乌龙丹对慢性脑缺血大鼠松果体钟基因表达的影响

目的初步探讨慢性脑缺血对大鼠睡眠钟基因表达的影响及乌龙丹对其的调控作用。方法 24只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、乌龙丹给药组。采用改良式双侧颈总动脉永久性结扎法建立大鼠慢性脑缺血模型,造模3周后,灌胃给药3周,并持续监测各组大鼠体重,应用实时荧光定量PCR检测大鼠松果体钟基因Clock、Bmal1、Per1表达的变化。结果模型组较假手术组Clock mRNA、Per1mRNA表达显著降低(P<0.01,P<0.05),Bmal1基因表达无显著差异(P>0.05);乌龙丹给药组的Clock基因水平高于模型组(P<0.01),Bmal1基因表达较假手术组降低(P<0.05),Per1无显著变化(P>0.05)。结论慢性脑缺血可能成为睡眠障碍的潜在病因,乌龙丹对慢性脑缺血引起的睡眠障碍有一定的治疗作用。     

乌龙丹对慢性脑缺血大鼠学习记忆功能的影响

目的探讨乌龙丹对慢性脑缺血大鼠学习记忆功能的影响。方法实验分为假手术组、慢性脑缺血模型组、乌龙丹高,中,低剂量组、银杏叶片组。采用双侧颈总动脉永久性结扎建立慢性脑缺血模型;术后第2天开始灌胃给药,连续8周。通过Morris水迷宫和避暗实验检测大鼠的空间学习记忆能力和被动回避学习记忆能力;尼氏染色观察大鼠海马组织结构的变化。结果与模型组比较,乌龙丹给药组和银杏叶组大鼠在Morris水迷宫实验中寻台时间明显缩短（P〈0.05,P〈0.01）;在避暗实验中潜伏期明显延长、错误次数减少（P〈0.05,P〈0.01）。尼氏染色：模型组海马CA1区神经细胞数量显著减少,排列紊乱,细胞核固缩,与假手术组和乌龙丹高剂量组比较具有明显差异。结论乌龙丹能改善慢性脑缺血大鼠学习记忆能力,其机制可能与保护大鼠海马组织结构有关。     

基于钟基因Clock和Bmal1调控探究辰时针刺自发性高血压大鼠的降压机制

目的 以自发性高血压大鼠（spontaneous hypertensive rat，SHR）为观察对象，探究针刺降压的钟基因调控作用。方法 将24只SHR随机分为针刺组和模型组，12只Wistar-Kyoto（WKY）大鼠作为正常组。针刺组选择辰时针刺SHR双侧曲池、足三里穴，模型组和正常组仅接受与针刺组同等强度的捆绑操作。4周后，各组分别在辰、酉时随机抽取6只大鼠，测量鼠尾收缩压（systolic blood pressure, SBP）和舒张压（diastolic blood pressure, DBP），然后检测血清5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）、褪黑素（melatonin, MT）的含量以及心脏生物钟基因Clock和Bmal1的表达水平。结果 分组因素对SBP、DBP、血清MT含量、Clock表达结果的RQ值、Bmal1表达结果的RQ值的主效应均有统计学意义（P＜0.05），时辰因素对各指标的主效应和两者的交互作用均无统计学意义（P＞0.05）。模型组辰、酉两个时辰的SBP和DBP均高于正常组（P<0.05），针刺组辰时的SBP和DBP及酉时的SBP均低于模型组（P<0.05）。模型组辰时MT含量较正常组降低，5-HT含量较正常组升高（P<0.05），针刺组辰时MT含量较模型组升高，5-HT含量较模型组降低（P<0.05）；针刺组酉时的MT含量较模型组升高（P<0.05）。针刺组辰时心脏Clock基因表达水平和酉时心脏Bmal1基因表达水平较模型组升高（P＜0．05）。结论 辰时针刺可以降低SHR的“双峰”血压，其作用机制可能与提高血清MT含量，减少5-HT含量以及提高心脏Clock和Bmal1基因的表达水平有关。     

复方黄甘延缓5/6肾切除大鼠慢性肾功能衰竭

目的观察复方黄甘对5/6肾切除慢性肾衰模型大鼠的疗效,并探讨其可能的作用机制。方法用HPLC检测复方黄甘提
取物组分并定量;构建5/6肾切除大鼠慢性肾衰模型,将模型大鼠随机分为尿毒清组、科素亚组、复方黄甘低、中、高剂量组和模
型组,另加假手术组共7组,每组10只大鼠,经灌胃给药12周后用全自动生化分析仪检测Scr、BUN、Ucr及24 h UPr;对残余肾
组织进行HE和Masson染色观察病理变化;用RT-PCR和免疫组化检测肾组织FN、MCP-1、ICAM-1的表达。结果复方黄甘提
取物中主要成分及其含量为：甘草苷（0.06%）、丹皮酚（1.06%）、芦荟大黄素（0.1%）、大黄酸（0.47%）、大黄素（0.19%）、大黄酚
（0.41%）和大黄素甲醚（0.13%）;复方黄甘低、中、高剂量组Scr、BUN、Ucr、Ccr及24h UPr都显著低于模型组（P<0.05）;复方黄甘
给药组肾小球硬化和肾间质纤维化改善较为明显,且肾组织中FN、ICAM-1 mRNA表达和蛋白表达均显著低于模型组（P<
0.05）。结论复方黄甘可改善慢性肾衰模型大鼠肾功能,减轻肾小球硬化和肾间质纤维化,在一定程度上延缓慢性肾功能衰竭
的进展。
     

新型苯二氮卓类药物L-838,417对三叉神经痛大鼠机械痛行为的影响

摘要：目的观察新型苯二氮卓类药物L-838,417对三叉神经痛大鼠机械痛行为的影响。方法健康雄性SD大鼠随机分
为模型组、假手术组及正常对照组,采用经颧骨下缘入路建立大鼠三叉神经分支眶下神经慢性缩窄环术来建立模型。取
模型制备成功的大鼠30只作为模型组,随机分为5组：L-838,417 1.0 mg/kg组（L1组）,L-838,417 10.0 mg/kg组（L10组）,
吗啡5 mg/kg组（M组）,安定3 mg/kg组（D组）及生理盐水组（NS组）,采用Von-Frey法于给药后每1 h测各组大鼠触须垫
部机械痛阈变化,并于各组痛阈达最高时进行镇静实验,进行姿势评分及翻正反射评分。L1组L10组及M组连续给药
10 d,每天测各组所能达到的最高疼痛阈值,观察药物耐受情况。结果各组大鼠疼痛基础阈值无统计学差异（P>0.05）。
模型组术后第9天疼痛阈值较术前明显降低（P<0.01）,术后第9~18天,其疼痛阈值明显低于sham组（P<0.01）。模型组各
组给药后,除NS组给药前后阈值无变化（P>0.05）外,其余4组给药后1 h疼痛阈值明显增加（P<0.01）,4组疼痛最高阈值
无统计学差异（P>0.05）。NS组、L1组及L10组均没有出现异常姿势和翻正反射。连续给药后,M组第3天最高疼痛阈值
明显下降,与第1天相比有统计学差异（P<0.01）,L1组及L10组与第1天比较均无统计学差异（P>0.05）。结论L-838,417
对三叉神经痛大鼠具有良好的抗痛觉过敏作用,且不会带来镇静及运动损害等副作用,长期给药不会产生药物耐受。     

乌龙丹改善慢性脑缺血大鼠学习记忆功能的分子机制探讨

目的 通过建立大鼠慢性脑缺血模型,观察NR1、NR2B在海马和皮层的表达水平,探讨乌龙丹改善慢性脑缺血大鼠学习记忆功能的部分作用机制.方法 采用双侧颈总动脉永久性结扎制作大鼠慢性脑缺血模型,造模3周后存活大鼠随机分为假手术组、模型组、银杏叶组、乌龙丹高剂量组、乌龙丹低剂量组(n=12),Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,Western blot法检测大鼠海马和皮层NR1、NR2B的表达水平.结果 模型组大鼠学习记忆能力较假手术组和乌龙丹给药组明显降低(P＜0.05,或P＜0.01);模型组皮层及海马区NR1、NR2B表达水平与假手术组比较,比值显著降低(P＜0.01).乌龙丹高剂量组和银杏叶组皮层及海马与模型组比较NR1、NR2B表达均增高(P＜0.01);但与假手术组比较,NR1、NR2B表达水平比值降低,差异也具有统计学意义(P＜0.01).结论 乌龙丹改善大鼠慢性脑缺血学习记忆功能可能途径之一:一定程度上提高海马和皮层区NR1、NR2B的表达水平.     

Apelin-13对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨Apelin-13对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤（CIRI）的保护作用及其可能的机制。方法改良线栓法建立S-D大
鼠局灶性CIRI模型,分假手术组、模型组、小剂量Apelin-13干预A组、中剂量B组、大剂量C组共5组,Apelin-13进行侧脑室注
射,分别进行神经功能评分,脑水肿、脑梗死体积测定,观察细胞凋亡;检测脑组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的活
性和细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）。结果（1）B、C组较模型组神经功能评分降低（P<0.05）,含水量、脑梗死体积降低（P<
0.05）;模型组梗死组织可见水肿、坏死,较多深染、固缩核细胞;B组、C组TUNEL阳性细胞数低于模型组（P<0.05）;（2）B、C组
缺血周边脑组织MDA含量降低,SOD的活性增加（P<0.05）;（3）各组ERK1/2 蛋白表达无差异性（P>0.05）;模型组和干预组
p-ERK1/2蛋白表达高于假手术组（P<0.05）;干预组高于模型组（P<0.05）。结论Apelin-13可能通过抑制氧化应激反应对大鼠
局灶性CIRI起保护作用;ERK1/2信号通路可能参与了Apelin-13保护作用机制。
     

慢性间歇性缺氧对大鼠骨骼肌葡萄糖转运蛋白4表达的影响

目的探讨慢性间歇性缺氧所致炎症因子以及复氧对大鼠糖代谢及骨骼肌葡萄糖转运蛋白4（GLUT-4）表达的影响。方
法24只SD雄性大鼠,分为空白组（UC组）、慢性间歇性缺氧组（CIH组）和复氧组（RH组）;所有大鼠在模型建立后,分别用氧化
酶-过氧化物酶法、放射免疫法、ELISA检测血糖、血清胰岛素及炎症因子的变化;Western blotting检测骨骼肌GLUT-4蛋白的表
达。结果大鼠空腹血糖,CIH组高于UC组和RH组（P<0.05）,RH组高于UC组（P<0.05）;血清胰岛素及胰岛素抵抗指数,CIH
组高于UC组和RH组（P<0.05）。各组大鼠血清炎症指标TNF-α、IL-6,CIH组显著高于UC组和RH组（P<0.05）,RH组高于UC
组（P<0.05）。大鼠骨骼肌GLUT4蛋白,CIH组显著低于UC组和RH组（P<0.05）,RH组低于UC组（P<0.05）。结论慢性间歇
性缺氧可引起大鼠体内炎症因子增加及胰岛素抵抗;大鼠胰岛素抵抗与炎症因子所致的骨骼肌GLUT-4蛋白量降低有关。
     

健脾清化方调节局灶节段硬化大鼠炎症信号通路的机制

目的从阻断炎症细胞生物功能角度,探讨健脾清化方对局灶节段硬化（FSGS）模型大鼠肾纤维化的影响。方法左侧肾切
除加尾静脉注射阿霉素致大鼠肾脏FSGS,观察健脾清化方对模型大鼠白细胞介素6（IL-6）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、细胞
间黏附分子（ICAM-1）表达的影响。结果大鼠肾小管间质IL6表达,健脾清化方组、健脾方组、清化方组、尿毒清组明显低于模
型组（P<0.01）。大鼠肾小管间质MCP-1 表达,健脾清化方组、健脾方组、清化方组、尿毒清组较模型组明显下降（P<0.01）;
健脾清化方组较尿毒清组下降（P<0.05）。大鼠肾小管间质ICAM-1表达,与模型组相比,健脾清化方组、清化方组、尿毒清组明显下降
（P<0.01）,健脾方组较模型组下降（P<0.05）;健脾清化方组较尿毒清组下降（P<0.05）。大鼠肾小管间质MCP-1、ICAM-1荧光强
度,与模型组相比,健脾清化方组、健脾方组、清化方组、尿毒清组明显减弱（P<0.01）,与尿毒清组比较,健脾清化方组、清化
方组荧光强度明显减弱（P<0.01）。健脾清化方能显著降低IL6、MCP-1、ICAM-1表达,且对MCP-1、ICAM-1的效果优于尿毒清
组。结论健脾清化方对FSGS模型大鼠肾脏的炎症损伤和肾纤维化有一定的改善作用,该机制可能与健脾清化方终止IL-6的信
号通路有关。
     

电针对急性痛风性关节炎大鼠踝关节髓样细胞表达激发受体表达的影响

目的探讨电针对急性痛风性关节炎（AGA）大鼠受试踝关节滑膜组织髓样细胞表达激发受体（TREM）-1表达的影响。方
法将40只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、西药组、电针组,每组各10只;正常组常规喂养,其余采用尿酸钠溶液注射法
建立AGA模型。造模前2 d,正常组与模型组按20 ml/kg予以生理盐水灌胃,西药组按1 mg/kg予以秋水仙碱溶液灌胃,电针组
选取受试侧三阴交、解溪、昆仑,频率1.5~2 Hz,电压9V,电流强度1~3 mA,疏密波,留针20 min,1次/d,连续9 d。分析各组大鼠
关节功能障碍,采用ELISA 法检测受试踝关节滑膜组织中肿瘤坏死因子TNF-α、白细胞介素IL-1β的含量,采用免疫组化及
Western blot 法检测TREM-1表达。结果与正常组比较,模型组大鼠功能障碍指数显著增高（P<0.01）,TNF-α和IL-1β含量显著
增高（P<0.05）,受试踝关节滑膜组织TREM-1表达明显增加（P<0.05）;与模型组比较,西药组和电针组大鼠功能障碍指数显著
降低（P<0.01）,TNF-α和IL-1β含量显著降低（P<0.05）,受试踝关节滑膜组织TREM-1表达明显降低（P<0.05）;西药组与电针组
比较,均无统计学意义（P>0.05）。结论电针治疗AGA的机制可能是通过抑制TREM-1的表达。
     

小鼠纹状体时钟基因表达的生后发育

目的 研究小鼠纹状体中时钟基因表达的生后发育.方法 选新生早期(P3)、断奶前期(P14)和成年(P60)小鼠,光照1h[01 Hour-After-Light-On (HALO)＝09:00]起取纹状体,连续24h取材,取材时间间隔6h.实时定量RT-PCR检测时钟基因Bmal1,Clock,Cry1,Per1和Rev-erbα Mrna水平.结果 P3组中,5种时钟基因表达均无明显波动;P14组仅有Rev-erb αmRNA表达随时间变化(P=0.027),表达高峰在19-01HALO;而P60组,各基因表达均表现明显波动[Bmal1(P=0.004)、Clock(P=0.004)、Per1(P=0.004)、Rev-erbα(P=0.004)],Bmal1,Clock和Cry1的高峰在01HALO, Per1和Rev-erbα分别在13HALO和07HALO.此外每种基因的总体表达水平出生后也呈动态变化,Bmal1,Clock,Per1和 Rev-erb表达丰度随发育而增加,P3组相似文献   

大鼠急性脑缺血后CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3表达及其意义

摘要：目的动态观察大鼠急性脑缺血后不同时期外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞和脑组织中Foxp3的表达,探讨其在急性
缺血性卒中病理生理演变过程中的作用。方法48 只Wistar 大鼠按随机数字表法分为缺血组和假手术组。参考改良的
Zea-Longer插线方法将缺血组大鼠制作成右侧大脑中动脉线栓脑缺血动物模型。采用流式细胞术和免疫组化染色检测造模后
1、3、7、14 d时大鼠外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞表达和脑组织中Foxp3表达,同时采用改良NSS神经功能评分观察大鼠
行为学变化。结果缺血组和假手术组大鼠神经功能缺损评分在模型制备后逐渐下降（P<0.01）。流式细胞术显示脑缺血后1、
3 d时缺血组大鼠外周血中CD4+ CD25+调节性T细胞的表达与假手术组比较差异无统计学意义（P>0.05）,7、14 d时表达明显高
于假手术组（P<0.05）,且与大鼠的神经功能评分呈负相关（r=-0.68,P=0.01）。免疫组化显示脑缺血后1 d时缺血组大鼠脑组织
中即可观察到Foxp3表达,且主要集中在缺血灶区域,在未缺血侧也可观察到Foxp3表达,但表达量较少,而假手术组脑组织中
未见Foxp3表达。结论CD4+ CD25+调节性T细胞参与了大鼠急性脑缺血后炎症免疫反应的发生发展过程,且在脑缺血后1 d
时便开始参与脑缺血性损伤的免疫调节,这种免疫调节对脑细胞有着保护作用。
     

小于胎龄儿Clock、Bmal1 基因 表达与胰岛素、胰岛素样因子 -1 水平的临床研究

目的 探讨小于胎龄儿（SGA）胎盘血、脐带血淋巴细胞中 Clock、Bmal1 基因表达及与胰岛素、胰岛素样因子 -1 （IGF-1）的相关性。 方法 选择 2013 年 1—12 月新生儿 67 例,其中 SGA 31 例,适于胎龄新生儿（AGA）36 例;采用酶化学发光法 测定脐带血、胎盘血胰岛素、IGF-1,采用竞争性 RT-PCR 法测定胎盘血、脐带血淋巴细胞中 Clock 、Bmal1 基因表达水平。 结果 SGA 组出生体重、BMI、身高、胎盘血胰岛素和 IGF-1 水平、脐带血胰岛素和 IGF-1 水平均低于 AGA 组（均 P＜0.05）;胎盘血、脐带血 胰岛素水平,脐带血 IGF-1 水平与出生体重均存在相关性（均 P＜0.01）。SGA 组胎盘血、脐带血淋巴细胞中 Bmal1 基因表达水平均高 于 AGA 组（均 P＜0.01）;而 Clock 基因表达水平差异均无统计学意义（均 P ＞0.05）。脐带血、胎盘血淋巴细胞中 Clock、Bmal1 基因表 达水平与出生体重、胰岛素、IGF-1 水平均无相关性（均 P ＞0.05）。 结论 SGA 血清胰岛素和 IGF-1 水平较低,脐带血、胎盘血淋巴 细胞中 Bmal1 基因表达水平较高;新生儿生理节奏性的发展受母体生物钟节奏的影响。     

血管紧张素（1-7）对糖尿病大鼠海马GFAP、GDNF表达和认知功能的影响

目的观察血管紧张素（1-7）[Ang（1-7）]对糖尿病大鼠海马胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、胶质细胞源性神经营养因子
（GDNF）表达及认知功能的影响。方法40只SD大鼠随机分为正常对照组（NC组）、糖尿病组（DM组）、糖尿病+Ang（1-7）组
（DM1组）、糖尿病+Ang（1-7）+A779组（DM2组）。糖尿病大鼠模型通过腹腔注射STZ（60 mg/kg）建立,Morris水迷宫实验测试
大鼠空间学习和记忆能力;RT-PCR和Western blot分别检测海马GDNF mRNA和蛋白水平的表达;尼氏染色观察海马神经元
形态变化;免疫组织化学方法检测GFAP及caspase-3表达的变化。结果与NC组相比,DM组大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台
次数减少（P<0.05）,海马区GDNF mRNA及蛋白表达下降（P<0.05）,神经元明显受损（P<0.05）,GFAP 表达减少（P<0.05）,
caspase-3阳性细胞明显增多（P<0.05）。与DM组相比,DM1组大鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加（P<0.05）,海马GDNF
的表达增多（P<0.05）,神经元受损减少（P<0.05）,GFAP表达增加（P<0.05）,caspase-3阳性细胞表达显著下降（P<0.05）,联合应
用Ang（1-7）和Mas受体拮抗剂A779后,Ang（1-7）上述作用被阻断（P<0.05）。结论Ang（1-7）与Mas结合后对糖尿病大鼠认知
功能有改善作用,其机制可能与上调大鼠海马GFAP和GDNF的表达、影响神经元存活有关。
     

重复性低氧预处理对大鼠肾缺血再灌注所致肝脏损伤的影响

目的探究重复性低氧预处理（RHP）对大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）所致的肝脏损伤的影响并初步探讨其机制。方法
120只雄性SD大鼠随机分为4组（n=30）：低氧预处理手术组（RHP组）,低氧预处理假手术组（RHPS组）,常压手术组（IRI组）及
常压假手术组（S组）。低压氧舱预处理大鼠5 d,建立肾IRI模型,RHP组及IRI组统一切除右肾、夹闭左肾肾门45 min后放开建
立肾缺血再灌注模型,而RHPS组及S组仅切除右肾,不进行左肾缺血再灌注处理。于再灌注后2、8、24 h检测血清谷丙转氨酶
（ALT）、IL-17A、TNF-α浓度,酶标仪检测肝脏匀浆超氧化物歧化酶（SOD）及一氧化氮（NO）的含量,Western blot 检测测肝脏
p-PI3K、p-AKT水平,病理组织形态学检查观察肝脏结构变化。结果与IRI组相比,RHP组大鼠再灌注后2、8、24 h病理组织形
态学检查显示损伤减轻,血清ALT浓度降低,TNF-α水平于再灌注后24 h降低（P<0.05）肝组织NO含量升高（P<0.05）,SOD含
量于再灌注后8 h升高（P<0.05）;与S组相比,IRI组及RHP组血清IL-17A浓度均显著升高（P<0.05）,但两组间差异无统计学意
义（P>0.05）;RHP组P-PI3K及P-AKT表达均高于IRI组（P<0.05）,且差异于再灌注后8 h尤为显著（P<0.05）。结论RHP对大
鼠肾脏IRI所致的肝脏损伤具有保护作用,但并非通过抑制IL-17A来实现。
     

阿托伐他汀对老年大鼠多器官内皮型一氧化氮合酶的影响及其在心肌缺血再灌注中的作用

目的观察阿托伐他汀对多器官内皮型一氧化氮合酶（eNOS）合成及eNOS mRNA表达的影响,探讨阿托伐他汀在心肌缺
血再灌注过程中对多器官保护作用的可能机制。方法20月龄Wistar大鼠应用阿托伐他汀灌胃至24月龄,采用结扎冠状动脉
方法建立心肌缺血再灌注模型,并设立未用药未手术组、未用药手术组、用药未手术组及用药手术组。应用Western blot方法检
测eNOS在各组大鼠心、肝、肾组织的含量,应用RT-PCR方法检测eNOS mRNA的表达情况。同批次同处理24月龄大鼠,分为
大剂量他汀组、小剂量他汀组并老年对照组。采用同上方法检测eNOS在各组大鼠心、肝、肾组织的含量,应用Western blot方法
检测eNOS在各组大鼠心、肝、肾组织的含量,应用RT-PCR方法检测eNOS mRNA的表达情况。结果阿托伐他汀能显著提高
老年大鼠心、肝、肾器官内eNOS合成（P<0.05）及eNOS mRNA的表达（P<0.05）,且与心肌缺血再灌注无关。引入药物剂量分组
后,与老年对照组相比,他汀组eNOS合成及eNOS mRNA的表达显著增加（P<0.05）;其中,大剂量他汀组较小剂量他汀组增加
更为显著（P<0.05）。结论阿托伐他汀可使老年大鼠多器官内eNOS合成及eNOS mRNA的表达增加,部分解释了阿托伐他汀
在心肌缺血再灌注过程中对多器官功能的保护作用。
     

补肾活血方对大鼠心脏成纤维细胞增殖及胶原表达的影响

摘要：目的探讨补肾活血方对大鼠成纤维细胞增殖及胶原表达的影响,为其抗心肌纤维化提供实验依据。方法通过血清药理
学方法制备补肾活血方含药血清,与DMEM配成细胞培养液。提取大鼠心脏成纤维细胞（CFs）并传代培养,将3~4代CFs分为
4组：A组为10%含药血清培养液培养,B组为20%含药血清培养液培养,C组为不含药血清培养液培养,D组为对照组,为常规胎
牛血清培养液培养。培养72 h后CCK-8检测CFs增殖,RT-PCR检测胶原基因表达,Western blotting检测胶原蛋白表达。结果
与C组、D组相比,A组、B组CFs增殖明显降低,B组较A组进一步降低（P<0.05）;Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA在A、B两组表达较C、
D两组明显下调（P<0.05）,Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达在A、B两组明显低于C、D两组（P<0.05）。结论补肾活血方可以抑制大鼠
成纤维细胞增殖及胶原表达。
     

阿托伐他汀对大鼠急性心肌梗死后心功能及TGF-β1信号通路的影响

摘要：目的观察阿托伐他汀对大鼠急性心肌梗死（AMI）后心脏重构及心功能的影响,并探索其作用是否与转化生长因子-β1
（TGF-β1）信号通路有关。方法结扎64只雄性SD大鼠左冠状动脉构建AMI模型,存活45只随机分为3组,即对照组（n=15）,低
剂量阿托伐他汀组［n=15, 10 mg/(kg·d)］及高剂量阿托伐他汀组［n=15, 20 mg/(kg·d)］,另设假手术组（n=15）,术后24 h开始灌
胃给药。8周后比较各组大鼠心功能、左室质量指数、胶原容积分数、TGF-β1及Smad2的mRNA及蛋白表达差异。结果（1）对
照组心功能显著低于假手术组（P<0.05）,左室质量指数、胶原容积分数、TGF-β1及Smad2的mRNA及蛋白表达均显著高于假手
术组（P<0.05）;（2）两个阿托伐他汀组的心功能均显著优于对照组（P<0.05）,左室质量指数、胶原容积分数、TGF-β1及Smad2的
mRNA及蛋白表达均显著低于对照组（P<0.05）;（3）高剂量阿托伐他汀组的作用更显著（P<0.05）。结论阿托伐他汀可显著改善
大鼠AMI后心脏重构及心功能,其作用具有剂量依赖性,其作用机制可能与抑制TGF-β1/Smad2信号通路有关。
     

单色光对鸡视顶盖生物钟基因昼夜节律表达的影响

生物体的行为活动与生理现象呈周期性波动,并与光照密切相关。本实验室前期研究发现光色能影响肉鸡和蛋鸡的生产性能,且禽类具有优越的视觉机能,视顶盖是禽类视觉信息加工和整合的部位,其结构复杂,那么在视觉传导通路中作为重要视觉中枢的视顶盖昼夜节律变化如何,为此我们将刚出壳的AA肉鸡分别饲养于白、红、绿和蓝光下,采用RT-PCR和Western blot等技术,研究鸡视顶盖是否存在生物钟基因的昼夜节律性表达,以及不同波长单色光对其昼夜节律表达的影响。研究发现,1除Per 2基因外,生物钟基因Clock、Bmal1、Bmal2、Per3、Cry1和Cry2的mRNA在鸡视顶盖中表达呈昼夜节律性。2相较于白光,红光和蓝光刺激使除Per 3外的其它钟基因Clock、Bmal 1、Bmal 2、Cry 1和Cry2昼夜节律性表达相位延迟,而绿光组钟基因相位与白光组相比无显著差异;单色光照射后,对钟基因产生的振幅改变不具有同向性,与白光相比,绿光刺激使Per3、Cry1和Cry2昼夜节律性表达振幅增强,红光组使Bmal1、Cry1和Cry2振幅减弱,而蓝光刺激后使Bmal2和Cry1振幅增加。3鸡视顶盖中BMAL1蛋白的昼夜节律性表达趋势与Bmal1基因mRNA表达相似。单色光照射后,其昼夜节律性不发生改变,但红光组比白、蓝光组相位发生了延迟,振幅降低,蓝光组的振幅较白、绿光组的提高。以上结果表明,除了Per2基因外,其余钟基因Clock、Bmal1、Bmal2、Per3、Cry1和Cry2在鸡视顶盖中表达均呈现昼夜节律性。不同单色光对生物钟基因和生物钟蛋白BMAL 1的昼夜节律性表达无影响,但在一定程度上影响其表达量、峰值以及相位。     

Tat蛋白对节律基因表达的影响

【摘要】目的 探讨HIV Tat 蛋白是否可以在细胞内影响主要节律基因Clock,Cry,Bmal1,Per的表达。方法 用lipofectamineTM2000将HIVat表达质粒转入PC12细胞,使Tat在PC12细胞中表达。转染48h后提取mRNA和蛋白,分别通过实时荧光定量PCR技术和Western blot技术检测节律基因在mRNA和蛋白水平表达的变化。结果 研究结果显示,与未处理组和空质粒组相比,转染组Cry1的表达水平显著升高（P＜0.05）;Clock的表达水平显著降低（P＜0.05）;Bmal1和Per的表达水平无明显变化（P＞0.05）。 结论 HIV Tat影响了近日节律基因Cry1和Clock的表达,表现为Cry1表达水平升高,Clock表达水平下降,提示TAT蛋白可以影响节律基因的表达并且可能通过对近日节律的影响调节细胞生理功能。