疟疾疫苗研究的现状和展望

疟原虫抗药性及疟蚊对杀虫剂抗性的产生和迅速扩散迫切需要研究新的疟疾防治方法,以控制该传染病的流行.根据自愿者试验、动物模型及现场研究结果,研制疫苗预防疟疾是可行的.当前,全球科学家正在研制3种类型的疟疾疫苗--抗红内期原虫疫苗、抗红前期原虫疫苗和传播阻断疫苗,其中一些候选疫苗已进入临床试验,并产生有意义的结果.由于疟原虫具有复杂的生活史、抗原变异和多种入侵途径,有效疫苗的研制将面临极大的困难,但是这种疫苗终究能够研制成功.     

疟疾疫苗抗原研究进展

疟疾疫苗抗原研究进展人体寄生虫学教研室王星，徐大为关键词疟疾，疫苗抗原，抗原结构，基因结构疟疾目前仍是严重威胁热带地区和第三世界国家的寄生虫病，近年来因疟原虫抗药性和蚊媒耐药物的产生与蔓延，促使科学家们重新考虑研制安全有效的疫苗来控制乃至彻底消灭疟疾...     

鼠疟原虫(Plasmodium yoelii yoelii)早期孢子增殖的体外培养

<正> 制备疟疾疫苗,进行疟疾有效免疫,以达到控制疟疾感染和流行,是当今防疟中期待解决的课题。体外培养疟原虫,做为疟疾抗原的来源,被认为系最好途径。许多学者设想在体外建立疟原虫孢子增殖期培养系统,试图获得由配子体发育成有免疫原性的子孢子,用以制备子孢子疫苗。为此,国内外对猴疟、鸟疟和鼠疟等动物疟原虫进行了许多研究。     

间日疟原虫多表位疫苗基因的设计、合成与酵母表达

目的针对疟原虫生活史复杂,蛋白种类多且具有期特异性,逃避宿主免疫机制健全,流行广泛等特点,构建间日疟多期多阶段多表位疫苗候选株。方法根据文献报道筛选间日疟有效保护性抗原表位,利用计算机模建技术进行组合、排列,演绎多表位肽基因,人工合成基因,构建酵母表达系统,甲醇诱导表达多表位肽。结果以间日疟原虫3个PvCSPT表位、1个PvCSPB细胞表位、2个PvMSP-19B细胞表位、2个PvDBP-Ⅱ保守序列、1个PvAMAB细胞表位和1个PvAMAT细胞表位,加入白喉毒素T细胞表位和Pan-DRTh细胞表位肽,设计合成了一条由786bp组成的间日疟原虫多表位肽疫苗基因(PvDBW);利用G418压力筛选得到多个高拷贝pPIC9K/PvDBW/P.pastoris菌株;用甲醇诱导后表位肽呈分泌性表达,表达量为80mg/L。结论成功地构建了间日疟原虫多期多阶段多表位疫苗pPIC9K/PvDBW/P.pastoris菌株,得到了分泌性表达的多表位肽,为探索间日疟原虫多期、多表位疫苗的可行性奠定了物质基础。     

恶性疟MSP-2、CSP多价DNA疫苗免疫小鼠应答类型研究

目的：探讨恶性疟原虫FCC-1/HN株裂殖子表面蛋白-2(MPS-2)和环子孢子蛋白(CSP)组成的DNA多价疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答的特性及抗感染的保护性免疫机制。方法：将重组真核表达质粒pBK/CSP和pBK/MSP-2经骨骼肌注射BALB/c小鼠，小鼠经多价疫苗免疫8wk后，用流式细胞仪分析脾脏T淋巴细胞的分化，并体外培养脾脏细胞，用夹心ELISA法测定IFN-γ和IL-2的产生；用血清学方法测定免疫鼠IgG抗体的动态变化。结果：与对照组相比，疫苗组CD^4 cd^8 淋巴细胞有显的增高，体外培养的脾脏细胞IFN-γ有一个高浓度的分泌。同时，免疫鼠血清对疟原虫抗原都表现了一个较高水平的IgG类抗体反应。结论：恶性疟原虫FCC-1/HN，pBK/MSP-2和pBK/CSP多价疫苗诱导了一个以细胞免疫为主的免疫应答类型。     

疟疾基因工程疫苗的研究Ⅱ．恶性疟保护性抗原复合基因的串接与克隆

将人工合成的恶性疟原虫４５肽抗原基因ＨＰＦＡ和７５肽抗原基因ＨＧＦＣ分别从克隆载体上切下，经过一系列的串接和克隆，筛选出含有ＨＧＦＣ－ＨＰＦＡ－ＨＧＦＣ三连体基因（ＨＧＦＣＡＣ）的重组克隆，经酶切鉴定和ＤＮＡ序列分析证实基因序列与设计一致。该三连体基因含有起始和终止密码，编码一个１９３肽的复合抗原。多连体基因串接与克隆的成功，在基因水平上实现了复合抗原的多聚，从而为进一步研究疟疾多价疫苗的结构和功能提供了条件。     

日本血吸虫多价DNA疫苗pBK—Sj26（Sj32）—Sj23免疫效果的观察

为了观察血吸虫病多价DNA疫苗的保护力,将小鼠分成5组：空白对照组、空质粒对照组、单价抗原DNA疫苗pBK-CMV-Sj23组、多价抗原DNA疫苗pBK-CMV-Sj26-Sj23和pBK-CMV-Sj32-Sj32组。大量提取各组质粒DNA后,各组于0、3、5周在BALB／c小鼠股四头肌注射相应质粒DNA,9周用血吸虫尾蚴攻击感染,15周剖杀小鼠计算减虫率及减卵率。结果显示：与对照组比较,实验组小鼠减虫率及减卵率及极显著性差异（P＜0.01）;与单价pBK-CMV-Sj23组比较,多价DNA疫苗组的减虫率及减卵率有显著性差异,提示血吸虫多价DNA疫苗诱导小鼠对血吸虫的保护力优于单价DNA疫苗。     

日本血吸虫多价DNA疫苗pBK-Sj26(Sj32)-Sj23免疫效果的观察

为了观察血吸虫病多价DNA疫苗的保护力,将小鼠分成5组空白对照组、空质粒对照组、单价抗原DNA疫苗pBK-CMV-Sj23组、多价抗原DNA疫苗pBK-CMV-Sj26-Sj23和pBK-CMV-Sj32-Sj23组.大量提取各组质粒DNA后,各组于0、3、5周在BALB/c小鼠股四头肌注射相应质粒DNA,9周用血吸虫尾蚴攻击感染,15周剖杀小鼠计算减虫率及减卵率.结果显示与对照组比较,实验组小鼠减虫率及减卵率有极显著性差异(P<0.01);与单价pBK-CMV-Sj23组比较,多价DNA疫苗组的减虫率及减卵率有显著性差异.提示血吸虫多价DNA疫苗诱导小鼠对血吸虫的保护力优于单价DNA疫苗.     

以小鼠精子/睾丸特异性抗原为基础的合成肽免疫避孕效应研究

目的：研制以精子/睾丸特异性抗原为基础的多价嵌合肽避孕疫苗。方法：选择小鼠精子/睾丸特异性抗原Sp17、Gy-ritestin作为对象，采用分子设计的方法与外源性牛核糖核酸酶非选择性T细胞表位组合合成新型嵌合肽-35肽，并对其免疫效应进行研究。结果：该嵌合肽可刺激小鼠产生较高效价的血清和阴道粘膜特异性抗体，诱导脾脏淋巴细胞增殖，促进细胞因子IL-4的分泌；将其与佛氏佐剂混悬，免疫雌性BALB/c小鼠可明显降低受孕率和每胎产仔率，其抗血清可显著抑制体外精-卵结合和融合。结论：新型嵌合肽具有较明确的抗生育作用，提示以分子设计、蛋白质优化方案进行多价避孕疫苗的研究是可行的。     

一种恶性疟原虫多价重组疫苗的体液免疫反应研究

一种恶性疟原虫多价重组疫苗的体液免疫反应研究陈白虹，缪军，薛采芳，毕惠祥，李英杰（寄生虫学教研室西安７１００３３第一军医大学疟疾免疫学研究室）关键词恶性疟原虫；重组疫苗；ＥＬＩＳＡ中图号Ｒ３８２．３１自杂合肽ＳＰｆ６６在猴和人体内试验中取得了初步的成...