重组人GM-CSF／IL-3融合蛋白(G3)的分离纯化

Ｇ３是由基因工程技术构建、在大肠杆菌中高效表达获得的由ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３组成的融合蛋白,能刺激造血细胞的增殖、分化和调节免疫应答。Ｇ３的生物学活性与ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３相比有明显提高［１］。本文用抗Ｇ３单抗（ＭＧ３１）分别与ＣＮ－Ｂｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ和ｒＰｒｏｔｅｉｎＡ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ偶联制备免疫亲和色谱（ＩＡＣ）柱,对Ｇ３进行纯化,取得了满意的结果。１　材料和方法１．１　ＭＧ３１单抗［２］的纯化　饱和硫酸铵溶液沉淀法。１．２　ＭＧ３１－ＣＮＢｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱（…     

转化生长因子、碱性纤维细胞生长因子、在胃肠道癌组织的表达

一、材料和方法１促血管内皮细胞生长因子的抗体：兔抗转化生长因子（ＴＧＦβ３）和碱性纤维细胞生长因子（ＢＦＧＦ）均由美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司供应。２组织来源：１３例胃癌，１６例肠癌和１９例肝癌组织均为手术切除标本，正常胃（５例），肠（３例）及...     

低丙种球蛋白血症病人PBMCs能产生BCGF和BCDF

低丙种球蛋白血症病人ＰＢＭＣｓ能产生ＢＣＧＦ和ＢＣＤＦ［英］／ＤａｖｉｄＳ…／／ＪＡｌｌｅｒＣｌｉｎＩｍｍｕ．－１９９４：９３（１）．－１２７～１３５正常Ｂ淋巴细胞的成熟要经过增殖期和分化期。两时期都受免疫细胞释放的ＢＣＧＦ（Ｂ细胞生长因子）和ＢＣＤ...     

食管癌患者血清血管内皮生长因子水平的初步研究

血管内皮生长因子（Ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）是新近被证实和鉴定在肿瘤血管发生中起重要作用的内源性血管发生因子,ＶＥＧＦ在乳腺癌等肿瘤组织中的表达提示可作为独立的预后因素［１］。但是,有关肿瘤患者血清中ＶＥＧＦ变化的研究报道甚少。本文应用ＥＬＩＳＡ方法对食管癌患者血清中的ＶＥＧＦ水平进行了初步研究。１　材料与方法１．１　材料　收集食管癌３８例,其中男性２２例,女性１６例,年龄区间为３９～７２岁,平均年龄５８．２岁。所有食管癌患者术前均未进行化疗和放疗…     

血栓素A2、肿瘤坏死因子和地塞米松对兔气道平滑肌细胞增殖的影响

目的：探讨血栓素Ａ２（ＴＸＡ２）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）、地塞米松（Ｄｅｘ）对气管平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）增生的影响。方法：［３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法及细胞计数检测上述因素作用下体外培养ＡＳＭＣ增生过程。结果：ＴＸＡ２可刺激ＡＳＭＣ增生,ＴＮＦ－α能抑制ＴＸＡ２的促增生作用,Ｄｅｘ又可使ＴＮＦ－α的抑增生作用消失。结论：ＴＸＡ２、ＴＮＦ－α在ＡＳＭＣ增生中起重要作用,Ｄｅｘ在治疗哮喘过程中,有可能加重ＡＳＭＣ的增生。     

GM-CSF、sICAM- 1 和 TGF-β_1在哮喘中的意义

本文测定了支气管哮喘患者血及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ）、细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）、转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）水平,探讨其在哮喘中的意义。１　材料及方法１１　对象　哮喘患者１３例,男８例,女５例,年龄２１～５２岁（３４１岁±９９岁）,诊断符合标准［１］,均处轻、中度发作期,既往有过敏史,就诊前３ｄ内未用过糖皮质激素,４８ｈ内未用茶碱类。健康对照组１０例,男７例,女３例,年龄２２～５７岁（３３７岁±１１８岁）,胸片及ＣＴ无异常…     

自身免疫病患者血清TGF-β1的研究

转化生长因子β（ＴＧＦβ１）为多效能生长因子,在人体已发现有三种异构体形式（ＴＧＦβ１,２,３）,有刺激［１］和抑制［２,３］双重生物功能。可刺激细胞外基质（ＥＣＭ）的分泌,调节细胞生长分化,趋化巨噬细胞和成纤维细胞,促进血管生成,从而在创伤修复...     

肝细胞癌组织中转化生长因子α表达及其与乙型肝炎病毒感染的 …

目的 研究肝细胞（ＨＣＣ）中转化生长因子α（ＴＧＦα）的表达及其与ＨＢＶ感染的关系。方法 应用原位杂交及免疫组化ＳＰ法对５３例ＨＣＣ及１４例正常肝组织吕ＴＧＦαｍＲＮＡ、ＴＧＦα蛋白、ＨＢＶ ＤＮＡ进行检测。结果 ５３例ＨＣＣ组织中ＴＧＦαｍＲＮＡ、ＴＧＦα蛋白的阳性率分别为３０．２％（１６例）、７３．６％（３９例）,显著高于无表达的正常对照组（Ｐ〈０．０５）。癌旁不典型增生肝细胞组ＴＧＦαｍＲＮ     

急性代谢性酸中毒时CSFpCO2在CSF酸碱调节中的作用

本文旨在探讨急性代酸时ＣＳＦｐＣＯ＿２在ＣＳＦ酸碱调节中的作用及其机制。４组急性代酸犬模型均由静脉内输入０．２ＮＨＣｌ产生，血浆［ＨＣＯ＿３－］ｌｈ内下降到１２±２ｍｍｏｌ／Ｌ，实验持续６ｈ。Ⅰ组控制ＰａＣＯ＿２常，６ｈ时ＣＳＦ［ＨＣＯ＿３－］下降了１．１ｍｍｏｌ／Ｌ；Ⅱ组自然呼吸，ＣＳＦｐＣＯ＿２伴随ＰａＣＯ＿２下降，６ｈ时ＣＳＦ［ＨＣＯ＿３－］下降了６．５ｍｍｏｌ／Ｌ；Ⅲ组机械通气，ＰａＣＯ＿２和ＣＳＦｐＣＯ２均迅速下降，６ｈ时ＣＳＦ［ＨＣＯ＿３－］下降了８．２ｍｍｏｌ／Ｌ；Ⅳ组控制ＰａＣＯ＿２正常，脑室注入乙酰唑胺，６ｈ时ＣＳＦ［ＨＣＯ＿３－］下降了１１．４ｍｍｏｌ／Ｌ。结果说明急性代酸时．ＣＳＦ［ＨＣＯ＿３－］取决于ＣＳＦｐＣＯ＿２。ＣＳＦＨＣＯ＿３－主要来源于ＣＮＳＣＯ＿２的水化作用，与ＣＡ活性显著相关。     

微丝重组对细胞增值作用的研究

用罗丹明－鬼笔环肽（ｒｈｏｄａｍｉｎｅ－ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ）显示微丝（ｍｉｃｒｏｆｉｌａｍｅｎｔｓ，ＭＦ）的荧光染色法对Ｇ期小鼠Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２成纤维细胞向Ｓ期过渡过程中，ＭＦ结构的变化及ＭＦ重组对ＤＮＡ合成的影响进行了研究，Ｇ期细胞在血清刺激１ｈ后ＭＦ解聚，３ｈ后重新组装，并恢复原来的分布。我们发现细胞松弛素Ｂ（ｃｙｔｏｃｈａｌａｓｉｎＢ，ＣＢ）使ＭＦ解聚并与蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ，ＰＫＣ）激活剂──佛波酯（ｐｈｏｒｂｏｌｅｓｔｅｒ，ＴＰＡ）同样可促进Ｇ期细胞提前进入Ｓ期，促进ＤＮＡ合成，但ＴＰＡ和ＣＢ的刺激作用必需依赖于血清的存在，而ＰＫＣ抑制剂Ｈ７则阻断Ｇ期细胞进入Ｓ期，ＭＦ稳定剂ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ对ＤＮＡ合成具有一定的抑制作用，实验结果表明，Ｇ期细胞向Ｓ期过渡的早期阶段存在ＭＦ重组过程，ＣＢ促使Ｇ细胞ＭＦ解聚并可促进ＤＮＡ合成，提示ＭＦ重组是Ｇ期细胞向Ｓ期过渡的一个重要的早期事件。     

肿瘤碱性蛋白单克隆抗体免疫学特性的研究及其应用

应用淋巴细胞杂交瘤技术，建立了４株抗人血清肿瘤碱性蛋白（Ｔｕｍｏｕｒｂａｓｉｃｐｒｏ－ｔｅｉｎ，ＴＢＰ）杂交瘤细胞株（１Ｃ３、４Ｆ４、５Ｆ４、３Ｇ９），并以制备的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）对其抗原决定簇及免疫学特性进行了分析。Ｉｇ亚类测定：均为ＩｇＧ２ａ，腹水效价为１×１０－６～１×１０－８。特异性测定：ＴＢＰＭｃＡｂ与ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ和Ａｌｂ无交叉反应。单抗相加试验证实：５Ｆ４、４Ｆ４和１Ｃ３为识别ＴＢＰ上同一抗原决定簇，３Ｇ９则为识别ＴＢＰ上另一抗原决定簇。分别利用单株和混合株ＭｃＡｂ标酶建立了可应用于人血清ＴＢＰ含量测定的ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法，并用于人血清ＴＢＰ含量测定。     

内皮素对成年鼠离体心室肌细胞内游离钙浓度的影响及机制

目的和方法：采用分离的Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠心室肌细胞,以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光指示剂负载,检测心肌细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）变化,探讨内皮素－１（ＥＴ－１）对［Ｃａ２＋］ｉ的作用及其机制。结果：ＥＴ－１（１×１０－７ｍｏｌ／Ｌ）引起［Ｃａ２＋］ｉ升高分两个时相：快速相和持续相,可被ＥＴＡ的特异性受体阻断剂ＢＱ１２３（２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ）所阻断。移去细胞外液钙以及用百日咳毒素（２００ｎｇ／ｍＬ）处理１０ｈ后,ＥＴ－１仍引起快速相,但持续相消失。Ｒｙａｎｏｄｉｎｅ（４μｍｏｌ／Ｌ）和异搏定（２×１０－５ｍｏｌ／Ｌ）对ＥＴ－１诱导［Ｃａ２＋］ｉ升高的作用无显著影响。结论：ＥＴ－１升高［Ｃａ２＋］ｉ是通过ＥＴＡ受体介导;快速相［Ｃａ２＋］ｉ升高主要由胞内Ｒｙａｎｏｄｉｎｅ不敏感的钙池释放造成,与百日咳毒素敏感的Ｇ蛋白无关;持续相［Ｃａ２＋］ｉ升高主要由胞外Ｃａ２＋内流引起,不是通过电压依赖性Ｌ－型钙通道介导,与百日咳毒素敏感的Ｇ蛋白有关     

手持式γ探测仪对荷人结肠癌裸鼠放射免疫定位研究

本文以手持式γ探测仪对荷人结肠癌细胞系Ｌｓ１７４Ｔ裸鼠进行体表放射免疫探测，为临床应用放射免疫引导外科手术（ＲＩＧＳ）提供了依据。以人结肠癌细胞系Ｌｓ１７４Ｔ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠制备ＭｃＡｂＣＬ－３，胃蛋白酶消化法制备ＣＬ－３Ｆ（ａｈ′）２片段，Ｉｏｄｏｓｅｎ法以１２５Ｉ标记ＣＬ－３及其Ｆ（ａｂ′）２。两组荷瘤裸鼠注射标记物后分别于２４、４８、７２、９６、１２０、１４４和１６８ｈ以手持式γ探测仪（ＨＨＧＤ－Ｉ型）进行体表探测，测定Ｔ／Ｎ比值。１２５ＩＣＬ－３组Ｔ／Ｎ比值在１．２２～３．７９之间，第１６８小时最高；１２５ＩＣＬ－３Ｆ（ａｂ′）２组Ｔ／Ｎ比值在２．０～４．５之间，第７２～１４４小时最高。结果表明，荷瘤裸鼠腹注腔射１２５ＩＣＬ－３及１２５ＩＣＬ－３Ｆ（ａｂ′）２后标记物能特异性地浓集于肿瘤组织，以手持式γ探测仪进行体表探测Ｔ／Ｎ比值有明显意义，能明确定位肿瘤。Ｆ（ａｂ′）２用于ＲＩＧＳ裸鼠实验效果优于完整抗体。     

支气管哮喘患者血小板CD62p、CD63变化观察

血小板因子４（ＰＦ４）为血小板特异性蛋白，当血小板活化后由血小板释放。有研究发现哮喘试验动物的肺泡灌洗液中ＰＦ４及βＴＧ水平升高［１］。我们用流式细胞方法测定了ＣＤ６２ｐ、ＣＤ６３在哮喘患者血小板表面的表达和血浆ＰＦ４水平变化，以探讨血小板在哮喘发病中的作用。１　对象和方法１－１　研究对象　发作期的哮喘者２６例，男１４例，女１２例，年龄１９～４８岁，平均３６－３岁。缓解期１５例，男９例，女６例，年龄２２～４９岁，平均３７－２岁。所有病例均符合制订的诊断标准［２］。对照组１６例，男８例，女８例，…     

血小板衍生生长因子及其受体与病毒性肝炎肝纤维化的关系

目的研究血小板衍生生长因子在病毒性肝炎肝纤维化中的作用。方法以免疫组化技术检测血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）－ＢＢ以及ＰＤＧＦ的β受体（ＰＤＧＦＲ－β）在病毒性肝炎肝组织中的表达。结果ＰＤＧＦ－ＢＢ及ＰＤＧＦＲ－β在肝组织中的表达与肝纤维化程度明显相关，肝硬变及慢性肝炎Ｓ３～４期患者肝组织ＰＤＧＦ－ＢＢ及ＰＤＧＦＲ－β表达强度明显高于急性肝炎及慢性肝炎Ｓ０～２期患者，同时与结蛋白、Ⅲ型前胶原肽在肝组织中的表达以及血清金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ－１）呈明显正相关。结论ＰＤＧＦ－ＢＢ及ＰＤＧＦＲ－β不仅对星状细胞的活化、分裂、增殖及其合成胶原等细胞外基质（ＥＣＭ）均有明显的促进作用，而且可能通过上调ＴＩＭＰ－１减少ＥＣＭ的降解，促进肝纤维化的发生和进展过程。     

血清CYFRA21-1在肺癌诊断中的应用

近年来 ,对肺癌肿瘤标志物的研究和应用较多 ,细胞角蛋白在组织学和肿瘤病理学中的作用已受到重视。早在１９９２年 ,Ｂｏｄｅｎｍｕｌｌｅｒ［１］等建立了血清ＣＹＥＲＡ２１ -１的ＥＬＩＳＡ方法。目前 ,国外已普遍采用ＣＹＦＲＡ２１ -１ＩＲＭＡ检测肺癌 ,可明显提高肺癌诊断的阳性率［２］。本文测定了１２５例肺癌病人血清ＣＹＦＲＡ２１ -１含量 ,并按组织学分类及临床分期进行比较 ,同时观察２２例阳性肺癌病人放、化疗前后ＣＹＦＲＡ２１-１水平的变化。对象和方法一、对象 :（一）正常对照组 :３０例（男１５ ,女１５） ,年龄２…     

大鼠急性肺损伤时外周血和肺灌洗液中几种炎症介质浓度的动态变化

体外研究表明，肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）［１－２］、白细胞介素１β（ＩＬ－１β）［３］、白细胞介素６（ＩＬ－６）［４］、粒细胞－巨嗜细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）［５］、粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）［６］等炎性细胞因子，可延迟中性粒细胞（ＰＭＮ）凋亡。本实验着重研究肺灌洗液和循环血中ＴＮＦ、ＩＬ－１β和ＩＬ－６含量的变化，以及内源性抗炎因子—可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅰ、Ⅱ（ｓＴＮＦＲⅠ、Ⅱ）的动态变化及规律，以探索上述细胞因子浓度的变化与ＰＭＮ凋亡、过度炎症反应、继发性肺组织损伤之间的内在关系。…     

健康老年男性血清胰岛素样生长因子-1水平的IRMA

胰岛素样生长因子－１（Ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔａｒ，ＩＧＦ－１）在基础研究和临床应用中有重要价值。它在循环中含量丰富。在肿瘤的病理生理过程［１］、糖尿病［２］、大脑局部缺血［３］、骨质疏松［４］以及肾脏疾病［５］中起作用，国内这方面的研究很少，我们对１０９例５１－９１岁健康老年男性进行了ＩＧＦ－１水平ＩＲＭＡ，以便在系统研究中提供正常对照参考。现报告如下。 对象和方法 一、对象：男性。来自广州企事业单位健康体检人员及离退休干部，共１０９人，年龄５１－９１岁（平均６９岁），符…     

巨噬细胞型骨髓基质细胞对肿瘤抗原提呈的体外实验研究

目的　探讨骨髓基质细胞对肿瘤抗原的提呈功能。方法　小鼠骨髓贴壁细胞经 Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ 诱导,形成以成熟巨噬细胞为主的基质细胞,用小鼠红白血病细胞 Ｆ Ｂ Ｌ３ 肿瘤抗原刺激,然后再与 Ｆ Ｂ Ｌ３ 肿瘤抗原致敏的 Ｔ 淋巴细胞混合培养。结果　骨髓基质细胞经 Ｆ Ｂ Ｌ３ 肿瘤抗原刺激后, Ｔ Ｎ Ｆα和 Ｉ Ｌ１β的分泌水平明显升高,经抗原预激的骨髓基质细胞能特异性地刺激同种抗原致敏的 Ｔ 淋巴细胞增殖和分泌高水平的 Ｉ Ｌ２ 。单抗阻断试验发现, Ｍ Ｈ ＣⅡ类分子和 Ｂ７２ 分子的联合阻断能有效地抑制致敏 Ｔ 淋巴细胞分泌 Ｉ Ｌ２ 。结论　本实验证实骨髓基质细胞具有抗原提呈功能, Ｍ Ｈ ＣⅡ类分子和 Ｂ７２ 分子在其抗原提呈中发挥了重要作用。     

原发性肝癌患者红细胞免疫和T细胞亚群的变化及相关性分析

８０年代初,Ｓｉｅｇｅｌ［１］提出红细胞免疫的概念,引起国内外有关学者的关注。红细胞不仅参与呼吸功能,而且具有清除循环免疫复合物,增强Ｔ细胞反应等多种免疫功能。此外,红细胞在肿瘤患者免疫方面亦发挥着重要的作用［２］。我们测定了５９例原发性肝癌患者红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ）、红细胞免疫复合物花环率（ＲＢＣ－ＩＣＲ）及Ｔ细胞亚群,以探讨患者红细胞免疫功能和淋巴细胞免疫功能的变化以及两者间的相互关系。１材料和方法１．１材料５９例原发性肝癌病例均为本院住院患者,其中男４９例,女１０例,…