1-磷酸-神经鞘氨醇干预化疗对荷瘤小鼠卵巢功能和抑瘤效果的影响

目的探讨凋亡抑制因子1-磷酸-神经鞘氨醇(S1P)对环磷酰胺(CTX)联合顺铂(DDP)诱导的S180荷瘤小鼠卵巢功能损害的干预作用及其对肿瘤化疗效果的影响。方法将52只C57BL/6雌性小鼠随机选取10只作为空白对照组,余皮下接种S180肿瘤细胞后随机分为3组,即荷瘤对照组、单纯化疗组、S1P+化疗组,每组14只。用药期间动态观察动情周期及肿瘤体积变化,于用药前、用药第11天左右的动情间期分批处死小鼠,分别称取体质量、卵巢质量及肿瘤质量;采用酶联免疫吸附(ELISA)法动态检测用药前后各组小鼠血清的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及雌二醇(E2)水平的变化;卵巢组织连续病理切片,计算原始卵泡、生长卵泡数量的变化。每组剩余小鼠与成年雄性小鼠合笼,观察生育情况。结果(1)血清基础性激素水平:给药前,各组血清FSH、LH、E2水平无显著性差异(P>0.05);用药第11天左右,单纯化疗组血清FSH水平明显高于其余3组、E2水平明显低于其余3组,其差异均有显著性意义(P<0.01),但血清LH水平各组间无显著性差异(P>0.05);S1P+化疗组血清FSH、LH、E2水平与两对照组均无显著性差异(P>0.05);(2)卵泡数量及卵巢质量:用药第11天左右,单纯化疗组原始卵泡数和卵巢质量明显低于其余3组(P<0.01),其生长卵泡数亦明显低于空白对照组、荷瘤对照组(P<0.01),但与S1P+化疗组的差别无显著性意义(P>0.05)。S1P+化疗组原始卵泡数、生长卵泡数及卵巢质量与空白对照组、荷瘤对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);(3)肿瘤质量和抑瘤率:给药第11天左右,与荷瘤对照组比较,单纯化疗组、S1P+化疗组的皮下肿瘤体积增长速度均受到明显抑制,两组的肿瘤质量与荷瘤对照组相比均有显著性差异(P<0.01),且两组的抑瘤率均高于60%。结论 S1P可以在不影响肿瘤化疗效果的同时,预防化疗对小鼠卵巢功能的损害。     

1-磷酸-神经鞘氨醇干预化疗对 S180 荷瘤小鼠卵巢功能损害和抑瘤效果的研究

探讨凋亡抑制因子 1-磷酸-神经鞘氨醇（S1P）对环磷酰胺（CTX）联合顺铂(DDP)诱导的S180荷瘤小鼠卵巢功能损害的干预作用及其对肿瘤化疗效果的影响。方法 将52只C57BL/6雌性小鼠随机选取10只作为空白对照组，余皮下接种S180肿瘤细胞后随机分为3组，即荷瘤对照组、单纯化疗组、S1P+化疗组，每组14只。用药期间动态观察动情周期及肿瘤体积变化，于用药前、用药第11天左右的动情间期分批处死小鼠，分别称取体质量、卵巢质量及肿瘤质量；采用酶联免疫吸附（ELISA）法动态检测用药前后各组小鼠血清的卵泡刺激素( FSH)、黄体生成素( LH) 及雌二醇（E2）水平的变化；卵巢组织连续病理切片，计算原始卵泡、生长卵泡数量的变化。每组剩余小鼠与成年雄性小鼠合笼，观察生育情况。结果（1）血清基础性激素水平：给药前，各组血清FSH、LH 、E2水平无显著性差异(P>0.05)；用药第11天左右，单纯化疗组血清FSH水平明显高于其余3组、E2水平明显低于其余3组，其差异均有显著性意义（P<0.01），但血清LH水平各组间无显著性差异(P>0.05)；S1P+化疗组血清FSH、LH 、E2水平与两对照组均无显著性差异(P>0.05)。（2）卵泡数量及卵巢质量：用药第11天左右，单纯化疗组原始卵泡数和卵巢质量明显低于其余3组（P<0.01），其生长卵泡数亦明显低于空白对照组、荷瘤对照组（P<0.01），但与S1P+化疗组的差别无显著性意义(P>0.05)。S1P+化疗组原始卵泡数、生长卵泡数及卵巢质量与空白对照组、荷瘤对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。（3）肿瘤质量和抑瘤率：给药第11天左右，与荷瘤对照组比较，单纯化疗组、S1P+化疗组的皮下肿瘤体积增长速度均受到明显抑制，两组的肿瘤质量与荷瘤对照组相比均有显著性差异（P<0.01），且两组的抑瘤率均高于60%。结论 S1P可以在不影响肿瘤化疗效果的同时，预防化疗对小鼠卵巢功能的损害。     

1-磷酸-神经鞘氨醇预防化疗大鼠卵巢功能损害的实验研究

【目的】探讨1-磷酸-神经鞘氨醇（S1P）对环磷酰胺（CTX）导致的大鼠卵巢功能损害的保护作用及可能机制。[方法]40只雌性SD大鼠随机分为4组，即实验对照组（生理盐水组）、CTX组、S1P＋NS组及S1P＋CTX组，每组10只，于结束用药的第1～2周内的动情间期处死，观察卵泡数量的变化，并采用半定量RT-PCR检测卵巢组织Bcl-2及Bax的mRNA变化。【结果】S1P＋CTX组的原始卵泡、初级卵泡和生长卵泡数与S1P＋NS组、对照组的差别不显著（P〉O．05），而CTX组的所有卵泡数均少于其余3组，其差异均有显著性意义（P〈0．01）。卵巢组织中，S1P两组Bcl-2 mRNA的表达明显高于对照组及CTX组（P〈0．01），BaxmRNA表达明显低于对照组及CTX组（P〈0．01）；而CTX组的Bcl-2 mRNA表达明显低于对照组及S1P两组（P〈O．01），BaxmRNA表达明显高于对照组及及S1P两组（P〈0．01）。【结论】S1P能预防CTX导致的大鼠卵巢功能损害，其抗凋亡作用可能是通过调节Bcl-2家族成员表达而实现。     

1-磷酸-神经鞘氨醇预防化疗大鼠卵巢功能损害的实验研究

 【目的】探讨1-磷酸-神经鞘氨醇(S1P)对环磷酰胺(CTX)导致的大鼠卵巢功能损害的保护作用及可能机制。【方法】40只雌性SD大鼠随机分为4组,即实验对照组(生理盐水组)、CTX组、S1P+NS组及S1P+CTX组,每组10只,于结束用药的第1～2周内的动情间期处死,观察卵泡数量的变化,并采用半定量RT-PCR检测卵巢组织Bcl-2及Bax的mRNA变化。【结果】S1P+CTX组的原始卵泡、初级卵泡和生长卵泡数与S1P+NS组、对照组的差别不显著(P>0.05),而CTX组的所有卵泡数均少于其余3组,其差异均有显著性意义(P<0.01)。卵巢组织中,S1P两组Bcl-2 mRNA的表达明显高于对照组及CTX组(P<0.01),Bax mRNA表达明显低于对照组及CTX组(P<0.01);而CTX组的Bcl-2 mRNA表达明显低于对照组及S1P两组(P<0.01),BaxmRNA表达明显高于对照组及及S1P两组(P<0.01)。【结论】S1P能预防CTX导致的大鼠卵巢功能损害,其抗凋亡作用可能是通过调节Bcl-2家族成员表达而实现。     

1-磷酸神经鞘氨醇对大鼠骨骼肌成肌细胞分化的影响

【目的】观察1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化?形成肌管的作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制?【方法】 分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,含不同浓度S1P的高糖DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜和共焦显微镜下观察形态变化,并通过免疫细胞化学方法分别检测成肌细胞分化的早期特异性标志-肌球蛋白和生肌素表达的改变?使用磷酸神经鞘氨醇激酶(SphK)活性抑制剂DMS和HACPT后观察S1P对骨骼肌成肌细胞的生肌素表达的作用?【结果】 S1P能明显促进骨骼肌成肌细胞细胞形成肌小管,诱导2 ~ 3 d开始有肌管形成,之后肌管越来越多,到6 ~ 7 d达高峰;同对照组相比随S1P浓度增高,细胞核生肌素阳性率逐渐增高(P <0.01);SphK活性抑制剂抑制S1P促进骨骼肌成肌细胞生肌素阳性率的增高(P < 0.01)?【结论】体外S1P可能通过提高SphK活性调节成肌细胞向成熟肌细胞分化?     

子宫内膜癌鞘氨醇激酶-1与1-磷酸鞘氨醇的表达和意义

目的 探讨鞘氨醇激酶-1（sphingosine kinase 1,SphK1）与1-磷酸鞘氨醇（sphingosine-1-phosphate,S1P）在子宫内膜癌的表达和意义.方法 收集正常子宫内膜和子宫内膜癌患者血浆,行子宫全切手术的子宫内膜癌和子宫肌瘤旁组织,ELISA法检测血浆或组织匀浆液S1P的表达,Western blot法检测组织SphK1的表达,组织SphK1激酶活性定量检测试剂盒测定SphK1酶活性.结果 和正常对照组相比,子宫内膜癌患者血浆S1P的水平和组织S1P的表达明显增加（P＜0.01）,子宫内膜癌SphK1酶活性约是正常子宫组织的2.6倍.结论 被激活的SphKl/S1P信号通路可能参与子宫内膜癌的发生发展.     

BCR/ABL融合蛋白对鞘氨醇激酶和1-磷酸鞘氨醇分泌的影响

目的 研究高表达BCR/ABL融合蛋白对人鞘氨醇激酶(SPK)表达、活性及1-磷酸鞘氨醇(S1P)分泌的影响.方法 使用pLXSN和pLXSN-bcr/abl的重组逆转录病毒感染HL-60和ECV304细胞并筛选出pLXSN和pLXSN-bcr/abl的细胞.利用RT-PCR鉴定病毒转染.Western Blot检测SPK表达,γ-32P-ATP掺入法检测细胞SPK活性和培养上清的S1P含量.应用同样方法检测不同剂量Gleevec对K562细胞培养上清中S1P的影响.结果 RT-PCR结果显示bcr/abl基因转染成功. 高表达BCR/ABL融合蛋白的HL-60和ECV304均比转染空载体后的细胞SPK表达、活性和S1P分泌均显著提高.随着Gleevec浓度的增加,K562细胞培养上清中S1P的含量逐渐减少.结论 BCR/ABL融合蛋白可提高细胞SPK表达、活性和S1P分泌.     

1-磷酸鞘氨醇对角膜血管新生的影响

目的评价1-磷酸鞘氨醇(S1P)对大鼠角膜新生血管(CNV)的影响。方法 20只SD大鼠随机分成对照组和实验组,制做角膜微囊袋并分别植入空白缓释微粒体和含S1P的微粒体,术后1d,7d,14d观察各组大鼠角膜新生血管的生长情况。结果对照组未见明显新生血管生长而实验组新生血管生长明显,差异有统计学意义(P<0.05),实验组CNV的面积、累积钟点数和血管长度随观察时间推移而增多(P<0.05)。结论 1-磷酸鞘氨醇可促进角膜的血管增生,作用机理可能与激活角膜缘附近血管内皮细胞S1PR通路有关。     

1-磷酸鞘氨醇对人视网膜色素上皮细胞增殖的影响

目的研究1-磷酸鞘氨醇对人视网膜色素上皮细胞增殖的影响。方法采用MTT法研究不同浓度、不同作用时间1-磷酸鞘氨醇对hRPE细胞增殖的影响。结果加入不同浓度S1P24 h后,仅浓度为1 ug/ml组的RPE细胞与对照组相比有统计学意义,加入不同浓度1-磷酸鞘氨醇48 h后,1×10~(-2)、1×10~(-1)、1μg/ml组与对照组相比有统计学意义,加入不同浓度1-磷酸鞘氨醇72 h后,1×10~(-3)、1×10~(-2)、1×10~(-1)、1μg/ml组与对照组相比有统计学意义。各实验组,培养24、48或72 h后,相同浓度各时间点OD之间比较差异有统计学意义。各浓度组培养24及48 h后,相同浓度两时间点OD值比较差异均有统计学意义;0、1×10~(-4)、1×10~(-3)、1×10~(-2)、1×10~(-1)μg/ml组培养48及72 h后,相同浓度两时间点OD值比较差异均有统计学意义。结论 1-磷酸鞘氨醇可促进体外培养的hRPE细胞的增殖,并具有明显的浓度及时间依赖性。     

1-磷酸鞘氨醇对长春瑞滨化疗血管的防护作用

目的探讨1-磷酸鞘氨醇（sphingosine1-phosphate,S1P）预防化疗性静脉炎的效果。方法将30只新西兰兔随机分为空白对照组、地塞米松处理组和S1P处理组,每组兔耳20只。空白对照组直接注射长春瑞滨,剂量为2mg/kg;地塞米松组先注射地塞米松,剂量为0.25mg/kg,再注射长春瑞滨;S1P处理组先注射S1P,剂量为90μg/kg,再注射长春瑞滨。比较三组的疗效。结果在输注长春瑞滨72h后静脉炎发生最严重,其中S1P组相对其他组静脉炎较轻微;地塞米松组和S1P组的微血管通透性改变较对照组轻微。结论 1-磷酸鞘氨醇可以预防长春瑞滨所致化疗性静脉炎。     

1-磷酸鞘氨醇受体2抑制小鼠血管通透性研究

目的 研究1-磷酸鞘氨醇受体2（S1PR2）对小鼠血管通透性的作用。方法 将野生鼠和S1pr2-/-鼠(S1pr2基因缺乏)气管内滴注脂多糖（LPS）制备急性肺损伤模型（LPS组）,以气管内滴注生理盐水为对照。通过检测肺伊文思蓝色素漏出,异硫氰酸荧光素（FITC）标记的葡聚糖肺血管渗漏,以及肺组织湿质量/干质量比值,观察S1PR2对血管通透性的影响,并通过Miles分析,观察血管内皮细胞生长因子（VEGF）对皮肤血管内皮通透性亢进反应。结果 与生理盐水组比较, LPS注射增加野生鼠和S1pr2-/-鼠伊文思蓝漏出（P 均<0.01）、FITC标记葡聚糖肺血管外漏出（P 均<0.01）和引起肺水肿。LPS组中S1pr2-/-鼠与野生鼠比较,伊文思蓝漏出量、FITC标记葡聚糖肺血管外漏出更多（P 均<0.01）,肺水肿更重（P <0.001）;LPS组野生型和S1pr2-/-鼠均增加VEGF剂量依赖性的伊文思蓝漏出,在50、100 ng的VEGF诱导下,与野生鼠比较,S1pr2-/-鼠伊文思蓝漏出量均较高（P 均<0.01）。结论 S1PR2参与内皮细胞屏障保护,抑制血管通透性。     

鞘氨醇-1-磷酸/鞘氨醇-1-磷酸受体信号通路在自身免疫性疾病中的研究进展

鞘氨醇-1-磷酸(S1P)是由鞘氨醇激酶磷酸化鞘氨脂产生的多效鞘磷脂,可通过与G蛋白偶联S1P受体(S1PR)结合发挥作用,在细胞的生存、增殖、迁移、免疫细胞的募集、炎症介质合成和淋巴管及血管的生成等多种生理及病理生理过程中起着不可或缺的作用,S1P/S1PR信号通路参与了免疫介导的疾病发病机制,在免疫系统中发挥着重要作用。然而该信号轴在自身免疫性疾病发病机制中的参与程度有待进一步发掘。因此,文章针对近年来S1P-S1PR轴在自身免疫方面相关疾病的研究进行综述。     

1-磷酸鞘氨醇对生殖系统保护作用的研究进展

鞘脂类是真核细胞胞膜的组成成分,1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)是鞘脂类的代谢产物之一,S1P既可作为外源性刺激因子,也可作为胞内第二信使发挥生物活性,在细胞增殖与凋亡,血管生成与完整性,免疫细胞迁移等方面发挥重要作用。在生殖系统中S1P具有保护生殖细胞,抑制细胞凋亡,减少早期胚胎碎片,在妊娠期间能够改善母胎免疫耐受维持妊娠的作用。本文综述S1P在生殖系统中的研究进展,为进一步改善IVF-ET妊娠结局提供新的治疗思路。     

1-磷酸鞘氨醇对豚鼠心室肌细胞钙电流的影响

目的：研究1-磷酸鞘氨醇（S1P）对心室肌细胞膜钙离子通道的作用及机制。方法：Langendorff离体心脏逆向灌流法分离豚鼠心室肌细胞,随机选取心室肌细胞分为正常对照组和S1P 0.1、1.0和10.0 μmol•L^-1剂量组以及百日咳毒素（PTX）0.1 mg•L^-1+S1P1.0 μmol•L^-1组。采用全细胞膜片钳技术分别记录各组心室肌细胞Ca²⁺电流。 结果：1.0 μmol•L^-1的S1P使豚鼠心室肌细胞Ca²⁺电流从给药前的(0.256±0.030)mV增加到（0.367±0.090）mV（P<0.05）,10.0 μmol•L^-1的S1P使Ca²⁺电流从给药前的(0.242±0.030)mV增加到(0.364±0.060)mV(P<0.01),而加入G-蛋白耦联受体阻断剂PTX后,S1P对Ca²⁺通道电流的作用与给药前比较差异无显著性。结论：S1P通过与G-蛋白耦联的细胞膜受体介导促进豚鼠心室肌细胞Ca²⁺通道的开放,并具有一定的剂量依赖性。     

1-磷酸鞘氨醇2受体缺失对全身过敏反应小鼠血管通透性的影响

[目的]探讨1-磷酸鞘氨醇(S1P)2受体对全身过敏反应小鼠血管通透性的调节作用及其机制.[方法]选取S1P2-/-鼠、eNOS-/-鼠及S1P2-/-/eNOS-/-鼠,建立血小板活化因子(PAF)诱导的全身过敏反应小鼠模型.利用伊文思蓝色素漏出法测定血管通透性,采用温氏法测定红细胞压积,并观察肺组织病理学改变及小鼠死亡率.[结果]与野生鼠比较,S1P2-/-鼠肺血管通透性、红细胞压积及死亡率均显著增高(P<0.01),eNOS基因敲除的S1P2-/-鼠的红细胞压积及死亡率均明显降低(P<0.01).[结论]S1P2受体缺失可增加全身过敏反应小鼠的血管通透性,此效应通过eNOS途径实现.     

鞘氨醇-1-磷酸转运体Spns2的研究进展

鞘氨醇-1-磷酸（S1P）是一种鞘脂类信号分子,在细胞增殖、分化和迁移等诸多方面发挥重要的调节作用。S1P在细胞内生成,随后释放到细胞外与靶细胞膜上的S1PR受体结合。S1P的体内来源主要是造血细胞和血管内皮细胞。造血细胞中S1P的释放主要通过ABC转运蛋白家族,而血管内皮细胞中S1P的释放则是通过Spns2。Spns2是首个被发现并确认具有重要生理功能的S1P转运蛋白,属于主要协助转运蛋白超家族。应用Spns2基因敲除小鼠模型研究发现Spns2缺陷小鼠的血浆S1P水平较野生小鼠明显下降,淋巴细胞外迁受到抑制。本文将对Spns2的研究历史、结构特性、作用底物、生理功能,以及Spns2与免疫性疾病和癌症的相关性进行简要介绍,为进一步研究Spns2提供重要参考。     

1-磷酸鞘氨醇在心血管系统中的研究进展

<正>1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)是近年来在心血管研究中发现具有重要生理功能的一种膜磷脂类代谢产物。T.K.Ghosh等[1]1990年发现,S1P在培养的肌细胞中通过非IP3依赖性的途径动员细胞内Ca2+释放,随后开始了对S1P研究更多还原     

新型鞘氨醇-1-磷酸受体选择性激动剂的研究进展

自芬戈莫德(fingolimod,FTY720)发现以来,鞘氨醇-1-磷酸(S1P)受体受到研究者的广泛关注,但是在S1P受体的5种亚型(S1P1～S1P5)中,只有S1P1受体的激动剂可通过控制淋巴细胞的迁移而产生较强的免疫抑制效应.因此,寻找S1P1受体选择性激动剂,并研究其构效关系,具有非常重要的意义.本文主要对4类新型的S1P1受体激动剂的研究现状及构效关系进行综述.     

外源性1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞DNA合成的影响

 目的  观察外源性1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响。方法  分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,通过制备S1P脂质体使S1P转运到骨骼肌成肌细胞内或直接加入外源性S1P,采用3H-TdR渗入法检测S1P进入细胞内和在细胞外对骨骼肌成肌细胞DNA的合成;进一步使用磷酸神经鞘氨醇激酶(sphingosine kinase,SphK)活性抑制剂N,N 二甲基鞘氨醇(N,N dimethyl sphingosine,DMS)和HACPT ［2-(p-hydroxyanilino)-4-(p-chlorophenyl) thiazole］,观察其对S1P促进DNA合成作用的影响。结果  S1P脂质体转入可明显促进骨骼肌成肌细胞DNA合成。100~1 000 nmol/L剂量范围内S1P脂质体使细胞胸腺嘧啶核苷(3H TdR)的摄入量较对照组增加 12.3%~50.7% (P<0.01),并与剂量呈正相关。该促进作用不会被SphK活性抑制剂DMS和HACPT所阻断。S1P直接加入培养液同样能促进细胞DNA合成(P<0.01),500和 1 000 nmol/L剂量组3H-TdR的摄入量较对照组分别增加18.8% (P<0.05)和26.5% (P<0.05),增幅低于同剂量的S1P脂质体。该促进作用可被DMS和HACPT所阻断。结论  外源性S1P可促进体外培养的大鼠骨骼肌成肌细胞增殖,其作用可能与细胞内SphK活性增加引起细胞内S1P生成增多。