裙带菜茎硫酸多糖体外抗单纯疱病毒Ⅰ型活性的实验研究

目的 研究裙带菜茎多糖体外抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)活性.方法 采用空斑减数实验测定裙带菜茎粗多糖及纯化后多糖抗HSV-1活性,计算它们的空斑抑制率和IC50,并从药物对病毒的直接灭活作用、对病毒吸附的影响及对病毒释放的影响3个方面初探裙带菜茎多糖抗单纯疱疹病毒活性机理.结果 裙带菜茎多糖能明显抑制HSV-1的致病变作用,IC50依次为 8.04,13.54 μg/ml.药物对病毒没有直接灭活作用,对病毒的释放也没有影响,主要影响了病毒的吸附.结论 裙带菜茎多糖有显著的抗HSV-1活性,且粗多糖比纯化后多糖活性要好,并且可以初步推测裙带菜茎多糖抗HSV-1活性是作用在病毒和受体结合、侵入Vero细胞阶段.     

广西苦丁茶提取物体外抗单纯疱疹病毒1型活性的实验研究

目的探讨不同苦丁茶提取物体外抗单纯疱疹病毒1型（HSV-1）的作用。方法采用细胞病变效应法（Cytopathogenic effect，CPE）和空斑减数实验（Plaque reduction assay）测定不同苦丁茶提取物抗HSV-1活性，计算药物对病变的抑制率和半数抑制浓度（50％ inhibiting concentration，IC50），并从药物对细胞的保护，对病毒增殖的影响及对病毒感染细胞的综合作用3个方面初步探索苦丁茶提取物抗HSV-1病毒活性的机理。结果苦丁茶水提物能明显抑制HSV-1的致病变作用，IC50为108．24μg／ml，药物对细胞的保护及对病毒感染细胞的综合作用中均表现出明显的活性。结论苦丁茶水提物具有显著的抗HSV-1活性，且初步推测其抗病毒活性是作用在病毒和受体结合，侵入Vero细胞阶段。     

千金藤素抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)初探

目的:体外测定千金藤素抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的作用,为筛选新型抗病毒药物提供参考依据.方法:用不同稀释度的千金藤素抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型对Vero细胞的感染作用,48 h后观察细胞病变(CPE)效应.结果:千金藤素能明显抑制HSV-1对Vero细胞的致病变作用,使细胞存活率升高.结论:千金藤素有较显著的抗HSV-1的作用,且抗病毒作用是多方面的,是一种具有潜在开发前景的药物.     

夏枯草水提物体外抗单纯疱疹病毒1型作用的研究

目的:研究夏枯草水提物体外抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)作用。方法:以Vero细胞作为病毒感染靶细胞,给予不同浓度的药物处理,镜下观察细胞的形态变化,应用MTT法检测夏枯草水提物体外抗HSV-1的效果。并以不同浓度夏枯草水提物作用于HSV-1感染的不同阶段,探讨夏枯草水提物抗HSV-1的机制。结果:夏枯草水提物对HSV-1具有明显的抑制作用,随着浓度的增加,抗病毒作用增强,呈量效关系,TI(药物治疗指数)值为45.71。进一步实验发现夏枯草水提物6.25 mg生药/ml在体外即能抑制病毒吸附和生物合成,又能直接杀灭病毒。结论:夏枯草水提物具有显著的抗HSV-1作用,是对病毒感染不同阶段综合作用的结果。     

贵州老鹰茶提取物体外抗单纯疱疹病毒1型活性的实验研究

目的研究贵州老鹰茶甲醇提取物体外抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)活性。方法采用细胞病变效应(Cytopatho-genic effect,CPE)法与空斑减数实验(Plaque reduction assay,PRA)测定甲醇提取物抗HSV-1活性,计算其空斑抑制率和半数抑制浓度(50%inhibiting concentration,IC50),并从药物对病毒的直接灭活作用、对病毒吸附的影响及对病毒穿膜的影响3个方面初步探讨其抗HSV-1的活性机理。结果贵州老鹰茶甲醇提取物能明显抑制HSV-1的致病变作用,其IC50为12.02μg/ml。药物主要是影响病毒对细胞的吸附,对病毒也有一定的直接灭活作用。结论贵州老鹰茶甲醇提取物有显著的抗HSV-1活性,初步推测其抗HSV-1活性的机理是作用在HSV-1和受体结合,侵入Vero细胞阶段。     

藏药紫金标抗HSV-1的作用机理研究

目的 :探讨紫金标抗单纯疱疹Ⅰ型病毒 (HSV-1)的作用及机理 ,为进一步开发该药提供理论依据。方法 :采用不同剂量的紫金标作用于适量HSV-1感染的Vero细胞 ,以 50%组织细胞感染量 (TCID₅₀ ) ,细胞病变效应(CPE) ,MTT法和核酸分子杂交作为评价指标。结果 :MTT法测得紫金标的 50 %抑制浓度 (IC₅₀ )为 29.46mg·L^-1,50%中毒浓度 (TC₅₀ )为 1 077mg·L^-1,治疗指数 (TI)为 36.56 ,结果表明紫金标有明显抑制HSV-1的作用 ,其作用强度和有效时间与药物浓度成正比。紫金标无直接灭活HSV-1的作用 ,也不能影响病毒的释放 ;但可干扰HSV -1对宿主细胞的吸附。不同浓度的紫金标能明显抑制HSV-1gD基因复制和mRNA表达。结论 :紫金标具有显著的抗HSV-1的作用 ,能抑制HSV-1对宿主细胞的吸附以及抑制HSV-1gD基因复制与转录。     

中药蜈蚣多糖的分离纯化及性质研究

目的:从中药蜈蚣体内提取多糖组分,并对其部分性质进行分析.方法:从中药蜈蚣体内提取粗多糖,经DEAE-52离子交换柱层析分离获得3个糖组分;凝胶过滤法测组分Ⅰ的分子量;MTT法检测多糖组分Ⅰ对两种肿瘤细胞的抑制作用.结果:组分Ⅰ的分子量为33.1 kD;该多糖组分对Hela细胞的抑制作用明显,当糖浓度为3.13 μg/mL时,抑制率达60.8%,但对Eca 109细胞无明显抑制作用.结论:蜈蚣多糖组分Ⅰ对不同的肿瘤细胞具有特异性.     

藏药甘青乌头抗单纯疱疹病毒Ⅱ型体内外作用研究

 目的探讨藏药甘青乌头抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)的作用和机制。方法MTT法测定甘青乌头对Vero细胞的毒性,采用细胞病变法和蚀斑法测定甘青乌头体外抗病毒活性,以半数抑制浓度和治疗指数为评价指标;定量荧光PCR法和蚀斑法考察甘青乌头体外抗病毒作用机制。用HSV-2建立小鼠脑炎模型,对甘青乌头体内抗单纯疱疹病毒的抗病毒活性进行评价。结果甘青乌头对Vero细胞的半数中毒浓度(CC₅₀)为5.57 g·L^-1。细胞病变法和蚀斑法测得甘青乌头的半数有效浓度(EC₅₀)分别为2.25,1.68 g·L^-1,治疗指数TI分别为2.47,3.32。LD₅₀值为0.85 g·kg^-1。甘青乌头延长了小鼠的平均存活时间,对小鼠的死亡显示出10%的保护率。甘青乌头能直接灭活HSV-2,能够显著抑制HSV-2的感染性;对病毒吸附到细胞没有抑制作用,能抑制HSV-2大分子的增值。抑制HSV-2 DNA合成的抑制倍数达102。结论甘青乌头体外具有较强的抗HSV-2的活性,抗病毒作用是通过抑制病毒复制循环的各个环节起作用的。     

川楝子提取物体外抗单纯疱疹病毒1型活性的实验研究

目的在体外研究川楝子提取物抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的作用。方法以Vero细胞为宿主细胞,阿昔洛韦为阳性对照药物,通过观察细胞病变效应(CPE)与空斑减数实验测定川楝子提取物抗HSV-1活性,计算其IC50与治疗指数,并从药物对病毒的直接灭活作用、对病毒吸附的影响及对病毒穿膜的影响三个方面初探川楝子提取物抗HSV-1活性的机理。结果川楝子提取物能明显抑制HSV-1的致病变作用,其IC50为18.26μg/mL,TI值为18。研究显示,川楝子提取物在体外对HSV-1直接灭活的效果明显,而对HSV-1吸附与穿入细胞的抑制作用较差。结论川楝子提取物在体外有明显的抗HSV-1感染作用,且主要是通过直接灭活HSV-1而发挥作用。     

青羊参多糖硫酸酯体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型活性研究

目的 体外测定青羊参多糖硫酸酯抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的活性。方法采用MTT法检测化合物对疱疹病毒感染Vero细胞的保护作用。结果青羊参多糖硫酸酯体外抗HSV—Ⅱ的EC50为69．9μg／ml，治疗指数为103。结论在体外，青羊参多糖硫酸酯有较显著的抗HSV-Ⅱ的作用。     

大青叶抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的活性研究

目的:评价大青叶不同化学部位抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的活性。方法:利用Hep-2细胞体外培养系统,通过噻唑蓝(MTT)比色法和观察细胞病变效应(CPE),以治疗指数(TI)为评价指标,评价大青叶不同化学部位体外抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)对Hep-2细胞的感染作用;并通过改变加药方式,初步探讨抗病毒机制。选择体外抗病毒活性较强的部位,观察其对HSV-Ⅰ脑炎小鼠的保护作用,以综合评价其抗病毒活性。结果:大青叶Ⅱ~Ⅴ部位对HSV-Ⅰ有直接灭活作用,各部位均不能阻止HSV-Ⅰ侵入细胞,除Ⅲ,Ⅴ部位外,其余部位均有抑制HSV-Ⅰ生物合成作用;Ⅳ部位能显著降低HSV-Ⅰ脑炎小鼠死亡率。结论:大青叶Ⅳ部位具有较强的体内外抗HSV-Ⅰ病毒活性。     

朱砂七抗Ⅱ型单纯疱疹病毒的体外研究

目的:研究朱砂七粗提物和总蒽醌体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的作用。方法:运用单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ),以非洲绿猴肾细胞(Vero)作为宿主细胞,通过三种给药方式观察感染病毒后的细胞变性反应(CPE)和MTT比色法,检测不同浓度朱砂七粗提物和总蒽醌对Ⅱ型单纯疱疹病毒的直接杀灭、预防和阻止复制作用。结果:朱砂七粗提物和总蒽醌能抑制HSV-Ⅱ病毒的复制,但无预防和直接杀灭作用,朱砂七粗提物抑制HSV-Ⅱ病毒复制IC50为0.1008 mg/ml,治疗指数(TI)为6.2;总蒽醌抑制HSV-Ⅱ病毒复制IC50为0.0067mg/ml,治疗指数(TI)为11.66。结论 :朱砂七粗提物和总蒽醌在体外具有明显的保护宿主细胞抵抗HSV-Ⅱ病毒复制的作用。     

咳尔康口服液体外抗病毒作用的研究

目的 探讨咳尔康口服液在细胞培养中对腺病毒3型(ADV3)、副流感病毒(HVJ),呼吸道合胞病毒(RSV)、单纯疱疹病毒1和2型(HSV-1,HSV-2)的抑制作用.方法 用敏感细胞培养法,采用鸡胚肾细胞(CEK)、Vero细胞,幼地鼠肾(BHK)细胞感染相应病毒2 h给药,观察细胞病变(CPE).结果 当病毒感染量≤100TCID50时,咳尔康口服液组无CPE,而病毒对照组有25%～75%的CPE.咳尔康口服液抑制ADV3、HVJ、RSV、HSV-1、HSV-2的最大无毒浓度(TDO)、半数有效浓度(IC50)、最小有效浓度(MTC)和治疗指数(TI)分别为0.5、0.25、0.125～0.0625 ml/ml和4、8.结论 咳尔康口服液在细菌培养中可显著抑制ADV3、HVJ、RSV和HSV-1,为治疗ADV3、HVJ、RSV和HSV-1感染提供了实验依据.     

Possible mode of action of antiherpetic activities of a proteoglycan isolated from the mycelia of Ganoderma lucidum in vitro

A bioactive fraction (GLPG) was extracted and purified from the mycelia of Ganoderma lucidum by EtOH precipitation and DEAE-cellulose column chromatography. GLPG was a proteoglycan and had a carbohydrate:protein ratio of 10.4:1. Its antiviral activities against herpes simplex virus type 1 (HSV-1) and type 2 (HSV-2) were investigated by the cytopathic effect (CPE) inhibition assay in cell culture. This kind of polysaccharide inhibited the development of the cytopathic effect in dose-dependent manner in HSV-infected cells, moreover did not show any cytotoxic effects on cells even when a concentration was as high as 2000 microg/ml. In order to study the possible mode of action of the antiviral activity of GLPG, cells were treated with GLPG before, during and after infection, and the viral titers in the supernatant of cell culture 48 h post-infection were tested by TCID(50) assay. The antiviral effects in pre-treated and treated during virus infection with GLPG were more remarkable than the treatment of post-infection. Although the precise mechanism has yet to be defined, our work suggested that GLPG inhibits viral replication by interfering with the early events of viral adsorption and entry into target cells. Thus, this proteoglycan seems to be a potential candidate for anti-HSV agents.     

鸡血藤醇提物体外抗病毒活性研究

目的 研究鸡血藤醇提物及其不同极性溶剂萃取物的体外抗柯萨奇B3病毒、单纯疱疹病毒Ⅰ型、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒以及乙型肝炎病毒的活性.方法 鸡血藤药材60%醇提物经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取后浓缩制得各不同极性溶剂萃取物,观察其药物毒性、病毒引起的细胞病变效应判断药物毒性及药物抗病毒效应.结果 鸡血藤醇提物无抗柯萨奇B3病毒和呼吸道合胞病毒活性,但具有抗甲型流感病毒、乙型肝炎病毒和单纯疱疹病毒Ⅰ型活性,且抗单纯疱疹病毒Ⅰ型效果显著.醇提物经初步萃取分离,得到5个不同极性溶剂萃取物,其中乙酸乙酯萃取物和水层留余物抗单纯疱疹病毒Ⅰ型活性最显著.结论 鸡血藤醇提物及其乙酸乙酯萃取物和水层留余物在体外对单纯疱疹病毒Ⅰ型具有明显的抑制作用,适用于抗单纯疱疹病毒Ⅰ型治疗药物的深入研究与开发.     

朱砂七抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的体外实验研究

目的研究朱砂七粗提物和总蒽醌体外对单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)的抑制作用。方法运用HSV-Ⅰ,以非洲绿猴肾细胞(Vero)作为宿主细胞,通过三种给药方式观察感染病毒后的细胞变性反应(CPE),MTI比色法检测不同浓度朱砂七粗提物和总蒽醌对HSV-Ⅰ的直接杀灭、预防和阻止复制作用。结果朱砂七粗提物和总蒽醌能抑制HSV-Ⅰ病毒的复制,但无预防和直接杀灭作用,朱砂七粗提物抑制HSV-Ⅰ病毒复制IC50为0.031 5g/L,治疗指数(TI)为19.84;总蒽醌抑制HSV-Ⅰ病毒复制IC50为0.004 7 g/L,治疗指数(TI)为16.62。结论朱砂七粗提物和总蒽醌在体外具有明显的保护宿主细胞抵抗HSV-Ⅰ病毒复制的作用。     

Structure-activity relationship of in vitro antiviral and cytotoxic activity of semisynthetic analogues of scopadulane diterpenes.

Fourteen semisynthetic compounds derived from the natural scopadulane-type diterpenes thyrsiflorin A (4), B (5), and C (6), including several precursors, have been examined in vitro for their antiherpetic activity against Herpes simplex virus type II (HSV-2) and cytotoxicity against two human tumor cell lines. Four of these compounds showed moderate antiherpetic activity, but none of them exhibited a significant cytotoxicity against the cell lines used. Some structure-activity relationships have been identified for the antiviral activity in these scopadulane derivatives as well as important structural features for the cytotoxic activity.     

中药粉膜Ⅱ号体外抗HSV-2作用的实验研究

目的:研究中药粉膜Ⅱ号抗 HSV-2作用机理。方法:利用体外细胞培养技术,采用微量细胞病变抑制法来研究中药各浓度组的抑制病毒增殖作用、直接杀伤病毒作用及预防病毒感染细胞作用,本实验以病毒滴度和抑病毒指数为指标。结果:(1)抑制病毒增殖实验:中药粉膜Ⅱ号1.63、0.81、0.41mg/ml 浓度组的病毒滴度与病毒对照组比较,差异有显著性(P<0.01),抑病毒指数>2;(2)直接杀伤病毒实验:中药粉膜Ⅱ号1.63mg/ml—8h 组、1.63mg/ml—24h 组、0.81mg/ml—24h 组的病毒滴度与病毒对照组比较,差异有显著性(P<0.05),其余各组的病毒滴度与病毒对照组比较,差异无显著性(P>0.05);(3)预防作用实验:中药各浓度组的病毒滴度与对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。结论:中药粉膜Ⅱ号具有抗 HSV-2病毒的作用,而无预防病毒感染细胞作用。     

三白草抗单纯疱疹病毒作用及机制

目的:病毒复制需要宿主细胞参与,包括信号通路的激活,本研究以病毒复制所需信号通路为靶点,寻找抑制单纯疱疹病毒(HSV-2)感染的有效药物。方法:观察HSV-2感染引起的Vero细胞病变效应(CPE),用MTT法检测细胞活性,评价三白草水提物冻干粉抗病毒能力;以免疫印迹法检查HeLa细胞中三白草水提物对HSV-2病毒诱导的信号通路的作用。结果:三白草水提物可以明显抑制HSV-2感染引起的CPE和病毒复制所需的NF-κB通路的活化。水提物(冻干粉)在0.10,0.03,0.01,0.003 g.L-1时对HSV-2平均抑制率分别为(70.68±3.39)%,(61.74±2.13)%,(39.31±1.10)%,(18.54±3.44)%;IC50为(0.023±0.004)g.L-1,而阳性对照阿昔洛韦100%抑制浓度为0.001 g.L-1(5.0×10-6mol.L-1);最佳药物添加时间为感染前2 h至感染后6 h之间。免疫印迹试验发现三白草水提物可以明显抑制HSV-2诱导的NF-κB核转移。结论:三白草水提物可以抑制HSV-2病毒复制,其机制与抑制病毒复制所需的NF-κB通路活化有关。