荧光多重PCR与血清型特异性抗体检测HSV感染的比较

目的：比较荧光多重PCR和血清型特异性抗体测定在生殖器疱疹临床诊断中的应用价值及评价各自的优缺点。方法：以细胞培养法作为“金标准”对照，分别用荧光多重PCR和血清型特异性抗体检测法对121例临床诊断为生殖器疱疹的标本进行检测。结果：以培养法作标准，并通过结果的差异性分析，荧光多重PCR的敏感性为100％，特异性为88．89％；血清型特异性抗体测定则分别为77．68％和77．78％，荧光多重PCR的敏感性和特异性均显高于血清型特异性抗体测（P＜0．05），但前不能检测出无皮损患HSV的DNA，而后可检测出无皮损患中的HSV抗体。结论：荧光多重PCR和血清型特异性抗体检测各有其自身的优缺点，单独用PCR和其它病毒分离的方法和单独使用血清特异性抗体检测的方法来诊断生殖器疱疹都是不完整的，均可造成漏诊。临床上将两种方法有机的结合起来应用能发挥各自的优势，取长补短，对早期、准确、快速地诊断生殖器疱疹及进行流行病学调查有着十分重要的意义和使用价值。     

三种方法检测生殖器疱疹病毒2型特异性IgG抗体

目的：比较细胞培养法、MicroTrak HSV2直接分型法和FOCUS酶联免疫吸附法检测生殖器疱疹病毒2型的敏感性和特异性。方法：分别用细胞培养法、MicroTrak HSV2直接分型法和FOCUS酶联免疫吸附法对156例临床表现疑似生殖器疱疹患者进行平行检测。结果：以扩大金标准结果为判断标准，156例疑似生殖器疱疹患者进行细胞培养法、MicroTrak HSV2直接分型法、FOCUS酶联免疫吸附法检测的敏感性和特异性分别为79．1％和100％，71．6％和86．4％，97．0％和95．5％。结论：FOCUS酶联免疫吸附法检测生殖器疱疹病毒2型特异性IgG抗体敏感性好、特异性强，且方便、快捷，结果可靠，值得在临床上推广应用。     

生殖器溃疡中单纯疱疹病毒的检测和分型

目的：了解性病门诊生殖器溃疡患者中单纯疱疹病毒（HSV）感染情况，并评价聚合酶链反应（PCR）－微孔板反向杂交检测和分型方法在生器疱疹诊断中的意义。方法：采用病毒分离培养、普通PCR和PCR－微孔板反向杂交法同时对200份生殖器溃疡标本作了HSV检测与分型。结果：PCR－微孔板反向杂交法的敏感性和特异性分别为98．1％和95．9％，PCR－微孔板杂交法分型结果与病毒分离培养法和普遍PCR的分型结果完全相符。生殖器溃疡中HSV检出率为30％（60／200），其中HSV－2感染占96．7％（58／60）。结论：HSV－2是性病门诊患者生殖器溃疡的主要病因之一，PCR－微孔板反向杂交法是一种适用生殖器溃疡标本中HSV的检测与分型的快速、敏感和特异的诊断方法。     

多重PCR检测性传播生殖器溃疡性疾病病原体方法的研究

目的建立多重PCR用于快速检测引起性传播生殖器溃疡性疾病(GUD)常见病原体。方法根据各病原体特异性基因序列,即单纯疱疹病毒I和II型(HSV1和HSV2)的DNA聚合酶基因、梅毒螺旋体47KD膜蛋白基因、沙眼衣原体的主要外膜蛋白基因(omp1/ompb)及杜克雷嗜血杆菌16SrRNA基因序列,自行设计4对特异寡核苷酸引物,建立同时检测4种病原体DNA的多重PCR。结果各特异性引物仅扩增相应的病原体DNA。其他几种生殖道常见菌及人基因组DNA不被上述引物扩增。检测了51例临床标本,多重PCR检查结果与暗视野显微镜检查梅毒螺旋体和培养法检查HSV结果进行比较,均有较好的一致性。结论多重PCR检测4种引起GUD常见病原体DNA具有较好的特异性,可为GUD患者提供敏感、快速和准确的诊断手段。     

单纯疱疹病毒的聚合酶链反应——微孔板反向杂交检测和分型

单纯疱疹病毒 2型 (HSV－ 2)和单纯疱疹病毒 1型 (HSV－ 1)引起的生殖器疱疹的预后不同 [1]，检测 HSV时有必要对其分型。目前，生殖器疱疹的实验室诊断“金标准”是 HSV分离培养法，该法敏感性欠佳，费时费力。新近出现的 PCR－ ELISA及 PCR－微孔板杂交法，将 PCR、核酸杂交及酶联免疫技术结合起来，克服了传统方法的诸多弊端 [2,3]。我们建立了 HSV的 PCR－微孔板反向杂交检测和分型方法，并初步评价其在生殖器标本 HSV检测和分型中的应用价值。 一、材料与方法 (一 )材料： Vero细胞自中国科学院上海细胞生物研究所引…     

PCR联合透射电镜诊断口唇初发单纯疱疹一例

患者男,66岁,因上唇水疱、糜烂伴疼痛7 d就诊。取水疱及痂皮,利用单纯疱疹病毒（HSV）特异性引物做实时荧光PCR检测,发现HSV-1阳性、HSV-2阴性。取疱壁做透射电镜观察,见表皮细胞核内有空心型、颗粒型或致密型3种类型的核衣壳,细胞核外大量成熟病毒颗粒,鉴定为疱疹病毒。诊断：口唇单纯疱疹。PCR分子分型结合透射电镜是确诊初发单纯疱疹的有效方法。     

FQ—PCR与细胞培养检测女性HSV感染者宫颈排泌HSV的对照研究

目的：比较FQ—PCR与细胞培养方法检测无症状生殖器疱疹宫颈排泌HSV的阳性率。方法：用型特异性抗体-2型单纯疱疹病毒糖蛋白G—IgG（HSVgG2-IgG）筛选出阳性女性34例,每例连续2月每月在排卵期和月经前取宫颈拭子,共取材136个。每次取材的拭子分别使用细胞培养鉴定和荧光定量多聚酶反应（Fluorescent quantitation—polymerase chain reaction,FQ—PCR）检测宫颈分泌物中HSV。结果：FQ—PCR方法得到38个拭子阳性,均为HSV-2;细胞培养方法得到4个拭子阳性,经直接免疫荧光分型鉴定为HSV-2。即所有宫颈拭子HSV阳性标本均为HSV-2,无HSV-1。采用Mc-Nemer检验细胞培养与FQ—PCR检测结果阳性率的差异有统计学意义（P〈0．05）,FQ—PCR检测的阳性率比细胞培养法高。结论：对于女性无症状生殖器疱疹,FQ—PCR的方法检测宫颈排泌HSV优于细胞培养方法。     

彩色乳胶免疫层析法检测单纯疱疹病毒1,2型抗原临床应用分析

目的探讨彩色乳胶免疫层析法检测单纯疱疹病毒(HSV)1和2型抗原的临床应用价值。方法采用彩色乳胶颗粒免疫层析法检测各种水疱、溃疡和其他皮损中的HSV-1和2型抗原,同时用实时荧光定量PCR法进行对照。结果免疫层析法可检出≥1×106DNA拷贝/mL的HSV-1型混悬液和≥5×105DNA拷贝/mL的HSV-2型混悬液。132例标本中,免疫层析法检出HSV阳性43例,PCR检出HSV阳性50例。以PCR法为金标准,免疫层析法的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为84.00%,98.78%,97.67%和91.01%。结论免疫层析法检测HSV敏感性和特异性高,具有方便、快速和经济的特点,适于有症状患者的及时检测,对疱疹感染早期诊断和及时治疗有重要作用。     

对ELISA检测生殖器疱疹患者HSV及其临床应用的评价

目的评价酶联免疫吸附试验(ELISA)检测生殖器疱疹病毒的临床应用价值。方法采用ELISA和分型聚合酶链反应(分型PCR)检测生殖器标本中的单纯疱疹病毒(HSV),两种试验结果不符合者采用不分型PCR检测。结果164例受检者中,ELISA法HSV阳性96例(58.5%),其中具典型皮损者阳性84例(80.8%,84/104),非典型皮损阳性12例(20.0%,12/60);分型PCRHSV阳性98例(59.8%),其中典型皮损者HSV阳性86例(82.7%,86/104),非典型皮损者阳性12例(20.0%,12/60)。HSV1感染者占生殖器疱疹的5.1%,HSV2感染占88.7%,HSV1和HSV2混合感染者占6.1%。ELISA的敏感性和特异性分别为96.7%和94.0%。结论ELISA检测HSV感染,其敏感性高、特异性强,方便、快速,尤其适合大批量样本的检测。     

酶联免疫吸附试验在检测生殖器疱疹病毒抗原中的应用

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)检测泌尿生殖道分泌物及皮损中单纯疱疹病毒(HSV)抗原在临床中的应用价值.方法用聚合酶链反应(PCR)和ELISA方法检测泌尿生殖道及皮损中HSV DNA和HSV抗原,并对两种方法的检测结果进行比较.结果118例标本中,PCR检出41例阳性,ELISA 42例阳性.在118例标本中,111例两种方法结果相符,7例不相符合.PCR阳性的41例中,ELISA阳性38例(敏感性92.68%);PCR阴性的77例标本中,ELISA阳性4例(特异性94.81%).结论ELISA检测HSV抗原的方法可直接检测出泌尿生殖道及皮损中HSV病原体,从而为生殖器疱疹诊断提供准确的实验依据,其敏感性、特异性高,方便,快速,值得临床推广应用.     

双嘧达莫抗单纯疱疹病毒的体外实验研究

目的和方法　用Vero细胞及HEK 2 93细胞体外培养法检测双嘧达莫对单纯疱疹病毒(HSV)的抑制活性 ,并以直线回归方程计算IC50 值。结果　双嘧达莫对HSV 1及 2型质控株及临床分离株的IC50 值范围在 6 9～ 1 6 1 μg/ml之间 ,而对照药阿昔洛韦为 1 9～ 2 1 3 μg/ml。 结论　从双嘧达莫广谱的抗病毒作用及其特有的作用机制以及药代动力学资料分析 ,口服给药对HSV感染的疗效尚待临床药理研究进一步证实 ,而局部给药则可能是抗HSV皮肤粘膜感染可供选择的治疗药物之一     

Herpes simplex virus: isolation,cytopathological characterization and antiviral sensitivity

BACKGROUND

Herpes simplex virus (HSV) infection is an endemic disease and it is estimated that 6095% of the adult population are infected with symptoms that are usually self-limiting, though they can be serious, extensive and prolonged in immunocompromised individuals, highlighted by the emergence of drug-resistant strains. The study of the wild-type HSV strains based on the cytopathogenic features and its antiviral sensitivity are important in the establishment of an antivirogram for controlling the infection.

OBJECTIVE

This study sought to isolate and examine the cytopathological characteristics of circulating strains of the Herpes simplex virus, from clinical specimens and their sensitivity to commercially available antiherpesvirus drugs, acyclovir, phosphonophormic acid and trifluridine.

METHODS

Herpes simplex virus isolation, cytopathological features and antiviral sensitivity assays were performed in cell culture by tissue culture infectious dose or plaque forming unit assay.

RESULTS

From twenty-two clinical specimens, we isolated and adapted nine strains. Overall, the cytopathic effect was detected 24 h post-infection (p.i.) and the presence of syncytia was remarkable 48 h p.i., observed after cell staining. Out of eight isolates, four developed plaques of varying sizes. All the isolates were sensitive to acyclovir, phosphonophormic and trifluridine, with the percentage of virus inhibition (%VI) ranging from 49.7-100%.

CONCLUSIONS

The methodology for HSV isolation and characterization is a straightforward approach, but the drug sensitivity test, regarded as being of great practical importance, needs to be better understood.     

天疱疮合并单纯疱疹病毒感染的研究进展

【摘要】 病毒感染是天疱疮常见的并发症之一,近年来天疱疮合并病毒感染的相关研究主要集中于单纯疱疹病毒（HSV）。有研究显示,HSV感染会对天疱疮患者的病程、治疗效果甚至皮损形态等产生影响。但由于现有研究在样本量、检验方式等方面存在较多差异,故HSV在天疱疮患者中的发生率及对天疱疮临床特征的总结在各研究结果中差异较大。本文就天疱疮合并HSV感染的发生率及临床特征做一综述,以提高临床医生对该病的认识并为诊治提供依据。     

COVID-19 infection and vaccines: potential triggers of Herpesviridae reactivation

Since the onset of the COVID-19 outbreak, numerous articles have highlighted a possible link between COVID-19 vaccination or infection and Herpesviridae co-infection or reactivation. The authors conducted an exhaustive literature review on this topic, the results of which are presented individually for each member of the Herpesviridae family: Herpes Simplex Virus (HSV) types-1 (HSV-1) and 2 (HSV-2); Varicella-Zoster Virus (VZV); Epstein-Barr Virus (EBV); Cytomegalovirus (CMV); HHV-6; HHV-7; and HHV-8. These human herpesviruses can serve as prognostic markers for the COVID-19 infection and may even underlie some of the clinical manifestations initially attributed to SARS-CoV-2. In addition to SARS-CoV-2 infection, all corresponding vaccines approved to date in Europe appear capable of inducing herpesvirus reactivation. It is important to consider all viruses of the Herpesviridae family when managing patients infected with or recently vaccinated against COVID-19.     

皮肤淋巴瘤与EB病毒潜伏感染的关系及病毒亚型的分析

目的 探讨EB病毒潜伏感染及其亚型与皮肤淋巴瘤的相关性.方法 标本来源于41例淋巴瘤患者的皮肤组织和38例健康成人咽部洗漱液.采用原位杂交、PCR、巢式PCR、Southern杂交方法检测EB病毒及其亚型.通过Southern杂交对5例自然杀伤/T细胞淋巴瘤病例中EB病毒末端重复序列进行分析.结果 8例自然杀伤/T细胞淋巴瘤、4例皮下脂膜炎型淋巴瘤、1例自然杀伤/T淋巴细胞增生症、1例血管免疫母细胞恶性淋巴瘤和1例组织细胞样淋巴瘤EB病毒原位杂交和PCR结果均阳性.38例正常人中有14例咽部携带有EB病毒.15例蕈样肉芽肿、5例Sézary综合征病例中,EB病毒原位杂交和EB病毒BMRF1基因PCR扩增均为阴性.除1例淋巴细胞增生症患者为EB病毒亚型1和2双重感染外,其它病例均为亚型1感染.正常人群咽部携带亚型1EB病毒.5例自然杀伤/T细胞淋巴瘤与EB病毒末端重复序列特异性探针杂交后,均只产生一条杂交带.结论 EB病毒潜伏感染与皮肤自然杀伤/T细胞淋巴瘤及皮下脂膜炎型淋巴瘤相关,但与蕈样肉芽肿和Sézary综合征无明显相关性.肿瘤细胞中的EB病毒与正常人群咽部所携带的病毒亚型相同,均为亚型1.肿瘤细胞单克隆增殖发生于EB病毒感染之后,此结论支持EB病毒在自然杀伤/T细胞淋巴瘤中的致病作用.     

EB病毒感染相关的皮肤淋巴增殖性疾病二例

目的 报道EB病毒感染相关的皮肤淋巴增殖性疾病2例及其与慢性活动性EB病毒感染的关系。方法 分析2例皮肤淋巴增殖性疾病患者的临床资料、实验室检查、治疗和转归。结果 2例患者均有间断性发热,淋巴结肿大,反复发作的丘疹、丘疱疹、坏死、痘疮样瘢痕,皮疹分布于曝光和非曝光部位。皮损组织病理示真皮内淋巴样细胞浸润,细胞形态异形,侵犯血管周围及部分皮下组织。免疫组化显示浸润细胞以CD8+细胞为主;T细胞受体γ基因（TCRγ基因）阴性;EB病毒原位杂交阳性。外周血EB病毒DNA拷贝数高于正常。糖皮质激素治疗后病情缓解。结论 2例皮肤淋巴增殖性疾病的生物学行为呈慢性惰性经过,与慢性活动性EB病毒感染密切相关。     

药疹患者人类疱疹病毒7型感染的检测

目的 探讨人类疱疹病毒7型（HHV-7）感染在药疹发病中的作用。 方法 收集50例药疹患者（其中重型药疹15例）及50例健康人外周血,采用PCR检测外周血单一核细胞中HHV-7 DNA特异性片段;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清HHV-7 IgM水平。 结果 50例药疹患者HHV-7 DNA阳性率（82.00%,41例）高于健康对照组（62.00%,31例）,两组差异有统计学意义（χ2 = 4.96,P < 0.05）;重型药疹患者（93.33%,14/15）、轻型药疹患者（77.14%,27/35）及健康对照组HHV-7 DNA阳性率差异有统计学意义（χ2 = 6.32,P < 0.05）,其中重型组高于对照组（q = 3.50,P < 0.05）;重型药疹患者急性期与恢复期HHV-7 DNA阳性率差异无统计学意义（P > 0.05）。药疹患者HHV-7 IgM水平（69.3190 ± 25.2897 ng/L）高于健康对照组（59.7853 ± 22.4382 ng/L,t = 1.99,P < 0.05）;轻型药疹（65.4791 ± 21.3261 ng/L）、重型药疹（74.3407 ± 31.4112 ng/L）及健康对照组间差异均无统计学意义（均P > 0.05）。HHV-7 DNA阳性与阴性药疹患者HHV-7特异性IgM水平（分别为63.7481 ± 27.2391 ng/L、65.5802 ± 36.2584 ng/L）差异无统计学意义（P > 0.05）。 结论 药疹患者中存在HHV-7活动性感染,HHV-7感染可能是药疹发病或加重的因素。     

武汉地区水痘带状疱疹病毒基因型分析

目的 探讨武汉地区水痘带状疱疹病毒流行的主要基因型。方法 收集96例水痘、带状疱疹患者皮损标本。采用煮沸、冻融方法提取标本中的DNA。多重PCR扩增水痘带状疱疹病毒ORF22、38、54,并测序。用ClustalW软件比对和Primer premier 5软件酶切位点分析核酸序列。结果 多重PCR检测水痘、带状疱疹患者皮损标本阳性率为81.3%（78/96）。与Dumas序列进行对比,78份阳性标本ORF22在37902、38055、38081、38177存在点突变,符合基因型J型特点。ORF38和 ORF54分别存在PstI和BglI酶切位点。结论 武汉地区水痘带状疱疹病毒流行的主要基因型为J型、ORF38 （PstI+） 和 ORF54 （BglI+）。     

天疱疮或大疱性类天疱疮合并单纯疱疹病毒感染8例临床特征及治疗分析

目的回顾分析天疱疮/大疱性类天疱疮(BP)合并单纯疱疹病毒(HSV)感染的临床特征及治疗方法。方法回顾分析2016—2021年在武汉市第一医院住院治疗的天疱疮/BP合并HSV感染病例的临床特征及治疗和随访情况。结果 8例天疱疮/BP合并HSV感染患者中, 男2例, 女6例, 年龄(50.6 ± 8.3)岁, 包括5例寻常型天疱疮, 1例落叶型天疱疮, 2例BP。7例合并HSV-1感染, 1例合并HSV-2感染。8例均因天疱疮或BP接受系统糖皮质激素及免疫抑制剂治疗, 并对治疗抵抗入院, 其中7例表现为原发病灶加重或复发, 1例表现为全身皮损增加。HSV感染位于躯干4例, 口腔4例, 头皮3例, 面部2例。皮疹表现为不规则的糜烂面, 伴血痂, 部分为中央有脐凹的脓疱, 7例伴有皮疹处明显疼痛。发生HSV感染时, 6例天疱疮患者抗Dsg1抗体均下降, 5例寻常型天疱疮中4例抗Dsg3抗体下降;2例BP患者中1例抗BP180抗体降低, 1例升高。予足量足疗程抗病毒治疗(伐昔洛韦或更昔洛韦治疗7 ～ 14 d), 所有患者HSV感染均被控制, 自身免疫性大疱性皮肤病严重程度评分较抗病毒治疗前均...     

Epstein-Barr病毒感染与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的探讨Epstein-Barr病毒(EBV)感染在系统性红斑狼疮(SLE)病因学中的作用以及EBV活动性感染与疾病活动期的关系。方法PCR技术检测85例SLE患者和43例正常人外周血单一核细胞中EBVDNA,采用巢式PCR(Nested-PCR)技术检测EBVDNA阳性标本EBV增殖期基因BZLF1mRNA的表达,ELISA法检测血清EBV特异性IgM抗体。结果SLE患者组EBVDNA阳性率明显高于对照组(P<0.05),EBV即刻早期基因BZLF1mRNA的表达在SLE患者组与对照组中阳性率差异无显著性(P>0.05),ELISA法检测血清EBV特异性IgM抗体,SLE患者组阳性率高于对照组(P<0.05)。结论SLE患者EBVDNA阳性率高于正常对照组,部分SLE患者存在EBV活动性感染,EBV感染可能与SLE的发生发展有关。