重组人骨形态发生蛋白2缓释体对铬磨损颗粒诱导的溶骨效应的影响

目的建立大鼠植骨气囊模型,观察在不同浓度重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)缓释体干预下气囊内组织的破骨细胞分化因子(RANKL)、骨破坏素(OPG)表达情况。方法在大鼠背部注入空气形成气囊,取同源大鼠的颅骨植入气囊内。将已制成的植骨气囊模型大鼠分成5组:空白组、铬颗粒组、50μg/L rhBMP-2缓释体+铬颗粒组、100μg/L rhBMP-2缓释体+铬颗粒组和200μg/L rhBMP-2缓释体+铬颗粒组。各组分别用药处理,2周后取出囊腔内组织进行RANKL、OPG的Wester-blot、Rt-PCR检测,并对囊腔内骨片行TRAP染色,用计算机图像分析技术测定骨片破骨细胞染色面积,进行药效评价。结果 RANKL、OPG在各组囊腔组织中均有表达。骨片破骨细胞染色面积、RANKL、OPG的Wester-blot和RT-PCR结果及RANKL/OPG值,在铬颗粒组中明显高于其他4组(P<0.05);在3个rhBMP-2缓释体干预组内,随着rhBMP-2缓释体浓度增高呈递减趋势,组间差异均有统计学意义(P<0.05);在空白组和200μg/L rhBMP-2缓释体+铬颗粒组间未见明显差异(P>0.05)。结论大鼠植骨气囊模型成功的模拟了人工关节无菌性松动的生物学和组织学特征。铬颗粒可以引起RANKL/OPG值升高,促进溶骨;rhBMP-2缓释体通过降低RANKL/OPG值,从而促进成骨、抑制骨吸收效益。     

健骨颗粒对钛颗粒诱导的骨溶解模型大鼠OPG/RANKL/RANK mRNA的调控作用

目的研究健骨颗粒对钛颗粒诱导的骨溶解模型大鼠OPG/RANKL/RANK系统相关因子的影响,探讨其防治人工关节假体无菌性松动发病机制。方法 40只SD大鼠随机取10只将其颅骨骨片作为供体,其余30只制备植骨气囊模型后随机分为对照组、模型组和健骨颗粒组各10只,其中模型组和健骨颗粒组建立肽颗粒诱导的骨溶解病理模型。造模后健骨颗粒组予健骨颗粒混悬液灌胃,对照组和模型组予等量生理盐水灌胃,连续灌胃2周。灌胃结束后取出完整气囊,HE染色观察植骨气囊壁形态变化,ELISA法检测IL-1β、TNF-α含量,Real-time PCR法检测OPG、RANKL mRNA表达。结果 HE染色中对照组气囊壁炎症反应较轻、无明显骨溶解,模型组气囊壁厚度增加、炎细胞浸润以及骨溶解,健骨颗粒组炎细胞浸润、骨溶解程度较模型组低。与对照组比较,模型组IL-1β、TNF-α含量及RANKL mRNA表达明显升高(P<0.05),OPG mRNA表达及OPG/RANKL明显降低(P<0.05);与模型组比较,健骨颗粒组IL-1β、TNF-α含量及RANKL mRNA表达明显降低(P<0.05),OPG mRNA表达及OPG/RANKL明显升高(P<0.05)。结论健骨颗粒可能通过降低炎性反应、上调OPG/RANKL mRNA比值来抑制钛颗粒诱导骨溶解,这可能是其防治人工关节无菌性松动的作用机制之一。     

当羊骨片对维甲酸致骨质疏松大鼠股骨OPG/RANKL mRNA表达的影响

目的:观察当羊骨片对维甲酸致骨质疏松大鼠股骨骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)mRNA表达的影响.方法:6月龄雌性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、维甲酸模型组、仙灵骨葆组 (312mg/kg)和当羊骨片低、中、高剂量组(250、500、1000mg/kg),每组10只.维甲酸灌胃建立骨质疏松大鼠模型,各用药组大鼠灌胃给予相应剂量的药物.RT-PCR法检测股骨上段OPG、RANKL mRNA的表达.结果:当羊骨片中、高剂量能显著升高模型大鼠股骨OPG mRNA表达(P＜0.01),降低模型大鼠股骨RANKL mRNA表达及RANKL/OPG比值(P＜0.01).结论:当羊骨片可能通过调控OPG、RANKL基因表达,对维甲酸致骨质疏松大鼠有一定的保护作用.     

RANKL/RANK/OPG信号通路调控磨损颗粒诱导的小鼠炎性骨溶解

目的 探讨RANKL/RANK/OPG信号通路对磨损颗粒诱导的小鼠炎性骨溶解的影响.方法 将45只小鼠随机分为对照组、模型组和骨保护素(OPG)组,每组15只,制备小鼠磨损颗粒刺激气囊植骨的骨溶解模型.OPG组小鼠于术后第1天腹腔注射OPG(3 mg/kg),1次/d,对照组和模型组小鼠同期给予等量生理盐水,持续2周....     

石藤胶囊对佐剂性关节炎大鼠OPG、RANKL表达的影响

[目的]观察石藤胶囊对佐剂性关节炎(A A)大鼠血清及关节组织核因子κB受体激活配体(RANKL)、骨保护素(OPG)的影响。[方法]采用弗氏完全佐剂诱导的大鼠A A模型。Wistar大鼠32只,随机分为模型组、石藤胶囊组、雷公藤组,正常对照组各8只。酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法测定大鼠血清中核因子KB受体激活配体(RANKL)、骨保护素(OPG)的水平,免疫组织化学法检测大鼠关节中OPG、RANKL的表达。[结果]石藤胶囊可以明显降低A A大鼠血清和关节中的RANKL水平,提高血清和关节中的OPG水平。[结论]石藤胶囊能够通过抑制破骨细胞通道对AA发挥防治作用。     

骨保护素抑制小鼠植骨气囊模型中聚乙烯磨损颗粒诱导的溶骨效应

目的 运用小鼠植骨气囊模型,研究骨保护素(osteoprotegerin,OPG)减少破骨细胞骨破坏的吸收效应.方法 在小鼠背部注入空气形成气囊,取同源小鼠的颅骨植入气囊内制作气囊模型.实验分成3组:空白组(气囊内注入生理盐水)、颗粒组(气囊注入聚乙烯颗粒和生理盐水)、OPG组(气囊内注入聚乙烯颗粒和OPG).3周后取...     

超声对大鼠牙根吸收过程中骨保护素及核激活因子受体配体表达的影响

摘要：目的研究低强度脉冲超声(LIPUS)对大鼠正畸性牙根吸收过程中骨保护素(OPG)及核激活因子受体配体(RANKL)
表达的影响。方法32只Wistar雄性大鼠(6~8周),随机分成4组：阴性空白对照1组、实验组2组(100 MW/cm2超声组和
150 MW/cm2超声组),接受LIPUS作用;对照组1组,不接受LIPUS作用,每组8只。100 g初始力值加载于大鼠右侧上颌中
切牙与第一磨牙之间10 d。每组取上颌第一磨牙及其牙周组织,制作以上颌第一磨牙为中心的、近远中方向的组织切片,
行OPG、RANKL免疫组化染色,光镜观察并作免疫组化光密度分析,对实验结果进行单因素方差分析。结果LIPUS超
声组OPG 表达上调(P<0.05),100 MW/cm2 与150 MW/cm2 超声组间OPG 表达有统计意义(P<0.05);LIPUS 超声组
RANKL表达下调(P<0.05),两超声组间RANKL表达有统计学意义(P<0.05)。结论LIPUS通过调节OPG/RANKL比值,
进一步调节破骨细胞分化,进而对大鼠正畸性牙根吸收有治疗作用。     

熊果酸衍生物对糖尿病骨质疏松骨重塑的影响

目的 探讨熊果酸衍生物(ursolic acid derivatives,UAD)对糖尿病骨质疏松骨重塑的影响。方法 将小鼠随机分为对照组、STZ组与US组三组,取胫骨进行基因和蛋白表达测定以及组织形态学分析,测定骨体积/总体积(BV/TV)、骨小梁数(Tb.N)、小梁厚度(Tb.Th)和骨密度/总体积(BMD／TV)等各项骨形态参数,分别检测骨保护素/核因子-κΒ受体活化剂(OPG/RANKL)比值与骨代谢关键调控因子mRNA的表达。结果 STZ组与对照组相比,OPG/RANKL比值和OPG显著降低且RANKL升高;US组显著增加OPG/RANKL比值。STZ组MMP9和CAII mRNA表达显著高于对照组,而STZ组Runx2和TGF-β的mRNA表达显著低于对照组。US组同时逆转糖尿病小鼠MMP9、CAII、RUNX2和TGF-β mRNA的表达。结论 UAD通过促进成骨细胞分化、新生骨形成及抑制破骨细胞骨吸收功能来逆转STZ诱导的骨小梁损伤作用进行骨重塑。     

桂枝芍药知母汤对Ⅱ型胶原蛋白诱导关节炎大鼠RANKL／0PG水平的影响

目的：研究桂枝芍药知母汤对Ⅱ型胶原蛋白诱导类风湿关节炎大鼠踝关节骨组织细胞RANKL表达的影响,以证明桂枝芍药知母汤可通过抑制破骨细胞的分化与活化,达到缓解或阻止关节的损伤,已达到对类风湿关节炎骨破坏的抑制作用。方法：采用Ⅱ型胶原蛋白诱导类风湿关节炎大鼠模型,灌胃给药30d后用原位杂交技术检测踝关节局部的OPG／RANKL水平。结果：桂枝芍药知母汤能降低CIA踝关节组织RANKL、OPG表达水平。结论：桂枝芍药知母汤可以抑制CIA模型鼠关节RANKLInRNA的表达水平,提高OPGmRNA的表达水平,降低RANKL／OPG的比值,可能通过抑制了破骨细胞的分化与活化,从而可能缓解或阻止关节的损伤破坏。     

RANKL浓度对破骨细胞形成与活性的影响

目的 探讨不同浓度RANKL对骨髓单核细胞向破骨细胞分化和活性的影响.方法 50、100和150 μg/L三种RANKL浓度诱导骨髓单核细胞向破骨细胞分化.抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞形态并计数,抗酒石酸酸性磷酸酶活性检测试剂盒检测上清中的抗酒石酸酸性磷酸酶活性,骨板吸收实验检测破骨细胞骨吸收活力.结果 100 μg/L和150 μg/L RANKL浓度组在破骨细胞数量、细胞大小、核数目,抗酒石酸酸性磷酸酶活性和骨吸收率方面均明显高于50 μg/L组（P＆lt;0.01）,而100 μg/L和150 μg/L组间没有明显差异.结论 100 μg/L RANKL浓度下破骨细胞形成和活性能力强且相对较经济,是破骨细胞诱导培养的理想浓度值.     

IL-4与骨保护素联合抑制聚乙烯磨损颗粒诱导的溶骨效应

目的运用小鼠植骨气囊模型,研究白介素-4(IL-4)与骨保护素(OPG)联合减少骨破坏吸收防治人工关节松动的效应。方法在小鼠背部注入空气形成气囊,取同源小鼠的颅骨植入气囊内。将已制成的气囊模型小鼠分成3组:对照组(气囊注入聚乙烯颗粒及生理盐水);IL-4组(气囊内注入聚乙烯颗粒及IL-4);联合组(气囊内注入聚乙烯颗粒、IL-4及OPG),3周后取囊壁和植入颅骨组织进行HE染色检测炎症反应情况及炎症细胞渗出量;取组织匀浆液应用ELISA方法检测炎性细胞因子(IL-1、TNF)浓度;抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞的分化成熟情况;应用扫描电镜检测骨片吸收情况。结果(1)HE染色检测炎症细胞渗出量IL-4组、联合组明显少于对照组(P<0.05)。(2)ELISA法检测炎性细胞因子(IL-1、TNF)浓度IL-4组与联合组均明显少于对照组(P<0.05)。(3)抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性区域与视野面积的百分比IL-4组与联合组明显少于对照组,且联合组较IL-4组染色面积也有显著减少(P<0.05)。(4)应用扫描电镜检测骨片吸收陷窝面积与视野面积的百分比IL-4组与联合组明显少于对照组;且联合组较IL-4组的骨片吸收面积有显著减少。讨论证实IL-4不仅能明显减轻炎症情况,并且能明显减少破骨细胞的激活、骨破坏吸收情况,抑制聚乙烯磨损颗粒所致的骨吸收效应。IL-4与OPG联合应用于小鼠植骨气囊模型中,其抑制骨吸收效应更加明显。     

溃疡性结肠炎患者血清IL-6、RANKL/OPG水平与骨质疏松的关系

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者血清白细胞介素-6(IL-6)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)与骨质疏松的关系。方法 2012年1月至2013年8月在郑州大学人民医院住院治疗的UC患者30例,健康对照20例,Elisa法检测血清IL-6、RANKL、OPG水平,双能X线骨密度仪测量L1~L4骨密度(BMD)。结果 UC患者骨密度降低13例(46.7%),骨密度平均值(0.97±0.18)g/m2,低于对照组(1.11±0.14)g/m2(P=0.007);UC患者血清IL-6、RANKL、OPG水平均显著高于对照组(P<0.001);UC患者骨量正常组血清IL-6、RANKL水平均高于对照组(P<0.01),骨量减少组与骨质疏松组IL-6、RANKL、OPG水平均高于对照组(P<0.01),IL-6水平在UC患者骨量正常组、骨量减少组及骨质疏松组间存在显著差异(P<0.01);OPG水平骨量减少组及骨质疏松组高于骨量正常组(P<0.01);UC患者血清IL-6、OPG水平与骨密度呈负相关(r值分别为-0.528和-0.437,P均<0.05)。结论 IL-6、RANKL及OPG在UC患者骨质疏松发生中起着重要作用,检测UC患者血清IL-6、RANKL和OPG水平对预防和诊断骨质疏松有一定的临床价值。     

骨质疏松相关蛋白OPG/RANK/RANKL系统的研究进展

本文就OPG/RANKL/RANK系统在骨质疏松中的作用做了较为全面的综述。而OPG/RANKL/RANK系统是近年来骨科研究领域中的重大突破之一,经研究发现许多激素、细胞因子等均通过直接或间接的调节骨保护素（OPG）,核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）的表达,调控OPG、RANKL和核因子-κB受体活化因子（RANK）之间的比例,从而影响破骨细胞的分化和功能而达到抗骨质疏松或致骨质疏松的作用。     

雌激素及人重组生长激素对去势大鼠剩余牙槽骨OPG、RANKL和血清中ALP表达的影响

目的 观察雌激素及人重组生长激素对去势大鼠剩余牙槽骨骨保护素、破骨细胞分化因子(OPG和RANKL)和碱性磷酸酶(ALP)含量的影响。方法 4月龄未交配雌性SPF级去势骨质疏松大鼠65只,拔除左侧上颌磨牙建立联合剩余牙槽骨模型。建模成功后根据治疗方案分为5组:去势组(ovariectomized,OVX)、雌激素治疗组(estrogen replacement therapy,ERT)、生长激素治疗组(rh GH therapy,rh GHT)、联合治疗组(estrogen+rh GH therapy,Erh GHT)、假手术组(sham-ovariectomized rats,sham-OVX)。采用免疫组化的方法观察不同治疗组对剩余牙槽骨OPG、RANKL和ALP含量的影响。结果 与shamOVX组相比,OVX组大鼠上颌剩余牙槽骨RANKL降低显著(P<0.05),而OPG表达略微增加,破骨细胞(OC)活性增强,剩余牙槽骨骨量减少。ERT、rh GHT和Erh GHT组均可升高OPG,降低RANKL,减弱OC活性,增加上颌剩余牙槽骨骨量(P<0.05)。去势后骨转换增强,血清ALP活性增强;ERT对血清ALP含量影响不大;rh GHT、Erh GHT可能通过增加成骨细胞活性,从而增强血清ALP活性。结论 一定量的雌激素及人重组生长激素可保护去势大鼠剩余牙槽骨并增加成骨。     

2型糖尿病伴牙周炎患者血清RANKL和骨保护素水平的检测及意义

目的:探讨慢性牙周炎伴2型糖尿病患者血清RANKL和骨保护素(OPG)浓度变化与牙槽骨破坏的关系.方法:检查和分析健康组、牙周炎组、2型糖尿病组以及2型糖尿病佯牙周炎组患者血清RANKL和OPG的浓度、空腹血糖水平及牙周检查指数.结果:与健康组相比,牙周炎组OPG显著降低,RANKL略增高,RANKL/OPG比值增高(P＜0.05);糖尿病组OPG明显增高,RANKL几无变化,RANKL/OPG比值降低(P＜0.05);糖尿病伴牙周炎组OPG明显增高,RANKL略增高,RANKL/OPG比值降低;与牙周炎组相比,糖尿病组和糖尿病伴牙周炎组OPG明显增高,RANKL/OPG比值降低(P＜0.05);空腹血糖与临床附着丧失,OPG浓度呈正相关,与RANKL/OPG比值呈负相关(P＜0.05).结论:糖尿病和牙周炎引起RANKL/OPG比值呈现不同的变化,提示糖尿病与牙周炎骨破坏机制可能不同,糖尿病患者与牙周病患者OPG浓度变化提示糖尿病患者的骨吸收可能还有未知的破骨机制.     

唑来膦酸抑制破骨细胞分化中TRPV5、NFATc1的表达

目的研究唑来磷酸（ZOL）对破骨细胞分化中瞬时性受体电位通道（TRPV）5和活化T细胞核因子c1（NFATc1）基因表达
的影响。方法小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7细胞分为A、B两组：两组均用核因子-κB受体激活因子配体（RANKL）诱导5 d,
B组在最后2 d应用10-6 mol/L ZOL处理。检测破骨细胞生成及TRPV5、NFATc1基因表达情况。结果B组新生多核破骨细胞
数、吸收陷窝数目及面积分别为29.0±2.4、24.8±1.1、2 030.0±165.7 μm2,均显著低于A组的56.5±4.5、49.3±0.9、3 946.7±367.5 μm2
（P<0.01）。B组TRPV5、NFATc1 的荧光强度也显著低于A组（P<0.01）。B组TRPV5 mRNA及蛋白水平较A组分别降低了
50.4%和37.8%（P<0.01）;而NFATc1则分别下降了68.0%和48.4%（P<0.01）。结论ZOL可显著抑制破骨细胞生成和骨吸收,并
下调TRPV5、NFATc1基因表达;ZOL对破骨细胞的抑制可能与其诱发的TRPV5、NFATc1表达抑制有关。
     

赤雹根总皂苷对佐剂性关节炎大鼠血清OPG/RANKL的影响

目的:观察赤雹根总皂苷(TSTDR)对佐剂性关节炎模型大鼠血清骨保护素(OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)的影响。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、TSTDR(160、80、40mg/kg/d)组和雷公藤多苷(12mg/kg/d)组,每组6只大鼠。模型组、TSTDR组和雷公藤多苷组大鼠建立佐剂性关节炎大鼠模型后,各用药组大鼠灌胃给予相应药物21d。采用ELISA法检测大鼠血清OPG和RANKL水平,并计算二者的比值。结果:TSTDR各剂量组大鼠血清OPG/RANKL比值显著高于模型组(P<0.01)。结论:TSTDR可能通过影响OPG/RANKL系统抑制骨破坏,从而有助于控制类风湿性关节炎的发生发展。     

钛颗粒诱导骨溶解的不同动物模型形态学研究

目的 通过钛颗粒诱导建立3种不同的骨溶解模型,比较其形态学差异、炎性反应水平、骨溶解情况以及破骨细胞计数等指标,为建立骨溶解动物模型的选择提供更好的依据。方法 45只雌性BALB/c小鼠采用数字表法随机分为钛颗粒刺激颅骨骨溶解模型(A组)、钛颗粒刺激气囊模型组(B组)及钛颗粒刺激气囊植骨模型组(C组)。通过大体观察和组织病理学对3组模型进行形态学观察;采用透射电子显微镜观察对比A、B两组骨溶解面积及C组软组织变化的超微结构,讨论其与人体标本病理生理变化的相似性。结果 大体观察:A组可见颅骨表面有钛颗粒浸润,骨面不光整;B组气囊组织中有钛颗粒浸润,气囊囊壁增厚,有炎性水肿;C组可见颅骨块与周围的气囊组织之间有炎性细胞浸润,有钛颗粒包裹,且炎性反应明显。HE染色结果:A组颅骨表面钛颗粒周围有部分炎性反应,骨面欠平整;B组可见气囊囊壁厚,囊壁内有多种炎性细胞浸润,可有钛颗粒聚集;C组可见钛颗粒周围有炎性细胞浸润,骨片表面骨溶解表现。透射电子显微镜结果:A组破骨细胞胞质内见到钛颗粒,钛颗粒下有部分片状骨溶解;B组细胞胞质内有钛颗粒浸润,周围的细胞外散在有基质组织,基质组织中含水量减少;C组颅骨骨片骨面缺失,周围及与界膜之间有增生活跃的破骨细胞。结论 3种不同钛颗粒刺激下骨溶解动物模型的构建,形态学表现各有不同,可为假体周围骨溶解的基础研究提供有效的实验平台。     

Effects of Serum Containing Jiangu Granules on Expression of OPG and RANKL mRNA in Osteoblast-like Cells

目的 观察健骨颗粒含药血清对OPG、RANKL mRNA表达的影响.方法 制备健骨颗粒含药血清和生理盐水血清,分别干预体外培养的成骨样细胞ROS17/2.8,干预48 h后,用MTT法检测细胞增殖,荧光定量PCR检测OPG、RANKL mRNA表达.结果 中药血清组对OPG mRNA表达较生理盐水血清组上升,对RANKL mRNA表达较生理盐水血清组降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 健骨颗粒含药血清能促进成骨样细胞的OPG mRNA表达并抑制其RANKL mRNA表达.     

骨康含药血清对细胞共育体系中OPG、RANKL的影响

目的:研究骨康含药血清对细胞共育体系中OPG、RANKL的影响。方法:以成骨-破骨细胞共培养液上清中OPG、RANKL及其比值为指标进行实验观察。结果:加入血清培养后,自第3天起骨康组OPG含量明显高于同时期空白组(P0.01),而空白组培养过程中无明显变化。骨康组RANKL含量第7天明显下降(P0.05),而空白组无明显变化(P0.05)。自第3天起骨康组OPG/RANKL比值显著高于空白组(P0.05,P0.01)。在培养第5、7天骨康组OPG/RANKL比值较初始比值明显增大(P0.05),而空白组在培养过程中无明显变化。结论:骨康含药血清对成骨细胞和破骨细胞均有影响,可改变细胞生存环境中OPG/RANKL的比例,间接影响破骨细胞的功能活性。