,建立双抗体夹心ELISA,计算标准曲线,测试检测能力,检测样本。结果获6个抗日本血吸虫单克隆抗体,经优化组合试验,选择其中3个抗日本血吸虫虫卵TCA可溶性抗原和成虫TCA可溶性抗原进行搭配,用于检测日本血吸虫病患者血清中循环抗原效果较理想。检测慢性血吸虫病118例,阳性61例,阳性率51．7％;急性患者30例,全部阳性;正常人187例,5例阳性,特异性97．3％。单盲法检测一批血清,结果也较满意。法论定量检测日本血吸虫病患者血清中循环抗原,对提示活动性感染的程度和疫苗保护作用的评估具有一定的应用价值。     

采用三种免疫方法制备抗CSA抗体的比较

据国内外文献报道,在血吸虫感染动物及部份病人血清中巳检测到 CSA(循环血吸虫抗原),这为考核血吸虫病疗效提供了新的希望。但是循环抗原的检测与所用已知抗体的效价及单相程度密切相关,尤其是采用高敏检测法(如放射免疫及酶免疫技术)时对抗体的质量要求更高。为此,我们对国内外报道的各种人工免疫方法作了一些改良和比较,现将实验过程与结果报告如下。一、动物:健康家兔15只,体重2.0～3.0公斤,分二批进行试验。第一批动物7只,随机分作三组,第二批动物8只分作二组(见表一)。     

感染日本血吸虫病兔循环抗原的提纯与分析

采用免疫亲和层析法,从感染日本血吸虫的兔血清中提纯日本血吸虫病循环抗原。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、PAS染色、酶联免疫印渍等方法分析,日本血吸虫病循环抗原显示7个组份,分子量分别为144、118、100、88、63、57、46kD;其中144、118、100、63、57kD为糖蛋白,并证实虫卵释放的循环抗原中含分子量分别为144、118kD的糖蛋白。     

四川省资中县血吸虫病感染状况调查报告

目的:了解血吸虫病感染状况,为制定防控措施提供科学依据。方法:患者血清学监测用ELISA法检测血吸虫循环抗原(SCAg);阳性者粪便"三送三检",用改良加藤氏法查找血吸虫卵。查螺采用系统与环境抽样相结合的方法。结果:监测2 115例,血吸虫循环抗原阳性43例(2.03%),均未检出血吸虫卵;查螺近153 291 m2,未发现钉螺孳生。结论:由于外出务工人员较多,为血吸虫病的输入提供了条件,应加强监测,巩固血防成果。     

解离血吸虫循环免疫复合物诊断晚期血吸虫病的研究通过鉴定

为改进和提高晚期血吸虫病的血清学诊断方法,我院寄生虫学教研室于1980～1981年首先建立了聚乙醇(PEG)沉淀试验,检测血吸虫性循环免疫复合物(SCIC)。结果证明可作为诊断血吸虫病的参考指标。随于1982～1985年初应用胰酶解离SCIC的新方法,并创用双向酶标对流免疫电泳(TD-ELACIEP)成功地检出了SCIC经酶解离后的特异性抗原和抗体。实验结果表明TD-     

紫外线减毒尾蚴活疫苗预防小鼠日本血吸虫感染有效照射剂量及免疫次数的研究

本文以小鼠为实验对象,探讨了紫外线减毒尾蚴活疫苗预防日本血吸虫感染的有效照射剂量和有效免疫次数。现予以报道。1 材料与方法1.1 实验动物 选用本校实验动物中心提供的中国昆明种10周龄雌性小鼠,随机分组。1.2 紫外线减毒尾锄活疫苗的制备 取武汉市东西湖区自然感染日本血吸虫的阳性钉螺,按常规法     

单克隆抗体酶标法检测日本血吸虫病人循环抗原及免疫复合物的研究

在血吸虫病的免疫诊断中，当今较为普遍采用的是检测血清抗体的方法．由于抗体在血吸虫病人治疗后仍可存留较长时间，不能确诊现症病人和用于考核疗效；而检测宿主体液中的寄生虫循环抗原可以反映活动性感染和评价药物治疗效果，所以它已成为血吸虫病诊断研究中的一个重要课题．近年已有不少采用克隆抗体或单克隆抗体（McAb）检测循环抗原的报道[1-4]，但由于循环抗原在血清中含量甚微和检测方法的限制，结果均不够理想；同时，因为循环抗原常与相应的抗体形成循环免疫复合物，而导致既往单纯检测游离循环抗原的实验方法检出率不高．为探索…     

巢式PCR法检测日本血吸虫低感染度宿主血清DNA的研究

目的探讨日本血吸虫低感染度宿主血清的DNA检测方法,为血吸虫病的早期诊断及疗效考核提供实验依据。方法建立并优化巢式PCR反应体系用于检测不同感染度家兔血清中的日本血吸虫特异性基因片段。结果在仅存活3～5对成虫的感染后家兔血清中均能扩增到特异性目的条带,尤其是感染后3d即可检出。结论巢式PCR可用于日本血吸虫低感染度宿主血清DNA检测,具有潜在应用前景。     

~(60)Co照射对家兔循环免疫复合物形成的影响

以实验性急性血清病家兔为实验模型。10只实验组动物于接种BSA抗原后5天,以300伦~(60)Co全身照射;10只对照组动物,不做照射处理。两组动物均于接种抗原前及接种后2、4、6、8、10、12、14、16天分别采血,分离血清后以PEG沉淀-补体消耗试验测定循环免疫复合物。检测结果证明照射组与对照组动物循环免疫复合物的动态基本一致,充分说明于抗原注射后5天进行γ射线照射,虽然动物已造成急性放射病亦不影响体内形成免疫复合物。     

囊尾蚴循环免疫复合物检测在脑囊尾蚴病诊断中的价值

目的: 探讨囊尾蚴循环免疫复合物检测在脑囊尾蚴病诊断中的价值。方法: 用ELISA法检测109例脑囊尾蚴病患者血清抗原、抗体及循环免疫复合物。结果: 在109例标本中,检出囊尾蚴抗原阳性率33.03%,抗体阳性率68.81%,循环免疫复合物阳性率47.71%。在52例循环免疫复合物阳性标本中,12例囊尾蚴抗原和抗体均为阴性。结论: 检测循环免疫复合物有助于提高脑囊尾蚴病的诊断率。