天泰1号对自发老年性痴呆模型学习记忆及神经元NOS的影响

目的观察天泰1号对自发老年性痴呆模型学习记忆功能及神经信使分子NO代谢的影响.方法从21月龄昆明种小鼠筛选出自发老年性痴呆(记忆障碍)鼠,随机分为4组,即空白对照组,西药对照组,补肝养髓小剂量组,补肝养髓大剂量组,另设老年学习记忆正常组(简称老年正常组,下同).西药对照组给以喜得镇(Hydergine)0.6 mg/kg,补肝养髓小、大剂量组分别予补肝养髓方6.80 g/kg及20.41 g/kg,连续60 d,正常对照组和痴呆对照组均灌以等量双蒸馏水(DW);用跳台实验(step-down test)检测学习记忆成绩;脑组织冰冻切片,NBT组织化学法示大脑NOS1活性,全自动显微图像分析系统定量.结果天泰1号能显著改善自发老年性痴呆模型小鼠的学习记忆障碍,并明显增强中枢大脑皮质和海马NOS1活性及其纤维密度,其作用呈现出一定的量效关系.此外,研究还发现颞叶皮质、海马NOS1活性与学习记忆成绩呈显著性正相关.结论中枢NOS1活性与学习记忆成绩显著相关;补肝养髓方可明显改善自发老年性痴呆模型的学习记忆障碍,这一作用可能与增强其大脑皮质和海马NOS1活性,调节中枢神经信使分子NO代谢有关.     

补肝养髓法对老年性痴呆海马神经元RNA和Nissl体的定量研究

目的观察补肝养髓法对自发老年性痴呆模型海马神经元内RNA和Nissl体的影响.方法用跳台实验(step-downtest)从21月龄昆明种小鼠筛选出自发老年性痴呆(记忆障碍)鼠,随机分为空白对照组、西药对照组、补肝养髓小剂量组、补肝养髓大剂量组,另设老年学习记忆正常组(老年正常组).西药对照组给以喜得镇(Hydergine)0.6mg/kg,补肝养髓小、大剂量组分别予补肝养髓方6.80 g/kg及20.41g/kg,连续60 d,正常对照和痴呆对照组均灌以等量双蒸馏水(DW);脑组织冰冻切片,细胞化学方法显示大脑皮质和海马神经元内RNA和Nissl体,全自动显微图像分析系统定量检测相关脑区RNA和Nissl体含量.结果补肝养髓法能显著增高大脑皮质和海马锥体细胞的RNA和Nissl体含量,而且其作用呈现出一定的量效关系.结论补肝养髓方可明显改善自发老年性痴呆模型的学习记忆关键脑区海马的神经元结构,并显著改善其海马神经元的RNA代谢.     

地黄益智方对Aβ1～40所致老年性痴呆模型大鼠学习记忆能力的影响

目的观察地黄益智方对Aβ1～40所致老年性痴呆模型大鼠学习记忆能力的影响。方法 120只SD雄性大鼠随机分为正常组,模型组,地黄益智方小、中、大剂量组,采用大鼠双侧海马CA1区注射Aβ1～40复制老年性痴呆模型,造模24 h后开始给药,连续4 w。分别在给药1、3 w后用Morris水迷宫法连续5 d进行定位航行实验,第6天进行空间探索实验,检测各组大鼠学习记忆能力;2、4 w用生化法检测各组大鼠大脑皮层ChAT、AChE的活性变化。结果模型组大鼠明显存在学习记忆功能障碍,其中1 w后第2、4、5、6天与空白组相比有差异(P=0.016、0.000、0.003、0.001),3 w后第1、4、5、6天与空白组相比有差异(P=0.023、0.006、0.005、0.007),地黄益智方各剂量组行为障碍明显轻于模型组。模型组ChAT活性明显降低,2、4 w时与空白组相比有差异(P=0.011、0.024);模型组AChE活性明显增高,2、4 w时与空白组相比有差异(P=0.003、0.010);地黄益智方各剂量组乙酰胆碱转移酶(ChAT)、乙酰胆碱酯酶(AChE)活性改变明显轻于模型组。结论地黄益智方能改善Aβ1～40所致老年性痴呆模型大鼠学习记忆能力,可能与其调节中枢神经递质ChAT、AChE活性有关。     

灵芝孢子粉对戊四氮慢性点燃大鼠学习记忆及胆碱乙酰转移酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的观察灵芝孢子粉对戊四氮点燃大鼠学习记忆及海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响,进一步探讨癫痫的发病机制及灵芝孢子粉对神经细胞保护的作用机制。方法将60只成年SD大鼠随机分为空白对照组、癫痫模型组、灵芝孢子粉用药高、中、低剂量组共5组。癫痫模型组和灵芝孢子粉用药各组大鼠腹腔注射阈下剂量的PTA35 mg.kg-1.d-1,直至达到点燃标准。点燃后,用药组以灵芝孢子粉灌胃。采用Morris水迷宫测试大鼠空间记忆能力,制备海马10%组织匀浆,化学比色法检测其ChAT、AChE的活性。结果水迷宫逃避潜伏期,模型组明显高于用药高剂量组和对照组(均P<0.01);跨过原平台次数,模型组明显少于用药高剂量组(P<0.05)和对照组(P<0.01);与模型组相比,用药中、高剂量组呈剂量依赖性显著抑制海马AChE的活性、增强ChAT的活性(均为P<0.05)。结论灵芝孢子粉可通过抑制功能脑区AChE活性、增加ChAT的活性,以增强中枢胆碱能神经系统的功能,改善癫痫大鼠认知能力,从而对脑组织起保护作用。     

孕烯醇酮对老年大鼠记忆相关脑区胆碱乙酰转移酶表达的影响

目的观察孕烯醇酮对老年大鼠记忆相关脑区胆碱乙酰转移酶(ChAT)表达的影响。方法雄性老年大鼠40只,随机分为空白组、溶剂组、小剂量孕烯醇酮组、大剂量孕烯醇酮组,每组10只。隔日腹腔注射1个月,通过免疫组织化学技术分别检测各组大鼠额叶、颞叶、海马皮质区ChAT表达情况。结果与空白组比较,大剂量孕烯醇酮组大鼠额叶、颞叶、海马皮质区ChAT免疫阳性细胞明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);而溶剂组和小剂量孕烯醇酮组ChAT阳性细胞数无明显增加,差异无统计学意义(P>0.05)。结论大剂量孕烯醇酮可以显著改善老年大鼠胆碱能系统活性。     

银杏叶提取物对2型糖尿病伴阿尔茨海默病样大鼠学习记忆能力的影响

目的探讨银杏叶提取物(Extract of Ginkgo biloba,EGb)对2型糖尿病(diabetes mellitus,T2DM)伴阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)样大鼠习记忆能力和中枢胆碱能系统的影响。方法健康雄性SD大鼠大鼠50只,随机分为5组,分别为正常组,模型组,低剂量银杏叶提取物组(1.5 g/kg),中剂量银杏叶提取物组(3 g/kg),高剂量银杏叶提取物组(6 g/kg)。通过持续高脂高糖饮食喂养及小剂量链脲佐菌素(STZ)制备T2DM伴AD大鼠模型模型。除正常组、模型组给予等容积的生理盐水,其他治疗组以相应药物治疗。8周后,用Y型迷宫刺激器检测大鼠的学习行为能力,24 h后检测大鼠的记忆能力,测试完成后处死动物,取各组脑组织,采用ELISA法测定各组脑组织检测AchE活性、ChAT活性。结果与阳性组比较,银杏叶提取物各剂量组在Y迷宫学习能力达标测试次数和24 h记忆检测中错误反应次数均减少,可提高模型大鼠的学习记忆能力,并能降低模型大鼠脑内AchE活性,提高ChAT活性。结论银杏叶提取物可改善T2DM伴AD大鼠模型模型大鼠的学习记忆能力,其机制可能与增强ChAT活性、抑制AchE活性有关。     

葛根素对D-半乳糖模型鼠记忆能力及大脑皮质胆碱能系统的影响

目的 探讨葛根素对D-半乳糖模型小鼠记忆能力及胆碱能系统的影响.方法 用Morris水迷宫法测试小鼠的空间记忆能力,用比色法测定大脑皮质胆碱乙酰转移酶(CHAT)、胆碱酯酶(AehE)活性,用碱性羟胺法测定乙酰胆碱(Ach)含量.结果 与正常对照组相比,模型组学习记忆能力减退,大脑皮层ChAT、AchE活性降低,Ach含量下降.与模型组比较,葛根素治疗组学习记忆能力明显改善,大脑皮层CHAT活性提高,AchE活性无显著性差异,Ach含量提高.结论 葛根素能改善D-半乳糖模型小鼠学习记忆能力和提高中枢胆碱能系统功能.     

金属硫蛋白对D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆的影响

目的 观察不同剂量金属硫蛋白(MT)对D-半乳糖致衰老大鼠模型的学习记忆的改善作用.方法 Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组、MT剂量组(低0.46、中1.4和高4.2 mg/kg),每组10只.采用跳台法和Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆功能,HE染色观察大鼠海马神经元形态变化,生化酶学法检测AChE、MAO-B、ChAT活性,黄嘌呤氧化酶法测定SOD,TBA法测定MDA.结果 D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆能力明显下降,海马神经元核固缩;海马AChE、MAO-B活性明显增加(P＜0.01),ChAT活性明显降低(P＜0.01),给予外源性MT能以剂量依赖性的方式改善D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆能力的损害、海马神经元损伤,并能明显阻遏D-半乳糖致衰老大鼠的海马AChE与MAO-B活性增加(低剂量组P＜0.05,中、高剂组P＜0.01),以及ChAT活性的降低(低剂量组P＜0.05,中、高剂量组P＜0.01).结论 MT能够改善D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆功能,延缓脑组织的衰老.     

参归煎剂对双侧NBM损伤痴呆大鼠海马Ach含量及ChAT活性的影响

目的探讨参归煎剂改善实验性痴呆动物模型学习记忆障碍的作用机制.方法向大鼠基底前脑Meynert基底核(NBM)注入鹅蕈氨酸(Ib),造成中枢胆碱能系统障碍性的阿尔茨海默病(AD)动物模型.通过放射免疫分析方法,观察参归煎剂对该模型大鼠海马内乙酰胆碱(Ach)含量和胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性的影响.结果给药组大鼠海马Ach含量及ChAT活性均明显高于模型组.结论参归煎剂对AD模型大鼠学习记忆功能障碍的改善作用,可能与其对中枢胆碱能系统的保护作用或者说与其增强中枢胆碱能系统的功能活动有关.     

绞股蓝皂甙对阿尔茨海默病小鼠海马胆碱能系统功能的影响

目的 探讨绞股蓝皂甙对D-半乳糖(D-gal)所致阿尔茨海默病(AD)模型小鼠海马胆碱能系统功能的影响.方法 昆明小鼠颈背部皮下注射10％ D-gal,连续6 w造模.同时,各组分别灌胃生理盐水(正常对照组、模型组)、绞股蓝(高、低剂量组).给药结束后进行水迷宫训练,24h后进行学习记忆功能测试和海马胆碱乙酰基转移酶(ChAT)与乙酰胆碱酯酶(AchE)活性测定以及Western印迹检测ChAT表达.结果 与正常对照组相比,D-gal模型组小鼠学习记忆能力,模型组ChAT活性和ChaT表达明显下降(P ＜0.05,P＜0.01);模型组AchE活性明显升高(P＜0.01).给予绞股蓝皂甙可明显改善AD模型小鼠的学习记忆功能(P＜0.05,P＜0.01),增强海马ChAT活性(P＜0.01)和降低AchE活性(P＜0.01),上调ChAT的表达(P＜0.01).结论 绞股蓝皂甙可明显提高模型小鼠的学习记忆能力,改善海马胆碱能系统功能.     

四氧嘧啶脑室内注射对小鼠脑组织自由基与胆碱能系统的影响

目的 研究四氧嘧啶脑室内注射对小鼠自由基与胆碱能系统的影响.方法 将小鼠随机分为3组,分别向侧脑室注射4 mg/kg四氧嘧啶(模型1组)、1.5 mg/kg四氧嘧啶(模型2组)、等量生理盐水(对照组).采用生化和ELISA方法测定小鼠脑组织内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乙酰胆碱(Ach)、乙酰胆碱酯酶(AchE)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)含量的变化.结果 ①氧自由基:与对照组相比,模型组SOD活性均明显降低,模型2组MDA含量明显升高(P均＜0.05);模型组总GSH含量无明显变化,GSH-Px活性明显降低(P＜0.01).②胆碱能系统:模型组脑内AchE活性高于对照组,ChAT活性和Ach含量均低于对照组(P均＜0.05).结论 四氧嘧啶脑室内注射能可引起小鼠脑组织氧自由基增多、中枢胆碱能系统活性抑制,这可能是其痴呆认知和记忆障碍的作用机制.     

胰岛素样生长因子-1对痴呆大鼠行为学及胆碱乙酰转移酶表达的影响

目的探讨胰岛素样生长因子（IGF-1）对痴呆模型大鼠学习记忆能力的影响及其对胆碱乙酰转移酶的保护作用。方法采用切断成年Wistar大鼠双侧穹窿海马伞（FF），建立隔-海马胆碱能系统损害的痴呆模型。分为痴呆治疗组、痴呆对照组和正常对照组三组。痴呆治疗组经侧脑室给予IGF-1，痴呆对照组给予生理盐水，正常对照组不给予处理。利用水迷宫和Y迷宫观察其行为学改变，利用原位杂交及图像分析测定大鼠脑内胆碱乙酰转移酶（ChAT）的表达。结果痴呆治疗组大鼠的学习记忆成绩优于痴呆对照组（P〈0．01），其脑内ChAT的表达量与痴呆对照组相比也明显增多（P〈0．01）。结论IGF-1对中枢胆碱能系统有保护作用，能改善学习记忆能力。     

双苯氟嗪对老龄大鼠学习记忆的改善作用及其机制

目的 观察双苯氟嗪对老龄大鼠学习记忆能力的影响并分析其机制。方法 选用雄性21月龄大鼠，灌胃给予双苯氟嗪5．0mg／kg90d后，跳台仪测定大鼠学习记忆能力，HE染色观察脑组织形态学变化，免疫组化法测定脑组织胆碱乙酰转移酶（choline acetyltransferase，ChAT）表达，生化分析法测定大鼠血清中SOD和MDA。结果 双苯氟嗪可缩短老龄大鼠的反应时间及受电击时间，减少错误次数，延长潜伏期，可显著增强老龄大鼠血清中SOD活力，降低MDA的含量，可以保护老龄大鼠脑损伤性改变，维持海马锥体细胞完整，并可提高老龄大鼠脑组织中ChAT表达。结论 双苯氟嗪可改善老龄大鼠的学习记忆能力，这种作用可能与其提高机体抗氧化能力及脑内胆碱能神经功能有关。     

呆聪液对老龄大鼠痴呆模型淋巴细胞增殖的影响

目的探讨中药呆聪液对老龄鼠痴呆模型免疫功能的影响。方法选择22月龄的老龄SD大鼠,脑内注射海人酸,选择性破坏神经元,制备学习和记忆功能障碍的老龄大鼠痴呆模型,然后用不同剂量的中药呆聪液给予治疗1月,用3H-TdR掺入DNA法观察呆聪液对淋巴细胞增殖的影响。结果低剂量呆聪液实验组可提高痴呆动物的淋巴细胞增殖能力,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),中剂量和大剂量实验组可显著提高痴呆动物的淋巴细胞增殖能力,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01);但中剂量和大剂量实验组组间无显著性差异。结论呆聪液可提高痴呆动物模型的细胞免疫功能。     

痴呆大鼠模型行为学、脑内胆碱乙酰转移酶及突触素的改变

目的　观察Meynert核损害对大鼠脑内胆碱乙酰转移酶 (ChAT)和突触素 (p38)的影响。 方法　Ibotenicacid定位损伤大鼠脑建立痴呆模型 ,利用水迷宫和跳台观察其行为学改变 ,利用原位杂交、免疫组化及图像分析测定大鼠脑内ChAT和 p38的表达。 结果　胆碱能损害组大鼠的学习记忆能力低于正常对照组和假手术组 ,其脑内ChAT和p38的表达也明显下降。结论　保护中枢胆碱能系统和增加p38水平有助于改善认知记忆能力     

异菝葜皂甙元及多奈哌齐对大鼠脑神经营养因子和胆碱乙酰转移酶的影响

目的平行对比观察知母皂甙元25位异构体异菝葜皂甙元（SMI）与胆碱酯酶抑制剂多奈哌齐（DN）对自然衰老大鼠行为学及脑毒蕈碱样胆碱受体（M受体）、脑源性神经营养因子（BDNF）水平和胆碱乙酰转移酶（ChAT）阳性神经元的影响，探讨SMI的作用机制。方法20月龄SD大鼠随机分为老年对照组、SMI组、DN组及SMI＋DN合并用药组，另设SD青年对照组。30d、60d及90d后用Y型电迷路评价大鼠学习记忆能力，放射配给结合法测乙酰胆碱M受体密度，酶联免疫吸附方法测BDNF含量，Fonnun法测ChAT活性，免疫组化法测大鼠不同脑区ChAT阳性神经元密度。结果老年鼠和青年鼠比较，学习记忆能力、脑内乙酰胆碱M受体密度[（1144±124）fmol／mg蛋白和（907±109）fmol／mg蛋白]、BDNF水平[（2．17±0．15）pg／mg蛋白和（1．36±0．14）pg／mg蛋白]和ChAT活性[（16．38±3．06）nmol·h^-1·mg^-1和（6．29±1．94）nmol·h^-1·mg^-1]显著降低（P〈0．05，P〈0．01）。老年鼠喂服SMI后，上述各指标均有显著改善[（1029±107）fmol／mg蛋白、（1．69±0．15）pg／mg蛋白和（10．18±1．47）nmol·h^-1·mg^-1，P〈0．05，P〈0．01]。老年鼠喂服DN后，学习能力改善，但长期记忆能力改善不显著，脑乙酰胆碱M受体密度和BDNF含量无增加，ChAT活性增加[（10．18±1．47）nmol·h^-1·mg-1]。海马、基底前脑斜角带核和Meynert基底核的ChAT阳性神经元密度检测结果，老年鼠显著低于青年鼠，SMI使该3个脑区都显著增加，DN仅使海马增加。结论SMI与胆碱酯酶抑制剂的药理作用机制不相同。SMI长期疗效明显好于胆碱酯酶抑制剂，SMI能延缓神经退行性变化的进程，可能是它改善学习记忆功能的重要机制之一。     

Melatonin alleviates behavioral deficits associated with apoptosis and cholinergic system dysfunction in the APP 695 transgenic mouse model of Alzheimer's disease

Melatonin is an endogenous antioxidant and free radical scavenger. A transgenic (Tg) mouse model for Alzheimer's disease mimics the accumulation of senile plaques, neuronal apoptosis and memory impairment. Previous studies indicated that melatonin reduced beta-amyloid (Abeta)-induced neurotoxicity. In this study, after giving melatonin at 10 mg/kg to APP 695 transgenic (APP 695 Tg) mice for 4 months, we evaluated the long-term influence of melatonin on behavior, biochemical and neuropathologic changes in APP 695 Tg mice. Step-down and step-through passive avoidance tests suggested that 8-month-old APP 695 Tg mice showed decreases in step-down latency and step-through latency and increases in count of error throughout the entire learning trial and memory session, which suggested learning and memory impairment. However, melatonin alleviated learning and memory deficits. Additionally, choline acetyltransferase (ChAT) activity also decreased in the frontal cortex and hippocampus of APP 695 Tg mice compared with non-Tg littermates. Melatonin supplementation increased ChAT activity in the frontal cortex and hippocampus. DNA fragmentation was present in the frontal cortex of the APP 695 Tg mice; melatonin reduced the number of apoptotic neurons. Congo Red staining and Bielschowsky silver impregnation both showed the apparent extracellular Abeta deposition in frontal cortex of APP 695 Tg mice. However, melatonin decreased the Abeta deposits. Our results indicate that neuroprotection by melatonin is partly related to modulation of apoptosis and protection of the cholinergic system. Early rational melatonin interventions may be one of the most promising strategies in the development of approaches to retard or prevent Abeta-mediated disease progression.