拓扑异构酶与肿瘤细胞耐药性

拓扑异构酶可分为二类即拓扑异构酶Ⅰ(TOPOI)和拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)。TOPOⅠ在细胞中DNA空间构型变化,DNA复制、重组、转录、切割、再连接、细胞染色质的组化以及有丝分裂中均起重要作用。TOPOⅡ是真核细胞生存所必不可少的核酸,它的作用涉及到核酸代谢的诸方面,包括DNA复制、mRNA加工、染色体的分离及浓缩、核基质的组成等。许多抗癌药物正是通过干扰DNA的正常代谢而发挥抗癌作用。肿瘤化疗失败的重要原因之一是耐药性的产生。耐药性的原因多种多样,最近研究表明拓扑异构酶的变化是一个不可忽视的原因,现综述如下。     

拓扑异构酶抑制剂治疗白血病的研究进展

 DNA拓扑异构酶是参与细胞基本活动的重要核酶,其抑制剂主要通过形成"DNA-药物-酶"三聚复合物干扰DNA的复制发挥抗肿瘤作用。重点阐述以拓扑异构酶Ⅰ为靶点的新药在白血病治疗中应用现况、拓扑异构酶表达水平与临床疗效及预后的关系和白血病细胞对拓扑异构酶抑制剂产生耐药的发生机制等方面研究进展。     

国产盐酸拓扑替康对小细胞肺癌疗效的初步研究

盐酸拓扑替康（ topotecan）是具有抑制拓扑异构酶Ⅰ活性的抗肿瘤新药。其作用机制是拓扑异构酶Ⅰ可诱导 DNA单链可逆性断裂，使 DNA螺旋链松解。盐酸拓扑替康与拓扑异构酶Ⅰ -DNA复合物结合并阻止这些单股断链的重新连接，其细胞毒作用是在 DNA的合成中。盐酸拓扑替康、拓扑异构酶 I和 DNA形成的三元复合物与复制酶相互作用产生双股 DNA的损伤，而哺乳动物的细胞不能有效地修复这些双股 DNA链的中断。国外研究表明盐酸拓扑替康对多种肿瘤有效 [1～ 3]，本研究采用国产盐酸拓扑替康对小细胞肺癌的疗效进行临床研究，报告如下。     

灵芝提取物对DNA拓扑异构酶的抑制作用及诱导K562细胞凋亡

目的 :研究中华灵芝宝的抗肿瘤作用机理。方法 :DNA超螺旋解旋法检测中华灵芝宝对拓扑异构酶Ⅰ、Ⅱ (TOPOⅠ、Ⅱ )活性的影响 ;琼脂糖凝胶电泳检测其对DNA的直接打断作用及诱导K5 6 2细胞凋亡的能力。结果 :中华灵芝宝能抑制TOPOⅠ、Ⅱ的活性 ,促进DNA的解旋、断裂 ;同时还能直接打断质粒和大分子DNA ;作用于K5 6 2细胞后电泳显示有凋亡细胞特有的“梯状”条带。结论 :中华灵芝宝能同时抑制TOPOⅠ、Ⅱ活性 ,直接打断质粒和大分子DNA ,并能诱导K5 6 2细胞凋亡。     

DNA拓扑异构酶抑制剂与抗癌作用(摘要)

自七十年代发现了一类能控制和改变DNA拓扑异构状态(三维结构)的酶,称为DNA拓扑异构酶(DNAT、opoisomerases)。按其在反应中暂时断裂一条或二条DNA链的不同,可分为Ⅰ型和Ⅱ型DNA拓扑异构酶。这类酶在DNA的复制和转录过程中起着非常重要的作用,它们控制DNA     

羟基喜树碱为主化疗方案治疗晚期胃癌的临床观察

DNA复制过程中进行解螺旋时必须有拓扑异构酶的参与,该酶在癌组织中的含量明显高于正常组织。HCPT(羟基喜树碱)为细胞周期特异性药物,主要作用于S期细胞,DNA拓扑异构酶Ⅰ(TOPOⅠ)是其作用靶点。我们自1999年10月以来用HDLF(HCPT、DDP、CF、5Fu)方案治疗62例晚期胃癌,现报告如下。 一、资料与方法 1.病例选择:1999年10月～2001年10月本组共62例,其中男性40例,女性22例。年龄32～72岁,中位年龄56     

华蟾素注射液对人肝癌HepG-2细胞DNA拓扑异构酶Ⅰ的影响

背景与目的:华蟾素注射液是传统抗肿瘤中药制剂,目前药效机制尚不明确.本研究旨在探讨华蟾素注射液对DNA拓扑异构酶Ⅰ(topoisomerase Ⅰ,TOPO Ⅰ)的影响.方法:采用噻唑蓝还原法(MTT)观察华蟾素注射液对人肝癌HepG-2细胞增殖的影响;采用流式细胞术(FCM)检测对HepG-2细胞周期的影响;采用RT-PCR法检测对HepG-2细胞TOPO Ⅰ mRNA表达的影响;采用TOPO Ⅰ介导的负超螺旋PBR322 DNA解旋反应检测华蟾素对TOPO Ⅰ酶活性的影响;采用负超螺旋PBR322 DNA检测华蟾素对DNA的直接抑制作用.结果:华蟾素注射液对HepG-2细胞增殖具有抑制作用,其抑制效应具有时间和剂量依赖性;并将HepG-2细胞阻滞于S期;RT-PCR检测表明,华蟾素注射液可下调TOPO Ⅰ mRNA表达,表现浓度依赖效应;对TOPO Ⅰ介导的负超螺旋PBR322 DNA解旋反应有抑制作用:对负超螺旋PBR322 DNA没有直接抑制作用.结论:华蟾素注射液能够抑制HepG-2细胞增殖,影响DNA拓扑异构酶Ⅰ酶的mRNA表达及活性可能为机制之一.     

肿瘤化疗的重要靶点—DNA拓扑异构酶

DNA 拓扑异构酶是近年来新发现的肿瘤化疗的重要靶点,它涉及到抗癌药作用的许多环节,如 DNA 复制、DNA 损伤与修复、基因的重组和转录、细胞有丝分裂及分化等。本文列举了一些临床上广泛使用的以 DNA 拓扑异构酶为靶点的化疗药物,着重介绍了拓扑酶抑制剂作用的分子基础及其与耐药的关系。事实证明拓扑酶抑制剂能促进酶介导的 DNA 切割复合物的形成,阻断正常基因及癌基因的表达。另一方面,对拓扑酶抑制剂耐药的细胞常表现为酶活性及酶量的下降,这种变化与拓扑酶基因的突变有关。     

DNA拓扑酶抑制剂诱导细胞凋亡的研究

目前 ,以 DNA拓扑异构酶为靶点的抗癌药已成为临床有效的抗肿瘤一线药物 ,随着此类药物越来越多地被开发 ,其作用机制的研究受到广泛关注。迄今其诱导肿瘤细胞凋亡的机制仍有探索中 ,现作一简要综述。1　 DNA拓扑异构酶主要生理功能及其抑制剂的作用机制　　　真核细胞 DNA拓扑异构酶 (Topoi-som erase Topo)主要分为 Topo 及Topo ,其生理功能主要以两种方式体现 ,一是调节控制 DNA超螺旋状态及打结或解结 DNA的环连体状态 ;二是直接参与那些需打断并重新连接 DNA分子链的细胞过程。Topo与 DNA共价结合形成断裂复合物 ,使 DNA产…     

依立替康在肺癌中的应用

依立替康（Irinotecan，CPT-11）是喜树碱的衍生物，其活性代谢产物为SN-38。它是由日本学者Yokokura于20世纪80年代初期合成，为DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂，其与TopoⅠ—DNA形成的复合物结合，稳定此复合物，从而使断裂的DNA单链不能重新接合，阻止DNA复制及抑制RNA合成，为细胞周期S期特异性药物。依立替康对转移性结直肠癌有明确的疗效，也应用于肺癌、卵巢癌、子宫颈癌等。本文就依立替康在肺癌中的应用作一综述，     

以DNA拓扑异构酶Ⅱ为靶点的一种抗癌药筛选的新方法

借鉴文献方法,我们以小鼠L_(1210)白血病细胞为村料,提取DNA拓扑异构酶Ⅱ,鉴别了其生物学特性,并观察了十多种已知及未知的抗癌药物对其活性的影响,初步建立了以DNA拓扑异构酶Ⅱ为靶点的新抗癌药筛选方法。实验表明DNA拓扑异构酶Ⅱ对DNA链切割反应是可逆的,并且高浓度的氯化钠对其活性有抑制作用。许多药物能促进拓扑酶Ⅱ引起的DNA链断裂如ADM、DNR、Vp16及ACM—B等,而另一些药物如萜类化合物BC_1、BC_4等则能抑制链断裂反应。     

肿瘤化疗增敏剂研究进展

化疗增敏剂通过逆转肿瘤组织耐药而提高化疗疗效。其作用机制包括：抑制药物泵功能；针对谷胱甘肽代谢相关酶、拓扑异构酶Ⅱ、DNA修复相关酶、蛋白激酶C等靶点逆转耐药；促凋亡；干扰肿瘤细胞与组织微环境之间耐药信号转导等。现按其作用机制,分类介绍化疗增敏剂的研发现状。     

肿瘤化疗增敏剂研究进展

化疗增敏剂通过逆转肿瘤组织耐药而提高化疗疗效。其作用机制包括：抑制药物泵功能；针对谷胱甘肽代谢相关酶、拓扑异构酶Ⅱ、DNA修复相关酶、蛋白激酶C等靶点逆转耐药；促凋亡；干扰肿瘤细胞与组织微环境之间耐药信号转导等。现按其作用机制，分类介绍化疗增敏剂的研发现状。     

抗VEGF抗体诱导K562细胞凋亡及其机制的研究

目的 观察抗VEGF抗体对K562细胞凋亡的影响,探讨VEGF抑制白血病细胞凋亡的机理.方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测抗VEGF单抗对拓扑异构酶Ⅱ（TOPOⅡ）表达的影响;采用低浓度溴乙啶荧光测定法检测细胞TOPOⅡ的活性;应用琼脂糖凝胶电泳检测K562细胞凋亡的情况.结果 抗VEGF抗体能抑制K562细胞TOPOⅡ的表达,降低TOPOⅡ的活性,促进DNA解旋、断裂;抗VEGF单抗作用于K562细胞后,电泳结果显示有凋亡细胞特有的“梯状”条带.结论 抗VEGF单抗能引起白血病细胞凋亡,其原因可能是抗VEGF单抗抑制了白血病细胞TOPOⅡ基因的表达.     

榄香烯联合热疗对Raji细胞增殖的影响及其机制探讨

目的:观察榄香烯(elemene,ELE)联合热疗(hyperthermia,HTM)对人Burkitt’s淋巴瘤Raji细胞增殖及DNA拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ(TOPOⅠ,TOPOⅡ)表达的影响。方法:采用噻唑蓝还原法(MTT)观察ELE联合HTM对Raji细胞增殖的影响;流式细胞术(FCM)检测细胞周期;RT-PCR法检测细胞TOPOⅠ和TOPOⅡmRNA表达;Western Blot法检测细胞TOPOⅠ和TOPOⅡ蛋白表达。结果:与单纯HTM和单纯ELE比较,ELE联合HTM对Raji细胞增殖的抑制作用增强(P<0.05),呈时间和剂量依赖性,而ELE联合HTM作用Raji细胞24h、48h和72h后,IC50值(93μg/ml、68μg/ml和41μg/ml)小于单纯ELE IC50值(116μg/ml、84μg/ml和60μg/ml);ELE联合HTM阻滞Raji细胞于S期[(35.40±1.27)%、(42.38±2.50)%VS(48.88±1.93)%,P<0.05],并下调TOPOⅠ和TOPOⅡmRNA及蛋白的表达。结论:ELE联合HTM可增强对Raji细胞增殖的抑制作用,下调TOPOⅠ、TOPOⅡ表达可能是其机制之一。     

榄香烯对人肝癌HepG-2细胞增殖及拓扑异构酶Ⅰ的影响

背景与目的:榄香烯(elemene,ELE)是传统抗肿瘤中药制剂,目前药效机制尚不明确.本研究旨在探讨ELE对人肝癌HepG-2细胞增殖及DNA拓扑异构酶Ⅰ(topoisomerase Ⅰ,TOPO Ⅰ)的影响.方法:采用四甲基偶氯唑蓝还原法(MTT)观察ELE对HepG-2细胞增殖的影响;采用流式细胞术(FCM)检测ELE对HepG-2细胞周期的影响;采用RT-PCR法检测ELE对HepG-2细胞TOPO Ⅰ mRNA表达的影响;采用TOPO Ⅰ介导的负超螺旋PBR322DNA 解旋反应检测ELE对TOPO Ⅰ酶活性的影响;采用负超螺旋PBR322DNA检测ELE对DNA的直接抑制作用.结果:ELE能抑制HepG-2细胞增殖,其抑制效应具有时间和剂量依赖性;阻滞HepG-2细胞于S期,呈剂量依赖性;下调TOPO Ⅰ mRNA表达,呈剂量依赖特性;对TOPO Ⅰ介导的负超螺旋PBR322DNA解旋反应有抑制作用;对负超螺旋PBR322DNA没有直接抑制作用.结论:ELE能够抑制HepG-2细胞增殖;影响TOPO Ⅰ的表达及活性可能是其作用机制之一.     

开普拓在肠癌辅助治疗中的应用现状与前景

开普拓是一种半合成、可溶性的喜树碱衍生物。是特异性拓扑酶Ⅰ抑制剂,通过抑制肿瘤细胞DNA重联步骤,导致DNA单链断裂而产生抗肿瘤作用。开普拓和奥沙利铂同为新一代抗肿瘤药物,目前已成为治疗转移性大肠癌最有效的药物之一。     

核基质成分-拓扑异构酶Ⅱ与肿瘤耐药

DNA拓扑异构酶(topoisomerase,Topo)是核基质成分之一,是一种调整DNA拓扑结构的核酶,在DNA的复制和转录过程中发挥着重要作用,故而成为许多抗肿瘤化疗药物的靶.针对Topo Ⅱ的抗肿瘤化疗药物同样面临着耐药问题.简要综述了近年来Topo Ⅱ与肿瘤耐药关系方面的研究进展.     

DNA嵌入剂和DNA拓扑异构酶Ⅱ抑制剂与抗癌作用的关系——介绍两种抗癌药物的筛选方法

本文介绍两种抗癌药物的筛选方法。实验表明,对pBR322 DNA能起嵌入和断裂作用或对DNA拓扑异构酶Ⅱ有抑制作用的化合物可能具有抗癌作用。吖啶衍生物9-(2-4-二氯苯氧乙酰氨基)吖啶,9-(2-4-5-三氯苯氧乙酰氨基)吖啶和9-(对-氯苯氧乙酰氨基)吖啶对pBR322 DNA能起嵌入和断裂作用。它们对体外生长细胞显示强力的细胞毒作用。山茶A和山茶C化合物对拓扑异构酶Ⅱ有强力的抑制作用,对体外培养细胞亦具有细胞毒作用。     

马来酸酐类聚阴离子化合物对拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制

DNA拓扑异构酶是某些抗癌,抗菌药物的靶酶。马来酸酐类聚阴离子化合物具有抗菌、抗病毒、抗瘤活性。普遍认为其作用机理是调节机体免疫功能。作者对20个马来酸酐类聚阴离子化合物,包括:①马来酸酐和呋喃的1:1交替共聚物半铵盐(MFN),②二乙烯基醚和马来酸酐的1:2交替共聚物MVE),③马来酸和呋哺的1:1交替共聚物(MF)。经反复试验,发现其中6个化合物在30μg/ml浓度下对小鼠艾氏腹水癌细胞的DNA拓扑异构酶Ⅱ的性有确定抑制作用。其中MVE_1的最低抑制浓度为5μg/ml。实验提示马来酸酐类聚阴离子化合物对拓扑酶Ⅱ的抑制可能是其抗癌作用机制之一。