小檗碱对产β-内酰胺酶的革兰阴性分离菌株的抑制作用研究

从感染性疾病患者标本中分离并提纯产β-内酰胺酶病原菌,用琼脂稀释法检测小檗碱对产β-内酰胺酶阴性杆菌的最低抑菌浓度。共分离出产β-内酰胺酶的G-杆菌59株,其中产β-内酰胺酶大肠埃希菌29株,有16株MIC为浓度62.5g/L小檗碱;产β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌有14株,有8株MIC为浓度31.25g/L小檗碱;产β-内酰胺酶铜绿假单胞菌12株,有7株MIC为浓度60.25g/L小檗碱。浓度为500g/L和15.62g/L的小檗碱对产β-内酰胺酶分离菌基本上无抑制作用。产β-内酰胺酶的G-杆菌是在感染疾病中比较常见的病原菌,不同浓度的小檗碱有不同程度的抗菌作用,其中以浓度为31.25g/L和60.25g/L的小檗碱作用最强,应加大对此类中药的研究,为临床开发新一代抗菌药物打下基础。     

小檗碱对外科术后产AmpC酶分离菌株的抑菌作用

目的：了解外科术后感染的病原菌分布情况并探讨小檗碱对产AmpC酶术后感染分离菌株的抗菌作用。方法从术后感染病人中分离出产AmpC酶细菌,并采用琼脂对倍稀释法、肉汤稀释法分别检测小檗碱对产AmpC酶三种分离菌株的最低抑菌作用。结果共分离出G-杆菌225株,其中产AmpC酶大肠埃希菌46株,有27株MIC为浓度31.25g/l小檗碱;高产AmpC酶肺炎克雷伯菌有26株,有13株MIC为浓度31.25g/l小檗碱;产AmpC铜绿假单胞菌21株,有12株MIC为浓度60.25g/l小檗碱。浓度为15.62g/L小檗碱对产AmpC酶分离菌基本上无抑制作用。G＋的病原菌有170株,其中金黄色葡萄球菌94例,表皮葡萄球菌36例,真菌27例。结论产AmpC酶的G-杆菌在术后感染中较为常见,而小檗碱对产AmpC酶细菌株有一定的抑菌作用,值得临床上推广应用,以减少滥用抗生素而引起多重耐药的产生。     

产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的筛选和耐药性分析

目的以多重耐药革兰阴性菌为对象,检测β一内酰胺酶表型,了解其耐药特性和分布特点。方法采用纸片扩散初筛法、扩散确证法、头孢西丁三维试验、甘露聚糖结合凝集素（MBL）的协同试验进行确证;采用法国梅里埃API生化鉴定试条或经VITEK一2鉴定系统将细胞鉴定到种;药敏试验用琼脂纸片扩散（K—B）法,经wH0一NET5．0软件进行统计学分析,分析其耐药特性。结果多重耐药革兰阴性杆菌口一内酰胺酶总检出率为26．4％（80／302）,主要由产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）引起,占16．56％（50／302）;其次为ESBLs＋AmpC引起,占6．62％（zo／302）;ESBLs＋AmpC＋MOL引起,占1．66％（5／302）,单独由AmpC引起的仅占0．66％（2／302）,有3株未能定型占0．99％（3／30z）。多重耐药革兰阴性杆菌对临床常用抗生素的总体耐药率最低的为阿米卡星（18．99％）、其次为亚胺培南（20．0％）,头孢哌酮／舒巴坦（21．7％）、哌拉西林／他唑巴坦（21．89％）;最高的为氨苄西林（98．33％）,其次为氨苄西林／舒巴坦（83．33％）、头孢曲松（76．25％）、头孢西丁（63．64％）及头孢噻肟（60．50％）等,大部分细菌呈多重耐药性。结论产多种6-内酰胺酶的革兰阴性菌具有多重耐药。     

革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶及其耐药分子机制的研究

目的分析革兰阴性杆菌所产β-内酰胺酶的表型及基因分型,并研究其耐药分子机制。方法用纸片扩散初筛试验、扩散确证试验进行超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum beta-lactamases,ESBLs）表型检查,头孢西丁三维试验进行AmpCβ-内酰胺酶的表型检查,纸片协同试验筛选产金属β-内酰胺酶（metallo-beta-lactamase,MBL）菌株;用多重PCR技术扩增β-内酰胺酶基因并进行DNA测序;用PCR技术扩增基因元件整合子、插入序列ISEcp1B和转座子tnpU;用MIC药敏法分析革兰阴性杆菌的药物敏感性。结果①革兰阴性杆菌β-内酰胺酶的表型总检出率为24.28%（42/173）,主要由单产ESBLs引起,占13.29%,β-内酰胺酶的基因型总检出率为24.86%;②整合子检出49株占28.32%,ISEcp1B插入序列检出29株占16.76%,转座子tnpU检出28株占16.18%,基因元件阳性的菌株大多数β-内酰胺酶表型为阳性;③β-内酰胺酶阳性菌株对抗生素的耐药率显著高于阴性菌株。结论革兰阴性杆菌可携带多种β-内酰胺酶,基因元件广泛分布于革兰阴性杆菌中,可能在多重耐药机制中起重要作用。     

革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶的状况及其耐药性监测

目的调查产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的革兰阴性杆菌的耐药状况。方法采用确证试验法检测产ESBLs的革兰阴性杆菌。结果187株革兰阴性杆菌中检出ESBLs阳性菌24株，检出率为12．83％；它们对β-内酰胺类抗生素呈现极高的耐药性。结论产ESBLs的革兰阴性杆菌具有极高的耐药性及多重耐药性。检测革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶的状况并探讨它们的耐药谱，有利于指导临床合理使用抗生素。     

革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶的状况及其耐药性监测

目的调查产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的革兰阴性杆菌的耐药状况.方法采用确证试验法检测产ESBLs的革兰阴性杆菌[1].结果187株革兰阴性杆菌中检出ESBLs阳性菌24株,检出率为12.83%;它们对β-内酰胺类抗生素呈现极高的耐药性.结论产ESBLs的革兰阴性杆菌具有极高的耐药性及多重耐药性.检测革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶的状况并探讨它们的耐药谱,有利于指导临床合理使用抗生素.     

高产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌质粒AmpC的检测

目的 了解产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌中质粒AmpC的分布,建立特异,灵敏的质粒AmpC检测方法.方法 利用头孢西丁敏感试验筛选出临床分离革兰阴性杆菌中的产酶菌,再经三维试验筛选出高产酶菌,对高产酶菌进行PCR检测质粒AmpC.结果 531株革兰阴性杆菌中有89株产酶菌,其中高产酶菌分别有17株大肠埃希菌,其质粒AmpC阳性的有5株,阳性率29.4%;11株肺炎克雷伯菌,其质粒AmpC阳性的有3株,阳性率27.3%;7株铜绿假单胞菌,其质粒AmpC阳性的有2株,阳性率28.6%;5株阴沟肠杆菌,其质粒AmpC阳性的有1株,阳性率20%.结论 本院高产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌中质粒AmpC的阳性率比较高,应引起临床的重视,PCR检测方法灵敏,可靠,值得向临床推广使用.     

高产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌质粒AmpC的检测

目的了解产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌中质粒AmpC的分布,建立特异,灵敏的质粒Am-pC检测方法。方法利用头孢西丁敏感试验筛选出临床分离革兰阴性杆菌中的产酶菌,再经三维试验筛选出高产酶菌,对高产酶菌进行PCR检测质粒AmpC。结果531株革兰阴性杆菌中有89株产酶菌,其中高产酶菌分别有17株大肠埃希菌,其质粒AmpC阳性的有5株,阳性率29.4%;11株肺炎克雷伯菌,其质粒AmpC阳性的有3株,阳性率27.3%;7株铜绿假单胞菌,其质粒AmpC阳性的有2株,阳性率28.6%;5株阴沟肠杆菌,其质粒AmpC阳性的有1株,阳性率20%。结论本院高产β-内酰胺酶革兰阴性杆菌中质粒AmpC的阳性率比较高,应引起临床的重视,PCR检测方法灵敏,可靠,值得向临床推广使用。     

产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的检测

目的研究大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药谱。方法收集2002年8月至2003年6月间从嘉善县第一人民医院分离的167株大肠埃希菌、154株肺炎克雷伯菌和67株阴沟肠杆菌，用头孢噻肟或头孢他啶药敏纸片筛选产ESBLs可疑株；用头孢噻肟和头孢噻肟加克拉维酸或头孢他啶和头孢他啶加克拉维酸双纸片扩散法检测ESBLs；采用K-B法进行药敏试验。结果符合CTX筛选标准的有158株，符合CAZ筛选标准的有94株，两者都符合的有76株，共176株产ESBLs可疑株。CTX和CTV／CA双纸片检出115株阳性，CAZ和CAZ／CA双纸片检出62株阳性，两种双纸片法都为阳性的有51株，共检出126株产ESBLs菌株。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的ESBLs检出率分别为30%（50／167）、34％（52／156）和36％（24／67）。产ESBLs株对氨苄西林、阿齐霉素和克林霉素的耐药率近乎100％，对阿米卡星、环丙沙星和呋喃妥因的耐药相对较低，除2株产ESBLs肺炎克雷伯菌耐亚胺培南外，其余均为敏感。结论大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的产ESBLs率较高，耐药性严重。筛选产ESBLs可疑株的最佳纸片为CTX，表型确证产ESBLs菌株的最佳双纸片为CTX和CTX／CA，阴沟肠杆菌的产ESBLs率超过肺炎克伯菌成为主要产ESBLs菌。     

快速筛查革兰阴性杆菌β内酰胺酶

目的应用Cica-Beta-Test试剂盒快速筛查革兰阴性杆菌β内酰胺酶:超广谱β内酰胺酶(ESBILs)、金属β内酰胺酶(MBLs)和染色体介导头孢菌素酶(AmpC酶),为临床抗感染治疗提供耐药依据。方法收集2010年1月至2011年3月上海交通大学医学院附属仁济医院临床分离革兰阴性杆菌共110株,其中头孢噻肟和(或)头孢他啶不敏感大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌各20株,多重耐药鲍曼不动杆菌20株和阴沟肠杆菌30株。其中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌用美国CLSI推荐方法确证产ESBLs;对鲍曼不动杆菌用聚合酶链反应(PCR)法检测其MBLs和AmpC酶耐药基因;对阴沟肠杆菌用表型筛选法(三维试验法)检测其AmpC酶;对所有菌株应用Cica-Beta-Test试剂盒快速筛查ESBLs、MBLs和AmpC酶。根据检测结果对试剂盒进行评估。结果应用Cica-Beta-Test试剂盒检测110株临床分离菌未发现假阳性,确诊试验总符合率为92.0%(92/100),其中与PCR法比较检测MBLs和AmpC酶结果符合率为100%;与CLSI推荐ESBLs双纸片确诊试验比较,符合率为86.7%(52/60)。30株阴沟肠杆菌用AmpC酶表型筛选法比较符合率为86.7%(26/30)。结论 Cica-Beta-Test试剂盒可对各种革兰阴性杆菌产生的β内酰胺酶进行筛查及初步分型,简便、快速,灵敏度高,准确率高,尤其能对CLSI未推荐方法的耐药革兰阴性杆菌进行β内酰胺酶快速筛查意义更大。     

革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶头孢菌素酶状况及耐药性研究

目的了解本院目前常见的革兰阴性杆菌菌种分布及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头孢菌素酶（AmpC）情况,分析产酶菌耐药谱特征。方法用法国生物梅里埃公司的VITEK-2细菌鉴定与药敏系统对革兰阴性杆菌进行鉴定,对可疑产ESBLs、AmpC的菌株,用标准纸片扩散法和三维试验法进行两种酶的表型确证,再用纸片扩散法行药物敏感性检测。结果检出单产ESBLs、单产AmpC、同时产ESBLs和AmpC的细菌分别为175株（43.8%）、54株（13.5%）和28株（7.0%）。ESBLs检出率以肺炎克雷伯菌最高,为60.3%;AmpC检出率在阴沟肠杆菌中最高,为46.7%。单产ESBLs菌株对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦以及哌拉西林/三唑巴坦的敏感性较高,耐药率分别为2.3%、26.3%和33.1%;单产AmpC菌株对亚胺培南和头孢吡肟具有较高的敏感性,耐药率分别为3.7%和29.6%;同时产AmpC和ESBLs的菌株仅对亚胺培南敏感,未发现耐药株。结论革兰阴性杆菌产ES-BLs、AmpC率较高,该类菌对大多数新型广谱β-内酰胺类抗生素耐药,对亚胺培南敏感。     

革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测与思考

[目的]了解肠杆菌科及非发酵菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的携带情况，为临床及时掌握和有效遏制细菌由于ESBLs而导致的耐药性提供实验依据。[方法]细菌的分离按全国临床检验操作规程第2版进行。细菌的鉴定主要采用仪器法（autoscan-4-DADE．U．S．A）。ESBLs的检测采用纸片扩散法初筛和确证，部分菌株辅以E．test法，以保证结果的准确性。[结果]2大类阴性杆菌1462株，产ESBLs的507株，阳性率35％；其中肠杆菌科细菌880株，产ESBLs309株，阳性率42％；此类菌中，大肠埃希菌和弗劳地枸椽酸杆菌产ESBLs最高，都在50％以上；肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌居第2，在45％以上；产酸克雷伯菌位于第3，达30％。非发酵菌523株，产ESBLs的126株，阳性率24％；这类菌中，脑膜炎败血性黄杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌产ESBLs最高，分别达56％和46％。[结论]2大类阴性杆菌产ESBLs都高，且有逐步增高的趋势。此外．2大类阴性杆菌比较，肠杆菌科细菌更易产ESBLs，P〈0．01；只有扩大ESBLs的检测面，与临床共同努力，才能减缓细菌耐药的进程。     

肿瘤患者感染革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶的分类检测

肿瘤患者感染革兰阴性杆菌的机会较多，其对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制是产β-内酰胺酶(BLA)。虽然革兰阳性菌中葡萄球菌的BLA产酶率高，但属于窄谱酶，其他阳性病原菌却很少产BLA，即革兰阳性菌的BLA产生对临床构成的威胁远不如革兰阴性菌。故笔者着重探讨革兰阴性     

革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶耐药性监测

目的分析330株细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况,观察细菌耐药性,以利于治疗。方法采用纸片扩散法。结果产ESBLs菌耐药率显著高于非产ESBLs菌。结论亚胺培南是治疗产ESBLs菌感染的首选药物。     

ICU临床分离黄杆菌对抗生素的敏感性及产β-内酰胺酶的研究

[目的 ]检测第三军医大学附属西南医院ICU临床分离黄杆菌产 β -内酰胺酶 (bla)、超广谱 β -内酰胺酶(ESBLs)情况及对临床常用抗生素的敏感性 ,以期为治疗黄杆菌属感染的经验用药方案和预防感染护理措施的制订提供实验依据。 [方法 ]用纸片法、PCR扩增法检测产bla情况 ;双纸片协同法检测产ESBLs情况 ;细菌对抗生素的敏感性用K -B法和梯度琼脂平板法测定。 [结果 ] 3株黄杆菌均产bla和ESBLs ,且对 β -内酰胺类抗生素耐药率高 ,对氟喹诺酮类抗生素及加酶头孢菌素较敏感。 [结论 ]院内感染黄杆菌普遍产bla ,对 β -内酰胺类抗生素耐药率高 ,可优先选用氟喹诺酮类抗生素或加酶抑制剂的 β -内酰胺类抗生素治疗该菌导致的感染 ,应加强护理措施控制耐药质粒的传播     

Etest用于革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶测定

用ＥｔｅｓｔＥＳＢＬ试条测定２００株革兰阴性杆菌产超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬ），发现１８％大肠埃希菌，１９％肺炎克雷伯菌，１５％不动杆菌，１６％阴沟肠杆菌和１８％枸橼酸杆菌ＥＳＢＬ阳性，总检出率为１５％。此外，ＥｔｅｓｔＥＳＢＬ试盒可将上述检出率提高至少２．５％，且发现安曲南作为酶底物是本院ＥＳＢＬ的最佳指示剂     

超广谱β内酰胺酶在腹泻病人分离156株革兰阴性杆菌中的分布

目的 研究临床腹泻病人粪便标本分离的革兰阴性杆菌产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）分布。方法 ESBLs的检测是采用NCCLs推荐的纸片确证试验。结果 腹泻病人粪便标本分离的156株革兰阴性杆菌中产超广谱β内酰胺酶有18株（占11．5％）。结论 在腹泻病原菌耐药的情况中，ESBLs已经占据了一定的地位，与喹诺酮耐药一起成为了腹泻病原菌耐药的两大原因。     

产超广谱β内酰胺酶和高产AmpC酶革兰阴性杆菌耐药性检测

目的了解铜陵地区产ESBLs和高产AmpC酶革兰阴性杆菌的耐药性.方法2003年10月至2004年9月铜陵地区临床分离的革兰阴性杆菌270株,用Kirby-Bauer法进行药敏试验,根据NCCLS 2002年判断标准分析结果.结果270株革兰阴性杆菌中检出产ESBLs或（和）高产AmpC酶68株,检出率25.2%,其中单产ESBLs 49株,以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌中检出率最高,分别为31.6%和31.0%：单产AmpC酶3株,均为阴沟肠杆菌,同时产AmpC酶和ESBLs16株,其中鲍曼不动杆菌8株.产酶株对头孢菌素耐药率明显高于非产酶株,产ESBLs菌株对替卡西林-克拉维酸、头孢哌酮-舒巴坦等含酶抑制剂的抗菌药物耐药率在50%以上,对亚胺培南敏感性好.结论ESBLs和高产AmpC酶是导致革兰阴性杆菌耐药的主要两类酶,产酶株对多种抗菌药物耐药,仅对亚胺培南敏感.     

革兰阴性杆菌超广谱β内酰胺酶检测与耐药性分析

随着广谱抗生素在临床普遍应用，尤其是近年来三代头孢菌素的广泛使用，使革兰阴性杆菌(主要为肠杆菌科细菌)产生了ESBLs，此酶能水解所有青霉素类，第一、二、三代和部分第四代头孢菌素以及单环氨曲南类，给临床治疗带来了很大困难，因此ESBLs的检测对于指导临床治疗，控制院内感染的传播具有重要意义，本文就我院2003年3月—2004年3月，对于临床标本所分离的革兰阴性杆菌ESBLs检测与耐药性结果作了统计分析，现报道如下：