五步蛇和蝮蛇的抗蛇毒血清对烙铁头蛇毒的中和作用

针对我国院目前尚无烙铁头蛇毒血清，本研究旨在利用国内现有的精制抗五步蛇毒血清和精制抗蝮蛇毒血清，通过动物实验，证明这两种抗血清在体外和体内都能中和烙铁头蛇毒，对被烙铁头蛇毒中毒的小鼠有明显保护作用，且两种血清的保护率无显著差异。     

五种抗蛇毒血清对眼镜王蛇毒的中和作用

本文通过琼脂免疫扩散及动物实验，对我国现有五种抗蛇毒血清对眼镜王蛇毒的交叉免疫反应、体外中和作用以及体内保护作用进行了研究，结果表明：（1）抗眼镜和抗银环蛇毒血清对眼镜王蛇毒均有中和作用，但作用较弱，其中和效价为60μg／ml；（2）抗眼镜蛇毒血清和抗银环蛇毒血清联合应用时，其中和效价是它们单独应用的11倍，约660μg／ml；（3）抗金环蛇毒血清、抗蝮蛇毒血清及抗五步蛇毒血清虽与眼镜王蛇毒有弱的沉淀线，但却无中和作用。     

精制抗五步蛇毒血清和抗蝮蛇毒血清对竹叶青蛇毒的中和作用

本文通过琼脂免疫扩散实验表明抗五步蛇毒血清和抗蝮蛇毒血清对竹叶青蛇毒有中和作用，对竹叶青蛇毒的出血毒素及促凝毒性作用两种抗血清均有中和及对抗作用；两种抗血清的混和液对竹叶青蛇毒有协同作用。     

中国眼镜蛇毒对血小板聚集的影响

中国常见八种蛇毒包括眼镜蛇毒;银环蛇毒;金环蛇毒;眼镜王蛇毒;蝰蛇毒;蝮蛇毒;竹叶青蛇毒;五步蛇毒。在体外前四种蛇毒通过ADP的诱导,抑制家兔血小板的聚集,后四个毒促进家兔血小板聚集。用CM-Sephaex C 50柱层析3.0×65cm。眼镜蛇毒分为9个组份。组份Ⅰ和组份Ⅱ有明显抑制血小板聚集作用。组份I和组份Ⅱ经聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳,鉴定为一区带。     

不同佐剂及免疫法对五步蛇毒类毒素产生免疫能力的影响

应用蚁醛含量渐增法使五步蛇毒脱毒为类毒素。将类毒素分别与等量的不同佐剂混合用以免疫豚鼠,均可使动物获得强固免疫力。不同佐剂类毒素的免疫力比较试验表明,美粘土及弗氏不完全佐剂类毒素免疫的豚鼠,其免疫力要比磷酸铝佐剂类毒素组为优越。美粘土组免疫动物的局部和全身反应均较轻微,但弗氏不完全佐剂组的注射局部易产生硬结。应用美粘土佐剂类毒素免疫豚鼠,皮下注射三次,每次间隔四周,总剂量为35mg 类毒素。免疫动物可抵御18—24mg 五步蛇毒,相当于对体重300—400克豚鼠的6—8MLD 毒量。免疫豚鼠每毫升血清所含蛇毒抗毒素,可中和700微克五步蛇毒,相当于对体重20克小鼠腹腔注射8.75LD50毒量。免疫血清的抗五步蛇毒沉淀素效价为1:20000—1:40000。     

蝮蛇类毒素免疫原性的研究

应用蚁醛脱毒蝮蛇类毒素与等量美粘士混合制剂免疫的豚鼠,可抵御14.786mg蝮蛇毒的攻击,相当于体重300～400g豚鼠肌内注射蝮蛇毒9.86MLD毒量。每毫升免疫豚鼠血清可中和蝮蛇毒200ug,相当于中和体重20g小鼠腹腔注射12.34LD_(50)蝮蛇毒量。免疫血清的蝮蛇毒沉淀素效价达1:10000。在第二次及第三次免疫注射类毒素前一小时给予抗组织胺药扑尔敏,可有效地防止过敏反应。     

消栓灵的临床应用

对蝮蛇毒制剂——消栓灵的药理作用特点,抗凝机理,疗效与适应证,用法及注意事项进行了总结讨论,并比较了国内不同产地蝮蛇毒酶活力及三种蛇毒制剂的疗效,认为值得推广应用。     

中华眼镜蛇毒心脏毒素—13对猪离体冠脉的作用

探讨中华眼镜蛇毒中分离纯化获得的心脏毒素－１３对离体冠脉血管平滑肌的作用和机制。用离子交换和凝胶过滤法从中华眼镜蛇毒中分离纯化出心脏毒素。以不同浓度ＣＴＸ－１３分别作用于猪冠脉环，观察记录其所诱发的血管环收缩。普萘洛尔，哌唑嗪和尼群地平分别与冠脉环预作用５ｍｉｎ，再分别给予不同浓度的ＣＴＸ－３，观察记录其收缩强度的变化。     

中华眼镜蛇蛇毒因子的简易提纯及鉴定

目的 勃勃从中华眼镜蛇（Ｃｈｉｎｅｓｅ ｃｏｂｒａ,Ｎａｊａ ｎａｊａ ａｔｒａ）蛇毒中一镒性快速分离提纯具有抗补体活性及溶血生的中华眼镜晕 毒因子（Ｃｈｉｎｅｓｅ ｃｏｂｒａ ｖｅｎｏｍ ｒａｃｔｏｒ,ＣＣＶＦ）的方法。方法 用倒流法将粗毒９经ＤＥＡＥ－ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－５０柱层析分离提纯。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ进行纯度鉴定及相对分子质量测定,并鉴定其活性与毒性。结果 本法ＣＣＶＦ得率高于２％,     

眼镜蛇毒中锌与蛋白质含量的相关性研究

对几批眼镜蛇（Ｎ．ｎａｊａａｔｒａ）毒样品，用紫外分光光度法和原子吸收分光光度法分别测定其中的蛋白质和锌的含量，首次发现该毒中的锌与蛋白质含量呈负相关。经相关系数检验，Ｐ＜０．０１，即具有良好的线性相关。     

二巯基丁二酸钠对眼镜蛇毒的解毒作用

给小鼠腹腔注射二巯基丁二酸钠,20分钟后于小鼠背部皮下注射眼镜蛇毒,观察48小时,与单用蛇毒组小鼠比较,两组死鼠率差异无显著意义(P>0.05)。将二巯基丁二酸钠和眼镜蛇毒混合,置23℃孵育5分钟后在小鼠背部皮下注射,观察48小时,与单用蛇毒组小鼠比较,两组间死鼠率的差异有非常显著意义(P<0.01)。     

蝎毒多肽提取物对小鼠Lewis肺癌生长转移的抑制作用

目的 观察蝎毒多肽提取物(PESV)对Lewis肺癌(LLC)生长及转移的影响并探讨其作用机制.方法 采用30只C57BL/6J小鼠,右腋下接种Lewis肺癌细胞悬液,建立皮下种植瘤模型,随机分为荷瘤对照组、5-FU治疗组、PESV治疗组,连续灌胃给PESV18d,检测肿瘤体积并计算抑瘤率.另取20只C57BL/6J小鼠,尾静脉注射Lewis肺癌细胞悬液,建立Lewis肺癌实验转移模型,随机分为荷瘤对照组和PESV组,连续灌胃给PESV28d,观察肺部转移灶数目并计算转移抑制率;采用免疫组化法和ELISA法分别检测瘤组织及血清中骨桥蛋白(OPN)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达.结果 PESV抑瘤率为46.02%,肺转移抑制率76.19%;与荷瘤对照组相比,瘤组织和血清中OPN和MMP-9的表达明显降低(P<0.05).结论 PESV能抑制小鼠Lewis肺癌的生长与转移,其机制可能与抑制OPN和MMP-9的表达有关.     

江西蝮蛇蛇毒类凝血酶分离纯化及理化、酶学性质的鉴定

本文采用DEAE—纤维素DE—52离子交换层析及SephadexG—150凝胶过滤法,从江西蝮蛇蛇毒中分离、纯化类凝血酶。该酶为糖蛋白,分子量39,200,pI为4.96,酸性氨基酸含量较高。类凝血酶水解苯甲酰-L-精氨酸乙酯(BAEE)的最适pH为8.0,km为3.57×10~(-4)M,其活性可被二异丙基氟磷酸(DFP)和苯甲基磺酰氟(PMSF)抑制。N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)可迅速抑制该酶的酯酶活性。该酶能直接作用于纤维蛋白原使之转变为纤维蛋白引起凝聚,但其凝固速度较牛凝血酶慢。     

颌下腺切除对小鼠妊娠的影响

Swiss成年雌性小鼠138只．随机分为对照组（18只）和实验组（20只）。实验组小鼠切除颌下腺，对照组小鼠保留颌下腺。待伤口愈合后，与正常Swiss雄性小鼠合笼交配，观察妊娠情况。结果：完成妊娠时实验组平均每只母鼠的产仔数是9．3±1．76（只），对照组是10．6±0．97（只），二者有显著性差异。在孕第6、7天时，实验组平均每只母及怀胎鼠数且为11±1．87（只），对照组为10．75±07，二者无显著性差异。结论：颌下腺切除可以使孕鼠完成妊娠时产仔数目减少。     

大黄水提物对雄性小鼠睾丸影响的实验研究

目的:观察大黄水提物对雄性小鼠睾丸的影响。方法:40只8周龄雄性昆明种小鼠随机分为空白对照组、大黄水提物大、中、小剂量组,每组10只小鼠,大黄三个剂量组小鼠分别给予2g/kg、1g/kg、0.5g/kg的大黄水提物连续灌胃30天。分别计算各组小鼠的睾丸指数,HE染色观察睾丸的形态结构。结果:与空白对照组比较,大黄中、大剂量组小鼠的睾丸指数明显降低(P0.01,P0.05);且大剂量组小鼠的睾丸指数明显低于小剂量组(P0.05)。HE染色结果显示,大黄三个剂量组小鼠睾丸的形态结构出现明显的病理变化,以大剂量组最为严重。结论:长期应用大黄可损害睾丸的形态结构,以大剂量的损害最为严重。     

尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列抗原位点分析及免疫保护效果观察

目的采用生物信息学方法分析尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列的关键抗原位点,并观察根据这些位点设计合成的新型免疫原的免疫保护效果。方法扩增尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列,采用Jameson-Wolf方法和ClustalX软件结合的生物信息学方法分析其抗原位点,人工合成筛选的抗原位点序列,并连接到pIRESneo表达载体,3次(0、2、4周)对BALB/c小鼠进行核酸免疫,ELISA法测定免疫后机体抗体水平,出血中和实验和攻毒实验初步观察其免疫保护效果。结果生物信息学方法分析得到6个关键抗原位点(MPA-1～MPA-6);ELISA法检测抗血清结果表明,抗原位点序列诱导小鼠产生的抗血清相对未免疫的小鼠血清稀释100倍后仍能表现出阳性结果;出血中和实验和攻毒实验表明,将抗原位点序列免疫小鼠可以诱导机体产生免疫反应,使体内产生抗体,能有效中和蛇毒,从而对尖吻蝮蛇蛇毒引起的出血有防护作用。结论用生物信息学方法成功获得尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列的6个关键抗原位点,针对这些位点设计合成的新型免疫原展示出初步免疫保护效果。     

蝮蛇毒磷酸二酯酶抗原的制备及性质

为研究蛇类毒腺细胞分化过程中磷酸二酯酶的作用,需制备特异性和敏感性较高的该酶单克隆抗体用于免疫组化研究.本文所介绍为浙江蝮蛇蛇毒中磷酸二酯酶抗原的提取纯化过程,为制备单克隆抗体提供条件.作者采用离子交换技术和分子筛过滤法相结合的方法提取抗原,具有步骤少、分离效率高的特点.所得抗原经聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳呈单一条带,测定分子量为20900.     

大剂量腹蛇抗栓酶与扩血管药合用治疗突发性聋

目的：观察蝮蛇抗栓酶与扩血管药合用治疗突发性聋的临床疗效．方法：８９例患者用大剂量蝮蛇抗栓酶与扩血管药合用为治疗组．对照组１１３例仅用扩血管药治疗．结果：治疗组的痊愈率为３６．６％,有效率为７６．２％;对照组痊愈率为２９．３％,有效率为６９．９％．两组比较无显著差异（Ｐ＞０．０５）,但治疗组治疗前病程（平均４１．６ｄ）较对照组（平均１０．６ｄ）长．结论：大剂量蝮蛇抗栓酶与扩血管药联合治疗突聋疗效肯定,尤其对病程较长突聋患者的治疗提供一可供选择的有效疗法．     

甘丙肽及其拮抗剂在雨蛙肽诱导的小鼠急性胰腺炎中的作用

目的探讨丙甘肽及其拮抗物(galantide)对雨蛙肽诱导的小鼠急性胰腺炎(AP)模型的影响。方法将55只小鼠随机分为11组,其中胰腺炎6组,建立胰腺炎模型;丙甘肽及其拮抗物治疗干预4组,对照组1组,每组各5只。各组干预前后分别测定其血清淀粉酶、脂肪酶、过氧化物酶(MPO),干预后评定各组胰腺坏死评分并做比较。结果 galantide 204、0 nmol/kg剂量组可不同程度地改善AP的高酶血症、MPO活性及胰腺坏死评分(P<0.05),丙甘肽并没显著影响AP所致的高酶血症和MPO活性及胰腺坏死(P>0.05),galantide 40 nmol/kg延迟治疗组可改善AP的高酶血症及胰腺坏死情况(P<0.05),但对MPO活性无显著影响(P>0.05)。结论丙甘肽以一定方式参与AP的发病过程,而丙甘肽拮抗剂可对急性胰腺炎有一定潜在的临床治疗价值。     

串珠镰刀菌培养物对小鼠诱癌作用的初步研究

四川西北食管癌高发区居民食物中分离的串珠镰刀菌,其玉米粉培养物长期饲喂LACA系小鼠,经过353天诱发出了少数食管及较多前胃肿瘤性病变,提示高发区人的食管癌的增多,可能与人们长期食用被串珠镰刀菌污染的食物有一定关系。