化通脉注射液对人脐静脉血管内皮细胞ECV304增殖的影响

[目的]以血清药理学的方法观察血化瘀通脉注射液(HYTM)对于培养人脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响,为治疗性血管新生的靶基因选择提供线索。[方法]取对数生长期的内皮细胞,同步化于G0期,2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐(CCK-8)检测细胞增殖活性;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测5溴-2脱氧尿苷(BrdU)的掺入。[结果]与空白血清对照组相比,10%的HYTM含药血清体积添加分数可显著提高细胞增殖活性。[结论]10%的HYTM含药血清体积添加分数通过促进细胞DNA合成,可能具有保护血管内皮的作用。     

四妙勇安汤对人脐静脉血管内皮细胞ECV304的增殖作用

目的:以血清药理学的方法观察血四妙勇安汤对于培养人脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响,为治疗性血管新生的靶基因选择提供线索。方法:取对数生长期的内皮细胞,同步化于G0期,ELISA法检测BrdU的掺入;用流式细胞仪分析细胞周期各时相分布。结果:与空白血清对照组相比,10%的四妙勇安汤含药血清体积添加分数可显著提高BrdU的掺入量,促进DNA合成,提高ECV304细胞周期S期所占比例。结论:10%的四妙勇安汤含药血清能促进内皮细胞ECV304DNA合成,加快细胞周期进程,从而对其增殖具有促进的作用,可能具有血管生成的作用。     

川芎嗪对人脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响

川芎为活血化瘀代表性中药，临床应用甚广。川芎嗪(Tranethylpyrazine，TMP)为川芎主要有效成分之一。前期研究表明，川芎嗪注射液能抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠移植瘤的生长和肺转移，可降低肿瘤组织微血管密度和抑制肿瘤细胞血管内皮生长因子(VEGF)的表达。本试验旨在进一步探讨川     

阿魏酸对人脐静脉血管内皮细胞ECV304的增殖作用

目的：观察阿魏酸对于培养人脐静脉内皮细胞ECV304增殖的影响,为治疗性血管新生的靶基因选择提供依据。方法：取对数生长期的内皮细胞,分为阿魏酸低、中、高浓度组,同步化于G0期,ELISA法检测BrdU的掺入;RT-PCR法检测血管内皮细胞生长因子（VEGF）mRNA的表达情况。结果：与对照组相比,不同浓度阿魏酸均可显著提高BrdU的掺入量,上调VEGFmRNA的表达,且在10^2ng/ml～10^4ng/ml之间呈一定的量效关系。结论：阿魏酸能显著促进体外培养的ECV304细胞的增殖,可能具有血管新生的作用。     

参麦注射液对人脐静脉血管内皮细胞的作用研究

目的：研究参麦注射液对心血管系统疾病的作用机制。方法：用参麦注射液与人脐静脉血管内皮细胞(human umbilicalvein endothelial cell,ECV-304)共同培养后,采用MTT法及形态学方法观察参麦注射液对人脐静脉血管内皮细胞的作用。结果：发现不同浓度计量的参麦注射液对人脐静脉血管内皮具有增殖／抑制两种不同的效应,且成正相关关系。     

化瘀通脉注射液对大鼠主动脉球囊损伤后内膜增殖的影响

目的:观察化瘀通脉注射液对大鼠主动脉球囊损伤后内膜增殖的影响。方法:72只体重300~350g的雄性Wistar大鼠随机分为3组:即化瘀通脉组、丹参组和生理盐水组。采用球囊剥脱大鼠主动脉内膜的方法复制内膜增殖动物模型。自造模前1天开始,各组动物经尾静脉分别注射化瘀通脉注射液、或丹参注射液、或生理盐水,1mL次/,1次/d。每组按造模后1、5、10、15、20、25天6个时点随机选取4只动物处死,留取标本。制作病理切片,观察各组动物内膜损伤后内膜面积、内膜/中膜面积比值的动态变化,比较化瘀通脉注射液、丹参注射液及生理盐水对内膜增殖的影响。结果:光镜下(40×)观察病理切片可见,在行球囊内膜剥脱术后,3组动物主动脉内膜出现不同程度的增殖,内膜增殖随时间延长而加重,在术后25天最为明显,化瘀通脉组内膜面积增长缓慢,与生理盐水组比较有显著性差异(P<0.05),和丹参组比较虽无显著性差异(P>0.05),但增长有减缓趋势;3组动物内膜/中膜面积比值均随时间延长而增大,在术后25天最为明显,化瘀通脉组比值增大缓慢,与生理盐水组和丹参组比较虽无显著性差异(P>0.05),但增大有减缓趋势。结论:化瘀通脉注射液可抑制大鼠主动脉球囊损伤后的内膜增殖,作用有优于丹参注射液的趋势。     

夏枯草抑制人脐静脉血管内皮细胞增殖的实验研究

目的探讨夏枯草（Spica Prunellae）对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）增殖的抑制作用，并从增殖细胞核抗原（PCNA）方面研究其抑制HUVEC增殖的作用机制。方法采用HUVEC为材料．取生长良好的HUVEC用于实验，利用100umol／L二氯化钴（CoCl2）诱导HUVEC增殖，同时分别将10mg／ml、20mg／ml、40mg／ml的夏枯草作用于增殖状态下的HUVEC24小时，进行以下的研究：①CCK-8法检测不同浓度夏枯草对HUVEC增殖的抑制程度；②流式细胞仪检测夏枯草对HUVEC核内PCNA蛋白表达的影响。结果①夏枯草明显抑制CoCl2诱导的HUVEC增殖，并且有剂量依赖关系。②夏枯草能够显著降低HUVEC核内PCNA蛋白表达，从而抑制细胞增殖，并具有剂量依赖关系。结论夏枯草能够明显抑制HUVEC的增殖。     

活血注射液对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞活化的影响

目的：观察活血注射液对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达及与人单核细胞黏附作用的影响，并探讨核转录因子kappa B(NF-κB) 在其中的调控作用。方法：HUVEC与单核细胞的黏附率用蛋白定量法检测；ICAM-1，VCAM-1 mRNA和蛋白表达分别用RT-PCR技术和流式细胞仪检测；NF-κB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值用免疫细胞化学法测定。结果：ox-LDL作用HUVEC后12,24 h时，人单核细胞与HUVEC的黏附率显著升高, HUVEC中ICAM-1和VCAM-1的mRNA和蛋白表达水平也均明显升高, HUVEC的NF-κB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值明显增高，明显高于正常组(P<0.05，P<0.01)，而活血注射液可明显降低人单核细胞与HUVEC的黏附率和HUVEC ICAM-1，VCAM-1 mRNA和蛋白表达水平，以及显著降低HUVEC中NF-κB p65的阳性细胞百分率和细胞核/浆染色的灰度比值，与ox-LDL组相比均有显著性差异(P<0.05，P<0.01)，这种作用随着剂量的增加而增强。结论：活血注射液能通过下调内皮细胞表面ICAM-1，VCAM-1 mRNA和蛋白表达抑制单核-血管内皮细胞黏附,其可能机制是其通过抑制内皮细胞NF-κB p65的活性，从而发挥对血管内皮细胞的保护作用。     

养阴生津方对血管内皮细胞增殖的影响

外感温邪具有热象偏重、易于化燥伤阴的特点 ,是导致温热性疾病发生的重要因素。以阴伤的甚微衡量病势的轻重 ,以阴气的存亡推断患者的生死 ,是判断疾病预后的关键。而养阴生津法在温热病的治疗中 ,具有举足轻重的地位。为明确养阴生津法在治疗热瘀证中的解毒护络作用的实质 ,我们确立从细胞水平研究其作用效果。本实验观察了临床中常用的、行之有效的养阴生津方对体外培养的内皮细胞增殖功能的影响 ,以探求养阴生律法“护络”作用的实质。1　研究材料和方法1 .1　研究材料养阴生津方组成 :生地、石斛、麦冬、玄参各 6g(药物由南京市药材公…     

冠心病不同阶段患者血清对人脐静脉血管内皮细胞促增殖作用的实验研究

目的观察冠心病不同阶段患者血清对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）增殖的影响。方法采集正常健康人群（正常组）、冠心病中高危人群（中高危组）、冠心病急性期患者（急性期组）、冠心病稳定期患者（稳定期组）的血清,分别作用于HUVEC,培养至24、48、72、96h检测吸光度值（OD值）。结果4组血清中加或不加5％胎牛血清,其对HUVEC增殖均有促进作用,正常组、中高危组、急性期组、稳定期组对HUVEC的促增殖作用呈逐渐增强趋势,稳定期组血清促增殖作用最强。结论心血管疾病在急性期后,随着病程和生存期的延长,其血清对HUVEC的促增殖作用逐渐增强。     

化瘀通脉注射液对脑梗塞患者血液流变学和凝血酶的影响

将360例脑梗塞患者分为化瘀通脉注射液组(治疗组)270例和复方丹参注射液组(对照组)90例,观察治疗前及治疗后血液流变学及凝血酶的变化。结果表明,两组治疗后血液流变学和凝血酶值较治疗前均有较明显改善,治疗后与对照组比较,全血粘度高切、血浆粘度、纤维蛋白原、活化部分凝血酶原时间值,改善程度优于对照组。另外,观察中发现,两组临床症状、体征均有一定改善,治疗组优于对照组。     

密蒙花方对缺氧状态下人血管内皮细胞的作用及机理研究

目的探讨密蒙花方对缺氧状态下人脐静脉血管内皮细胞（Human Umbilical Vascular Endothelial Cell，HUVEC）增殖的抑制作用。方法体外培养HUVEC，采用二氯化钴（Cocl2）建立细胞化学缺氧模型，采用WST-8法观察密蒙花方对缺氧状态下HUVEC的作用。并进一步采用流式细胞仪（Flow Cytometry，FCM）检测密蒙花方对缺氧状态下HUVEC增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）蛋白表达的影响。结果①在Cocl2所诱导的化学缺氧下，HUVEC增殖明显。密蒙花方可抑制缺氧状态下HUVEC的增殖，并呈剂量一效应关系；②密蒙花方对HUVEC内PCNA蛋白表达有明显的下调作用，低、中、高不同浓度的密蒙花方作用24h后，其PCNA蛋白表达率分别为（62．377±3．200）％，（43．707±3．195）％、（27．621±3．622）％与缺氧组（90．600±3．694）％比较差异有统计学意义（P〈0．01）；随着密蒙花方浓度升高，PCNA蛋白表达率下降，呈剂量-效应关系（P〈0．01）。结论上述结果提示，密蒙花方有抑制新生血管发生的作用，有望成为防治增殖性糖尿病视网膜病变的有效药物。     

三七总皂苷对人脐静脉内皮细胞的促血管新生作用

目的:研究三七总皂苷(PNS)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖作用。方法:采用体外培养HUVEC的方法,通过XTT法以及细胞计数法观察对细胞的增殖作用;细胞侵入实验观察细胞迁移的能力。结果:PNS对HUVEC有促增殖作用,XTT实验中100μg/ml浓度增殖率为(33.58±2.41)%;在细胞计数实验100μg/ml浓度增殖率为(94.15±10.96)%;在细胞侵入实验中100μg/ml浓度侵入率为(42.64±9.50)%。结论:PNS能够促进HUVEC的增殖与侵入。     

白藜芦醇对过氧化氢诱导的人脐静脉血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 研究白藜芦醇(Res)对过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤及凋亡的保护作用及机制.方法体外培养第4～6代HUVECs,分为空白对照组、H2O2损伤组(300μmoL)、Res低浓度(5 μmoL/L)、中浓度(10 μmoL/L)、高浓度(20 μmoL/L)预处理1 h加H2O2损伤组.用噻唑蓝比色法检测HUVECs活力,试剂盒检测丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)量、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)活性,流式细胞仪分析细胞凋亡率,western blot检测caspase-3的表达.结果 与空白对照组比较,H2O2损伤模型组细胞活力显著降低、MDA和LDH量显著增加、SOD和GSH活性显著下降、细胞凋亡率和caspase-3表达显著增加(P＜0.01).结论 Res通过降低与凋亡过程直接相关的caspase-3表达,抑制H2O2诱导内皮细胞凋亡,减轻H2O2对内皮细胞的损伤作用,从而产生保护血管内皮细胞的作用.     

通脉丸对人血管内皮祖细胞功能的影响

目的应用含通脉丸的培养基进行实验研究,探讨其对人内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）功能的影响。方法采用密度梯度离心法分离出人外周血EPCs,实验分为正常对照组、低剂量组（10mg/ml）、中剂量组（20mg/ml）和高剂量组（50mg/ml）,培养细胞7d。通过倒置显微镜、MTT实验以及细胞黏附、迁移实验评价EPCs增殖、黏附和迁移能力;采用细胞表型分析、VEGF的表达、NO的分泌和体外成血管能力来检测不同组别对细胞功能的影响。结果与对照组比较,不同浓度药物组能提高细胞的增殖、分化、迁移和黏附能力,并促进EPCs表型的改变、NO的分泌和VEGF的表达,形成丰富的血管样结构,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）;与低、高浓度组比较,中浓度组在细胞的增殖、黏附、迁移功能以及CD133表达和NO分泌等方面作用最为明显,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论通脉丸能明显改善外周血EPCs的功能,促使EPCs的增殖、分化、黏附和迁移,促进EPCs分泌NO和VEPF的表达,能够更快形成血管样结构。