颅咽管瘤中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体的表达及意义

目的　研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体 (tumornecorisisfactorrelatedapoptosisinducedligandreceptor,TRAILR)在颅咽管瘤细胞中的表达 ,探讨其临床意义。方法　采用免疫组化方法检测颅咽管瘤细胞及正常脑组织中TRAILR蛋白的表达。同时 ,采用原位杂交方法检测颅咽管瘤中诱骗受体 (Decoyreceptor,DcR)在mRNA水平的表达。 结果　免疫组化染色显示 ,2 4例颅咽管瘤均大量表达死亡受体 (Deathreceptor,DR)DR4和DR5 ,7例 (2 9.2 % )表达DcR1 ,5例 (2 0 .8% )表达DcR2 ,而 1 6例正常脑组织普遍表达DcR ,7例 (43 .8% )表达DR4 ,5例 (31 .3 % )表达DR5。颅咽管瘤组织中DR的高表达以及DcR的低表达不同于正常脑组织中DR的低表达及DcR的高表达 ,两者间有显著差异 (P <0 .0 1 )。原位杂交显示 2 4例颅咽管瘤组织分别有 1 9例 (79.2 % )DcR1和 1 5例 (62 .5 % )DcR2在mRNA水平呈强阳性表达 ,DcR在转录水平的表达明显高于翻译水平 (P <0 .0 1 )。结论　颅咽管瘤细胞中普遍存在DR的高表达和DcR的低表达 ,DcR在颅咽管瘤中限制性表达的调控位于转录后水平。这可能为颅咽管瘤的凋亡诱导治疗提供新的靶点和新的策略。     

TRAIL及其受体DR5在病毒性心肌炎小鼠心肌组织中的表达和意义

目的 研究肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)及其死亡受体5(DR5)在病毒性心肌炎小鼠心肌组织中病变不同时期的表达及与细胞凋亡的关系.方法 建立病毒性心肌炎小鼠模型,于注射病毒后第7、10、14、21、28天取心肌组织,HE染色做心肌病理积分,TUNEL法检测凋亡细胞百分率,免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测心肌组织中TRAIL和DR5蛋白及mRNA的表达.结果 病毒感染组小鼠和正常对照组小鼠心肌组织中均存在TRAIL和DR5蛋白和mRNA的表达.病毒感染后第14天,病毒感染组小鼠心肌组织中TRAIL蛋白表达高于同期正常对照组(P<0.05)和第7天病毒感染组(P<0.05),组间比较差异有统计学意义(F=9.17,P<0.01).病毒感染后第10、14、21天,病毒感染组小鼠DR5蛋白表达高于同期正常对照组(P<0.01)和第7天病毒感染组(P<0.01),组间比较差异有统计学意义(F=13.32,P<0.01).且TRAIL和DR5蛋白的表达与心肌病理积分、心肌细胞凋亡率密切相关(P<0.05).病毒感染组第10天TRAIL mRNA表达高于同期正常对照组(P<0.01)和第7天病毒感染组(P<0.01),组间比较差异有统计学意义(F=10.86,P<0.01).病毒感染组第10、14天DR5 mRNA表达高于同期正常对照组(P<0.01)和第7天病毒感染组(P<0.01),组间比较差异有统计学意义(F=22.75,P<0.01).结论 病毒性心肌炎小鼠发病中期,TRAIL及其受体DR5在心肌组织中出现高表达,且与病理积分、心肌细胞凋亡率成正相关,TRAIL及其受体DR5可能通过调控心肌细胞凋亡参与病毒性心肌炎的病理过程.     

皮肤血管瘤患儿肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及死亡受体的表达与细胞凋亡的关系

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其死亡受体4、5(DR4、DR5)在小儿皮肤血管瘤各阶段的表达及其与细胞凋亡的关系。方法采用免疫组织化学法检测增生期、消退期血管瘤和正常皮肤组织中TRAIL和DR4、DR5蛋白的表达,并采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的末端标记技术(TUNEL法)检测各组织细胞凋亡情况。结果TRAIL、DR4、DR5蛋白的阳性表达率及细胞凋亡指数(AI)在血管瘤消退期明显高于血管瘤增生期和正常皮肤组织(P<0.05)。结论血管瘤的各个阶段均存在细胞凋亡现象,在由增生期转变为消退期的过程中出现细胞凋亡的上调,TRAIL及DR4、DR5参与细胞凋亡的调节,其与血管瘤的自行消退过程有关。     

Caspase-8和DR5在TRAIL诱导神经母细胞瘤细胞凋亡中的作用

目的：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)能诱导多种肿瘤细胞凋亡而对正常细胞无诱导凋亡作用。大多数神经母细胞瘤细胞株对TRAIL的诱导凋亡作用耐受与其Caspase8表达缺失有关,也与细胞表面TRAIL受体的表达和分布有关。该文主要探讨Caspase8及TRAIL受体DR5的表达在TRAIL诱导神经母细胞瘤细胞株SKNDZ凋亡中的作用及其发生机制。方法：应用RTPCR方法检测IFNγ作用前后SKNDZ细胞Caspase8的表达;应用WesternBlot方法检测化疗药作用前后SKNDZ细胞DR5的表达;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪(FCM)检测TRAIL、IFNγ+TRAIL、化疗药+TRAIL及化疗药+IFNγ+TRAIL对SKNDZ细胞生长及凋亡的影响。结果：SKNDZ细胞不表达Caspase8,IFNγ作用后的SKNDZ细胞Caspase8表达明显增加。对照组未检测到DR5蛋白表达,而阿霉素和依托泊苷处理后检测到DR5蛋白表达。表达Caspase8的SKNDZ细胞对TRAIL的诱导凋亡作用仍不敏感,而同时表达Caspase8和DR5的SKNDZ细胞对TRAIL的诱导凋亡作用敏感。阿霉素/依托泊苷+IFNγ+TRAIL组早期凋亡率为:(17.9±3.6)%、(14.8±3.3)%,与IFNγ+TRAIL组(3.9±1.2)%比较,差异有显著性(F=26.233,P<0.01)。结论：同时表达Caspase8和DR5的SKNDZ细胞恢复了对TRAIL的敏感性,Caspase8和DR5在TRAIL诱导SKNDZ细胞凋亡中起着十分关键的作用。     

MYCN基因表达抑制促TRAIL诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的研究

目的神经母细胞瘤(NB)为小儿常见恶性肿瘤。MYCN基因高扩增NB细胞对TRAIL诱导凋亡多有抵抗。我们以MYCN基因高扩增NB细胞株为研究对象,抑制其MYCN基因的表达,探讨其对TRAIL诱导凋亡有无增强作用。方法构建MYCN siRNA,转染NB细胞株SK-N-BE(2),抑制MYCN基因表达后,Western-blot法检测SK-N-BE(2)细胞Bcl-2、Bcl-xL、Bid、DR4、DR5表达的变化,ELISA法检测细胞凋亡。结果转染MYCN siRNA的SK-N-BE(2)细胞中MY-CN基因表达显著降低(P<0.05)。MYCN基因表达抑制后,SK-N-BE(2)细胞DR5、Bid表达增高(P<0.05),Bcl-2、Bcl-xL表达降低(P<0.05),DR4表达无变化(P>0.05),TRAIL诱导细胞凋亡显著增强(P<0.05)。结论 MYCN基因表达抑制后,可调控Bcl家族中相关蛋白、DR5的表达,促进TRAIL诱导NB细胞凋亡。     

Livin基因及其变构体在儿童脑胶质瘤中的表达

目的探讨凋亡抑制蛋白家族成员Livin基因及其变构体在儿童脑胶质瘤组织中的表达。方法采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应检测脑胶质瘤组织30例和12例正常脑组织Livin基因2个变构体Livinα和Livinβ mRNA的表达。结果脑胶质瘤组织Livin mRNA表达率为83.3%(25/30例),对照组Livin mRNA表达率仅为8.3%(1/12例),二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。随着脑胶质瘤病理分级增加,Livin mRNA表达量也增高(P<0.05)。结论凋亡抑制蛋白Livin在儿童脑胶质瘤组织中呈高表达,并与脑胶质瘤的病理分级有一致趋势,提示Livin基因可能参与儿童脑胶质瘤的发生、发展过程。     

内毒素致胎鼠脑白质损伤后Bcl-2和Bax蛋白表达的研究

目的 探讨内毒素致胎鼠脑白质损伤后凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达及其意义.方法 孕鼠随机分为两组:感染组和对照组.感染组:建立宫内感染的动物模型,孕鼠怀孕15 d腹腔注射内毒素;对照组:孕鼠怀孕15 d腹腔注射生理盐水.分别于给药后2、4、12、24、72 h剖腹取胎鼠,取脑组织行组织病理学检查,观察胎盘及胎鼠脑组织病理特点,用免疫组织化学方法检测胎鼠脑组织凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达.结果 感染组胎盘组织见中性粒细胞浸润,胎鼠脑组织病理改变包括脑白质染色减淡,结构疏松等.感染组胎鼠脑组织凋亡蛋白Bcl-2的表达自2 h开始逐渐下降,而Bax的表达自2 h逐渐升高,均于12h达到峰值.2h感染组Bcl-2、Bax的阳性细胞百分数与对照组相比,差异无显著性(P>0.05);而4 h、12 h、24 h和72 h感染组与对照组相比,差异有非常显著性(P<0.01).感染组Bax与Bcl-2的比值均明显高于对照组,在各观察时间点两组相比,差异有非常显著性(P<0.01).结论 内毒素诱导是制备胎鼠脑白质损伤的一种有效形式.在胎鼠脑白质损伤中Bcl-2可能抑制细胞凋亡,Bax可能诱发细胞凋亡,两者的比率变化可能对脑白质损伤后细胞凋亡的调节起重要作用.     

婴幼儿血管瘤及血管畸形组织中p16及TRAIL的表达及其意义

目的　检测婴幼儿血管瘤组织中抑癌基因 p1 6及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的表达 ,并探讨它们在血管瘤增生、消退过程中的作用。方法　采用免疫组化SP法检测 32例增生期、2 0例消退期血管瘤及 1 4例血管畸形组织中p1 6和TRAIL的表达。结果　p1 6在增生期和消退期血管瘤组织中阳性表达率分别为 78.1 % (2 5/ 32 )、90 .0 % (1 8/ 2 0 ) ,血管畸形组织中全部为阴性。经秩和检验 :Hc=2 6 .6 ,三者之间差异存在显著性意义 (P <0 .0 1 ) ,两者之间差异有显著性意义(P <0 .0 5)。TRAIL在增生期和消退期血管瘤组织中阳性表达率分别为 2 1 .9% (7/ 32 )、80 .0 % (1 6/2 0 ) ,血管畸形中全部为阴性 ,卡方检验 :χ2 =2 7.8,三者之间差异存在显著性意义 (P <0 .0 1 ) ,两两之间比较经 χ2 分割 ,增生期与消退期之间有差异 (P <0 .0 5) ,消退期与血管畸形之间有差异 (P <0 .0 5) ,增生期与血管畸形之间无差异 (P >0 .0 5) ,血管瘤与血管畸形之间有差异。结论　p1 6和TRAIL的表达水平与血管瘤的增生、消退有关 ,p1 6可抑制内皮细胞的分裂增殖 ,TRAIL可通过诱导内皮细胞凋亡发挥作用 ,两者均可促进血管瘤消退     

TRAIL蛋白联合顺铂抑制裸鼠横纹肌肉瘤生长的实验研究

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)蛋白及联合顺铂对RD人横纹肌肉瘤裸鼠移植瘤生长的影响及其可能的作用机制.方法 将RD人横纹肌肉瘤细胞制成细胞悬液后接种于裸鼠皮下,成瘤后将裸鼠随机分4组:生理盐水组、TRAIL组、顺铂组及两药联合组.检测裸鼠的重量和体积;测定裸鼠肝功能、尿素氮及肌酐;另取肝肾组织进行切片,HE染色观察;用FCM方法检测肿瘤组织Fas表达;用RT-PCR检测DR4和DR5mRNA的表达.结果 各组裸鼠实验前后的体重变化无明显差异;DDP组和TRAIL+DDP组裸鼠的血清丙氨酸转氨酶高于生理盐水组,DDP组与TRAIL+DDP组裸鼠尿素氮和肌酐值比较,无明显差异;TRAIL组、DDP组和TRAIL+DDP组移植瘤的重量均明显降低;各组肝肾组织切片观察未见明显改变;TRAIL+DDP组Fas表达水平高于DDP组和TRAIL组;DDP组和TRAIL+DDP组裸鼠移植瘤细胞的DR5mRNA、DR4mRNA表达水平明显升高,而TRAIL组没有明显改变.结论 TRAIL和顺铂对裸鼠移植瘤的生长有抑制作用,联用有协同作用.     

肿瘤坏死因子凋亡诱导配体联合顺铂对人横纹肌肉瘤细胞株凋亡的影响

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）蛋白及TRAIL基因和顺铂联合应用对人横纹肌肉瘤细胞生长抑制和诱导凋亡作用，并分析细胞线粒体膜电位和细胞内cFLIPmRNA表达的改变对凋亡的的影响。方法将TRAIL蛋白、TRAIL基因和顺铂作用于培养的人横纹肌肉瘤细胞，通过MTT比色法、流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡和线粒体跨膜电位的改变、RT-PCR检测cFLIPmRNA表达，观察和分析TRAIL蛋白及TRAIL基因单独对横纹肌肉瘤细胞的作用及和顺铂联合作用的效果和机制。结果TRAIL基因和100μg／L的TRAIL蛋白对横纹肌肉瘤细胞的生长抑制率分别为52．5％和43．5％，凋亡诱导率为12．95％和10．26％，联合应用顺铂，生长抑制率和凋亡诱导率均显著高于单独应用，FCM分析显示联合应用降低了线粒体跨膜电位，RT—PCR显示cFLIPmRNA表达下降，与联合应用细胞凋亡率增加相一致。结论TRAIL蛋白和TRAIL基因能有效诱导横纹肌肉瘤细胞的凋亡从而抑制横纹肌肉瘤细胞的生长，联合应用顺铂可显著提高疗效。     

Clinical implications and prognostic value of EMMPRIN/CD147 and MMP2 expression in pediatric gliomas

Extracellular matrix metalloproteinase inducer (EMMPRIN), a member of the immunoglobulin superfamily, is present on the surface of tumor cells where it stimulates adjacent fibroblasts to produce matrix metalloproteinases (MMPs). We have analyzed the clinicopathological characteristics of EMMPRIN and MMP2 expression in normal brain tissue and pediatric gliomas and evaluated their prognostic value in diagnosing the latter. Immunochemistry analysis revealed EMMPRIN and MMP2 expression in cryo-sections of pediatric gliomas (45 samples) and normal brain tissue (20 samples). Both EMMPRIN and MMP2 were expressed in normal brain and glioma tissues with different levels of malignancy. The intensively positive expression rates of EMMPRIN (22/27) and MMP2 (21/27) in anaplastic astrocytoma and glioblastoma tissues were significantly higher than those in normal brain and low-grade astrocytoma tissues (2/28 and (1/2)8, respectively). Spearman analysis indicated that the expression level of EMMPRIN was significantly positively correlated with that of MMP2 (r = 0.86, p < 0.01). The positive expression of EMMPRIN and MMP2 was associated with higher grade gliomas. Patients with EMMPRIN+/MMP2+ expression had the lowest survival rate (p < 0.01). Based on these results, we conclude that EMMPRIN and MMP2 are expressed differently in normal brain and pediatric gliomas. The detection of their co-expression may facilitate the prediction of pediatric gliomas prognosis.     

小儿脑瘤中CD_(44)基因mRNA内含子9的潴留初探

目的　探讨CD4 4基因mRNA中内含子 9在小儿脑瘤中的潴留情况及其肿瘤学意义。方法　采用组织选择性方法提取标本RNA ,应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 18例小儿恶性脑膜瘤 ,16例脑癌旁组织标本及脑胶质瘤 7例中CD4 4基因mRNA内含子 9的潴留情况。结果　 18例恶性脑膜瘤中有 16例CD4 4内含子 9含量高 ,其中 10例表达明显 (88.9% ) ;16例脑癌旁组织只有 1例内含子潴留 ,15例无潴留现象 (6 .2 5 % ) ;脑胶质瘤 7例有 5例CD4 4基因mRNA内含子 9表达阳性 (71.4% )。恶性脑瘤中含量高于脑癌旁组织 (P <0 .0 1) ,内含子 9的潴留与小儿恶性脑瘤的组织学类型无明显关系。结论　小儿恶性脑瘤组织中存在内含子 9的潴留现象 ,而脑癌旁组织基本无潴留现象。CD4 4基因mRNA中内含子 9的检测在恶性脑瘤中表达阳性可能与肿瘤的发生有关     

TRAIL/Apo2L ligands induce apoptosis in malignant rhabdoid tumor cell lines

Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL/Apo2L) is a potent inducer of apoptosis in various cancer cells, whereas normal cells are not sensitive to TRAIL-mediated apoptosis. Four TRAIL/Apo2L receptors (DR4, DR5, DcR1, and DcR2) have been identified. DR4 and DR5 have a death domain, whereas DcR1 and DcR2 are called decoy receptors because of their incomplete or lack of a death domain. Malignant rhabdoid tumor (MRT) is an aggressive neoplasm showing a poor prognosis because of its resistance to chemotherapeutic agents. In this study, we examined whether TRAIL could induce apoptotic cell death in MRT cell lines. We found that although half of the MRT cell lines examined were sensitive to TRAIL/Apo2L, Western blot analysis revealed that the expression of DcR2 was low in TRAIL-sensitive MRT cells. We examined the effect of doxorubicin on the expression levels of TRAIL receptors and its enhancement on the susceptibility of MRT cell lines to TRAIL. Western blot and flow cytometric analyses revealed that doxorubicin significantly increased the expression of DR5, and somewhat up-regulated the expression of DR4 and DcR2. Moreover, doxorubicin, NF-kappaB inhibitor (SN50), and PI3-kinase/Akt inhibitor (wortmannin, LY294002) enhanced the susceptibility of MRT cell lines to TRAIL/Apo2L-induced apoptosis. These results suggest that TRAIL/Apo2L may provide the basis for clinical trials of TRAIL-based treatment to improve the outcome of MRT patients.     

脑红蛋白在小儿脑挫裂伤病理过程中变化的初步研究

目的：初步探讨脑红蛋白（neuroglobin, Ngb）在小儿脑挫裂伤病理生理过程中的作用。方法：采用二维凝胶电泳技术分离3例行脑室肿瘤切除患儿的正常额叶皮层组织和8例脑挫裂伤患儿额叶皮层组织总蛋白质,PDquest图像分析软件识别差异蛋白质点,电喷雾串联质谱鉴定差异蛋白;免疫组化检测差异蛋白Ngb在正常脑组织和脑挫裂伤患儿的脑组织中的表达。并采用酶联免疫法检测10例正常儿童和15例脑挫裂伤患儿血清中Ngb的表达变化。结果：建立了正常儿童和脑挫裂伤患儿脑组织的二维凝胶电泳图谱,识别了6个差异蛋白质点,并鉴定了5种差异蛋白。免疫组化结果显示,Ngb在脑挫裂伤患儿额叶皮层组织中的表达水平高于正常对照组额叶皮层组织（P<0.05）。酶联免疫法检测结果表明,脑挫裂伤后6 h、12 h、18 h、24 h及48 h 血清Ngb表达高于正常对照组,差异有统计学意义（P<0.01）。结论：Ngb可能在小儿脑挫裂伤病理生理过程中发挥了重要作用。     

MECP2基因甲基化和羟甲基化水平的性别差异研究

目的 探讨MECP2在不同性别脑组织中是否有表达差异,从而与孤独症等疾病的性别差异相关。方法 利用4例非疾病流产胎儿脑标本,采用酚氯仿方法提取基因组DNA。在MethPrimer在线软件上检测MECP2基因-1 000 bp至+1 200 bp区间的CpG 岛。甲基化检测采用亚硫酸氢盐修饰后测序法（使用EZ DNA Methylation-goldTM Kit 试剂盒）。对于超声断裂后的基因组DNA,用基因组羟甲基化试剂盒（diagenode,hMeDIP kit）进行ChIP反应。反转录cDNA采用FastQuant RT Kit（With gDNase）试剂盒,定量PCR检测MECP2表达量采用 SuperReal PreMix Plus （SYBR Green）试剂盒。结果 标本1男,重量106 g,长度17.4 cm;标本2女,重量100 g,长度19.1 cm;标本3男,重量500 g,长度28.3 cm;标本4女,重量510 g,长度31.5 cm。MECP2表达量男性胚胎（标本1=0.0367,标本3=0.0155）高于女性胚胎（标本2=0.0177,标本4=0.0088）。MECP2的甲基化水平女性个体平均1条X染色体上MECP2的甲基化程度显著高于男性,特别是在启动子的核心区域-309 bp至-179 bp,男性MECP2上几乎没有甲基化,而羟甲基化水平男性高于女性。结论 男性MECP2基因的DNA修饰促进其表达,可能提高了男性胚胎对MECP2基因突变的易感性,从而影响MECP2基因突变导致的患病人群的性别差异。     

水通道蛋白4在脂多糖致大鼠脑水肿的表达及与血脑脊液屏障的关系

目的观察脂多糖（LPS）致幼年大鼠感染性脑水肿后水通道蛋白4 mRNA（AQP4mRNA）的表达变化,探讨其作用机制。方法将50只幼鼠随机分为内毒素组（40只）和对照组（10只）,内毒素组又按时间点分为6、12、24及48h4个亚组,每组均为10只。于预定时间点处死动物,制备脑组织标本。用干湿重法测定不同时间点脑组织含水量,甲酰胺法测定伊文思蓝（EB）水平,RT-PCR技术检测脑组织内AQP4 mRNA的表达。结果内毒素组脑组织含水量和EB水平明显高于对照组。LPS注射后6h,脑组织AQP4 mRNA水平的表达均明显增加,12h时达高峰,各时间点与对照组比较均有显著性差异（Pa〈0.01）。结论感染性脑水肿后脑组织中AQP4 mRNA的表达增加,且与血脑脊液屏障的破坏程度呈正相关。     

Intrauterine growth retardation: fetal glucose transport is diminished in lung but spared in brain.

"Uteroplacental insufficiency" often causes asymmetric fetal growth retardation. Glucose transporters control cell glucose utilization and thus may be critical in the control of fetal growth. We hypothesized that uteroplacental insufficiency might alter glucose transporter activity, protein, and gene expression and thereby affect discordant organ growth in small-for-gestational-age (SGA) fetuses. We performed bilateral uterine artery ligation in pregnant rats on d 19 of gestation (term-21.5 d) to cause uteroplacental insufficiency and obtained fetal brain and lung tissue on d 20. The brain mass of SGA fetuses did not differ from that of sham and normal fetuses, but lung mass was significantly diminished. Glucose transport, measured with [3H]2-deoxyglucose, was similar in glial cells and brain tissue of SGA, sham, and normal fetuses. In contrast, type II pneumocytes, lung fibroblasts, and lung tissue of SGA fetuses had significantly decreased glucose transport. The intrinsic activity of the glucose transporter (Km) was not altered in the brain or lung of SGA fetuses. Total glucose transporter protein measured by cytochalasin-B binding and glucose transporter 1 mRNA was diminished in SGA lung tissue and type II pneumocytes, but not in SGA brain tissue or glial cells. We could not detect glucose transporter 3 mRNA in significant quantity in any tissue. With uteroplacental insufficiency, glucose transport is differentially altered in lung and brain. Glucose transporter protein and gene expression are diminished in the lung and normal in the brain of SGA fetuses. These changes may contribute to fetal growth retardation and the phenomenon of "brain sparing."     

谷氨酰胺影响脓毒症大鼠脑内PDGF及其受体表达的研究

目的：该研究旨在探讨脓毒症幼年大鼠大脑血小板衍生生长因子-B（PDGFB）及其受体(PDGFR-β)表达的变化及谷氨酰胺（Gln）干预的影响,探讨PDGF-B在幼年期脓毒症时脑损伤发病机制中的作用及Gln对脑损伤的可能保护机制。方法：120只10日龄Wistar大鼠随机分为对照组、内毒素组（LPS）和谷氨酰胺组（Gln）。腹腔注射内毒素（LPS,5 mg/kg)制备幼年大鼠脓毒症动物模型。Gln组为腹腔注射LPS前1 h腹腔注射Gln (1.346 g/kg)。各组大鼠又分为5个亚组（n=8）,分别于注射后2、6、12、24及72 h处死,采用免疫组织化学方法及免疫印迹法检测大脑皮层PDGF-B及PDGFR-β的表达。结果：（1）免疫组织化学方法结果显示注射LPS后 72 h Gln组大脑皮层神经元PDGF-B和 PDGFR-β表达明显高于对照组和LPS组。（2）免疫印迹方法结果显示,LPS组和Gln组于注射LPS后第2 h、6 h和12 h 的PDGF-B表达均低于对照组（P＜0.05）。而Gln组12 h和72 h 的PDGF-B表达明显高于LPS组（P＜0.05）。与对照组比较,LPS组大脑组织PDGFR-β表达在2 h和6 h增加,而在72 h表达下降（P＜0.05）。Gln组则与对照组于各时间点比较,差异均无统计学意义。结论：Gln在注射LPS后能上调大脑PDGF-B和PDGFR-β的表达,提示Gln对幼年期脓毒症脑损伤的保护机制可能与其促进大脑PDGF-B和PDGFR-β的表达有关。［中国当代儿科杂志,2010,12(12)：967-971］