广西壮族和汉族人群Toll样受体4基因启动子区遗传多态性研究

目的探讨广西壮族和汉族健康人群Toll样受体4(TLR4)基因启动子区rs10116253C/T、rs10983755G/A位点多态性的分布情况及其与不同地区、不同人群间的差异。方法采用单碱基延伸PCR技术及DNA测序方法检测123例广西壮族和汉族健康人群TLR4基因启动子区rs10116253C/T、rs10983755G/A位点的基因型和等位基因,并对比分析其与北京人、日本人、欧洲人、非洲人的基因型和等位基因频率的分布差异。结果广西人群TLR4基因启动子区rs10116253C/T位点存在CC、CT、TT三种基因型,分布频率分别为13.82%、44.72%、41.46%,三种基因型在广西地区男女组间相比,差异有统计学意义(P<0.05),而等位基因在广西地区男女组间相比,差异无统计学意义(P>0.05);其基因型及等位基因分布频率与欧洲人群相比,差异有统计学意义(P<0.05)。rs10983755G/A位点存在AA、AG、GG三种基因型,分布频率分别为4.07%、32.52%、63.41%,其基因型和等位基因在广西地区男女组间相比,差异均无统计学意义(P>0.05);其基因型及等位基因分布频率与欧洲、非洲人群相比,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论广西人群TLR4基因rs10116253C/T、rs10983755G/A位点多态性在不同的人群和地区之间存在差异。     

TLR4基因内含子区rs12377632T／C位点多态性研究

目的：通过对TLR4（tolllikereceptor4）基因内含子区单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism,SNP）基因型和等位基因的研究,旨在了解其在中国广西地区人群的频率分布及其在不同地区、种族之间分布是否存在差异。方法：使用单碱基延伸PCR技术和DNA测序方法来检测中国广西地区人群TLR4基因内含子区rsl2377632T／c多态性,并比较中国广西地区人群与人类基因组计划研究的4个人群（欧洲、中国北京、日本、非洲）的SNP分型数据,以分析TLR4基因内含子区rsl2377632T／C位点基因型和等位基因在不同地区、人群之间的差异。结果：中国广西地区人群的TLR4基因内含子区rsl2377632T／C位点SNP分型数据在男性、女性之间分布差异无统计学意义（P〉0．05）。其sNP分型数据与日本、中国北京地区人群相比较,分布差异无统计学意义（P〉0.05）;而与欧洲、非洲地区人群比较,分布差异有统计学意义（P〈0．001）。结论：TLR4基因内含子区rs12377632T／c位点SNP,在不同地区、种族人群之间存在明显差异。     

TLR4受体基因多态性与呼吸系统疾病的相关性研究

Toll样受体家族是近年来新发现的连接天然抗病原体反应和适应性免疫最重要的分子之一,可通过识别病原相关的分子模式,引发信号转导,产生肿瘤坏死因子α、干扰素γ等多种促炎因子,并最终激活获得性免疫系统。而研究最早、最多的成员是Toll样受体4(TLR4)。近年来的众多研究表明,TLR4作为跨膜受体与呼吸系统的多种疾病有着密切的联系。对TLR4的研究可以进一步了解呼吸系统疾病的发病机制,以寻找更好的抗感染、抗炎症的治疗方法。     

TLR3c.1377,TLR9-1486和TLR9 2848基因多态性与多发性硬化易感性的关系

目的：探讨中国南方汉族人群Toll样受体（Toll like receptor,TLR）3和9单核苷酸多态性与多发性硬化（multiple sclerosis,MS）遗传易感的相关性。方法：以123名临床及实验室确诊的中国南方汉族MS患者和126名与入组病人种族、年龄、性别相匹配健康志愿者为研究对象,利用聚合酶链-限制性长度多态性分析（PCR-RFLP）技术检测TLR3和TLR9基因多态性。结果：TLR3c.1377基因型、等位基因频率MS组与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,携带T等位基因可降低MS患病危险性（OR=0.532,P=0.014）。TLR9-1486基因型、等位基因频率在MS组与对照组间分布差异无统计学意义;TLR92848A等位基因频率MS组较对照组增高（39.8%vs.30.6%,P=0.037）,A＋等位基因携带者明显高于A-携带者患病危险性（OR=1.837,P=0.020）。关联分析未发现TLR3c.1377与TLR9-1486和TLR92848有联合作用。TLR9-1486和TLR92848处于强连锁不平衡状态;MS组与对照组间单倍体型频率分布差异无统计学意义。结论：TLR3c.1377基因型频率、等位基因频率及TLR92848等位基因频率可能与中国南方汉族人群MS发病相关,两基因位点可能均是MS的易感基因或与易感基因相连锁。     

TLR3c.1377, TLR9-1486)和TLR9 2848基因多态性与多发性硬化易感性的关系

目的:探讨中国南方汉族人群Toll样受体(Toll like receptor, TLR)3和9单核苷酸多态性与多发性硬化(multiple sclerosis, MS)遗传易感的相关性.方法:以123名临床及实验室确诊的中国南方汉族MS患者和126名与入组病人种族、年龄、性别相匹配健康志愿者为研究对象,利用聚合酶链-限制性长度多态性分析(PCR-RFLP)技术检测TLR3和TLR9基因多态性.结果:TLR3c.1377基因型、等位基因频率MS组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),携带T等位基因可降低MS患病危险性((OR=0.532, P=0.014).TLR9-1486基因型、等位基因频率在MS组与对照组间分布差异无统计学意义;TLR9 2848 A等位基因频率MS组较对照组增高(39.8% vs. 30.6%,P=0.037),A+等位基因携带者明显高于A-携带者患病危险性 (OR=1.837,P=0.020).关联分析未发现TLR3c.1377与(TLR9-1486)和TLR9 2848有联合作用.TLR9-1486和TLR9 2848处于强连锁不平衡状态;MS组与对照组间单倍体型频率分布差异无统计学意义.结论:TLR3c.1377基因型频率、等位基因频率及TLR9 2848等位基因频率可能与中国南方汉族人群MS发病相关,两基因位点可能均是MS的易感基因或与易感基因相(连锁.)     

TLR4基因单核苷酸多态性与哮喘严重度及哮喘相关临床指标的关系

目的:探讨Toll 样受体4(TLR4)单核苷酸多态性(SNPs)与哮喘发病严重度和哮喘相关临床指标的相关性?方法:在HapMap上挑选TLR4的全部标签SNPs?连续性招募哮喘患者318例?采用SNPstream和Taqmans法进行基因分型?流式细胞技术检测外周血中CD4+CD25high调节性T细胞及其表面TLR4的表达?结果:TLR4的4个标签SNPs rs1927914?rs10983755?rs11536879?rs1927907与哮喘患者外周血嗜酸性粒细胞?血清总IgE和hsCRP无相关性?但是rs1927914 TT基因型比TC和CC基因型的FEV1%要低(P = 0.043),哮喘发病程度更严重(P = 0.024)? 同样,rs10983755 GG基因型比GA和AA基因型?rs1927907 GG基因型比GA和AA基因型哮喘发病程度更严重(P = 0.009和P = 0.013)?TLR4 SNPs与哮喘患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞无相关性,但是和CD4+CD25high 调节性T细胞表面TLR4的表达量有关?结论:TLR4 SNPs和哮喘严重度分级及CD4+CD25high 调节性T细胞表面TLR4的表达量相关,与哮喘其他表型无相关性?TLR4 SNPs可能影响哮喘症状的严重度,这为哮喘的基因治疗提供了一定理论基础?     

中国广西人群Nogo-B基因内含子区遗传多态性的检测

目的 研究Nogo-B基因内含子区单核苷酸多态性(SNP)各等位基因及基因型在中国广西地区人群中的分布频率,比较其在不同种族间分布的差异.方法 采用单碱基延伸的PCR技术和DNA测序法检测199例中国广西人的Nogo-B基因内含子区rs12464595 C/T、rs2864052 G/A多态性,并结合人类基因组计划( Hapmap)公布的四个人群(欧洲人、非洲人、日本人和中国北京人)的SNP分型数据,比较分析这五个人群的基因型及等位基因的分布频率.结果 在中国广西人群中存在Nogo-B基因内含子区rs12464595 C/T、rs2864052 G/A多态性,与欧洲及非洲人群比较,Nogo -B基因多态性的分布频率均存在显著性差异(P＜0.05);而与日本人及北京人比较差异无显著性(P＞0.05).结论 在中国广西人群中存在Nogo-B基因多态性,但与其他种族人群比较存在显著性差异,这种差异对于人类学的研究可能起重要的作用.     

广西人群Toll样受体4及其rs10116253C/T位点多态性与冠心病的相关性研究

目的探讨广西人群Toll样受体4(TLR4)及其rs10116253C/T位点多态性与冠心病(CHD)的相关性。方法选取278例CHD患者为CHD组,123例健康体检者为对照组。采集两组入选者7 ml外周静脉血,检测两组外周血TLR4基因rs10116253位点的多态性和血清TLR4的表达水平。结果广西人群CHD组和对照组三种基因型(CC、CT、TT基因型)和等位基因(C和T等位基因)频率分布趋势相同,rs10116253位点携带CT基因型(OR=0.372,95%CI:0.191~0.722,P=0.003)和C等位基因(OR=0.440,95%CI:0.257~0.752,P=0.002)的女性较携带相同等位基因的男性患CHD的风险低,携带TT基因型(OR=0.505,95%CI:0.257~0.991,P=0.045)的汉族人较携带相同基因型的壮族人患CHD的风险低;CHD组血清TLR4表达水平明显高于其对照组[(4.29±1.55)ng/ml对比(1.07±0.43)ng/ml,t=31.969,P<0.05],且在CHD组内随着病变累及血管支数的增加,TLR4也随之升高,其差异均具有统计学意义(P<0.05),rs10116253位点不同基因型CHD患者组内血清TLR4水平、病变累及血管支数间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在中国广西人群中,TLR4基因rs10116253C/T位点多态性可能是CHD发病的一个遗传易感因素,外周血TLR4的表达水平在CHD患者中明显升高,且可能与病变累及血管支数有关。     

TLR9-1486和TLR9-2848基因多态性与胃癌易感性关系

目的 探讨Toll样受体9(TLR9)编码基因TLR9-1486和TLR9-2848位点多态性以及EB病毒(EBV)感染与胃癌易感性的关系。方法 选取131例胃癌病人为研究对象,包括43例EBV相关胃癌(EBVaGC)和88例EBV阴性胃癌(EBVnGC),同时随机抽取66例健康人外周血标本作为对照。采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测TLR9基因-1486位点T/C和-2848位点G/A多态性。结果 TLR9-1486T/C位点多态性分析显示,胃癌组和对照组3种基因型分布和等位基因频率比较差异无显著性(P>0.05);EBVaGC组和EBVnGC组中各基因型分布和等位基因频率差异也无显著性(P>0.05);与携带T等位基因者相比较,C等位基因携带者胃癌和EBVaGC发病风险无明显升高趋势。TLR9-2848G/A位点多态性分析显示,胃癌组和对照组3种基因型分布和等位基因频率差异无显著性(P>0.05);EBVaGC组和EBVnGC组中各基因型分布和等位基因频率差异也无显著性(P>0.05);与G等位基因携带者比较,A等位基因携带者胃癌和EBVaGC易感性无明显升高。结论 TLR9-1486和TLR9-2848位点多态性与胃癌易感性无关,且在EBVaGC发生中与EBV感染无协同关系。     

TLR4基因Asp299Gly多态性与冠心病关系的Meta分析

目的：采用Meta分析的方法系统评价TLR4基因Asp299Gly多态性与冠心病（CHD）的关系,为探索CHD的遗传背景提供循证医学证据。方法：全面检索1990-2013年PubMed、Medline医学数据库、中国期刊全文数据库（CNKI）、万方数据库和维普数据库,检索TLR4基因Asp299Gly多态性与冠心病关系的病例-对照研究。在全面文献回顾的基础上对文献进行筛选、评价和数据提取。采用RevMan 5.0统计软件,对符合纳入标准的文献进行统计分析,包括异质性检验、合并效应量、评估文献发表偏倚以及敏感性分析。结果：共纳入11篇文献,累计病例8 343例,对照5 357例。TLR4基因Asp299Gly位点的基因型Meta分析结果,合并OR=0.98,95%CI(0.78,1.23),P=0.87;TLR4基因Asp299Gly位点的等位基因Meta分析结果,合并OR=0.98,95%CI(0.78,1.22),P=0.84。结论：TLR4基因Asp299Gly多态性可能与CHD无关联。     

TLR-9 基因多态性与膝骨关节炎的易感性研究

目的研究Toll样受体9(TLR9)基因rs187084和rs5743836位点单核苷酸多态性,探讨其与膝骨关节炎易感性之间的联系。方法采用直接测序法分析145例膝骨关节炎患者和145名健康对照组的TLR9基因rs187084-1486TC和rs5743836-1237CT位点单核苷酸多态性。结果rs187084位点C等位基因是膝骨关节炎发生保护因素(OR=0.599,95%CI=0.424-0.847,P=0.002)。rs5743836位点基因型频率在研究组和对照组之间差异无统计学意义(χ~2=5.14,P=0.08)。TLR9基因rs187084位点单核苷酸多态性与年龄、膝骨关节炎严重程度相关,rs5743836位点单核苷酸多态性与年龄、膝骨关节炎严重程度不相关。结论 TLR9基因rs187084-1486TC位点单核苷酸多态性与膝骨关节炎易感性相关,rs5743836-1237CT位点单核苷酸多态性与膝骨关节炎易感性不相关。     

TLR4基因多态性与刨伤后脓毒血症相关性研究

目的探讨我国浙江汉族人群Toll样受体4（TLR4）基因（Asp299Gly和Thr3991le）多态性与创伤后脓毒血症的关系。方法在50例创伤后脓毒血症患者和100例正常对照者中,采用等位基因特异性聚合酶链反应一限制性片段长度多态性方法（ASPCR—RLFP）检测TLR4Asp299Gly和Thr3991le基因多态性,分析TLR4基因多态性与创伤后脓毒血症的相关性。结果在所有的研究对象中均未发现TLR4Asp299Gly和Thr3991le基因突变。结论浙江汉族人群TLR4Asp299Gly和Thr3991le基因多态性与创伤后脓毒血症易感性可能无相关性。     

湖北人群Toll样受体4基因多态性研究

目的 研究湖北人群Toll样受体4(TLR4)Asp299Gly和Thr399Ile基因多态性分布特征。方法 采用等位基因特异性聚合酶链反应(ASPCR)-限制酶片断长度多态性(RFLP)检测TLR4 Asp299Gly和Thr399 Ile基因多态性。结果 在所有的253例中国湖北人群样本中，没有检测到TLR4 Asp299Gly和Thr399Ile基因多态性存在。结论 TLR4基因多态性在不同地区和人群发生的频率是不同的，与白种人相比，中国湖北人群的TLR4Asp299G1y和Thr399Ile的基因多态性非常罕见。     

烧伤患者外周血单个核细胞TLR2和TLR4表达的变化

目的观察烧伤患者外周血单个核细胞表面TLR2、TLR4表达的变化。方法选取深II度以上烧伤30%~50%TBSA烧伤患者23例,伤后48 h取外周血20 mL,同时抽取健康献血者(设为对照组)12例,外周血20 mL。常规方法分离出单个核细胞,用异硫氢酸荧光素(FITC)标记的小鼠抗人TLR2抗体和藻红蛋白(PE)标记的小鼠抗人TLR4抗体对外周血单个核细胞进行免疫染色,流式细胞仪(FCM)测定FITC、PE阳性细胞率及其平均荧光强度(MFI)。结果烧伤后48 h,患者外周血单个核细胞TLR2-FITC阳性细胞数量上升,为(57.57±18.56)%,与对照组的(26.32±10.31)%相比,P<0.05;细胞表面TLR2-FITC荧光强度下降,TLR2-FITC MFI为58.5±18.76,低于对照组(69.79±23.42);TLR4-PE阳性率为(29.84±13.28)%,与对照组的(12.75±5.18)%相比,P<0.05;TLR4-PE MFI减弱,与对照组相比,P<0.05。结论烧伤患者外周血单个核细胞TLR2/4阳性数量均升高,而TLR2/4表达强度降低。     

TLR2、TLR4在实验性末端回肠炎发病过程中的变化及意义

目的 探讨Toll样受体(Toll-like receptor,TLRs) TLR2、TLR4在实验性末端回肠炎发病过程中的变化及意义.方法 60只雄性SD大鼠,随机均分为造模组、缝线组、对照组.造模组行末端回肠-盲肠侧侧吻合术,缝线组只在末端回肠作手术缝线,对照组只给予麻醉,不作手术.分别于2周及8周时处死大鼠,收集...     

OCTN1、OCTN2基因多态性与广西壮族炎症性肠病患者的相关性研究

目的 研究OCTN1、OCTN2基因单核苷酸多态性(SNP)位点C1672T、G-207C与中国广西壮族炎症性肠病(IBD)易感性的关系.方法 分别收集广西无亲缘关系的壮族70例和汉族76例IBD患者及壮族80例和汉族87例健康对照者的肠黏膜组织,苯酚/氯仿法提取各组肠黏膜组织的DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度...     

TLR4和DcR3在肝细胞癌中的表达及其意义

目的 研究肝细胞癌(HCC)中Toll样受体4(TLR4)、诱骗受体3(DcR3)的表达及其意义.方法 应用免疫组化方法检测60例HCC组织中及对应癌旁组织中的TLR4和DcR3蛋白表达.结果 60例HCC肿瘤组织中7例TLR4表达阳性(11.7%),对应癌旁组织中43例TLR4表达阳性(71.7%),两者比较P＜0.01.60例肿瘤组织中46例DcR3表达阳性(76.7%),对应癌旁组织中11例DcR3表达阳性(18.3%),两者比较P＜0.01.TLR4与DcR3在HCC中的表达具有负相关性.结论 TLR4与DcR3在HCC发生发展过程中起重要作用.     

子宫内膜异位症患者在位和异位内膜组织中TLR4的表达及意义

目的 检测Toll样受体4（TLR4）在正常子宫内膜、子宫内膜异位症（EMs）患者在位内膜和异位内膜中的表达情况,探讨TLR4在EMs发病中的作用.方法 选择EMs患者的卵巢异位内膜45例（EMs异位内膜组）和相对应的在位子宫内膜32例（EMs在位内膜组）,32例非EMs患者子宫内膜组织为对照组.采用免疫组织化学二步法检测各组内膜组织中TLR4的表达情况,以及TLR4在EMs不同临床分期的异位内膜组织中的表达,作半定量分析后进行组间比较.结果 EMs患者异位内膜、在位内膜及对照组子宫内膜中,TLR4蛋白均有不同程度表达,主要表达于子宫内膜腺上皮和腔上皮.TLR4蛋白在EMs患者异位内膜、在位内膜的表达均低于对照组子宫内膜,差异均有统计学意义（均P＜0.01）,但在异位内膜中表达要高于在位内膜的表达,差异有统计学意义（P＜0.01）.TLR4蛋白在Ⅰ～Ⅱ期EMs患者异位内膜的表达与Ⅲ～Ⅳ期患者异位内膜的表达比较,差异无统计学意义（P ＞0.05）.结论 EMs患者在位和异位内膜组织中的TLR4表达下降,但在异位内膜表达高于在位内膜,TLR4可能参与了EMs的发生、发展.     

TLR4-2242 T→C variant increases transcriptional activity of its promoter

Objective： To investigate the effects of-2242, 1892 and -1837 single nucleotide polymorphisms （SNPs） on toll-like receptor 4 （TLR4） promoter activity. Methods： Polymerase chain reaction （PCR） and site direct mutation technology were used to construct TLR4 basic promoter and -2242C, -1892A and -1837G mutate promoter plasmids. Dual-Luciferase Reporter assay system was used to detect the activity of constructed promoter following human embryonic kidney （HEK） 293 cells were transiently cotransfected with the constructed plasmids and the control plasmid pRL-CMV. Results： In HEK293 cells, the activity of-2242C mutate promoter was higher than -2242T promoter, and there was no significant difference when both -1892A and -1837G mutate promoter compared with -1892G and -1837A promoter, respectively. Conclusion： It is implied that -2242T→C base variation can enhance the activity of TLR4 promoter, while -1892 and -1837 SNPs have no effect on TLR4 promoter activity.     

Toll样受体4与器官移植排异

器官移植是目前治疗恶性疾病的方法之一,而移植相关并发症制约了器官移植的进一步发展.其中,移植物排斥是移植后高死亡率的主要原因.Toll样受体4(TLR4)在先天免疫和免疫耐受中是个关键分子,但在器官移植后移植物排斥中的作用目前尚不明确.文中将对TLR4信号途径在器官移植后移植物排斥中如何通过调控抗原递呈细胞( APC)成熟、活化T细胞、引发免疫攻击的分子机制作一综述.