Erk信号传导通路与细胞周期调控

近年来 ,丝裂原激活蛋白激酶 (Mitogenactivatedproteinkinase,MAPK)信号传导通路的研究引人注目 ,细胞外信号调节蛋白激酶 (extracellularregulatedprotein ,ERk)为MAPK家族重要成员 ,围绕肿瘤、血液等细胞领域的研究表明 :ERK信号通路是多数生长因子、细胞因子调控细胞增殖的重要途径。进一步研究证实 ,ERK信号传导通路参与了细胞周期调控。本文对近期ERK信号传导通路调控细胞周期的研究扼要综述如下 :1　ERk信号传导通路　　ERK为MAPK家族重要成员 ,它具有MAPK家族两个显著特征 :(1)通过VIII区域苏氨酸、丝氨酸双位点磷酸…     

运动改善衰老内皮祖细胞功能活性的机制研究

目的:探讨运动对衰老内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)功能活性的影响及机制。方法:入选30名健康老年人(年龄:64.3±5.6岁),排除主要的心血管危险因素、疾病史和临床证据,参与12周中等强度改良布鲁斯运动试验(每周3次,每次30 min,共12周)。运动前后抽取志愿者外周血20ml提取分离培养EPCs,比较EPCs体外迁移、粘附能力变化;通过建立裸鼠颈动脉拉脱损伤模型,观察运动对EPCs修复裸鼠颈动脉内皮损伤能力的影响。检测运动前后EPCs表面基因和蛋白的表达情况。结果:12周的平板运动明显提高衰老EPCs体外的迁移、粘附及血管内皮损伤修复能力(运动前:33.1%±6.2%;运动后:50.6%±7.1%;P<0.01)。EPCs表面的CXCR4信号通路明显上调(P<0.01)。结论:运动明显改善老年志愿者EPCs血管内皮损伤修复能力,其机制可能与EPCs表面的CXCR4信号通路密切相关。     

氧化应激产物对内皮祖细胞的影响

内皮祖细胞（endothelial progenitorcells,EPCs）是干细胞领域的研究热点之一,其可以分化成熟为内皮细胞,参与血管形成及血管内皮损伤后修复,EPCs内活性氧类（Reactive oxygen species,Ros）生成失衡,将导致正常EPCs生长周期紊乱,过多的ROS甚至诱导其凋亡。虽然近年来有关EPCs体外培养及ROS通过细胞信号通路诱导EPCs凋亡的研究已经取得很大进展,但仍有很多问题有待进一步解决,本文主要对EPCs的生物学特性、EPCs相关的ROS增多机制、氧化应激信号通路对EPCs功能影响等问题进行综述。     

MAPK反义寡核苷酸对乙醛活化HSC增殖和JNK信号通路的影响

目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)反义寡核苷酸(ASO)对乙醛活化肝星状细胞(HSC)增殖和MAPK中的c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路的影响。方法:用脂质体转染法将MAPKASO导入乙醛活化HSC中,通过MTT法检测细胞增殖情况、流式细胞仪检测MAPK-JNK表达。结果:MAPK ASO可明显抑制细胞增殖及抑制JNK信号通路的表达,其抑制率分别为40.81%、60.6%。与对照组比较有显著差异(P<0.05)。结论:MAPKASO能够抑制HSC的增殖,阻断JNK信号通路,这可能成为治疗肝纤维化的一个有效途径。     

表皮生长因子受体与非小细胞肺癌放射敏感性相关的研究进展

表皮生长因子受体(EGFR)是一种相对分子质量为170000的跨细胞膜糖蛋白受体,是HER1家族中的一员,由原癌基因c-erbB1编码[1].EGFR由膜外配体结合区、单链跨膜区和胞内络氨酸激酶区组成,其配体包括表皮生长因子(EGF)、肿瘤坏死因子-α(TGF-α)等.EGFR在肿瘤细胞增殖、迁移、生存及肿瘤的血管生成等方面均发挥着重要作用,当配体与EGFR的胞外配体结合区结合,2个EGFR或EGFR与HER家族中的另一种受体发生二聚体化,导致其胞内段络氨酸激酶域自身磷酸化,磷酸化的EGFR进一步诱发胞内一系列信号传导通路的激活,如ras/MAPK通路,P13K/AKT通路,JAK/STAT通路等,分别传递细胞增殖,抗凋亡,细胞迁移及血管生成等信号.EGFR在大多数非小细胞肺癌中存在高表达,且与肿瘤的放疗效果密切相关.目前,针对EGFR的靶向治疗与放化疗联合成为非小细胞肺癌治疗的研究热点.本文就近几年EGFR与非小细胞肺癌放射敏感性相关的基础与临床研究进展进行综述.     

黑色素瘤与MAPK信号通路

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是细胞内介导细胞外信号到细胞内反应的信号转导系统中最重要的一员,参与细胞生长、分化、凋亡等多种生理过程.其中丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)与黑色素瘤关系最密切,对该信号通路的深入研究,除了探讨新的调节机制,还为临床早期诊断及新的分子靶向治疗提供依据.     

嗜酸性粒细胞对支气管上皮细胞中p38 MAPK信号转导通路的活化作用观察

目的探讨嗜酸性粒细胞在与支气管上皮细胞接触共培养过程中对后者炎性介质释放的影响。方法用CD16抗体磁珠法分离嗜酸性粒细胞,免疫印迹(Western blotting)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测支气管上皮细胞中磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、激活转录因子(ATF)-2蛋白含量,微珠免疫沉淀结合免疫印迹法检测p38MAPK活性。结果经与嗜酸性粒细胞共同培养活化后,支气管上皮细胞中磷酸化p38MAPK蛋白含量及其活性均显著上升,p38MAPK信号转导通路链中下级底物蛋白质ATF-2(细胞内调控某些基因表达的转录因子)量也显著上升;多聚甲醛固定的嗜酸性粒细胞同样可以活化支气管上皮细胞,增加其细胞内p38MAPK蛋白质磷酸化。p38MAPK酶选择性抑制剂SB203580可有效抑制p38MAPK诱导其底物ATF-2磷酸化。结论嗜酸性粒细胞与支气管上皮细胞接触共培养过程中对炎性介质表达和释放的调控作用可能是通过活化支气管上皮细胞内p38MAPK信号传导通路未实现的。     

p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路在急性胰腺炎中的作用

丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen-activated protein kinase,MAPK）信号通路能够接受多种细胞外刺激,是真核生物细胞传递细胞外信息到细胞内,调节细胞生命活动的重要信号转导系统。p38MAPK信号通路是迄今发现的重要MAPK通路之一,在炎症、细胞分化、细胞周期、细胞凋亡和发育等多方面发挥重要调节作用。     

海湾战争综合征模型大鼠海马VGF、BDNF及MAPK表达研究

目的探讨神经营养因子BDNF、神经肽VGF及MAPK/Erk信号传导通路表达情况与海湾战争综合征(GWS)发病机制的关系。方法将36只SD大鼠随机分为对照组、限制应激组及GWS模型组,采用Abdel-Rahman的方法建立GWS大鼠模型。分别在0、7、14、21、28 d测定大鼠体质量。实验28 d结束后,处死实验大鼠、取脑、分离海马。采用免疫组化染色、VGF/MAPK免疫荧光双标染色及蛋白质印迹法(Western blot)检测VGF、BDNF、MAPK的表达情况。结果单因素方差分析3组大鼠体质量,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。GWS模型组大鼠体质量增长率明显低于对照组与限制应激组,差异有统计学意义(P<0.05)。海马CA1区VGF、BDNF、MAPK免疫组化染色的平均光密度值,限制应激组、GWS模型组较对照组均降低,差异有统计学意义(P<0.05);GWS模型组较限制应激组均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光检测结果显示,海马CA3区细胞内MAPK与VGF的表达部位相同、变化趋势一致,MAPK、VGF荧光的表达与CA1区免疫组化结果一致。Western blot结果显示,限制应激组、GWS模型组与对照组比较,海马VGF、BDNF和MAPK的积分光密度值降低,差异有统计学意义(P<0.05);GWS模型组与限制应激组比较,海马VGF、BDNF和MAPK的积分光密度值降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GWS的发病机制与MAPK/ERK信号传导通路的抑制及VGF的表达减少相关。     

细菌内毒素对血管内皮细胞ERK1/ERK2和 P38分裂原激活的蛋白激酶磷酸化的影响①

研究细菌内毒素(LPS)对血管内皮细胞的直接损伤机制,有助于了解内毒素血症对血管内皮的直接损害机制及其在多脏器损害中的作用。本研究通过观察LPS刺激血管内皮细胞后,对内皮细胞中细胞外信号调节激酶(ERK)1/ERK2和P38分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)磷酸化的影响,发现LPS(1mg/L)直接作用内皮细胞后P38MAPK磷酸化程度明显增强,并与LPS剂量有明显依赖关系。2.5mg/L LPS刺激后,P38 MAPK磷酸化在15min反应最强,30min后减弱,约60min后消失。而ERK1和ERK2的磷酸化在15～30min明显,60　min减弱,其总强度不如P38 MAPK。由此证明,LPS直接作用内皮细胞后其信号可以通过跨膜传导,将MAPK激活,并可能引起细胞核内的基因转录和胞浆内功能蛋白的磷酸化,导致血管内皮细胞的多种功能变化。     

微重力环境对细胞内信号转导通路的影响

微重力环境对细胞而言是一种应激刺激和胞外信号,可通过信号传导系统影响细胞的形态和功能,进而导致一定的生物学效应.目前已发现多个信号通路参与调节微重力环境下细胞的生命活动,如NF-κB、Notch、MAPK、HSP信号通路等,为太空环境下细胞活动的研究奠定了分子基础.本文综述近年来发现的受微重力影响的细胞内信号转导通路,为了解空间环境对机体病理生理变化的影响,寻找对抗微重力对机体不良影响的靶点提供参考.     

内皮祖细胞治疗脑创伤的研究进展

内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)可促进创伤性脑损伤患者损伤区血管新生,并保护神经元的再生。近年来,外源性EPCs移植、动员内源性EPCs以及运用EPCs等治疗方法在创伤性脑损伤大鼠的实验研究中证实有很好的疗效,并表明EPCs的水平与脑创伤的恢复程度和预后密切相关。为了详细阐明最新相关研究,笔者就EPCs治疗创伤性脑损伤的作用机制、治疗策略、临床应用、预后作一综述。     

模拟失重下空间诱变菌感染巨噬细胞炎症相关microRNAs的筛选及生物信息学分析

目的探索模拟失重下空间诱变大肠杆菌(T1-13)感染巨噬细胞RAW264.7后差异表达的microRNAs(miRNAs)及其意义。方法采用第二代测序技术检测模拟失重染菌组与对照组巨噬细胞miRNAs差异表达,通过生物信息学预测差异miRNAs的靶基因,并对靶基因进行GO功能富集分析、KEGG信号通路分析以及STRING蛋白互作分析。结果模拟失重染菌组与对照组间筛选出33个差异miRNAs,下调23个,上调10个。这些miRNAs互补结合的靶基因参与了MAPK通路、WNT通路、轴突导向以及TGF-β等信号通路,其中关键下调的靶基因是MAPK9,MAPK14,MAP3K7,MAP3K14,PIK3CA,PIK3CB,PIK3CD,MYC,JUN,SMAD4;关键上调的靶基因是AKT3,MAPK8,MAPK9,MAPK10,MAP2K1,PIK3CD。结论模拟失重下空间诱变大肠杆菌感染巨噬细胞后miRNAs表达出现显著差异,这些miRNAs可能通过调控MAPK,WNT以及TGF-β等通路参与失重条件下炎症反应的发生。     

内皮祖细胞在血管新生和抑制血管损伤后再狭窄中的作用

内皮祖细胞 (endothelialprogenitorcells ,EPCs)也叫成血管细胞 (angioblast) ,是一种成体干细胞。出生后的个体 ,外周血、骨髓及脐血中均存在EPCs[1-3 ] 。它的发现使传统血管新生的概念发生了变化。 1997年以前一直认为 :出生以后的血管新生(neovascularization)是从已经存在的毛细血管网以出芽的方式形成微血管[4] ;目前认为血管结构可以通过内皮祖细胞迁移、分化形成[5] ,即血管发生(vasculogenesis)。后者以往认为只有在胚胎发育阶段存在[6] 。日益增多的证据显示 ,通过各种途径向体内移植或动员机体自身的EPCs可以提高缺血组织的血管新生能力 ,促进损伤血管的再内皮化、抑制新生内膜的增生 ,从而为治疗缺血性心脏病和血管介入治疗后再狭窄防治提供了新思路。本文将对EPCs在缺血性心血管疾病治疗方面的最新研究进行综述。一、EPCs的概念和生物学特性EPCs是一种多能干细胞 ,能循环、增殖并分化为血管内皮细胞 ,但尚未表达成熟血管内皮细胞表型特征。胚胎发育过程中 ,血液与血管的发生密切相关 ,内皮细胞和造血细胞系共同来源于中胚层。个...     

细胞移植术治疗兔下肢缺血模型的影像学评价

目的:利用血管内皮生长因子(VEGF_(165))基因转染体外诱导的血管内皮祖细胞(EPCs)治疗慢性下肢缺血兔模型,探讨CTA、DSA及多普勒超声检查对缺血下肢侧支循环形成评价的敏感性,并比较各种检查方法的差异性。方法:①制作高脂血兔,梯度离心法分离兔骨髓单个核细胞(MNCs),用内皮细胞专业培养基(EGM-2)诱导培养EPCs,脂质体介导转染携带增强型绿色荧光蛋白EGFP标记的VEGF_(165)质粒转染EPCs,流式细胞仪检测整体转染率。②制作兔单侧下肢缺血模型,随机分为A、B、C组,分别移植注射未转染EPCs(EPCs组)、VEGF_(165)转染的EPCs(EPC/VEGF组)、EGM-2培养基(EGM-2组),多种方法检测移植效果。结果:①自兔骨髓诱导出的梭形贴壁细胞为EPCs。②流式细胞仪检测其总体转染率约22.5%。③DSA、CTA、多普勒超声及免疫组化显示移植基因修饰后的EPCs组比未转染EPCs组能更好地促进缺血肢体新生血管形成,改善缺血肢体血运。DSA较CTA对新生血管显示更清晰,各处理组内对2种检查结果进行比较,结果均具有统计学意义(P0.05)。结论:CTA、DSA及多普勒超声均能客观评价缺血下肢侧支循环建立情况,DSA对新生血管的显示上优于CTA,但DSA为有创检查,技术要求高,CTA为无创性检查,对缺血下肢评价时宜首选CTA检查,超声多普勒用于对治疗效果的长期随访。     

前列腺炎SB203580镇痛模型大鼠脊髓p38MAPK的表达变化及意义

目的 观察p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)活性抑制剂SB203580鞘内注射对前列腺炎镇痛模型大鼠脊髓p38MAPK表达的影响.方法 45只SPF级雄性国大鼠随机分为3组:对照组(5只)、前列腺炎组(IO只)和前列腺炎SB203580鞘内注射镇痛组(镇痛组,30只).镇痛组再均分3个亚组,通过前列腺注射完全弗氏佐剂(CFA),并经脊髓鞘内分别注射SB2035800.5、2.5和12.5μg/10μl.前列腺炎组和各镇痛亚组分别于给药或建模后5、10d处死5只大鼠,采用Western blotting和ELISA法检测各组大鼠L5-S2脊髓背角组织磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)蛋白含量及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)水平和一氧化氮合酶(iNOS)的活性变化.结果 前列腺炎组大鼠L5-S2脊髓背角中p-p38MAPK、GFAP、TNF-α、NO水平和iNOS活性在5d和10d均明显高于对照组,并随时间延长增高(P<0.01).镇痛组大鼠L5-S2脊髓背角中p-p38MAPK、GFAP、TNF-α、NO水平和iNOS活性在5d和10d均低于前列腺炎组,且呈剂量依赖效应(P<0.01).结论 脊髓p38MAPK信号通路参与了大鼠前列腺炎发生后的脊髓痛觉传导及SB203580镇痛机制,阻断p38MAPK信号通路可有效降低脊髓炎性因子水平.     

血管内皮生长因子基因转染自体骨髓血管内皮祖细胞治疗下肢缺血的实验研究

目的:利用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF165)基因转染体外诱导的血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),并移植到下肢缺血的高脂血日本大耳兔体内,观测其促进血管新生、改善肢体缺血的效果。方法:①制作高脂血兔,梯度离心法分离兔骨髓单个核细胞(MNCs),用内皮细胞专业培养基(EGM-2)诱导培养EPCs,并用双荧光染色法及免疫组化等方法进行鉴定。②脂质体介导携带EGFP标记的VEGF165质粒转染EPCs,用激光共聚焦显微镜检测VEGF蛋白的表达,用流式细胞仪检测转染率。③制作兔单侧下肢缺血模型,并将其随机分为A、B、C 3组,分别移植EPCs、VEGF165基因转染后的EPCs及EGM-2培养基,多种方法检测移植效果。结果:①诱导出的梭形细胞,经FITC-UEA-I和DiI-acLDL荧光双染证实为正在分化的EPCs,同时经免疫组化法证实其Flk-1和Ⅷ因子的表达。②激光共聚焦显微镜下见绿色荧光蛋白表达,证实VEGF165转染成功,经流式细胞仪检测得到转染率约22.5%。③DSA及免疫组化检查显示VEGF165基因转染后的EPCs移植后改善肢体缺血的效果优于其他2组。结论:VEGF基因转染EPCs后能改进EPCs质量,移植后促血管新生能力增强,其效果优于未转染组。     

c-Jun氨基端激酶信号传导通路及其在肝纤维化中的作用研究进展

c-Jun氨基端激酶（c-Jun N-terminalkinase，JNK）是丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）家族的重要成员之一，JNK参与了如细胞分化、凋亡等许多生理过程，与癌症、心脏病和肝脏疾病等多种疾病的发病机制有关。JNK是一个重要的信号传导通路，在肝纤维化发生发展过程中起作重要作用，对JNK的功能及作用的分子机制进行深入研究，有利于完善肝纤维化产生的分子机制，对预防、治疗肝纤维化有一定的作用。     

VEGF/VEGFR2/NRP1与胶质瘤干细胞血管微环境及其靶向分子成像

血管内皮生长因子(VEGF)/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)/神经纤毛蛋白1(NRP1)信号通路与胶质瘤干细胞(GSC)血管生成过程具有密切的关系。对VEGF/VEGFR2/NRP1进行靶向分子成像,可以对肿瘤血管生成在肿瘤生长、浸润、迁移等过程中的作用有更好的理解,从而有利于肿瘤的早期诊断、合理治疗及判断预后。就VEGF/VEGFR2/NRP1信号通路与胶质瘤干细胞血管微环境的关系以及对其靶向分子成像作一综述。     

AT的信号传导

基因缺陷所致共济失调-毛细血管扩张症(AT)表现为免疫缺陷、进行性共济失调、性腺发育异常、辐射敏感和易患癌症等。本文综述了AT的信号传导,包括AT基因突变和临床症状、电离辐射诱导的信号传导通路中的一些转录因子、细胞周期检控点异常、持续的氧应激和细胞凋亡等。