乐清地区儿童肺炎链球菌耐药性及大环内酯类耐药表型和耐药基因型

目的：了解乐清地区儿童患者分离的肺炎链球菌耐药性及大环内酯类耐药表型和耐药基因型分布情况。方法对2014年乐清地区儿童患者分离的124株肺炎链球菌采用细菌鉴定分析仪进行9种抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）检测,同时对大环内酯类耐药肺炎链球菌用红霉素和克林霉素双纸片协同试验确定其耐药表型,用聚合酶链反应（PCR）扩增这些菌株的耐药基因ermB和mefE。结果124株肺炎链球菌中,红霉素、克林霉素、四环素和复方新诺明的耐药率依次为96.77％、93.55％、84.68％和81.45％;青霉素、氯霉素和左旋氧氟沙星的耐药率较低,分别为20.16％、5.65％和0.81％,未发现对阿莫西林/克拉维酸和万古霉素耐药的菌株。120株大环内酯类耐药肺炎链球菌中,大环内酯类耐药表型cMLS占96.67％、iMLS占0.83％、M型占2.50％;耐药基因ermB检出率为97.50％,mefE的检出率为6.67％。结论乐清地区儿童肺炎链球菌对大环内酯类抗生素的耐药性严重,ermB基因介导的cMLS型耐药是大环内酯类耐药的主要原因,大环内酯类抗生素已不是治疗乐清地区儿童肺炎链球菌感染的有效药物。     

肺炎链球菌对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素的耐药监测及耐药机制研究

目的研究肺炎链球菌对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素类抗菌素的耐药机制。方法K-B纸片法测定肺炎链球菌对红霉素、克林霉素、泰利霉素和喹奴普汀/达福普汀的耐药性。对全部红霉素耐药菌株和部分红霉素敏感菌株用聚合酶链反应(PCR)检测ermB和mefA基因。结果97株肺炎链球菌对红霉素、克林霉素、泰利霉素和喹奴普汀/达福普汀的耐药率分别为60.8%、58.8%、0和0。59株红霉素耐药菌株均检出ermB和/或mefA基因,其中34株(57.6%)ermB阳性,18株(30.5%)ermB和mefA同时阳性,7株(11.8%)mefA阳性。5株敏感菌株ermB和mefA基因均为阴性。结论本研究显示肺炎链球菌对泰利霉素和喹奴普汀/达福普汀高度敏感,而对红霉素和林可霉素则表现出较高的耐药性。肺炎链球菌对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素的耐药机制以ermB基因介导的靶位改变为主。     

肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药情况及耐药基因研究

目的调查上海地区肺炎链球菌对红霉素的敏感度，研究肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药机制。方法对中山医院57株临床分离肺炎链球菌进行红霉素药敏试验；应用聚合酶链反应（PCR）技术对上海4所医院中分离的53株红霉素耐药肺炎链球菌检测耐药基因（ermB，mefA，merE）。结果57株肺炎链球菌中12株（21．0％）敏感，3株（5．3％）中介，42株（73．7％）耐药。53株红霉素耐药肺炎链球菌中，ermB基因、mere基因、mefA基因分别在51株（96．2％）、22株（41．5％）和1株（1．9％）中检测到。其中21株（39．6％）同时检测到ermB基因和mefE基因，1株（1．9％）同时检测到ermB基因和mefA基因，1株（1．9％）未检测到ermB基因、mefE基因或mefA基因。结论上海地区肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药率较高。ErmB介导的靶位改变是最常见的耐药机制，mef（特别是mefE）介导外排机制引起者也较常见。     

A群β溶血性链球菌药敏试验及大环内酯类抗生素耐药基因检测

目的研究我国儿科A群β溶血性链球菌（GAS）临床分离株抗菌药物敏感性情况。方法收集5所儿童医院2005--2006年222株GAS感染的临床菌株，采用琼脂稀释法测定11种抗菌药物的MIC值；诱导试验分析大环内酯类抗生素耐药表型；PCR检测大环内酯类抗生素耐药基因ermB、erm RT和mefA。结果分离株对大环内酯类抗生素和克林霉素耐药率在93．69％～98．65％，MIC90〉512mg／L；对四环素的耐药率为94．14％；对青霉素、头孢他啶的敏感率高达100％。分离株大环内酯类抗生素耐药以耐大环内酯类、林可酰胺类和链阳性菌素B表型（cMLS）为主，占99．04％，iMLS表型仅2株，未检测到M型；ermB、ermRT和mefA阳性率分别为94．71％、2．89％和0。结论所测儿科GAS感染流行菌株对大环内酯类抗生素和克林霉素耐药率高，主要耐药机制为ermB编码的23SrRNA甲基化酶导致靶位改变，青霉素类和头孢菌素类抗生素是治疗我国GAS感染首选药物。     

β溶血链球菌中诱导型克林霉素耐药的检测和分析

目的 了解β溶血链球菌对红霉素及克林霉素的耐药性，探讨红霉素对克林霉素诱导耐药的表型和基因型。方法 按CLSI推荐的K—B法测定并判读β溶血链球菌对红霉素及克林霉素的耐药性，用D试验检测红霉素诱导β溶血链球菌对克林霉素耐药的表型．并且用PCR方法确定所检测的菌株是否携带的ermB基因和mefA基因。结果49株红霉素耐药的β溶血链球菌结果显示有35株β溶血链球菌只扩增到ermB基因，有9株只扩增到mefA基因，有3株同时扩增到ermB和mefA基因，有2株没有扩增到ermB和或mefA基因；17株红霉素耐药克林霉素敏感菌株中D试验阳性8株细菌都只扩增到ermB，D试验阴性9株细菌中都只扩增到mefA；红霉素敏感的β溶血链球菌没有扩增到ermB或mefA基因。结论 β溶血链球菌的耐药表型与基因型高度一致，临床上可用PCR方法和D试验检测，D试验检测更为简单方便．临床应该用D试验检测β溶血链球菌的iMLS型耐药。     

肺炎链球菌大环内酯类耐药表型与相关基因的关系

目的了解肺炎链球菌临床分离株红霉素耐药基因的流行情况和耐药表型的关系。方法对42株肺炎链球菌用E-试验和K-B纸片扩散法检测其对10种抗生素的敏感性;用红霉素和克林霉素双纸片协同试验确定其耐药表型;用PCR扩增这些菌株的耐药基因ermB、mefA和mefE。结果 42株肺炎链球菌中耐药基因ermB总检出率为95.2%(40/42),mefE总检出率为26.1%(11/42),未检出mefA基因。耐药基因组合ermB(+)mefE(-)和ermB(+)mefE(+)占95.2%,两者均呈cMLSB耐药表型。ermB(-)mefE(+)占4.8%(2/42),耐药表型为M型。结论耐药基因ermB导致的cMLSB耐药是大环内酯类耐药的主要原因。大环内酯类抗生素已不是治疗肺炎链球菌的有效药物。     

肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药机制研究

目的了解肺炎链球菌对大环内酯类抗生素的耐药机制和转座子整合酶的流行情况。方法188株红霉素耐药肺炎链球菌，用E试验和K—B纸片扩散法检测其对11种抗菌药物的敏感性；用双纸片法（红霉素和克林霉素）确定其耐药表型；用PCR扩增这些菌株的耐药基因ermB、mefa、mefE、tetM及转座子整合酶基因intTn。结果188株红霉素耐药株中耐药基因ermB总检出率为91．5％（172／188），mefE总检出率为38．3％，未检出mefA基因。97．9Yoo的红霉素耐药株中存在转座子整合酶intTn。耐药基因组合ermB（＋）mefE（-）和ermB（＋）mef（＋），占91．5％，两者均呈cMLSB耐药表型。ermB（-）mefE（＋）占8．5％，耐药表型为M型。结论我院分离的肺炎链球菌大环内酯耐药以errnB介导的cMLS。耐药表型为主。转座子可能在本地区肺炎链球菌耐药基因的水平转移和克隆播散中起重要作用。     

β溶血链球菌中诱导型克林霉素耐药的检测和分析

目的 了解β溶血链球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,探讨红霉素对克林霉素诱导耐药的表型和基因型.方法 按CLSI推荐的K-B法测定并判读β溶血链球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,用D试验检测红霉素诱导β溶血链球菌对克林霉素耐药的表型,并且用PCR方法确定所检测的菌株是否携带的ermB基因和mefA基因.结果 49株红霉素耐药的β溶血链球菌结果显示有35株β溶血链球菌只扩增到ermB基因,有9株只扩增到mefA基因,有3株同时扩增到ermB和mefA基因,有2株没有扩增到ermB和或mefA基因;17株红霉素耐药克林霉素敏感菌株中D试验阳性8株细菌都只扩增到ermB,D试验阴性9株细菌中都只扩增到mefA;红霉素敏感的β溶血链球菌没有扩增到ermB或mefA基因.结论 β溶血链球菌的耐药表型与基因型高度一致,临床上可用PCR方法和D试验检测,D试验检测更为简单方便,临床应该用D试验检测β溶血链球菌的iMLS型耐药.     

肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药及传播机制研究

目的 研究上海3所医院临床分离肺炎链球菌对大环内酯类抗生素的耐药机制及传播方式。方法收集上海市3所医院临床分离的红霉素耐药肺炎链球菌共118株，用E试验和K-B纸片扩散法检测对12种抗菌药的敏感度；用双纸片法（D试验）确定大环内酯类耐药表型；用PCR扩增检测耐药基因ermB、mefA、mefE、msrD及Tn1545-Tn916家族转座子整合酶基因intTn；用转化试验证实耐药传播方式。结果①118株肺炎链球菌对红霉素的MIC范围为4-256mg／L，其中5．9％对克林霉素敏感，对青霉素不敏感率达72．7％。左氧氟沙星、阿莫西林-克拉维酸对红霉素耐药的肺炎链球菌仍有较好的体外活性；②该组细菌耐药基因ermB检出率为88．1％，mefE、msrD检出率各为50％，未检出，mefA基因，转座子整合酶基因intTn检出率达97．5％。耐药基因组合模式以ermB（＋）reefE（＋）msrD（＋）intTn（＋）和ermB（＋）mefE（-）msrD（-）intTn（＋）为主，两者均为cMLSB型耐药。ermB（-）mefE（＋）msrD（＋）intTn（＋）模式占5．9％，耐药表型为M型。③cMLSB型耐药代表菌株ET37和M型耐药代表菌株RJ324基因组DNA均成功转化敏感株，使之表现红霉素耐药性并可传代。结论上海地区肺炎链球菌对大环内酯抗生素耐药以ermB介导的cMLSB耐药表型为主；大环内酯外排基因有流行趋势，但仅限于起源于肺炎链球菌的，mefE。耐药基因可以转化方式进行传播，转座子可能在本地区肺炎链球菌耐药基因的传播中起重要作用。     

肺炎链球菌192株对新喹诺酮类体外耐药性测定

目的：调查192株肺炎链球菌对青霉素、红霉素和环丙沙星等的耐药现状，并与新喹诺酮类进行比较。方法：根据美国国家I临床实验室标准委员会(NCCLS)2002年标准使用微量肉汤稀释法检测192株肺炎链球菌对青霉素、红霉素、克林霉素和喹诺酮类抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC)。结果：肺炎链球菌对青霉素的耐药率(中介率 耐药率)已达42．7％，对红霉素的耐药率为77．6％，克林霉素、白霉素和环丙沙星的耐药率分别为66．7％、65．6％和57．3％，新喹诺酮类抗菌药物对之有较好的抗菌活性，敏感率皆大于90％；并与是否对青霉素、红霉素耐药无关。结论：在我国，肺炎链球菌对青霉素、红霉素的耐药率较高，新喹诺酮类抗生素有较好的抗菌活性。     

肺炎链球菌红霉素相关耐药基因与耐药表型的关系

目的:了解肺炎链球菌(Streptococcuspneum oniae,SP)临床分离株红霉素耐药基因的流行状况及和耐药表型的关系。方法:对住院儿童分离到的43株肺炎链球菌进行红霉素药敏试验,并用PCR法检测与红霉素耐药相关的红霉素核糖体甲基化酶基因(ermB)、主动外排转运基因(mefA)。结果:43株肺炎链球菌红霉素药敏试验40株耐药(占93%),3株敏感。红霉素ermB基因总检出率为76.7%(33/43),mefA基因总检出率为23.3%(10/43)。3株红霉素敏感的肺炎链球菌均未检出ermB基因和mefA基因;40株红霉素耐药肺炎链球菌ermB基因和mefA基因的PCR检出率分别为82.5%(33/40)和25%(10/40)。共有35株肺炎链球菌检出ermB基因或/和mefA基因,其中单独携带ermB基因的耐药表型为25株(占71.4%);单独携带mefA基因的耐药表型2株(占5.7%);同时携带ermB基因和mefA基因的耐药表型8株(占22.9)%。结论:ermB基因和mefA基因同时表达或单独表达均可导致红霉素耐药,ermB基因表达是儿童肺炎链球菌对红霉素耐药的主要原因,mefA基因表达是造成对红霉素耐药的次要原因。红霉素已不是治疗肺炎链球菌的有效药物。     

某地区部分医院肺炎链球菌对红霉素的耐药性与基因分析

目的 了解某地区临床分离的肺炎链球菌(SPN)对红霉素的耐药基因流行情况及与耐药表型的关系.方法 采用微量琼脂稀释法,对2008年1月至2009年12月某地区部分医院临床分离到的98株SPN对红霉素的耐药状况进行分析,并用PCR法检测与红霉素耐药基因的关系.结果 98株SPN对红霉素的药敏结果显示,耐药87株,中敏2株,敏感9株;在红霉素耐药菌株中,含有ermB基因70株,含有Mef基因18株,含有ermA基因9株.9株红霉素敏感SPN均未检出ermB基因.结论 ermB基因表达是SPN对红霉素耐药的主要原因,并同时使克林霉素耐药.红霉素已不是治疗SPN的有效药物.     

大连地区儿童肺炎链球菌耐药及血清分型研究

目的研究大连地区住院儿童感染肺炎链球菌（SP）的耐药性及其血清分型。方法 SP菌株均从5岁以下儿童患者鼻咽抽吸物中分离。血清分型通过多重PCR方法鉴定,药敏试验通过E-test方法来判断,而耐药基因ermB及mefA/E则由PCR方法来检测。结果从2010年7月到2013年6月,共分离得到131例SP。药敏结果显示所有的131例菌株对红霉素以及克林霉素全部耐药,大约有39.8%的菌株对青霉素G不敏感,而所有的菌株则均对左氧氟沙星和万古霉素敏感。此外,有129例（98.5%）属于多种耐药菌株。血清分型结果显示本地区SP血清型以19F（28.2%）、19A（19.1%）、6B（17.6%）及23F（14.5%）为主。且在这些血清型中的SP中,青霉素不敏感肺炎链球菌（PNSP）对阿莫西林、头孢曲松及头孢噻肟的不敏感性要显著高于青霉素敏感肺炎链球菌（PSSP）（P〈0.05）。7价疫苗（PCV7）和13价疫苗（PCV13）覆盖的血清型分别占68.7%和87.8%。此外,49株（37.4%）单独携带ermB基因,而82株（62.6%）同时携带ermB和mefA/E两种耐药基因。结论大多数分离的SP对青霉素G仍然相对敏感,所有菌株对左氧氟沙星和万古霉素敏感。本地区SP血清型以19F、19A、6B及23F为主。鉴于19A血清型的高流行率,引入PCV13更能有效地预防儿童肺炎链球菌的感染和控制耐药菌株传播。     

儿童鼻咽部肺炎链球菌携带株研究

目的了解武汉地区健康儿童肺炎链球菌带菌状况、耐药性、耐药基因及血清型流行情况。方法收集武汉地区2所幼儿园469名健康儿童的鼻咽拭子标本,分离鉴定肺炎链球菌,琼脂稀释法测定其对12种抗菌药物的MIC;PCR检测红霉素耐药基因ermB和mefA;“荚膜肿胀”试验进行血清学分型。结果469份鼻咽拭子标本共分离出116株肺炎链球菌,分离率为24.7%。存活的114株中,肺炎链球菌对青霉素的敏感率为51.8%(59/114),对红霉素的敏感率为13.2%(15/114)。99株红霉素耐药肺炎链球菌中,ermB基因总检出率为98.0%(97/99),其中30株(31.6%)同时具有ermB和mefA基因,2株红霉素低耐株仅检出mefA基因。血清分型涉及16个血清型、群,主要分布在19、23、6和14血清群。结论武汉地区肺炎链球菌耐药性高,多为多重耐药菌株,红霉素耐药基因主要为ermB,19、23、6血清群多重耐药株分布广泛。     

2011年北京市朝阳区儿童A组溶血性链球菌的emm基因分型及耐药性分析

目的 了解2011年北京市朝阳区儿童感染A组溶血性链球菌(GAS)的emm基因分型及对红霉素和克林霉素的耐药情况及耐药基因谱的特点。 方法 从猩红热或咽峡炎及扁桃体炎儿童患者的咽拭子培养分离获得71株GAS,应用PCR扩增emm基因及红霉素耐药基因mefA、ermA、ermB和转座子基因Tn916;采用E-test法进行药敏试验并分析耐药情况。 结果 北京市朝阳区儿童感染GAS的emm12.0基因型占87.4%,其次为emm1.0型(9.8%)、emm22.0型(1.4%)、emm75.0型(1.4%);GAS对红霉素和克林霉素的耐药率为100%和95.8%,两种药物的交叉耐药率为95.8%;耐药基因ermA、ermB、mefA和转座子基因Tn916的携带率分别为5.6%、90.1%、4.2%和90.1%。 结论 北京市朝阳区2011年儿童感染GAS的主要流行株为emm12.0型,对红霉素普遍具有较高的耐药率且与克林霉素之间存在显著的交叉耐药;ermB基因是决定本地区2011年儿童感染GAS对红霉素耐药的重要基因;而Tn916转座子基因在GAS菌株间耐药基因扩散中起重要作用。     

儿科临床分离肠球菌的耐药性监测及大环内酯类耐药机制研究

目的 研究儿科临床分离肠球菌的流行情况及红霉素耐药株基因ermB、mefA、tetM与转座子整合酶基因int-Tn分布特点.方法 采用KB纸片法对北京、上海、广州和重庆5家儿科专科医院2000-2006年临床分离粪、屎肠球菌进行8种抗菌药敏感性试验,并用琼脂稀释法测定225株红霉素耐药粪、屎肠球菌对大环内酯类及四环素最小抑菌浓度.PCR检测红霉素耐药基因ermB和mefA,四环素耐药基因tetM,以及转座子Tn1545的整合酶基因int-Tn.结果 4地5家儿童医院分离所得肠球菌对红霉素耐药率最高,平均耐药率86.5%;对氨苄西林、高浓度链霉素、高浓度庆大霉素、环丙沙星及利福平的耐药率分别为48.0%、47.6%、60.5%、45.4%、63.6%;未发现对万古霉素耐药的肠球菌.225株红霉素耐药粪、屎肠球菌ermB基因阳性率为70.7%,仅发现1株对mefA阳性的菌株.tetM基因阳性率为75.1%.Tn1545基因阳性株组ermB和tetM的携带率分别为84.8%和83.7%,高于阴性组60.9%和70.0%,且差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论 我国儿科临床分离粪、屎肠球菌对多种抗菌药均有较高耐药率,对糖肽类抗菌药均保持较好敏感性,分离株对红霉素和四环素耐药主要机制分别是ermB编码的靶位改变和tetM编码的核糖体保护作用;接合性转座子Tn1545与tetM和ermB存在关系密切,可能是肠球菌多重耐药的重要机制之一.     

Resistance to macrolides in Streptococcus pyogenes in France in pediatric patients

A total of 1,500 recent throat isolates of Streptococcus pyogenes collected between 1996 and 1999 from children throughout France were tested for their susceptibility to erythromycin, azithromycin, josamycin, clindamycin, and streptogramin B. The erythromycin-resistant isolates were further studied for their genetic mechanism of resistance, by means of PCR. The clonality of these strains was also investigated by means of serotyping and ribotyping. In all, 6.2% of the strains were erythromycin resistant, and 3.4 and 2.8% expressed the constitutive MLS(B) and M resistance phenotypes and harbored the ermB and mefA genes, respectively; ermTR was recovered from one isolate which also harbored the ermB gene. Ten serotypes and 8 ribotypes were identified, but we identified 17 strains by combining serotyping with ribotyping. Among the eight ribotypes, the mefA gene was recovered from six clusters, one being predominant, while the ermB gene was recovered from four clusters, of which two were predominant.