卵巢癌细胞诱导的CD8+T细胞凋亡与Caspase-3活性及细胞内钙的关系

目的 探讨卵巢癌细胞诱导CD8^＋T细胞发生凋亡，及Caspase-3与细胞内游离钙离子在CD8^＋T细胞凋亡过程中的作用。方法分别采用透射电镜、流式细胞术观察3株卵巢癌细胞（OVCAR3、CAOV3和SKOV3）的培养上清液诱导的CD8^＋T细胞凋亡和细胞周期变化；逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法和比色法检测CD8^＋T细胞Caspase-3mRNA的表达和Caspase-3活性；Fura-2荧光负荷技术检测细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）。结果 经3株卵巢癌细胞的培养上清液分别作用后，CD8^＋T细胞被阻滞在G1／G0期，电镜下出现典型的凋亡改变，流式细胞仪检测见凋亡峰，细胞凋亡率增高；CD8^＋T细胞凋亡过程中Caspase-3mRNA的表达水平、Caspase-3的活性和[Ca^2＋]，均明显升高。结论 卵巢癌细胞能诱导CD8^＋T细胞凋亡，CasDase-3激活及细胞内钙超载在此过程中起雷要作用。     

95例SARS患者T细胞及其亚群动态变化的观察

对 95例SARS患者的T淋巴细胞亚群动态变化进行分析。其中 85例痊愈 ,1 0例死亡。 85例痊愈患者 ,病程第 7天平均CD4 + ( 3 2 5± 1 90 )个 /μL ,CD8+ ( 3 1 9± 3 1 5 )个 /μL ,CD4 + /CD8+ 1 .2 5± 0 .71 ,与我国正常人相比〔平均CD4 + ( 72 7± 2 5 5 )个 /μL、CD8+ ( 5 3 9± 1 3 4)个 /μL ,CD4 + /CD8+ 1 .49〕 ,T淋巴细胞亚群明显下降 (P =0 .0 0 1 )。病程第1 4天左右免疫功能逐渐恢复 ,平均CD4 + ( 5 61± 5 2 2 )个 /μL ,CD8+ ( 3 70± 2 71 )个 /μL ,CD4 + /CD8+ 1 .68± 1 .1 1。 2 1d后免疫功能基本恢复正常 ,平均CD4 + ( 675± 448)个 /μL ,CD8+ ( 4 67± 2 41 )个 /μL ,CD4 + /CD8+ 1 .48± 0 .68。 1 0例死亡患者的T细胞亚群在入院后逐渐出现下降趋势 ,病程第 7天CD4 + ( 2 48± 82 )个 /μL ,CD8+ ( 2 3 3± 1 1 5 )个 /μL ,CD4 + /CD8+ 1 .2 1± 0 .40 ,第 1 4天T淋巴细胞继续下降 ,平均CD4 + ( 1 81± 1 2 8)个 /μL ,CD8+ ( 1 73± 1 0 9)个 /μL ,CD4 + /CD8+ 1 .1 7± 0 .45 ,2 1d后CD4 + 细胞继续下降 ,平均CD4 + ( 1 2 5± 46)个 /μL ,CD8+ ( 94± 3 8)个 /μL ,CD4 + /CD8+ 1 .44±0 .5 9。结果提示 :SARS患者早期可能存在异常的免疫反应 ,这种异常免疫反应可能是导?     

尖锐湿疣患者HPV感染类型与细胞免疫功能关系的研究

目的　探讨尖锐湿疣 (CA)患者组织中HPV感染的类型与细胞免疫功能的关系。方法　采用PCR技术检测组织中HPVDNA ,流式细胞仪检测外周血T细胞亚群 ,ELISA法检测血清中细胞因子。结果　CA患者组织中HPV阳性率为 96 2 0 % ,假性湿疣 (PCV)患者组织中HPV阳性率为 5 0 0 %。CA组外周血CD3+ T细胞、CD4 +T细胞、CD4 + /CD8+ T细胞分别为 (5 1 2 3± 5 5 1) %、(2 3 5 2± 4 90 ) %、0 90± 0 84均低于PCV组 (6 0 31±9 4 6 ) %、(35 13± 5 94 ) %、1 5 5± 0 77和正常体检对照组 (6 1 0 1± 9 2 1) %、(36 4 6± 6 0 4 ) %、1 5 9± 0 78(均P<0 0 1) ;CA组外周血CD8+ T细胞为 (2 5 98± 5 78) %均高于PCV组 (2 2 6 7± 2 94 ) %和正常体检对照组 (2 2 86± 3 0 1) % (均P <0 0 5 ) ;CA组血清中IL - 12产生水平为 (6 1 38± 5 38) %均低于PCV组 (82 0 3± 9 0 1) %和正常体检对照组 (81 75± 10 18) % (均P <0 0 5 ) ;不同型别HPV感染的CA患者之间外周血CD3+ 、CD4 + 、CD8+ 、CD4 + /CD8+ 和血清中IL - 12产生水平无差异 (P >0 0 5 )。结论　CA患者存在细胞免疫缺陷 ,不同型别HPV感染的CA患者之间细胞免疫功能无差异     

HIV感染和AIDS患者T淋巴细胞免疫病理改变的研究

目的　探讨我国HIV感染和AIDS患者T淋巴细胞的免疫病理改变情况及其临床意义。方法　收集 13例HIV感染患者 (HIV组 )、2 7例AIDS患者 (AIDS组 )和 5 1名健康献血员 (正常对照组 )的抗凝血 ,用人T淋巴细胞亚群的特异性荧光抗体标记 ,通过流式细胞仪检测外周血CD4 + T淋巴细胞 (T4细胞 )、CD8+ T淋巴细胞 (T8细胞 )及其亚群 ,并检测患者血浆HIV载量。结果　正常对照组、HIV组和AIDS组外周血T4细胞计数 (× 10 6个 /L)分别为 84 9± 2 88,4 37± 184 ,5 0± 5 1,组间比较P <0 0 1;T8细胞计数 (× 10 6个 /L)分别为 5 79± 175 ,10 31± 345 ,5 35± 338,HIV组明显高于正常对照组(P <0 0 5 ) ;T4纯真细胞 (CD4 + CD4 5RA+ CD6 2L+ )亚群比例分别为 4 3 0 %± 11 4 % ,4 4 2 %± 12 8% ,2 4 8%± 15 5 % ,AIDS组明显为低 (P <0 0 5 ) ;T4纯真细胞计数 (× 10 6个 /L)分别为 36 8± 16 2 ,185±134,18± 2 0 ,组间比较P <0 0 1;T4功能细胞 (CD4 + CD2 8+ )亚群比例分别为 93 1%± 8 1% ,6 2 6 %±2 8 2 % ,5 6 9%± 2 6 4 % ,组间比较P <0 0 1;T4和T8激活细胞 (CD4 + HLA DR+ ,CD8+ HLA DR+ ,CD8+CD38+ )亚群比例均表现为AIDS组 >HIV组 >正常对照组 (P <0 0 5 ) ;T4和T8凋亡细胞 (CD4 +CD95 + ,C     

SARS患者T细胞和免疫球蛋白动态变化的研究

目的　研究传染性非典型肺炎 (SARS)患者免疫功能及其在病程中的变化。方法　用流式细胞仪测定 12 4例不同病程SARS患者外周血CD3+ 、CD4 + 和CD8+ T细胞计数 ,同时测定免疫球蛋白 ,另设 5 1例获得性免疫缺陷综合征 (AIDS)患者和 5 7名健康人为对照组 ;对SARS患者进行病程分组 ,比较不同病程免疫功能的变化。结果　SARS组CD3+ [(5 89± 4 35 )× 10 6/L]、CD4 + [(316± 2 6 7)× 10 6/L]和CD8+ T细胞 [(2 15± 16 5 )× 10 6/L]均显著低于健康对照组 [(116 3± 32 4 )× 10 6/L、(6 4 1±186 )× 10 6/L和 (4 0 5± 14 6 )× 10 6/L],但CD4 + T细胞高于AIDS组 [(15 3± 10 5 )× 10 6/L],CD3+ 和CD8+T细胞则低于AIDS组 [(112 2± 5 72 )× 10 6/L、(96 9± 5 4 6 )× 10 6/L](P值均 <0 0 1)。SARS组和AIDS组分别有 5 4例 (4 4 % )和 39例 (76 % )CD4 + T细胞 <2 0 0× 10 6/L。SARS患者外周血T细胞亚群计数在病程 10～ 12d达最低值。SARS组血清IgG(15 1g/L± 8 5g/L)和IgE(0 6g/L± 0 9g/L)水平高于健康对照组 (12 4g/L± 2 2g/L ,0 3g/L± 0 6g/L)。结论　SARS患者CD3+ 、CD4 + 及CD8+ T细胞均显著减少 ,病程 10～ 12d为最低值阶段。     

氧化低密度脂蛋白干预记忆性CD8+T细胞亚群的分化

目的 探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对CD8+记忆性T细胞亚群分化的影响及其机制.方法 将雌性10周龄未发生糖尿病NOD小鼠随机分为2组(n=5):ox-LDL组及对照组.断颈处死各组小鼠磁珠分离脾脏CD8+T细胞体外培养(IL-2),ox-LDL组加入ox-LDL 30μg/mL体外刺激24 h,ox-LDL未处理组作为对照组.24 h后分离细胞.体外实验利用流式细胞仪检测各组以下指标:胞内CD8+IFN-γ+确定胰岛β细胞特异性杀伤性CD8+T细胞的比例;细胞表面分子CD8、CD44、CD62L确定CD8+记忆性T细胞的不同亚群分化;T细胞相关转录因子TCF-1及STAT-3的活化确定关键性转录因子的作用.体内实验中,将各组CD8+记忆性T细胞通过尾静脉注射的方法移植给未发病NOD小鼠,同时设立未移植的模型对照组,每5 d检测血糖1次,监测小鼠的血糖改变及生存率.结果 相比对照组,ox-LDL(30μg/mL)作用24 h后,胰岛β细胞特异性杀伤性CD8+T细胞活化减少[(0.7±0.03)%vs(2.7±0.14)%,P<0.01],记忆性T细胞中的效应记忆性T细胞形成数目减少[(10.3±0.71)%vs(30.3±1.36)%,P<0.01],干细胞样记忆性T细胞增加[(72.3±3.8)%vs(55.1±2.61)%,P<0.05].T细胞转录因子TCF-1及p-STAT-3活化的也受到抑制[TCF-1:(14.5±0.82)%vs(34.2±1.23)%,磷酸化STAT-3:(3.3±0.12)%vs(22.1±1.1)%,P<0.01].T细胞移植给未发病NOD小鼠后,ox-LDL处理组小鼠血糖升高明显低于对照组(P<0.05),且生存率提高(P<0.05).结论 ox-LDL干扰记忆性CD8+T细胞核转录因子TCF-1活化及STAT-3的磷酸化,抑制长效杀伤作用的效应性和记忆性CD8+T细胞形成,诱导干细胞样记忆性CD8+T细胞形成,从而阻止胰岛β细胞自身免疫损伤及□型糖尿病的发生.     

原发性肾病综合征患者sIL-2R,T细胞亚群及红细胞免疫功能的意义

目的　观察原发性肾病综合征 (PNS)患者细胞免疫功能变化 .方法　采用双抗体夹心 EL ISA法检测血清可溶性白细胞介素 2受体 (s IL - 2 R) ,流式细胞仪测定外周血 T细胞亚群 (CD3+ ,CD4 + ,CD8+ )及红细胞 C3b受体花环 (RBC-C3b RR)和红细胞免疫复合物花环 (RBC- ICR)试验 .结果　原发性肾病综合征组 s IL - 2 R明显高于对照组 [(398± 12 2 ) vs(2 0 2± 84 ) pm ol· L- 1 ,P<0 .0 1],T细胞亚群 CD3+ ,CD4 + ,CD8+较对照组明显降低 (0 .5 0± 0 .0 8) vs(0 .71±0 .0 7) ,(0 .2 6± 0 .0 7) vs(0 .36± 0 .0 7) ,(0 .2 2± 0 .0 5 ) vs(0 .31± 0 .0 6 ) ,P<0 .0 1,CD4 + / CD8+ 较对照组明显降低[(1.12± 0 .2 2 ) vs (1.32± 0 .30 ) ,P<0 .0 5 ],RBC- C3b RR较对照组明显降低 [(14 .5 %± 3.7% ) vs(2 1.4 %± 2 .3% ) ,P<0 .0 1],RBC- ICR与对照组比较明显增高 [(17.8%±5 .2 % ) vs(8.8%± 2 .1% ) ,P<0 .0 1].结论　原发性肾病综合征患者存在细胞免疫功能异常并参与发病     

过敏性哮喘患儿T、B淋巴细胞亚群的变化

目的　观察过敏性哮喘患儿T、B淋巴细胞亚群的变化 ,以探讨免疫致病机制。方法　以 43例急性发作过敏性哮喘患儿、2 0例缓解期过敏性哮喘患儿及 2 0例健康儿童为主要研究对象 ,采用流式细胞术测定CD 4+、CD 4+/3 0 +、CD 8+,CD 8+/2 8+T淋巴细胞亚群和CD19+B淋巴细胞亚群。采用ELISA法测定其血清中白介素 (IL 4)与IgE浓度 ,同时行CD 4+/3 0 +与IL 4、IgE以及CD19与IgE相关性分析。结果　过敏性哮喘急性发作时 ,CD 8+/2 8+T淋巴细胞亚群为 ( 13 .7± 2 .8) % ,较哮喘缓解组的 ( 10 .6± 2 .8) %和正常组的 ( 11.9± 1.5 ) %显著上升 (P <0 .0 1) ;哮喘急性发作组CD 4+/3 0 +T淋巴细胞亚群与CD 19+B淋巴细胞亚群分别为 ( 2 .4± 0 .5 ) %和 ( 2 0 .6± 4.1) % ,缓解组分别为 ( 2 .0± 0 .3 ) %和 ( 17.8± 3 .3 ) % ,均较正常组的 ( 1.6± 0 .5 ) %和 ( 15 .8± 2 .9) %呈不同程度升高。CD 4+/3 0 +与IL 4、IgE以及CD 19与IgE均呈正相关 (P <0 .0 1)。结论　过敏性哮喘患儿T、B淋巴细胞功能状态出现紊乱 ,可能在过敏性哮喘致病过程中具有重要作用     

狼疮性肾炎患者淋巴细胞亚群的变化与免疫球蛋白的关系

目的　探讨狼疮性肾炎 (L N)患者外周血淋巴细胞亚群、活化状态和免疫球蛋白的变化及其相互关系 .方法　采用流式细胞仪和酶联检测仪对 2 1例 L N进行了研究 .结果　 1L N患者 CD3+ +CD4 + (0 .2 4± 0 .10 ) ,CD4 5 RA+ (0 .2 9± 0 .0 6 ) ,CD4 5 RO+ (0 .0 2± 0 .0 2 ) ,CD4 + +CD4 5 RA+ (0 .11± 0 .0 6 ) ,CD4 + CD4 5 RO+ (0 .0 5± 0 .0 4 )细胞比例明显减少 ,与对照组 (0 .4 1± 0 .0 9,0 .4 5± 0 .11,0 .0 5± 0 .0 5 ,0 .2 1±0 .0 7,0 .0 8± 0 .0 2 )比较 P<0 .0 5 ,P<0 .0 1;2 L N患者 HL A-DR+ (0 .13± 0 .0 4 ) ,CD19+ +HL A- DR+ (0 .0 8± 0 .0 3) ,CD19+ +CD4 3+ (0 .0 3± 0 .0 2 ) ,CD19+ +CD5 + (0 .0 5± 0 .0 2 )细胞比例明显增高 ,与对照组 (0 .0 6± 0 .0 4 ,0 .0 4± 0 .0 4 ,0 .0 1± 0 .0 0 4 ,0 .0 1± 0 .0 1)比较 P<0 .0 5 ,P<0 .0 1;3L N患者 Ig E水平明显升高 ,与对照组 (81± 4 0 ) k U· L- 1 相比 ,NS组 (46 7± 2 99) k U· L- 1 P<0 .0 1,非 NS组 (2 2 4± 15 1) k U·L- 1 P<0 .0 5 ,两组比较 P<0 .0 5 ;Ig M,NS组 (3.7± 2 .0 )g· L- 1 ,非 NS组 (3.6± 2 .9) g· L- 1 ;Ig A,NS组 (4.7±1.1) g· L- 1 ,非 NS组 (4.1± 2 .0 ) g· L- 1 水平也升高 (P<0     

鼻咽癌患者脾区低剂量照射对外周血T-淋巴细胞亚群的影响

目的 :探讨鼻咽癌 (NPC)患者脾区接受低剂量照射后外周血T 淋巴细胞亚群的变化。方法 :比较 5 8例常规放疗(NPC 1)前后和 5 0例放疗加脾区低剂量照射 (NPC 2 )前后淋巴细胞亚群的变化。T 淋巴细胞亚群用抗人T 淋巴细胞单克隆抗体致敏红细胞直接法检测。结果 :①NPC患者外周血T 淋巴细胞各亚群均低于正常人。常规放疗后的T 淋巴细胞较放疗前进一步下降 ,CD3 为 (48 31± 3 75 ) % ,CD4 为 (2 0 76± 4 70 ) % ,CD4 /CD8比值 0 95± 0 2 9,低于放疗前 ,(P <0 0 0 1)。但CD8无变化。② 5 0例NPC患者在放疗同时每周 1次脾区低剂量照射 ,放疗后的CD3 为 (5 2 6 2± 4 2 6 ) % ,CD4 为 (2 7 6 2±3 0 6 ) % ,高于放疗前 (P <0 0 0 1) ,CD8(19 14± 3 10 ) %低于放疗前 ;CD4 /CD8比值 1 48± 0 2 7,高于放疗前 (P <0 0 0 1)。结论 :NPC患者放疗期间接受低剂量的脾区放射 ,可刺激外周血T 淋巴细胞的CD3 和CD4 升高 ,抑制CD8。     

The mechanism of signal transduction during vascular smooth muscle cell proliferation induced by autoantibodies against angiotensin AT1 receptor from hypertension

Background Autoantibodies against angiotensin AT1 receptor have been discovered in patients with preeclampsia or malignant hypertension. Some studies have demonstrated that the autoantibodies are involved in the immunopathogenesis of hypertension and have an agonist effect similar to angiotensin II. Methods Autoantibodies against AT1 receptor were purified from sera of patients with primary hypertension by affinity chromatography. Proliferation of cultured rat vascular smooth muscle cells was detected by bromodeoxyuridine incorporation and activation of signalling molecules detected by Western blotting and electrophoretic mobility shift assay. Results The AT1-RAb caused a significant proliferation similar to the Ang II during first 24 hours. The levels of nuclear factor-KB （NF-KB）, phosphorylated JAK2., phosphorylated STAT1 （pSTAT1） and phosphorylated STAT3 （pSTAT3） molecules were increased in response to the autoantibodies. In contrast, the activations of NF-KB and JAK-STAT were blocked by Iosartan, pyrrolidinedithiocarbamate （a specific inhibitor of NF-KB） and AG490 （a specific inhibitor of the JAK2. tyrosine kinase）. The expressions of NF-KB, pSTAT1 and pSTAT3 reached peak levels at different times. Moreover, the relative densities of electrophoretic bands showed that activation of pSTAT3 was more significant than STAT1 induced by AT1 -RAb. Conclusions These results suggest that the autoantibodies against AT1 receptor have an agonist effect similar to Ang II in proliferation of VSMCs and the NF-KB and JAK-STAT proteins play essential roles. The effect is different from Angll in that STAT3 is the main downstream activating molecule in JAK-STAT signalling pathway.     

基于Janus激酶/信号转导和转录激活因子信号通路的乙胺丁醇片对肺结核大鼠模型的作用机制

目的 探讨乙胺丁醇片(EMB)对肺结核(PTB)大鼠的治疗作用及其作用机制是否与Janus激酶(JAK)/信号转导和转录激活因子(STAT)信号通路有关。方法 将60只SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、PTB组、PTB+EMB组(30 mg/kg)、PTB+EMB+Colivelin(JAK/STAT通路激活剂)组(30 mg/kg+1 mg/kg),每组15只。除对照组外,其他组大鼠均通过注射0.2 ml 5 mg/ml的结核杆菌悬液构建PTB模型。建模成功后,进行连续4周(1次/d)的给药处理,检测大鼠在给药第1、14、28天时的体重变化;计数结核分枝杆菌菌落数;HE染色检测大鼠肺组织病理变化;ELISA法检测各组大鼠血清中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α、IL-1β、γ干扰素水平;流式细胞术检测各组大鼠外周血中T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平;16S rRNA测序检测各组大鼠肠道菌群属水平的相对丰度;Western blot检测JAK/STAT通路相关蛋白表达。结果 与对照组比较,PTB组大鼠体重减轻(第14、28天时)、结核分枝杆菌菌...     

上皮性卵巢肿瘤患者外周血和腹水T淋巴细胞凋亡和Fas表达特点及其与CA125关系的研究

目的了解卵巢肿瘤患者外周血和腹水T淋巴细胞凋亡和Fas（CD95）表达特点及其与CA125的关系。方法应用流式细胞术测定18例Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌患者（Ⅲ～Ⅳ期组）,15例Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌患者（Ⅰ～Ⅱ期组）,Ⅲ～Ⅳ期组患者手术加化疗后（治疗后组）,18例良性上皮性卵巢肿瘤患者（良性组）,6例库肯勃氏瘤患者（库肯勃氏瘤组）及20例正常体检女性（正常组）的外周血T淋巴细胞凋亡和Fas表达,并测定上述治疗前的卵巢癌患者和库肯勃氏瘤患者的腹水T淋巴细胞以及良性组中10例患者（良性盆腔积液组）的盆腔积液T淋巴细胞的凋亡和Fas表达。同时测定卵巢癌患者外周血CA125的水平。结果Ⅲ～Ⅳ期组患者的外周血T淋巴细胞凋亡阳性率为5．55（3．57～9．62）％,明显高于正常组、良性组、Ⅰ～Ⅱ期组（P＜0．01）和治疗后组（P＜0．05）,Ⅲ～Ⅳ期组患者外周血T淋巴细胞的Fas表达强度为51±10,明显高于正常组（P＜0．05）。Ⅰ～Ⅱ期组和Ⅲ～Ⅳ期组患者腹水T淋巴细胞的凋亡阳性率,T淋巴细胞的Fas阳性率,Fas表达强度分别为17．41（7．06～24．56）％,（57±16）％,（55±11）％和34．06（17．03～44．65）％。（66±12）％,（70±24）％,均高于良性盆腔积液组的0．78（0．67～I．44）％,（37±6）％,（43±6）％（P＜0．01）。Ⅲ～Ⅳ期组的凋亡阳性率和Fas阳性率均明显高于库肯勃氏瘤组（P＜0．01）。Ⅰ～Ⅱ期组患者腹水T淋巴细胞凋亡与血清CA125水平呈正相关（r=0．77,P=0．009）。血清CA125＞500KU／L的卵巢癌患者腹水T淋巴细胞的凋亡高于CA125≤500KU／L的患者（P=0．009）。结论（1）T淋巴细胞凋亡上调出现于较早期卵巢癌患者的腹腔局部和晚期患者的外周血,而且晚期卵巢癌腹水T淋巴细胞凋亡和Fas表达高于库肯勃氏瘤患者,反映了原发卵巢癌腹腔局部免疫缺陷的特殊性。（2）有效的治疗可以降低卵巢癌患者外周血T淋巴细胞的凋亡。（3）卵巢癌腹水T淋巴细胞的Fas表达显著上调,是卵巢肿瘤免疫治疗的重要靶点。（4）CA125能间接反映卵巢癌腹腔局部的免疫状况。     

转基因JAK3体外长期扩增T淋巴祖细胞的实验研究

目的探讨激活JAK3信号传导通路是否能够体外长期扩增调控T淋巴祖细胞并评价其定向分化潜能的可行性。方法构建含有JAK3基因的逆转录病毒载体MG I-F2JAK3,内含有绿色荧光蛋白(GFP)和两个可以结合小分子二聚化合物AP20187的结合位点F36v。将该载体转入小鼠的骨髓造血干细胞中,在无血清培养基X-V ivo15培养体系中扩增,分为4组:空白对照组;AP20187组;干细胞因子(SCF)组;AP20187+SCF组。对扩增的细胞进行流式细胞仪检测免疫分型,定向分化、胸腺内注射等研究。结果AP20187+SCF组可以使转导的造血细胞获得长期大量对数级的扩增,扩增50 d后细胞可以达到1.2×1012倍±0.2×1012倍,所扩增的细胞为最早期的T淋巴祖细胞,表型为C-k ith iCD44+CD25-TN。该祖细胞群在SCF+IL-7+IL-3培养条件下,可定向分化为Thy1.2阳性的T淋巴细胞,并在小鼠的胸腺内可定向分化为GFP+CD3+和GFP+CD4+双阳性的成熟T淋巴细胞。结论AP20187联合SCF激活JAK3信号,可以大量扩增最早期的T淋巴祖细胞。该祖细胞具有定向分化为成熟T淋巴细胞的功能。该系统有助于研究T淋巴细胞的发生发育。     

卵巢癌6B11抗独特型微抗体诱导抗肿瘤免疫应答的体外实验

目的:研究6B11抗独特型微抗体在体外抗肿瘤免疫情况,探讨其作为卵巢癌疫苗的可能性.方法:分离人外周血单个核细胞,用6B11抗独特型微抗体刺激并培养.采用3HTdR参入法、51Cr细胞毒实验分别观察淋巴细胞增殖情况和细胞毒作用,ELISA方法测定用6B11微抗体刺激后培养上清液中IFN-γ水平的变化,流式细胞术检测微抗体刺激后淋巴细胞表型的改变.结果:6B11抗独特型微抗体可以刺激人外周血淋巴细胞的增殖,最佳刺激剂量为20 mg/L;并对OC166-9表达阳性的卵巢癌细胞系有细胞毒作用;用6B11微抗体刺激后培养上清液中IFN-γ水平升高;淋巴细胞的表型表现为,疫苗刺激后CD3 的细胞明显增高, CD4 的细胞也增加, CD8 的细胞增加不明显.CD4 /CD8 的比率明显增高,差异有统计学意义.结论:6B11抗独特型微抗体在体外可诱导机体产生特异体液免疫和细胞免疫反应,为抗独特型微抗体疫苗的临床应用提供了一定的实验依据.     

非小细胞肺癌肿瘤间质T淋巴细胞亚群活性及临床意义

目的检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者肿瘤间质T淋巴细胞亚群分布,探讨NSCLC临床分期与淋巴细胞各亚群比例及免疫功能的关系。方法收集60例NSCLC患者新鲜肿瘤标本,运用免疫组化染色方法检测T淋巴细胞亚群CD4^＋、CD8^＋和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋（Treg）的分布。结果与I/II期患者比较,Ⅲ/Ⅳ期患者肿瘤组织中CD4^＋和CD4^＋/CD8^＋比值下降（P〈0.05）,CD8^＋和CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋比值升高（P〈0.05）。较之癌旁组织,Treg细胞在肿瘤组织中明显富集。结论NSCLC患者T淋巴细胞免疫功能受抑制,作为主要免疫抑制细胞的Treg细胞比例与肿瘤分期呈正相关。     

240例SARS患者T淋巴细胞及活化亚群的变化

目的研究严重急性呼吸综合征(severeacuterespiratorysyndrome,SARS)患者外周血T淋巴细胞及其活化亚群的变化情况。方法采用多色荧光标记流式细胞术结合血液分析仪,检测240例不同病程的SARS患者(包括50例重型患者和190例普通型患者)的外周血T淋巴细胞及其活化亚群的表达情况。结果在年龄、性别无显著差异时,与正常对照组比较,SARS患者的外周血T淋巴细胞及其各活化亚群绝对值明显减低,其中CD3+CD25+、CD3+HLA-DR亚群百分比升高;与普通型患者比较,重型患者T细胞、CD4+亚群的绝对值均明显减低,CD25+CD3+、CD28+CD4+及CD95+CD4+亚群的绝对值也明显降低;各病程SARS患者比较,T淋巴细胞(包括CD4、CD8亚群)的绝对值为Ⅲ组>Ⅱ组>Ⅰ组;CD25+CD3+、CD28+CD4+及CD95+CD4+亚群的绝对值也明显降低。结论伴随着全面低下的细胞免疫功能,SARS患者的T细胞有效活化过程有所改变,以重型SARS患者尤其明显。     

经导管动脉化疗栓塞中化疗药物剂量对肝癌患者T细胞亚群的影响

目的：探讨经志管动脉化疗栓塞术（TACE）中化疗药物剂量对肝癌患者肝细胞癌（HCC）患者T导胞亚群的影响。方法：36例不能动手术切除的HCC患者随机分成A、B两组，分别进行选择性TACE。A组（n=18)给予小剂量化疗药物：肿瘤直径小于5cm者给予丝裂霉素（MMC）2－4mg；在5-8cm之间者给予MMC4－6mg及表阿霉素（EPI）10mg；大于8cm者给予MMC6－8mg、EPI10mg及卡铂（CBP)100mg。B组（n=18)给予常规剂量化疗药物（MMC10mg、CBP300mg及EPI40mg）。术前和术后1周用流式细胞仪检测患者外周血T细胞亚群（包括CD ^3 、CD^4 、CD^8 、NK、CD^4 /CD^8 、CD^4 CD45^ 、CD4^ CD29^ 、CD8^ CD28^ 、CD8^ CD38^-)。结果：治疗前两组间各细胞亚群均无显著差异；A组患者治疗后CD ^3 、CD^4 、CD^8 、NK、CD^4 /CD^8 、CD^4 CD45^ 、CD4^ CD29^ 、CD8^ CD28^－无显著变化。但CD4^ CD45^＋显著下降（P＜0．05），CD8^ CD28^ 明显增高（P＜0．001）；B组CD4^ 、CD4^ CD29^ 和CD^4 /CD8^ 比值显著下降（P＜0．05），CD8^ 、CD8^ CD28^-显著增高（P＜0．05）。结论：常规剂量化疗药物TACE 可明显抑制细胞免疫功能，而小剂量化疗药物TACE可以提高患者细胞免疫功能。     

强效抗逆转录治疗对艾滋病患者CD4^＋ T淋巴细胞的动态影响

目的观察强效抗逆转录治疗对艾滋病患者CD4^＋T淋巴细胞的动态影响。方法分析25例患者在治疗前（DO）和抗逆转录病毒（HAART）治疗第3、6、12个月时外周血中CD4^＋T淋巴细胞、CD4^＋T淋巴细胞百分率的动态变化。结果AIDS患者组与正常对照组CD4^＋T淋巴细胞、CD4^＋T淋巴细胞百分率指标间差异存在非常显著性（t=24.98、t=11.61,P均〈0.001）。25例患者DO前根据CD4^＋T淋巴细胞数量分为Ⅰ组（〈100个/μL）、Ⅱ组（100~200个/μL）、Ⅲ组（〉200个/μL）,经3、6、12个月HAART治疗后CD4^＋T淋巴细胞、CD4^＋T淋巴细胞百分率指标均有不同程度提高,各组与DO前比较：Ⅰ组P均〈0.01、Ⅱ组CD4^＋T淋巴细胞P〈0.05、CD4^＋T淋巴细胞百分率指标P〉0.05、Ⅲ组P均〉0.05。Ⅰ组DO前CD4^＋T淋巴细胞、CD4^＋T淋巴细胞百分率指标最低,经12个月治疗后CD4^＋T淋巴细胞、CD4^＋T淋巴细胞百分率指标增加最为明显。有关CD4^＋T淋巴细胞绝对数的增加比较：Ⅰ组与Ⅱ组、Ⅲ组比较,P均〈0.01;Ⅱ组与Ⅲ组比较,P〉0.05。结论HAART能有效回升AIDS患者CD4^＋T淋巴细胞数量,提示HAART治疗对CD4^＋T淋巴细胞数量越低患者疗效越为显著。     

肝癌患者自体细胞因子诱导杀伤细胞治疗后免疫活性细胞的检测及其临床意义

目的　观察肝癌患者自体细胞因子诱导杀伤细胞 (CIK细胞 )回输后 ,外周血中T细胞亚群及树突状细胞亚群的变化 ,评价CIK细胞治疗肝癌的临床效果。方法　采用成份血采血机采集13例肝癌患者的外周血单个核细胞 (PBMC) ,经多种细胞因子诱导后 ,于培养的第 4、7、10、13、15天流式细胞仪检测细胞表型 ;CIK细胞回输前及回输后取病人外周血 ,流式细胞仪测定Ⅰ型树突状细胞(DC1)和Ⅱ型树突状细胞 (CD2 )的比例。结果　诱导培养后 ,CD3+ CD8+ ,CD3+ CD5 6 + ,CD2 5 + 效应细胞的比例明显升高 ,分别由最初的 33 5 %± 10 1%、7 7%± 2 8%和 12 3%± 4 5 % ,上升至 36 6 %±9 0 %、18 9%± 6 9%和 16 4 %± 5 9% ,其中CD3+ CD8+ 可维持较高水平 ,CD2 5 + 和CD3+ CD5 6 + 比例分别于培养后的第 7天和第 13天开始下降。CD3+ CD4 + 和NK细胞比例略有下降 ,但差异无显著意义。CIK细胞回输后DC1和CD2细胞亚群的比例明显升高 ,分别由回输前的 0 5 9%± 0 2 3%和0 2 6 %± 0 12 %上升至回输后的 0 85 %± 0 2 7%和 0 4 3%± 0 2 0 %。CIK细胞治疗后患者临床症状明显改善 ,无明显副作用。结论　CIK细胞治疗可以提高肝癌患者的细胞免疫功能 ,提高对肿瘤细胞的杀伤作用。