VEGF和PCNA在肾细胞癌中的表达及意义

目的 研究肾细胞癌中血管内皮生长因子(VEGF)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达与肾癌临床分期、病理分级、组织学类型、预后之间的关系. 方法 采用免疫组织化学技术检测40例肾细胞癌和10例正常肾组织标本中VEGF和PCNA的表达. 结果 正常肾组织与肾细胞癌组织中VEGF和PCNA阳性表达率比较差异均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).在不同病理分级肾细胞癌中,高分化组、中分化组的VEGF和PCNA阳性表达率分别与低分化组比较差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).在不同临床分期肾细胞癌中,VEGF阳性表达率随临床分期的升高而逐渐升高;PCNA阳性表达率随临床分期的升高有升高的趋势.在不同组织类型肾细胞癌中,VEGF和PCNA阳性表达率差异均无统计学意义(P>0.05). 结论 VEGF在肾细胞癌组织中的表达与肾癌的病理分级及临床分期有相关性,其高表达与肾细胞癌的浸润转移密切相关.PCNA的表达与肾癌的病理分级具有相关性,能较为客观、准确地反映肾癌的恶性程度.     

肿瘤细胞性染色体数目异常在肾透明细胞癌中的生物学作用及其与SSIGN评分的关系

目的探讨肿瘤细胞性染色体数目异常在肾透明细胞癌中的生物学作用及其与SSIGN评分的联系。方法收集20例男性肾透明细胞癌患者,根据SSIGN评分分为高SSIGN评分组和低SSIGN评分组,并选择5例非肿瘤肾组织作为阴性对照。采用荧光原位杂交技术分别检测标本X、Y染色体数目的异常率,观察比较高SSIGN评分组与低SSIGN评分组以及正常组之间的性染色体异常率的差异。结果 5例非肿瘤肾组织无异常,与肿瘤组比较,有显著性差异(P0.05)。高SSIGN评分组比低SSIGN评分组的X染色体获得率没有显著的变化,无统计学意义(P0.05),而高SSIGN评分组比低SSIGN评分组的Y染色体获得率有明显增高,差异有统计学意义(P0.05)。结论肾透明细胞癌肿瘤细胞存在性染色体的异常,而非肿瘤肾组织无异常率的发现,提示性染色体异常与肾透明细胞癌的发生发展有着密切的关系。肾透明细胞癌高SSIGN评分组比低SSIGN评分组的Y染色体获得率有明显增高,Y染色体获得很可能是肾透明细胞癌预后差的特征性改变,可望作为判断肾透明细胞癌恶性程度和预后的指标之一。     

Notch1和Jagged1表达与肾透明细胞癌发病及预后

目的:探讨肾透明细胞癌Notch1与Jagged1的表达及意义。方法:应用Western blot和免疫组化染色法,检测肾透明细胞癌及正常肾组织中Notch1、Jagged1的蛋白表达,分析两者与临床病理参数的相关性。随访肾透明细胞患者术后情况,分析Notch1、Jagged1蛋白的表达水平与预后的关系。结果:肾透明细胞癌组织中Notch1、Jagged1的阳性表达率高于正常肾组织(分别为95.3%比36.4%,P<0.05;93.0%比42.4%,P<0.05),Notch1和Jagged1的表达水平与肾癌的病理分级、临床分期和肿瘤的大小均有关。结论:Notch1和Jagged1高表达可能在肾透明细胞癌发生发展中发挥作用,Notch1和Jagged1表达水平对肾透明细胞癌预后判断具有一定价值。     

Survivin在人肾透明细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨凋亡抑制因子survivin蛋白在人肾透明细胞癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测48例肾透明细胞癌组织和20例正常肾组织中survivin蛋白的表达及定位情况;并应用Western blot检测10例肾透明细胞癌组织及正常对照组织survivin蛋白的表达情况。结果Survivin蛋白在肾癌组织中表达,阳性率为89.58%(43/48),而正常组织中未见表达,二者有统计学差异(P0.05);肾透明细胞癌中survivin蛋白的表达与患者有无远处转移、肾癌的Fuhrman分级及Robson分期呈正相关(P0.05),而与肾癌患者的年龄、性别、肿瘤大小及有无下腔静脉癌栓无显著相关性。Western blot结果则进一步提示survivin高表达于肾透明细胞癌组织内,而不表达或极低表达于正常肾脏组织中。结论Survivin的高表达与肾透明细胞癌的分期、分级及进展具有密切相关性,提示了survivin在肾透明细胞癌的发生发展过程中可能扮演重要角色。     

p53β在肾细胞癌中的表达及其临床意义的研究

目的 探讨p53β在肾癌中的表达与肾细胞癌的病理类型、分期以及核分级的相关性.方法 采用逆转录PCR对47例肾细胞癌标本和癌旁正常肾组织进行了检测,并结合肾癌的分级和临床分期进行统计学分析.结果 p53β在肾癌组织中的表达显著高于正常肾组织,其表达与其临床分期有关与病理类型、核分级无关.结论 p53β的表达与肾细胞癌的发生发展有密切关系.p53β可以进一步研究作为肾细胞癌新的诊断分子标记和基因治疗的新的靶点.     

p16基因及PCNA在肾癌中的表达及意义

目的 探讨肾癌中ｐ１６蛋白与ＰＣＮＡ的表达与肾癌组织学类型、临床分期、病理分级及预后的关系。方法 采用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法检测４１例肾癌及１８例癌旁正常肾组织中ｐ１６蛋白及ＰＣＮＡ的表达。结果 ｐ１６蛋白在肾癌及癌旁正常肾组织中的阳性表达率间具有显著性差异（Ｐ〈０．０５）,ｐ１６蛋白表达在肾透明细胞癌及颗粒细胞癌间无显著性差异,随肾癌分级、分期升高而明显降低,ｐ１６阳性表达组术后５年生存率明显高于     

bcl-2、cyclinD1、P27~(kip1)在肾癌中的表达及相关性

目的探讨bcl-2、cyclinD1、p27kip1 mRNA水平在肾细胞癌(RCC)中的表达及其意义。方法采用RT-PCR半定量方法检测42例肾癌患者(透明细胞癌33例,非透明细胞癌9例)癌组织和10例正常肾组织中bcl-2、cyclinD1、p27kip1 mRNA的表达情况。结果 42例肾癌标本中bcl-2 mRNA、cyclinD1 mRNA表达的中位值(分别为0.56、0.65),均显著高于正常肾组织(分别为0.13、0.15)(P0.05);而p27kip1mRNA在肾癌中表达的中位值0.46,显著低于正常组织(0.86)(P0.05)。在肾癌临床分期中bcl-2在Ⅰ+Ⅱ期肾癌组织中表达高于Ⅲ+Ⅳ期(P0.05),cyclinD1在Ⅰ+Ⅱ期肾癌组织中表达低于Ⅲ+Ⅳ期(P0.05),p27kip1 mRNA表达量随着临床分期的升高而降低(P0.05);bcl-2、cyclinD1在非透明细胞癌组中表达量分别为0.39±0.18、0.55±0.08,低于透明细胞癌组的0.58±0.19、0.66±0.08(P0.05),p27kip1在透明细胞癌组和非透明细胞癌组中表达量(P0.05)无差异。偏相关分析示P27kip1与cyclinD1之间相关系数为-0.57(P0.01),p27kip1与bcl-2之间相关系数为0.44(P0.01);而cyclinD1与bcl-2之间相关系数为-0.06,无相关性(P0.05)。结论 bcl-2、cyclinD1高表达和p27kip1低表达与肾癌的发生、发展有密切关系;检测bcl-2、cyclinD1、p27kip1 mRNA可作为诊断肾癌的参考指标;p27kip1与cyclinD1负相关、与bcl-2正相关,而cyclinD1与bcl-2之间无相关性。     

长链非编码 RNA MIAT 在肾透明细胞癌中的表达情况和预后意义

目的 探讨长链非编码RNAMIAT在肾透明细胞癌中的表达情况及与患者临床指标的相关性,分析其作为肾透明细胞癌分子标记物的可能性。方法 通过荧光定量PCR方法 检测MIAT在40例肾透明细胞癌组织和40例癌旁正常组织中的表达情况,同时结合TCGA数据库分析MIAT表达水平与肾透明细胞癌患者临床指标和预后的关系。结果 MIAT在肾透明细胞癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织,在肾癌细胞系中的表达明显高于正常肾小管上皮细胞,差异均具有统计学意义（P<0.05）。TCGA数据库资料分析表明,MIAT表达水平与肾癌患者T分期（P<0.001）、M分期呈正相关（P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析表明,高表达MIAT的肾癌患者总体生存时间明显低于低表达MIAT的肾癌患者（Log-rankP<0.05）。结论 MIAT在肾透明细胞癌组织和肾癌细胞系中高表达,有可能成为肾透明细胞癌的分子标记物。     

肾透明细胞癌中胰岛素样生长因子2外显子9异常甲基化与其表达的关系

目的 探讨肾透明细胞癌中原癌基因胰岛素样生长因子2(IGF-2)表达与IGF-2外显子9 CpG岛甲基化状态的关系.方法 检测43例肾透明细胞癌及相应正常组织的IGF-2外显子9甲基化状态及IGF-2基因表达.结果 癌组织中IGF-2外显子9甲基化率为15.00％,正常组织为96.77％,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01),并且与肿瘤大小、病理分级及临床分期明显相关(P＜0.05).肾癌组织中外显子9去甲基化组IGF-2双等位基因表达率显著高于甲基化组(P＜0.01).结论 IGF-2外显子9去甲基化在肾透明细胞癌的发生发展中具有重要作用,可作为反映其生物学行为的指标之一.     

DNA甲基化转移酶谱表达与肾透明细胞癌病理特征及预后的相关性

目的明确DNA甲基化转移酶家族(DNMTs)表达(DNMT1,DNMT3A及DNMT3B)与肾透明细胞癌患者病理特征及患者预后的相关性。方法收集本院2006-2014年行手术治疗并术后病理证实为透明细胞癌患者肿瘤及对应癌旁标本(90例),术后随访时间为18~90个月,应用免疫组织化学方法检测DNMTs表达状况,分析DNMTs表达与肾透明细胞癌临床病理特征及患者预后的关系。结果 DNMTs在肾透明细胞癌组织中表达强度显著高于正常肾脏组织(P0.001);DNMTs表达强度与肿瘤大小(P0.01)、病理分级(P0.01)、临床分期(P0.05)关系密切,而与患者性别、年龄未见显著性差异(P0.01);DNMTs表达强度与患者总生存时间(OS)呈负相关性(P0.001)。结论 DNMTs表达与透明细胞癌患者病理特征及预后关系密切,其表达异常升高可能是透明细胞癌发生发展的重要原因,并有可能作为透明细胞癌早期监测指标及治疗靶点。     

EGFL7和VEGF在肾透明细胞癌血管生成及转移中的相关性研究及临床意义

目的：探讨表皮生长因子样结构域7（EGF_1ikedomain7,EGFL7）、血管表皮生长因子（vascularen—dothelialgrowthfactor,VEGF）在肾透明细胞癌中的表达及其与肾癌血管生成和转移的关系。方法：选取87例行根治性肾切除的肾透明细胞癌患者癌及癌旁组织标本,采用免疫化学SP法检测EGFL7、VEGF的表达,并计数血管内皮细胞表面抗原（CD34）标记的血管密度（MVD）;同时选取46例癌及癌旁组织标本,采用RT—PCR检测EGFL7mRNA的表达。结果：EGFL7和VEGF阳性表达率及MVD值在癌组明显高于癌旁组（P〈O．05）,且EGFL7、VEGF与MVD在肾透明细胞癌组织中的表达呈正相关,并与肿瘤分级、分期显著相关（P〈0．05）;EG—FL7mRNA阳性表达率明显高于癌旁组织（P〈O．05）,并与肿瘤分级、分期相关（P〈O．05）。结论：肾透明细胞癌组织中EGFL7、VEGF的表达与肾癌血管生成有关,两者可能协同肿瘤新生血管的生成。     

NNMT在肾透明细胞癌的表达及对肾癌细胞侵袭能力的影响

目的:研究NNMT在肾透明细胞癌中的表达情况及对肾癌细胞侵袭能力的影响。方法:采用RT-PCR和Western blot方法检测正常肾小管上皮细胞株HKC、肾癌细胞株786-O及30例肾透明细胞癌组织、相应癌旁组织中NNMT的mRNA和蛋白的表达水平,并分析NNMT的mRNA水平与临床病理参数的关系。化学合成针对NNMT特异的siRNA序列,应用脂质体Lipofectamine 2000将其转染进786-O细胞中,利用RT-PCR和Western blot法检测NNMT在786-O细胞中的表达水平,用Transwell小室法检测肾癌细胞786-O侵袭能力的变化。结果:NNMT在肾癌细胞786-O中的mRNA和蛋白表达水平显著高于正常肾小管上皮细胞株HKC(P<0.001);肾透明细胞癌组织和对应的癌旁组织中NNMT的mRNA相对表达量分别为(1.582±0.2145)、(0.1269±0.04279),两组比较P<0.001。NNMT的mRNA水平与肿瘤大小、临床分期有关(P<0.05);Tran-swell法检测结果显示降低NNMT的表达后786-O细胞的侵袭能力明显下降。结论:NNMT在肾透明细胞癌组织和细胞中表达升高,可能在肾癌发生、发展过程中发挥重要作用。     

E2F1在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的：探讨E2F1在肾透明细胞癌中的表达及意义。方法：通过实时定量PCR和Western blot方法检测E2F1在肾透明细胞癌及对应瘤旁组织中mRNA和蛋白的表达情况,并分析E2F1的mRNA水平与临床病理资料的关系及表达相关性。结果：与对应瘤旁组织相比,E2FJ的mRNA水平在肾透明细胞癌手术标本中表达明显升高（P=0．0002）,相应的蛋白水平对比与mRNA变化一致;E2F1的mRNA水平在不同年龄、性别组间差异无统计学意义（P〉0．05）,而在组织学分级、肿瘤直径大小、T分期、临床分期和大血管浸润与否差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：E2F1表达上调可能在肾透明细胞癌的肿瘤形成中发挥作用,且E2F1表达升高可能促进肾透明细胞癌的恶性进展。     

HLA-G和Fas配体在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的：探讨两种免疫抑制分子人类白细胞表面抗原HLA—G和Fas配体（FasL）与经典型肾透明细胞癌（ccRCC）分级和分期的相关性。方法：采用免疫组织化学方法对60例ccRCC标本石蜡切片进行检测,数据由SPSS软件进行统计分析。结果：肿瘤旁正常肾组织中无HLA—G表达;肾癌组织中,40例（66．7％）表达HLA—G,36例（60．0％）表达FasL。31例（51．7％）两者均表达,15例（25．0％）两者均不表达。在同一标本中,肿瘤侵犯脉管或淋巴结后,其HLA-G或FasL表达较原位肿瘤明显增强。统计分析显示HLA—G表达的阳性率和表达强度与肿瘤的分期、分级均呈正相关（P〈0．01）。FasL表达的阳性率与肿瘤分级呈正相关（P〈0．05）,而表达强度与肿瘤分期呈正相关（P〈0．01）。结论：ccRCC中HLAG和FasL的表达与肿瘤的分期、分级均呈正相关,与淋巴结转移有一定关系;晚期ccRCC高表达免疫抑制分子的机制需进一步研究。     

Survivin和Vimentin在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨凋亡蛋白抑制因子生存素（Survivin）和波形蛋白（Vimentin）在肾透明细胞癌（clearcellrenalcellcarcinoma,ccRCC）中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测56例ccRCC、25例癌旁组织及13例正常肾组织中Survivin和Vimentin的表达及定位情况。结果Survivin在肾透明细胞癌中高表达,而在癌旁及正常组织中未见表达;其表达与ccRCC临床分期及病理分级呈正相关,差异有统计学意义（P〈0．01）。Vimentin在正常肾组织及癌旁组织中亦未见表达,而在肾透明细胞癌中高表达,且与临床分期及病理分级呈正相关,差异有统计学意义（P〈0．01）。并且两个因子的表达呈显著正相关（r=0．566,P〈0．01）。结论Survivin和Vimentin在ccRCC组织中高表达,共同促进了ccRCC的发生、发展、侵袭与转移,联合两因子检测可为ccRCC的预后评估提供重要的信息。     

Simultaneous Chromosome 7 and 17 Gain and Sex Chromosome Loss Provide Evidence that Renal Metanephric Adenoma is Related to Papillary Renal Cell Carcinoma

Purpose

Metanephric adenoma has recently been recognized as a unique renal tumor characterized by an unusual degree of cellular differentiation and maturation. We recently studied metanephric adenoma using metaphase analysis and observed concomitant chromosome Y loss and chromosome 7 and 17 gain. To determine if these chromosomal anomalies are consistently present in renal metanephric adenoma, we studied all 11 tumors in the pathology tissue registry at our institution using fluorescence in situ hybridization (FISH).

Materials and Methods

FISH, using deoxyribonucleic acid probes for chromosomes 1, 7, 8, 17, × and Y, was performed in isolated nuclei from 11 paraffin embedded renal metanephric adenoma specimens.

Results

Of the 11 tumors (73%) 8 demonstrated chromosome 7 and 17 gain by FISH, and the remaining 3 were found to have an apparently normal chromosomal content. Of the 8 tumors (75%) from men showed 6 chromosome 7 and 17 gain with Y chromosome loss. Of the 3 tumors (33%) from women 1 had chromosome 7 and 17 gain with × chromosome loss, while 1 had chromosome 7 and 17 gain without sex chromosome aneusomy. Metaphase analysis performed on 2 tumors revealed chromosome 7 and 17 gain and Y chromosome loss in 1, and no apparent chromosome anomaly in the other, confirming the results of FISH analysis.

Conclusions

FISH analysis of renal metanephric adenoma identified frequent chromosome 7 and 17 gain and sex chromosome loss. These results are consistent with a clonal neoplastic disorder in which chromosomes 7, 17, × and Y are likely to be involved in the pathogenesis of this tumor. These characteristic chromosomal alterations have also been observed in papillary renal cell adenoma and papillary renal cell carcinoma, providing evidence that these tumors may be related.     

RCC5基因在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的明确RCC5在肾透明细胞癌（ccRCC）组织中的表达水平及其对肾癌患者预后的影响。方法通过荧光定量PCR方法对54对ccRCC患者标本（包括癌组织和癌旁正常组织）的RCC5mRNA进行分析;并运用免疫组化对82对配对的癌组织和癌旁正常组织切片及161例癌组织切片进行染色;运用统计学方法分析RCC5的表达量和患者的临床特点之间关系。结果荧光定量PCR结果显示92.59%（50/54））的肾癌组织中RCC5表达水平明显高于癌旁正常组织（P〈0.001）;82对癌组织及癌旁正常组织切片免疫组化显示,92.68%（76/82）的癌组织RCC5表达水平高于癌旁正常组织（P〈0.001）;同时发现RCC5的表达水平与性别、肿瘤直径、病理分期、分级、TNM分期和复发率相关;RCC5高表达的患者预后一般较低表达者差,多元分析显示RCC5表达上调是ccRCC的独立预后因素。结论 RCC5的表达水平和ccRCC预后之间存在明显相关性;研究发现RCC5表达上调的患者预后较差,RCC5可能是一个新颖并且有临床价值的预后标志物。     

Dicer表达与肾透明细胞癌发生及转移的关系

目的：探讨Dicer在肾透明细胞癌发生及转移中的作用。方法：选取正常肾小管上皮细胞株HKC、非转移性肾透明细胞癌细胞株769P、转移性肾透明细胞癌细胞株Caki-1以及36例肾透明细胞癌手术标本（其中11例已发生远处转移）和相应癌旁正常肾组织,应用实时定量PCR和Western blot方法检测Dicer在肾透明细胞癌细胞株和组织中mRNA和蛋白的表达情况,并分析Dicer的mRNA水平与临床病理资料的关系。结果：和正常肾小管上皮细胞株HKC相比;Dicer的mRNA水平在肾透明细胞癌细胞株769-P和Caki-1中均降低（P〈0．001）,而转移性肾透明细胞癌细胞株Caki-1比非转移性肾透明细胞癌细胞株769-P表达水平更低（P〈0．001）;和癌旁正常肾组织相比,Dicer的mRNA水平在‘肾透明细胞癌手术标本中明显降低（P〈0．001）,且已发生远处转移的。肾癌标本比未发生远处转移的肾癌标本表达水平更低（P=0．04）;Dicer在细胞株和组织中的蛋白水平的变化与mRNA水平的变化一致（P〈0．001）;Dicer的mRNA水平在不同年龄、性别、组织学分级、肿瘤大小及T分期组间无统计学差异（P〉0．05）。结论：Dicer表达降低可能在。肾透明细胞癌的肿瘤发生中发挥作用,且其表达的进一步下降可能与肾透明细胞癌的远处转移有关。