液相色谱串联质谱技术平台在临床代谢组学研究中的应用

代谢组学是研究生物体内源性代谢物质的整体及其随内因和外因变化的科学分支,是系统生物学的一个重要组成部分.代谢组学是继基因组学、蛋白组学之后又一热点学科.本文着重介绍液相串联质谱和其统计分析软件在代谢组学中的应用,和目前临床生物标志物发现上取得的成果.     

结核病患者血清蛋白质组学研究实践的启示

H37Rv全基因组序列图[1],标志着结核病研究进入后基因组时代.以双向电泳、生物质谱和生物信息学为核心技术的蛋白质组学开启了后基因组时代研究之门.蛋白质作为生物生命活动的直接体现者,必将体现于结核病发生、发展的各个环节和方面,为探讨结核病血清学诊断新型标志物,笔者进行了结核病血清蛋白质组学的相关研究.在研究过程中,笔者获益匪浅,现总结报告如下.     

质谱技术在多组学研究和医学检验中的应用前景及挑战

传统医学模式正进入到基因组学、蛋白质组学、代谢组学等多组学整合分析的精准诊断时代.以高性能质谱为核心的多组学研究已成为各类疾病筛查、早期诊断、治疗监测和预后评估的生物标志物创新发现的关键技术平台.近年来质谱技术的迅速发展及其在临床诊断中的推广应用,为提升医学检验水平奠定了坚实的基础,临床质谱技术将是医学检验未来发展的一...     

MALDI-IMS直接组织分析

在生物医学研究中,新的生物标志物的发现和新药物的研发,需要灵敏、高通量、全面、快速的分析技术。利用基质辅助激光解吸附电离成像质谱(matrix-assisted laser desorption     

基于MRM-MS技术的蛋白质生物标志物研究的前景

随着蛋白质组学技术的兴起,疾病生物标志物的研究发展迅速,但筛选出的海量候选标志物却极少进入临床应用.近几年,基于MRM-MS技术的方法和策略凭借其低成本、耗时短、高灵敏度、高准确性等优势引起了国内外检验医学界的广泛关注.基于MRM-MS的技术,特别是SISCAPA技术,可能在不远的将来将逐步发展成为蛋白质生物标志物研究的快车道.本文分析了当前生物标志物研究领域的瓶颈,系统阐述了MRM-MS技术的原理和特点,以及近年来该技术在蛋白质生物标志物研究领域的主要应用现状,并展望其发展前景.

Abstract：

With the development of proteomic technologies, large numbers of putative biomarkers have been screened out but few of them are put into the clinical application.Recently, MRM-MS based approaches and strategies have aroused extensive concern in domestic and overseas clinical laboratory community because of their cost-efficiency, time-saving, high analytical sensitivity and accuracy.MRM-MS based approaches, especially SISCAPA, may gradually become a key technology for the protein biomarker research in the near future.In this review, the "bottleneck" existing in the field of protein biomarkers research, and features as well as applications of MRM-MS are discussed and the future trend of research is prospected.     

基于质谱技术的尿液代谢组学在膀胱癌生物学标志物挖掘中的研究进展

膀胱癌是我国常见的泌尿系肿瘤,但目前的诊断手段在早期诊断方面还有所不足,若能早期及时治疗,对提高膀胱癌患者的五年生存率有重大意义。质谱技术作为一种“指纹图谱”,在新的肿瘤标志物的挖掘中具有广泛的应用前景,而肿瘤是一种始于线粒体代谢障碍的疾病,又因尿液与膀胱接触时间较长,故而是探索新的膀胱癌生物学标志物最为理想的样本之一。该文就基于质谱技术的尿液代谢组学在膀胱癌生物标志物挖掘中的研究进展作一综述。     

基于质谱技术的外泌体蛋白质组学在肿瘤诊断中的研究进展

外泌体是一类参与多种生理病理过程的细胞间信息交流载体,其脂质双分子层结构能有效维护所携带的生物信息分子的稳定性。因此,外泌体相对于血清、血浆等更加适合于组学研究,如蛋白质组学、转录组学及代谢组学等。随着质谱技术的不断发展,蛋白质作为诸多生物功能的直接执行者受到越来越多的关注,尤其是外泌体内的蛋白质及其生物功能。外泌体用于蛋白质组学的研究有助于阐明肿瘤的发生和发展机制,进而寻找特异性的肿瘤标志物和可用于精准治疗的靶点。     

基于质谱的蛋白质组学诊断所面临的挑战

过去的几年中,基于质谱技术的蛋白质组学分析方法已经成为寻找新的疾病标志物的重要手段之一.由于它具有高灵敏度、高通量、快速以及能和生物信息学技术结合同时快速分析大量的蛋白质或多肽的优点,使之成为临床研究的有力工具.然而,最近的一些研究显示,因为这项技术的重复性和数据统计分析等方面的不足而受到了争议.本文介绍了采用该方法进行标志物筛查时在实验设计、质谱技术以及数据分析等方面面临的一些挑战,探讨其在血清或血浆分析中的应用.     

卒中生物标志物及其研究进展

卒中生物标志物对卒中患者的早期诊断、病情评价和预后监测起重要作用,这一领域是目前国内外的研究热点之一.本文在分析卒中的传统危险因素的基础上,对卒中的血管损伤标志物、氧化应激标志物、炎性标志物、其他新的生物标志物、卒中生物标志物的联合应用及其研究进展进行了介绍.     

IGF2BP2在胰腺癌中的诊断和预后作用及泛癌分析

目的:本研究通过生物信息学分析,筛选出对胰腺癌具有诊断和预后作用的m6A相关生物标志物,并探讨其与多种肿瘤的预后关系.方法:在TCGA数据库胰腺癌数据集中进行m6A相关基因差异表达和预后分析,筛选出潜在生物标志物.采用ROC分析评估该标志物对胰腺癌的诊断价值;采用卡方检验及Fisher精确检验比较分子高、低表达组间各临...     

乳腺癌保乳治疗疗效及不良反应分析

目的：研究乳腺癌保留乳房手术加术后放疗的疗效、不良反应及美容效果。方法：以2001年7月—2008年3月139例保乳术后放疗的乳腺癌患者为保乳组,88例行改良根治术后患者作为非保乳组。根据肿块大小、腋窝淋巴结状态、雌激素和孕激素受体状态、发病年龄、肿瘤位置、HER-2蛋白表达水平、病理分型、治疗模式8个变量对保乳手术患者和改良根治术的患者进行匹配分组,两组齐同可比。保乳术后全乳切线照射46~50Gy（平均剂量49.4Gy）,瘤床追加电子束照射10Gy。患侧锁骨上野剂量：X线30Gy加电子束20Gy。改良根治术88例患者中,有20例行常规患侧锁骨上野及内乳野照射,16例行患侧锁骨上野及胸壁照射。结果：保乳治疗组患者的复发率为2.2%（3/139）,转移率为1.4%（2/139）,生存率为99.3%（138/139）;改良根治组复发率为4.5%（4/88）,转移率为3.4%（3/88）,生存率为97.7%（86/88）。在所有随访患者中,3例病死,其中保乳组1例,改良根治组2例。这3例患者均死于乳腺癌的转移。保乳手术组与改良根治术组间总体生存率和无病生存率均无显著性差异（P〉0.05）。保乳组患者对乳房美观的满意率为90.6%（126/139）。保乳组患者的放疗不良反应中,75.3%为I级反应,17.3%为II级反应,仅1例出现III级迟发性毒性反应。无皮肤和软组织坏死、乳房及上肢水肿等并发症发生。结论：保乳综合疗法（保乳手术＋放疗）安全、可靠,其短期生存率和局部复发率与同病期改良根治术患者比较无显著差异,美容效果满意,并发症发生率低,可保全患者的生理功能和社会心理状态,提高其生活质量。     

伊伐布雷定及去甲伊伐布雷定的血药浓度测定及初步药动学研究

目的建立高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)法测定人血浆中伊伐布雷定及去甲伊伐布雷定浓度并用于人体药动学研究。方法血浆样品处理均采用乙腈沉淀蛋白法,以地西泮为内标。质谱条件均采用电喷雾离子源(ESI)、正离子和多反应离子监测(MRM)模式进行检测。结果本方法伊伐布雷定线性范围为0.096 7¹45.050 0 ng/ml,r=0.997 1,最低定量浓度为0.096 7 ng/ml,去甲伊伐布雷定线性范围为0.050 5145.050 0 ng/ml,r=0.997 1,最低定量浓度为0.096 7 ng/ml,去甲伊伐布雷定线性范围为0.050 5³0.270 0 ng/ml,最低定量浓度为0.050 5 ng/ml,r=0.997 5。两者日内、日间RSD均<15%。提取回收率为>78.5%。结论该方法简单、灵敏、可靠,适用于伊伐布雷定及去甲伊伐布雷定人体药动学研究。     

乳癌术后不同引流方式对皮下积液的影响

目的探讨乳癌改良根治术后皮下积液的发生原因及治疗方法。方法回顾2005年2月—2010年6月在我院行乳癌改良根治术的162例女性病人,比较不同引流方式下皮下积液的发生率。结果采用持续负压引流及弹性绷带加压包扎＋乳胶管-导尿管序贯引流的病人,术后皮下积液的发生率、皮瓣坏死率、住院时间、导管留置时间、引流量均明显低于无乳胶管-导尿管序贯引流组及对照组,差异有显著性（χ2=11.60、9.45,F=21.60～40.75,q=3.82～12.84,P〈0.01）。结论采用持续负压引流及弹性绷带加压包扎＋乳胶管-导尿管序贯引流的方法,能显著降低乳癌改良根治术后皮下积液的发生率。     

《医学磁共振》杂志论文的写作及审稿

《医学磁共振》杂志(MRM或官方简称“Magn Reson Med”)是一本国际性期刊,迄今为止已收到来自38个不同国家(和地区)的稿件.近年来,越来越多的中国学者关注我们的杂志.本文是Magn Reson Med杂志主编应邀在澳大利亚墨尔本召开的2012年国际磁共振年会上“聚焦中国”的发言稿,将向大家介绍《医学磁共振》杂志的概况、审稿流程、对审稿人的要求以及杂志社给作者的一些写作建议和投稿的注意事项.     

乳腺癌术后患者的症状困扰及其与生活质量的相关性

目的探讨乳腺癌术后患者的症状困扰及其与生活质量的相关性,为进行有针对性的症状管理提供依据。方法于2010年1月至2011年1月以便利抽样法选取哈尔滨医科大学附属第一医院行乳腺癌手术的患者126例,采用症状困扰量表（the symptom distress scale,SDS）、欧洲癌症研究与治疗组织生活质量问卷（ European Organization for Researchand Treatment of Cancer quality of life questionnaire, EORTC QLQ-C30）调查乳腺癌患者术后l周内的症状困扰和生活质量,进行多元逐步回归分析和Pearson相关分析。结果乳腺癌术后1周内患者普遍存在症状困扰（97．6％）,困扰程度最高的症状依次为外表的改变、对前景的担忧、手臂活动受限、胸壁紧张感、疼痛频率;年龄、疾病阶段、手术方式是症状困扰的影响因素;症状困扰与生活质量之间呈负相关（r=-0．31,P〈0．01）。结论护理过程中应重视疾病和治疗带给患者的症状困扰,对年轻、中晚期和乳房全切患者应给予更多关注,加强症状管理,进而提高乳腺癌术后患者的生活质量。     

乳腺癌保乳手术住院患者生存质量的研究

目的 了解乳腺癌保乳患者术后早期的生存质量（quality of life,QOL）及其影响因素,为乳腺癌保乳患者术前健康教育及术后康复护理干预提供理论支持.方法 选取120例保乳手术（BCS）和140例改良根治术（MRM）术后1周的在院乳腺癌患者为研究对象,以中文版乳腺癌患者生命质量测评量表（FACT-B,V4.0）评价2组患者的生存质量,并对影响保乳手术住院患者生存质量的因素进行分析.结果 BCS组的情感状况分值比MRM组低,乳房附加关注分值比MRM组高,其余各项得分2组比较无显著差异;多因素分析显示影响乳腺癌保乳手术患者生存质量的主要因素有焦虑、家庭关系、乳腺病史、手术部位、性格类型等.结论 护理人员应采取有效干预措施减轻保乳患者心理负担,提高生存质量.     

人血浆中双氢可待因浓度HPLC-MS／MS测定方法的建立

目的建立测定人血浆中双氢可待因浓度的高效液相色谱一串联质谱分析方法。方法血浆样品用甲醇沉淀蛋白后,选用安捷伦色谱柱XDB．C18,2．1×50mm,5μm梯度洗脱。流动相A为0．1％甲酸10mM甲酸铵水溶液,流动相B为0．1％甲酸甲醇。流动性梯度为0min（B5％）→1min（B5％）→1．3（B65％）→2．4min（B65％）→2．5min（B5％）→3．5min（B5％）。流速0．6mL／min,柱温30℃,自动进样器温度4cC,进样量10止。选用岛津LC-20A高效液相色谱系统和串联APl4000Qtrap型三重四极杆质谱仪,ESI源正离子MRM扫描,Is电压5500V,CAD气Medium,CUR气40psi,Gasl：35psi,Gas2：40psi,源温度550℃,EP电压10V,CXP电压9V。双氢可待因：m／z302．1—199．1,DP电压：105V,CE电压：47V。右美沙芬（内标）：m／z271．3→170．1,DP电压100V,CE电压54V。结果该方法测定血浆中二氢可待因的线性范围为2～1000ng／mL（r〉0．99）,定量下限为2ng／mL,准确度均在85％～115％,批内和批间精密度也均〈15％。稳定性试验中,血浆样品及血浆经处理后样品中的双氢可待因在方法学要求的各种贮存条件下均比较稳定。结论该方法简单、快速、灵敏、专属性强、重现性好,适用于检测人血浆中双氢可待因浓度的研究。     

乳腺癌改良根治术后置管时间的影响因素研究

目的探讨乳腺癌改良根治术后引流管置管时间的相关影响因素及其影响程度。方法采用乳腺癌改良根治术后引流管置管时间相关因素调查表,对随机选取的行乳腺癌改良根治术后的92名患者进行临床观察,并对其相关影响因素进行分析。结果不同年龄和行改良根治术Ⅰ式、Ⅱ式患者的置管时间差异无统计学意义（P〉0．05）;而患者身体质量指数、手术医生行手术的方法、负压引流强度以及患肢肩部开始活动时间的置管时间差异有统计学意义（P〈0．05）;多因素回归分析结果显示,患者身体质量指数、手术医生行手术的方法进入方程。结论患者身体质量指数、手术医生行手术的方法是影响置管时间的最主要因素,而负压引流强度以及息肢肩部开始活动时间能够影响置管时间。     

LHPC—MS／MS法测定人体血浆中丙泊酚浓度的评价

【目的】建立人血浆中丙泊酚浓度的高效液相色谱串联质谱法（HPLC—MS／MS）测定方法,以评价其效果。【方法】采用LC—MS／MS法测定丙泊酚的浓度,色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C18（50mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇及0．1％氨水溶液;流速0．4mL／min;电喷雾离子化电离源（ESI）,质谱采用MRM模式,以负离子检测,检测离子为丙泊酚m／z177．2→m／z161．4、麝香草酚m／Z147．2→m／z106．7。20名健康志愿者静脉注射丙泊酚2mg／kg后,按预定时间点抽取动脉血进行血浆药物浓度的检测。【结果】丙泊酚血药浓度在线性范围分别为0．012～12．06μg／mI。范围内线性关系良好（r=0．9993）,定量下限为0．012μg／mL;低、中、高3个浓度的日内及日间相对精密度（RSD）〈15％;平均提取回收率86．7％,RSDl．87％。【结论】本方法特异性强、灵敏、高效、精密度及准确度好,适用于人体血浆中丙泊酚的检测。     

Genomic expression patterns in menstrual-related migraine in adolescents

Background.— Exacerbation of migraine with menses is common in adolescent girls and women with migraine, occurring in up to 60% of females with migraine. These migraines are oftentimes longer and more disabling and may be related to estrogen levels and hormonal fluctuations. Objective.— This study identifies the unique genomic expression pattern of menstrual‐related migraine (MRM) in comparison to migraine occurring outside the menstrual period and headache‐free controls. Methods.— Whole blood samples were obtained from female subjects having an acute migraine during their menstrual period (MRM) or outside of their menstrual period (non‐MRM) and controls (C) – females having a menstrual period without any history of headache. The messenger RNA was isolated from these samples, and genomic profile was assessed. Affymetrix Human Exon ST 1.0 (Affymetrix, Santa Clara, CA, USA) arrays were used to examine the genomic expression pattern differences between these3 groups. Results.— Blood genomic expression patterns were obtained on 56 subjects (MRM = 18, non‐MRM = 18, and controls = 20). Unique genomic expression patterns were observed for both MRM and non‐MRM. For MRM, 77 genes were identified that were unique to MRM, while 61 genes were commonly expressed for MRM and non‐MRM, and 127 genes appeared to have a unique expression pattern for non‐MRM. In addition, there were 279 genes that differentially expressed for MRM compared to non‐MRM that were not differentially expressed for non‐MRM. Gene ontology of these samples indicated many of these groups of genes were functionally related and included categories of immunomodulation/inflammation, mitochondrial function, and DNA homeostasis. Conclusions.— Blood genomic patterns can accurately differentiate MRM from non‐MRM. These results indicate that MRM involves a unique molecular biology pathway that can be identified with a specific biomarker and suggest that individuals with MRM have a different underlying genetic etiology.