放线共生放线杆菌与牙周疾病

放线共生放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)是牙周主要致病菌之一,近年对其研究较多,并取得不少进展,本文着重描述了放线共生放线杆菌的一些重要特性,包括其传播特征、分类、毒性特征、检测方法、与牙周炎的关系及对临床治疗的指导作用。     

放线共生放线杆菌的分离鉴定及其与牙周炎关系的探讨

经选择分离培养,从14例青少年牙周炎(JP)患者和35例成人牙周炎(AP)患者的牙周袋中鉴定出放线共生放线杆菌(A.a)14株,其中12株为白细胞毒素株。结果表明:A.a 的感染与IP 和 AP 的发生有一定的关系,其白细胞毒株与临床关系尤为密切。     

用荧光试剂快速鉴别放线共生放线杆菌与嗜沫嗜血杆菌

本实验应用荧光试剂检测放线共生放线杆菌与嗜沫嗜血杆菌，简便、快速、明确。可用于两种细菌的初步鉴别。     

放线共生放线杆菌显微形态学的研究

目的 观察放线共生放线杆菌不同菌落菌株形态特点，探讨其致病的形态学基础。方法 粗糙型和光滑型两种菌落形态的细菌固体培养2天-4天应用电子显微镜阴性染色的方法比较观察放线共生放线杆菌菌体表面结构特点。结果 粗糙型菌落菌体菌毛丰富；刚刚转变后的光滑型菌落菌体仍可存在菌毛，但这种菌落继续传代菌毛可完全失去，菌毛表现为几种形态，细密或稀疏，也可成束状或网状，粗糙型菌体染色深，不均匀，菌体边缘不规则，视野不干净，多次传代后的光滑型菌落，菌体染色浅且均匀，菌体饱满透明，视野干净，粗糙型可以见到膜泡样的结构，但量很少。结论 粗糙型和光滑型菌的菌体形态存在明显的差异。主要表现为菌毛。     

放线共生放线杆菌的分型和基因鉴定方法

放线共生放线杆菌（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｕｓａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ,Ａａ）是革兰氏阴性、兼性厌氧的球杆菌,它在牙周炎患者的牙周袋中检出率较高,有报告９０％‘以上青少年牙周炎的牙周损害部位有此菌定居［１］,因此,被认为是与牙周炎,...     

伴放线放线杆菌高毒株与局限性青少年牙周炎相关性研究进展

伴放线放线杆菌与局限性青少年牙周炎的关系密切。该菌的多种毒力因子中，白细胞毒素的研究最深入。菌株编码白细胞毒素的操纵子中启动子区的结构存在差异，从而影响产生白细胞毒素的量，形成致病力强的高毒株，并与不同人群中局限性青少年牙周炎的发病情况相关。本文就伴放线放线杆菌与局限性青少年牙周为的相关性进行综述。     

放线共生放线杆菌表面相关物质的提取和纯化

目的：提取并纯化放线共生放线杆菌表面相关物质。方法：厌氧环境下液体培养放线共生放线杆菌（Ｙ４）７２ｈ，低温超速离心分离细菌，上清液经超滤浓缩后，以６０％硫酸铵粗提，ＨＰＬＣ纯化，检测各峰细胞毒性以及蛋白质含量、总糖含量、内毒素含量，透射电镜观察。结果：透射电镜显示：液体培养７２ｈ多数细菌表面电子阻射区剥离；粗提物经ＨＰＬＣ显示一个蛋白主峰中含３个小蛋白峰，峰Ⅱ有细胞毒性，此峰为糖蛋白，内毒素含量极微。结论：提取、纯化毒素的主要毒力成份是细菌表面相关物质     

口腔放线共生放线杆菌

放线共生放线杆菌(Actinobacillus actinomycetem—comitans,A.a)是一兼性厌氧、嗜CO_2、无动力的G-小杆菌。正常以少量寄居于口腔牙菌斑,现归于嗜血杆菌属。但其分类问题还有争论。最近的研究表明,A.a的感染不仅与青少年牙周炎(juvenile periodontitis-JP)的关系密切,而且在快速进行性牙周炎(rapidly progressive periodontitis-RP)和活跃性成人牙周炎(adult periodontitis—AP)中也占有一定地位。提示了A.a与牙周炎的活动性和进行性破坏有关。本文仅就A.a的生物学性状及致病性和免疫性作一综述。一、生物学性状 (一)形态与染色为G-小杆菌,有的略弯     

伴放线放线杆菌细胞致死性膨胀毒素研究进展

伴放线放线杆菌产生一种毒性蛋白成分——细胞致死性膨胀毒素（cytolethal distending toxin,CDT）。该毒素由3个相邻基因cdtA（669 bp）、cdtB（852 bp）、cdtC（561 bp）编码的蛋白亚基CdtA（28 000 Da）、CdtB（32 000 Da）、CdtC（20 000 Da）组成异源三聚体全毒素。CDT引起细胞膨胀,导致细胞周期阻滞,抑制细胞增殖,还能诱导淋巴细胞凋亡,影响宿主免疫功能,诱导细胞因子分泌等,在牙周病的发生发展过程中发挥至关重要的作用。本文就伴放线放线杆菌CDT各亚基及其致病机制作一综述。     

伴放线共生放线杆菌表面相关物质的骨吸收活性研究

目的：通过对伴放线共生放线杆菌（Aa)表面相关物质（SAM）的提取，纯化，研究其潜在的骨吸收活性，以揭示SAM在牙周病变过程中的作用。方法：Aa国际标准菌株培养，SAM提取，过Sepharyl-S200层析柱和DEAE－Sephacel层析柱，所有的管用酚硫法测其碳水化合物含量，纯化后鉴定其骨吸收活性.结果：冻干的Aa(1.0g)产生0．1375g粗提物，通过Sepharyl-S200时出现单峰，通过DEAE－Sephacel出现两个峰，骨吸收实验证明SAM有骨吸收活性。结论：Aa的SAM在骨吸收方面具有极大潜能，提示SAM在牙周病骨损害上起到重要作用。     

伴放线放线杆菌高毒株与局限性青少年牙周炎相关性研究进展

伴放线放线杆菌与局限性青少年牙周炎的关系密切。该菌的多种毒力因子中,白细胞毒素的研究最深入。菌株编码白细胞毒素的操纵子中启动子区的结构存在差异,从而影响产生白细胞毒素的量,形成致病力强的高毒株,并与不同人群中局限性青少年牙周炎的发病情况相关。本文就伴放线放线杆菌与局限性青少年牙周炎的相关性进行综述。     

伴放线放线杆菌形态变化对白细胞毒素分泌影响的研究

目的观察伴放线放线杆菌形态变化对白细胞毒素分泌的影响。方法选择粗糙型和光滑型伴放线放线杆菌各8株,应用聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测液体培养12、24、48、60、72h的菌体及培养上清液中116kDa大小白细胞毒素蛋白条带的情况,应用超滤法分离纯化培养上清液蛋白,应用台盼蓝染色排除法检测上清液蛋白白细胞毒素活性。结果粗糙型伴放线放线杆菌菌株液体培养12、24、48、60、72h菌体蛋白电泳均可见116kDa大小的蛋白条带,培养上清液蛋白电泳结果显示116kDa大小的蛋白条带均出现于培养24和48h;光滑型伴放线放线杆菌菌株液体培养12、24、48、60、72h菌体蛋白电泳结果均缺少116kDa大小的蛋白条带,培养上清液蛋白电泳结果显示116kDa大小的蛋白条带出现于培养12和24h;实验菌株培养上清液提取蛋白均具有白细胞毒素活性。结论伴放线放线杆菌粗糙型和光滑型菌株均可分泌具有直接杀灭人多形核白细胞活性的白细胞毒素,但粗糙型菌株分泌白细胞毒素的时间晚于光滑型。     

放线共生放线杆菌表面相关物质促进骨吸收的动物实验研究

目的：观察放线共生放线杆菌表面相关物质在骨吸收破坏中的作用。方法：用成年健康犬的C8、C7、C6、D6、D7、D8，去髓后将含500mg／mL的放线共生放线杆菌表面相关物质溶解物过滤除菌后的无菌生理盐水注入根管中，对照组加入等量无菌生理盐水，术后1个月后观察。结果：实验组可见犬牙槽骨尖周骨质吸收，牙周膜纤维排列受到破坏，对照组无明显改变，两组均未见到细菌污染。结论：此物质有极强的骨吸收诱导活性，在细菌未到达组织时其可溶性对尖周组织产生连续的毒性作用。     

放线共生放线杆菌表面相关物质对人牙龈成纤维细胞的增殖抑制作用

目的：观察放线共生放线杆菌表面相关物质对人牙龈成纤维细胞的增殖抑制作用。方法：采用细胞计数法和图像分析法观察对人牙龈成纤维细胞的生长抑制作用。结果：此物质抑制作用明显，能抑制细胞的分裂、增殖，使细胞、细胞核面积增大，１００ｍｇ／Ｌ对与对照组差别显著（Ｐ＜０．０５），且细胞无死亡现象。结论：此物质可明显抑制人牙龈成纤维细胞的生长、增殖，在牙周病病理变化过程中起重要作用     

分泌抗放线共生放线杆菌Y_4特异性抗体的杂交瘤细胞系的建立

本实验建立了三株分泌抗放线共生放线杆菌Ｙ４特异性抗体的杂交瘤细胞系Ｙ４１Ｈ１、Ｙ４２Ｇ１和Ｙ４２Ｅ４。反复传代三个月仍能稳定分泌抗体。抗体与放线共生放线杆菌其它血清型及口腔其它常见菌未发现有交叉反应。Ｙ４１Ｈ１和Ｙ４２Ｇｉ抗体亚类均为ＩｇＧ３。腹水抗体ＥＬＩＳＡ效价：Ｙ４１Ｈ１２×１０５，Ｙ４２Ｇ１及Ｙ４２Ｅ４为５×１０５。     

伴放线放线杆菌与牙周病相关细胞凋亡关系的研究

牙周病是口腔的常见病和多发病,但其具体机制至今尚未完全明了。大量研究证实,细胞凋亡在牙周病的发生和发展过程中起重要作用。伴放线放线杆菌是牙周炎主要致病菌之一,可产生多种毒力因子。本文就伴放线放线杆菌的各种毒力因子与细胞凋亡及伴放线放线杆菌与牙周组织内多种细胞凋亡的关系进行综述。     

放线共生放线杆菌表面相关物质对人牙周膜成纤维细胞在牙根片上附着的影响

目的：观察放线共生放线杆菌表面相关物质对人牙周膜成纤维细胞在牙根片上附着的影响。方法：应用细胞计数法和扫描电镜观察法。结果：100mg/L组对人牙周膜成纤维细胞在根面附着有明显抑制作用,表现为正常牙根片上附着细胞数明显少于对照组（P＜0．05）;扫描电镜显示细胞生长数量减少,细胞突起伸展不充分。结论：此物质可抑制人牙周膜成纤维细胞在牙根面上的附着。     

放线共生放线杆菌表面相关物质对人牙龈成纤维细胞DNA合成和细胞周期的影响

目的观察放线共生放线杆菌表面相关物质对人牙龈成纤维细胞的DNA合成和细胞周期的影响。方法应用流式细胞仪技术。结果100mg/L组明显抑制细胞DNA合成，细胞增殖指数（S+G2M）%降低（P<0.05）。结论此物质不仅抑制细胞的分裂、增殖，而且还抑制细胞的DNA合成。     

放线共生放线杆菌白细胞毒素水平检测

目的　检测放线共生放线杆菌 (Actinobacillusactinomycetemcomitans,Aa)临床分离菌株白细胞毒素水平 ,区分高毒株与低毒株。方法　应用聚合酶链反应 (polymerasechainreaction ,PCR)检测白细胞毒素操纵子启动子区域基因序列的差异。检测临床菌株 6 8株 ,其中b型 17株 ,c型 42株 ,a型9株。阳性对照高毒株为JP2 ,低毒株为ATCC43717等 5株Aa国际参考菌株 ,阴性对照为 12株异种菌国际参考菌株。结果　 6 8株临床分离菌株扩增片段均为 10 2 2bp ,JP2扩增片段为 492bp ,ATCC43717等 5株扩增片段均为 10 2 2bp ,12株异种菌参考菌株无扩增片段出现。结论　 6 8株临床分离菌株全部为低毒株