马来丝虫感染期蚴低温保存

丝虫感染期蚴(L_3)的低温保存,国内外已有一些报道。冷冻后的L_3仍能保持原有的生物学特性,在易感宿主体内能继续发育至成虫;亦能在体外继续培养,蜕皮发育至童虫(L_4)。鉴于L_3的来源和虫种的不同,所采用的冷冻方法也各异,目前尚无标准化的方法。本实验采用不同冷冻方法,对马来丝虫L_3进行低温保存研究,以探索长时间冷冻保存L_3的实验方法。材料与方法一、虫源周期型马来丝虫(Brugia malayi)感染期蚴,从本实验室马来丝虫长爪沙鼠动物模     

周期型马来丝虫感染期幼虫在人卵巢癌细胞中的体外培养(科研简报)

1985年我室成功地建立了我国第一株人卵巢粘液性囊腺癌细胞系(OMC_(685))。1986年7～10月我们用 OMC_(6(?)5)细胞系作营养层的培养系统,体外培养周期型马来丝虫感染期幼虫(L_(?)),L_3可在体外蜕皮发育为第四期幼虫(L_4),幼虫最长可存活66天。从感染周期型马来丝虫的阳性沙鼠腹腔液获取微丝蚴,人工感染中华按蚊,7.5～8天后收集 L_(?),置于含有高浓度青、链霉素(各1000 u/ml)的培养液中37±0.5℃温箱中静置约2小时,再用该培养液换液洗涤三次。     

马来丝虫感染期幼虫的低温保存及在沙鼠体内发育的观察

丝虫的感染期幼虫(L_3)于液氮内(-196℃)低温保存,对开展丝虫病的免疫学研究和体外培养以及建立动物模型均有着重要的实用价值。1975年Mecall最早报道。但对马来丝虫L_3的冷冻保存国外于1983年才获成功,国内尚未见报道。1985年我们在获得微丝蚴(mf)低温保存成功的基础上进行了L_3冷冻保存的探索,现已取得初步结果,报道如下。材料与方法一.冷冻保护剂及L_3的收集: (一)以6％二甲基亚砜、15％小牛血清的RPMI—1640培养液(PH7.2)作为L_3低温保护剂。     

冷冻保存马来丝虫成虫

近年来,国内外学者对微丝蚴及感染期蚴的低温冷冻保存已有不少报道。经冷冻后的幼虫仍具有原有的生物学特性。成虫的低温冷冻保存,国内尚未见公开报道;国外,Townson等(1986)首次报道了牛盘尾丝虫(Onchocerca gutturosa)成虫雄虫在液氮中保存36天,仍具有活力。本实验用液氮冷冻保存马来丝虫成虫获得成功,冷冻后的虫体能在体外培养液中存活并继续产出微丝蚴。材料与方法一、虫源:周期型马来丝虫(Brugia malayi)雌性成虫,取自本实验室动物模型,长爪沙鼠腹腔,生理盐水洗涤后备用。     

周期型马来丝虫微虫蚴的体外培养

建立丝虫的体外培养系统对丝虫病的防治与监测有着重要的价值。Sawyer和Weinstein(1963)首次报道犬恶丝虫在NCTC_(109)培养液中可发育到一期。1966年Wood和Suitor利用埃及伊蚊细胞的Grece＇s细胞系培养台湾猴丝虫微丝蚴,至第19天发育到第2期幼虫。此后,体外培养受到广泛注意,并取得一定进展。1987年,姜维维用CaCl_2人工脱鞘的马来丝虫微丝蚴在HamF_(12)和RPMI_(1640)含30％小牛血清中最高有20％可发育至腊肠期。陶鸿章(1989)用CaCl_2脱鞘的马来丝虫微丝蚴在含中华按蚊细胞系的TC_(199)培养液中有25.5％发育致腊肠期,并且认为有鞘微丝虫蚴的体外培养,脱鞘是使其发育的先决条件。本文报道未经人工脱鞘及人工脱鞘的微丝蚴在各种培养液及含东乡伊蚊胸肌细胞系的培养液中发育情况。     

人体淋巴丝虫各期抗原、排泄—分泌代谢抗原及抗丝虫性单克隆抗体分析

由于马来丝虫沙鼠模型的建立,马来丝虫Mf、Aw 抗原及经体外培养获得的 Es—Ag 已广泛应用于人体淋巴丝虫病的免疫学诊断和丝虫病流行病学的监测。近年来,应用单克隆抗体检测丝虫病人循环抗原亦获可喜结果。随着丝虫病防治和免疫学研究的深入发展,丝虫病的免疫预防、保护性免疫及晚期丝虫病人免疫机制的研究已成为当前我国丝虫病防治、科研领域的主要研究课题。为深入探索这些问题,本研究用 SDS—PAGE 技术对马来丝虫 Mf、L_3、AW 可溶性抗原,马来丝虫MfES—Ag、L_3—L_4Es—Ag;班氏丝虫L_3ES—Ag 和 McAb、BmAWES_5、McAb     

氯喹、呋喃嘧酮、痢特灵和海群生对体外培养的周期型马来丝虫成虫、感染期幼虫和微丝幼作用的观察

1987年4月,我们用抗疟药氯喹作了体外抗周期型马来丝虫成虫、感染期幼虫和微丝蚴的效果观察,并与呋喃嘧酮、痢特灵和海群生比较,结果报道如下。材料与方法一.虫源(一)周期型马来丝虫成虫和微丝蚴(Mf)的收集:分别用腹腔灌洗法和解剖法从感染马来丝虫沙鼠腹腔内收集 mf 和成虫于消毒离心管,盛 Mf 管加入10倍灭菌 RPMI—1640液(加青、链霉素各500u/ml),1500rpm 离心10分钟,弃去上清液,如此反复3     

福建蚊体内5种常见丝虫感染蚴的形态比较

福建已发现有寄生于人体、家畜、家禽及各种鸟类的丝虫15种,其中以吴策丝虫属班氏丝虫(W.banerofti)、布鲁丝虫属马来丝虫(B.malayi)、恶丝虫属的犬恶丝虫(D.immitis)和猫恶丝虫(D.repens)及腹腔丝虫属的牛腹腔丝虫(S.digitata)为在丝虫病调查和蚊媒监测工作中,正确鉴别人体丝虫和动物丝虫的幼虫,现将蚊体内5种常见丝     

伊维菌素降低马来丝虫感染东乡伊蚊和长爪沙鼠传播能力的效果观察

作者用伊维菌素(IVM)0.05ug/ml、0.1 ug/ml和海群生(DEC)150ug/ml浓度在体外与兔血混合马来丝虫微丝蚴实验感染东乡伊蚊。12天后全部蚊虫进行个体解剖:伊维菌素组蚊体内未发现马来丝虫三期幼虫,而海群生组东乡伊蚊感染率为30.5％、对照组为36.0％。单剂量的伊维菌素以400ug/kg体重,对照组用无菌生理盐水,经皮下或腹腔液内注入微丝蚴阳性的长爪沙鼠。治疗组和对照组分別于治疗后间隔1、7、30和75天喂饲东乡伊蚊。实验组于治疗后1—15天蚊体内未发现幼虫,对照组东乡伊蚊自然感染率为13.6％—14.6％。在治疗后75天蚊体内检获L_3数目,仍低于对照组。本研究提示伊维菌素能降低马来丝虫在蚊媒中的传播作用。其作用方式将进一步探讨。     

周期型马来丝虫微丝蚴在不同基础培养液中存活情况的比较观察

1983年WHO丝虫病专家委员会报道班了氏丝虫微丝蚴能在培养液中进行培养,大部分微丝蚴脱鞘后8天发育为第一期蚴虫(L_1)。1987年2月,我们对马来丝虫微丝蚴(mf)在不同基础培养液中存活情况进行了观察比较,现将结果报道如下: 一、mf的收集: 以生理盐水腹腔灌洗法从感染丝虫的鼠体内获取mf。方法详见贵州省丝虫病防治与科研资料汇编(1955—1966页) 二、培养技术: (一)基础培养液:应用Earle液;Earle加0.5％水解乳旦白(L+E);Hanks液;RPMI—1640;No199。每种培养液取2ml加     

马来丝虫微丝蚴低温保存及在东乡伊蚊体内发育的观察

丝虫幼虫置液氮内(-196℃)冷冻保存作为“虫库”,对开展丝虫病的生物学和免疫学研究开辟了新的途径。1969年以来国外已有报道,但国内报道甚少。1985年我们开始进行马来丝虫微丝坳(Mf)于液氮内不同时间的低温保存研究,并观察它在东乡伊蚊体内发育的情况,现报告如下。材料和方法一、Mf 的收集及低温保护剂用腹腔内灌洗法从马来丝虫感染的长爪沙鼠腹腔液内收集 Mf 于离心管内,加入10倍37℃灭菌生理盐水,1500rpm 离心10分钟,     

周期型马来丝虫微丝蚴液氮内保存的初步观察

丝虫幼虫置液氮内冷冻保存国外已有报道,国内报道甚少。1985年我们参考国外有关文献,并改进一些方法,进行了周期型马来丝虫微丝蚴液氮内冷冻保存的试验,取得初步结果,现报告如下。材料和方法一.微丝蚴(mf)的收集及冷冻保护液用腹腔内灌洗法从马来丝虫感染的长爪沙鼠腹腔液中收集微丝蚴。实验前用灭菌的37℃Earle 氏液冲洗微丝蚴,并于1500rpm 离心10分钟,弃去上清液,反复三次。     

丝虫周期性机理的研究——微丝蚴的自身萤光及其周期性

本文作者搜集了具有夜现周期性、亚周期性、前夜现周期性、日现周期性及无周期性的人和动物丝虫共21个种、株,通过荧光显微镜观察及微量荧光测定法检查这些丝虫的微丝蚴体内是否存有自身荧光及其相对的荧光强度;并对微丝蚴体内的荧光颗粒的有无及其密度与周期性型之间的关系进行了探讨。实验结果证明,在高度夜现周期性型的班氏丝虫(普通株)、马来丝虫(逞罗株)及寄生猫体的派特丝虫(Brugia patei),的微丝坳体内,不经任何染色,可见到弥散性自身荧光和许多自身荧光颗粒;在低度夜现周期性型的犬恶丝虫及马来丝虫(伦敦和东京的猫体及朝鲜的人体)微丝坳体内的荧光颖粒较少,在前夜现周期性型     

抗丝虫病药物的进展

据世界卫生组织1974年的报道,全世界丝虫病患者约有2亿5千万。流行于亚州、非洲、大洋洲、中南美洲等地。过去丝虫病在我国的流行也很广,解放后,尤其是无产阶级文化大革命以来,在毛主席革命卫生路线的指引下,各地区积极开展丝防工作,使发病率大大降低,流行区日趋缩小。寄生于人体丝虫主要有班氏丝虫(Wuchereria Bancrofti)、马来丝虫 (WuchereriaMalayi)、蟠尾丝虫(Onchcerca Volvulus)和罗阿丝虫(Loa Loa)等。在我国主要为班氏和马来二种丝虫。早期使用有机砷药物治疗丝虫病。自1947年发现海群生(Hetrazan)对丝虫病有效之后,     

经卫生部初步选定的我省部分重大医药卫生科研成果

周期型马来丝虫长爪沙鼠模型主要研究单位:遵义医学院建立人体寄生丝虫病的动物模型,对丝虫生物学特性的认识、抗丝虫药物的筛选、丝虫病免疫和免疫诊断方法的研究以及丝虫病理学的研究都有重要的意义。以往用大动物猴和猫建立马来丝虫动物模型。至于用小动物感染人体丝虫的研究,国外报导是用人体的亚周期型马来丝虫人工感染长爪沙鼠成功。但我国寄生人体的马来丝虫属于周期型,与国外的不同。一九七四年遵义医学院用人工接种(腹腔注射)的方法,成功地将我国寄生人体的周期型马来丝虫感染长爪沙鼠成功,并可传种接代,今已     

江苏省丝虫病现状的分析

本文报告1980～1981年对江苏省71个县、市的216个大队作丝虫病的抽样调查,结果全省居民微丝蚴平均阳性率为2.01%。其中班氏丝虫单一感染地区的66个县市中有40个以及马来、班氏丝虫混合感染的5个县市的阳性率都已降到1%以下;多数县、市未查到10岁以下的儿童阳性者,苏州、镇江、南通三地区和南京市蚊媒中未查到感染期幼虫。联系已往有关资料,说明20多年来江苏无论在居民微丝蚴阳性率、阳性者的感染度、蚊媒自然感染率均有所下降,但尚有部分县、市(主要是苏北灌溉总渠以北)仍维持在较高的感染水平。本文就防治对策和措施进行了讨论。     

非典

非典科技攻关组研究七大进展 6月3 日,非典科技攻关组副组长、军事医科院副院长黄培堂发布了非典流行病研究的科技七大方面的进展情况。 一、确定了非典型肺炎病毒体外环境存活时间。1.在人体常见的三种排泄物(痰、粪便、尿液)和血液中,非典型肺炎病毒能长时间保持活力。在24℃条件下,在痰中和粪便中存活约5 天,在尿液中存活约10天,血液中可存活15天。2.在室内条件下,滤纸、棉布、木块、土壤、金属、塑料、玻璃等表面可存活3 天。     

周期型马来和斑氏丝虫成虫形态扫描电镜的观察

1984年,我们对贵州地区马来丝虫及海南地区斑氏丝虫成虫形态进行了观察,现报告如下:材料和方法分别从沙鼠和恒河猴模型获取贵州地区人体马来丝虫((?)10,♂7)及海南地区斑氏丝虫成虫((?)4,♂25),置5％甘油酒精中固定,先进行光学显微镜观察,然后将成虫取出,以pH7.4缓冲生理盐水洗涤数次,3％戊二醛固定3～24小时,再以生理盐水冲洗数次至无戊二醛气味止;逐级乙醇脱水,每次3～5分钟,以乙酸乙酯替代15分钟,置于CO_2临界点干燥器内干燥,解剖镜下切取头、体、尾各部,在真空冷模仪内倾斜旋转喷金,送     

马来丝虫成虫冰冻切片抗原间接荧光抗体试验诊断丝虫病的初步观察

丝虫病间接荧光抗体试验(IFA)始于1962年,Chowdhury 等用微丝蚴为抗原诊断班氏和盘尾丝虫病,继而 Coudert(1968)、Ambrise—Thomas(1969)(1974)和 Diesfeld 等(1979)用 Dipetalonema viteae 丝虫成虫冰冻切片为抗原 IFA 试验诊断丝虫病和流行病学调查取得一些进展。Grove(1978)用感染沙鼠腹腔的马来丝虫成虫为抗原 IFA 试验可提高其敏感性和特异性。国内河南医学院冯祖梅等(1982)以马来丝虫成虫为抗原对丝虫病患者进行检查阳性符合率为92.81～98.39%、假阳性为0.66%,与钩虫、蛔虫、鞭虫等其他蠕虫感染未见交叉反应。1983年我们采用同法试验,现将结果介绍如下:材料和方法一.抗原的制备:断头法杀死实验感染马来丝虫的沙鼠,收集丝虫成虫,灭菌生理盐水     

螺旋神经节神经元体外培养及提高细胞产率和活性的探讨

目的在体外建立大鼠耳蜗螺旋神经节神经元培养模型,并提高其产出率及细胞活性.方法将出生后5天的大鼠耳蜗螺旋神经节神经元在体外培养3～5天,用神经丝蛋白(Neurofilamentprotein,NFP)单克隆抗体进行免疫组化染色.结果显示耳蜗螺旋神经节神经元在体外无血清培养条件下,可以存活并进行正常分化.结论耳蜗螺旋神经节神经元在体外有稳定的可塑性及轴突再生修复能力.