气相色谱法测定盐酸伊立替康原料中的溶剂残留

 目的 用毛细管柱气相色谱法建立盐酸伊立替康中残留溶剂（甲醇、无水乙醇、丙酮、三氯甲烷、吡啶）的测定方法。 方法 采用 DB-5 （ 0.53 mm×30 m , 5.00 μm ）毛细管柱（固定相为 5% 二苯基 -95% 二甲基硅氧烷共聚物）,以氮气为载气, FID 检测器,采用程序升温,分流直接进样,外标法计算残留溶剂的含量。 结果 在考察的浓度范围内呈现良好的线性关系（甲醇 <> r =0.999 7 ,无水乙醇 <> r =0.999 7 ,丙酮 <> r =0.999 7 ,三氯甲烷 <> r =0.999 5 ,吡啶 <> r =0.999 8 ）,平均回收率范围为 97.3% ～ 101.1% ,理论塔板数均 >5 000 ,相邻的溶剂峰的分离度均 >2 ,精密度 RSD<3% 。 结论 本方法简单、结果准确、重现性好,可用于盐酸伊立替康中甲醇、无水乙醇、丙酮、三氯甲烷、吡啶 5 种残留溶剂的同时测定。     

贯叶金丝桃可降低伊立替康的功效

为评价贯叶金丝桃对伊立替康代谢的影响,荷兰研究者对5例54～66岁的癌症病人进行了随机交叉研究。这些病人连续90 min静注伊立替康350 mg/m~2,每3周1次,在第1次或第2次输注前14天开始口服贯叶金丝桃300 mg,每日3次,连续服药直至输注伊     

气相色谱法同时测定盐酸伊立替康中8种残留溶剂

目的:建立盐酸伊立替康中8种有机溶剂残留量的分离测定方法。方法:采用气相色谱法,色谱柱为SE-54(50m×0.53mm×1.0μm),氢火焰离子化检测器(FID),氮气为载气,程序升温,N,N-二甲基甲酰胺为溶解介质,二氯乙烷为内标物。结果:8种有机溶剂完全分离,线性关系与精密度良好。结论:本方法可用于盐酸伊立替康中有机溶剂残留量的检测。     

辣椒素诱导白血病和肝癌细胞凋亡的比较研究

目的:比较合成辣椒素(N-Vanillylnonanamide)诱导白血病细胞K562及其多药耐药K562/ADM、肝癌HepG2细胞凋亡的作用.方法:以K562细胞、K562/ADM细胞和HepG2细胞为靶细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性,流式细胞法测定细胞周期和Annexin V/PI双染色检测细胞凋亡.结果:MTT示合成辣椒素可抑制白血病细胞和HepG2细胞的增殖,根据同时期半数抑制浓度(IC50)示HepG2细胞最敏感,K562细胞较K562/ADM细胞敏感.合成辣椒素可阻滞细胞周期.合成辣椒素诱导24小时后Annexin V/PI双染色显示白血病细胞和肝癌细胞凋亡率升高;白血病敏感细胞株和耐药细胞株的对舍成辣椒素敏感性相似.结论:合成辣椒素可抑制白血病和肝癌细胞的增殖并诱导其凋亡;辣椒素对药物敏感和耐受的白血病细胞的作用相似.     

肠复康诱导人结肠癌HT-29裸小鼠移植瘤细胞凋亡的机制

目的探讨肠复康诱导人结肠癌HT-29裸小鼠移植瘤细胞凋亡的机制。方法建立人结肠癌HT-29癌细胞株裸小鼠皮下移植瘤模型,用电子天平测量移植瘤的质量,苏木精伊红(HE)染色计数凋亡细胞数,免疫组化染色结合图像分析系统半定量检测移植瘤细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax、半胱天冬酶3(caspase-3)的积分光密度(IOD),同时计算Bcl-2/Bax IOD比值,并使用逐步引入剔出模型进行单因素和多因素线性回归分析。结果与模型组比,肠复康组和西药组均使移植瘤瘤体质量量明显减轻(P<0.05或0.01),凋亡细胞数明显增多(P均<0.01),同时能显著增高瘤细胞iNOS、Bax及caspase-3蛋白的含量(P<0.05或0.01),显著降低瘤细胞Bcl-2/Bax比值(P<0.05或0.01);单因素回归分析显示,瘤细胞iNOS、Bcl-2、Bax及caspase-3含量和Bcl-2/Bax比值与移植瘤凋亡细胞数有关;多因素回归分析显示,移植瘤凋亡细胞数与瘤体质量呈明显负相关(r=-0.775,P<0.01),瘤细胞iNOS及Bax蛋白含量与移植瘤凋亡细胞数呈明显正相关(r=0.771,P<0.01,r=0.763,P<0.01)。结论肠复康能诱导人结肠癌HT-29裸小鼠移植瘤细胞凋亡,其机制之一可能是促进NO的生成,通过线粒体凋亡途径激活caspase-3,导致瘤细胞凋亡。     

亚麻木酚素联合硼替佐米诱导肺腺癌A549细胞凋亡的机制研究

目的:探讨亚麻木酚素(SDG)联合蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bortezomib,Bor)对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及其机制。方法:MTT法检测细胞增殖;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞法和Hoechst 33258荧光染色法检测细胞凋亡;比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性;Real Time PCR检测Caspase-3、BCL-2、BAXmRNA的表达;Western Blot检测BCL-2、Bax及p-JNK的蛋白表达。结果:SDG联合Bor能明显抑制细胞生长,上调Caspase-3活性,促进p-JNK、BAX mRNA和蛋白的表达,抑制BCL-2 mRNA和蛋白的表达,诱导细胞凋亡。结论:SDG联合Bor可显著诱导肺腺癌A549细胞的凋亡,其机制可能与其激活JNK信号通路有关。     

黄芪注射液诱导人结肠癌Lovo细胞凋亡机制的研究

目的研究黄芪注射液诱导结肠癌Lovo细胞株的凋亡机制。方法以不同浓度的黄芪注射液作用于人结肠癌Lovo细胞株,用MTT法测黄芪注射液对Lovo细胞体外增殖的影响,透射电镜观察细胞超微结构;流式细胞仪AnnexinV和PI双重染色行凋亡相关检查。结果与对照组相比,实验组对Lovo细胞株增殖均有明显的抑制作用,且与浓度和作用时间呈正比;电镜下可见凋亡的早、中、晚期细胞及凋亡小体,同时可见部分细胞呈坏死改变。流式细胞仪显示:黄芪注射液作用Lovo细胞48 h后,0.05 g/mL、0.1 g/mL、0.15 g/mL、0.2g/mL各组的凋亡率分别为4.8%,18.6%,42.1%,64.8%。结论黄芪注射液能抑制Lovo细胞生长,诱导细胞凋亡。     

黄芩汤预防伊立替康所致迟发性腹泻的研究

目的:探讨中药复方黄芩汤对伊立替康(CPT-11)所致小鼠迟发型腹泻的预防作用.方法:健康雄性ICR小鼠40只随机分为5组,腹泻组ip伊立替康连续5d制备迟发性腹泻模型,正常组等量生理盐水代替,黄芩汤低(5 g·kg-1)、中(10 g·kg-1)、高(20 g·kg-1)剂量组ip伊立替康前1d分别按剂量ig给药,连续用药8d,观察迟发性腹泻发生情况及体重变化;实验第9天将小鼠处死,取血、结肠、盲肠、空肠、回肠组织.光镜下根据Chiu肠黏膜损伤评分方法对肠组织进行分级;Griess法检测肠组织匀浆液一氧化氮(NO)含量;免疫组化法测定增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平;瑞士-吉姆萨染色法测定中性粒细胞数.结果:小鼠腹腔注射CPT-11后,出现明显的迟发性腹泻.黄芩汤中、高剂量组小鼠腹泻发生率较腹泻组显著降低(P＜0.05);体重下降率较腹泻模型组降低;肠黏膜损伤程度比腹泻模型组显著降低,盲肠及结肠的中、高剂量组损伤较腹泻组显著且降低(P＜0.05),与剂量呈一定的量效关系;结肠的NO表达含量明显增加且PCNA表达减少(P＜0.05);还可增加血中性粒细胞数量(P＜0.01).结论:黄芩汤通过改善肠黏膜损伤程度、增加肠组织NO含量和减少PCNA表达,从而对CPT-11所致迟发性腹泻具有预防作用,还可缓解中性粒细胞减少症.     

姜黄素诱导结肠癌LoVo细胞凋亡的作用及机制研究

目的: 探讨姜黄素促人结肠癌LoVo细胞凋亡的生物学作用及其调控机制。 方法: 体外培养人结肠癌LoVo细胞,0~20 mg·L^-1不同浓度姜黄素处理后,采用MTT 比色法测定姜黄素对细胞的增殖抑制作用,利用透射电镜观察细胞的超微结构,采用PI单标流式细胞仪测定细胞周期分布,Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡率; 采用 RT-PCR检测Bax,Bcl-2,Caspase-3,Bcl-xL mRNA表达水平。 结果: MTT检测显示姜黄素能显著抑制人结肠癌LoVo细胞的生长、増殖,呈现浓度和时间效应关系;透射电镜结果显示姜黄素能使LoVo细胞发生形态学改变,呈现典型凋亡细胞特征;流式细胞仪分析显示姜黄素能阻滞细胞周期于S期,诱导细胞发生凋亡。RT-PCR检测显示姜黄素可促进细胞中Bax,Caspase-3 mRNA 表达,抑制Bcl-2,Bcl-xL mRNA 表达。 结论: 姜黄素能显著抑制人结肠癌LoVo细胞的增殖并促进其凋亡,这种生物学效应可能与激活Bax表达、抑制Bcl-2和Bcl-xL表达而活化Caspase-3的信号通路有关。     

高效液相色谱法测定大鼠肝微粒体酶孵育体系中伊立替康及其代谢产物的浓度

 目的 建立大鼠肝微粒体酶孵育体系中伊立替康（CPT-11）及其活性代谢产物7-乙基-10羟基喜树碱（SN-38）的HPLC检测方法,并对体外孵育条件进行优化。方法 采用HPLC测定微粒体酶孵育体系中伊立替康及其代谢产物的浓度,用单因素法对各孵育条件进行优化,采用Lineweaver-Burk双倒数法研究羧酸酯酶(CES)的酶促动力学。结果 伊立替康、7-乙基-10羟基喜树碱分别在20~4 000、2~400 ng·mL^-1内线性关系良好。体外酶孵育条件为：伊立替康 10 μmol·L^-1,肝微粒体蛋白含量0.02 mg,孵育时间为15 min。结论 本实验建立的HPLC的方法快捷、灵敏,适用于伊立替康及其代谢产物的测定。体外酶孵育条件的优化,同时也为研究其他多种经羧酸酯酶代谢的药物对伊立替康代谢影响及相互作用的体外研究奠定了基础。     

肉豆蔻醚抑制结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用及机制研究＊

目的 探讨肉豆蔻醚（myristicin）对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用及机制。方法 MTT法检测肉豆蔻醚在体外对结肠癌细胞HCT116和LOVO增殖的影响；Annexin V/PI双染法检测肉豆蔻醚对HCT116和LOVO细胞凋亡的影响；划痕试验和Transwell实验分别检测肉豆蔻醚对HCT116和LOVO细胞迁移和侵袭的影响；western blot实验检测肉豆蔻醚对p-MEK1/2、p-ERK1/2、CyclinD1、E-cadherin、MMP-2以及MMP-9表达的影响。结果 肉豆蔻醚作用后，HCT116和LOVO细胞增殖、迁移和侵袭受到显著抑制，细胞出现显著凋亡；肉豆蔻醚作用后，HCT116和LOVO细胞内MEK1/2、ERK1/2、CyclinD1、MMP-2以及MMP-9蛋白表达水平显著降低，而E-cadherin蛋白表达水平显著增高。结论 本研究发现肉豆蔻醚在体外具有抑制结肠癌细胞生长的作用，为临床用药提供一定的实验依据，为肿瘤治疗提供新的靶点和策略。     

结肠充气状态下CT扫描诊断结肠癌效果观察

目的探讨在结肠充气状态下通过螺旋CT扫描解决结肠癌分期的准确性。方法对32例术前经螺旋CT结肠充气成像拟诊结肠癌并初步分期与临床手术病理结果进行比较。结果 32例患者正确诊断为结肠癌的占30例,分期判断正确的占24例,误诊息肉为结肠癌的占2例。结论在结肠充气状态下螺旋CT扫描诊断结肠癌有很高的价值,但在结肠癌分期方面还有一定的局限性。     

腹腔镜辅助结肠癌根治术治疗结肠癌的安全性分析

〔摘 要〕 目的：探究腹腔镜辅助结肠癌根治术治疗结肠癌患者的手术安全性。方法：选取石门县妇幼保健计划生育服 务中心 2018 年 3 月至 2020 年 4 月期间行手术治疗的 78 例结肠癌患者,随机抽签分为对照组与观察组,各 39 例。观察组 选用腹腔镜辅助结肠癌根治术治疗,对照组选用开腹结肠癌根治术治疗,观察比较两组患者术后肛门恢复排气时长、手术 之后可进食流质饮食时长、术后并发症发生率、术中失血总量、手术时长、下床走动时长、住院时长、对手术治疗效果总 体满意占比。结果：观察组患者术后肛门恢复排气时长、手术之后可进食流质饮食时长均短于对照组,差异具有统计学意 义（P ＜ 0.05）;观察组患者术后并发症发生率为 2.56 %,低于对照组的 15.38 %,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）;观 察组患者的术中失血总量、手术时长、下床走动时长、住院时长均优于对照组,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）;观察 组患者的对手术满意为 36 例（92.31 %）,优于对照组的 29 例（74.36 %）,差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论： 为结肠癌患者采取腹腔镜辅助结肠癌根治术治疗表现出良好手术安全性。     

基于生物信息学和体外实验探讨紫草素潜在的抗肿瘤机制

目的：紫草素（SHK）,一种紫草根部的萘醌类活性成分,具有抗肿瘤活性。本研究通过生物信息学方法和细胞实验,探索SHK在肝细胞肝癌（LIHC）、前列腺腺癌（PRAD）和结肠腺癌（COAD）中的新靶点。方法：通过人类基因数据库（GeneCard）及癌症基因图谱（TCGA）获得SHK与3种癌症的交集基因,并进行基因本体（GO）和京都基因和基因组百科全书（KEGG）富集分析、蛋白质-蛋白质相互作用（PPT）网络构建等。体外实验检测SHK对人肝癌细胞（HepG2）、人前列腺癌细胞（LNCaP C4-2）和人结肠癌细胞（HT-29）的抑制作用,并分析SHK对细胞凋亡及预测靶点基因表达的影响。结果：SHK显著抑制3种癌细胞增殖并通过调节周期素依赖性激酶抑制因子1A（CDKN1A）等基因的表达实现抗肿瘤作用,且与生物信息学预测结果一致。此外,Kaplan-Meier生存曲线进一步表明CDKN1A等是SHK影响癌症患者生存的重要靶点;CDKN1A和B淋巴细胞瘤-2（BCL-2）是SHK抑制肿瘤细胞增殖和侵袭的核心靶点。结论：SHK可通过人体抑癌基因（P53）/CDKN1A和BCL-2/BCL-2关联X蛋白（BAX）通路诱导癌细胞凋亡。本研究报道了SHK抑制肿瘤的作用靶点及潜在机制,为含SHK的中草药作为抗肿瘤的潜在药物提供了初步依据。     

薏苡附子败酱散对结肠癌细胞HCT116凋亡的影响及机制

目的：探究薏苡附子败酱散对结肠癌细胞HCT116凋亡的影响,并探讨其相关的细胞凋亡机制。方法：不同质量浓度(0.5、1、2、4、6、8、10、12、14、16 g·L^-1 )薏苡附子败酱散干预结肠癌细胞24、48、72 h,细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法检测细胞体外增殖的影响;设空白组、卡培他滨组(1.8 g·L^-1 )和薏苡附子败酱散组(6、10、14 g·L^-1 ),分别处理48 h,采用流式细胞技术检测细胞凋亡率,Hochest 33342荧光染色观察细胞凋亡形态,线粒体红色荧光探针(Mito-Tracker Red CMXRos)分析线粒体膜电位(MMP)变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测线粒体凋亡途径相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyt C)、胱天蛋白酶(Caspase)-9、Caspase-3、活化的(cleaved) Caspase-9、cleaved Caspase-3的表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time...     

桦褐孔菌醇诱导人卵巢癌SKOV3细胞株凋亡及其分子机制研究简

 目的 研究桦褐孔菌醇(inotodiol)诱导人卵巢癌细胞SKOV3凋亡及其对相关蛋白Bcl-2、 Bax和caspase-3表达的影响。方法 选用人卵巢癌SKOV3细胞株进行体外培养, 四甲基偶氮唑蓝法检测桦褐孔菌醇对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响;应用透射电镜观察细胞形态学变化;通过TUNEL染色测定凋亡率;通过免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白Bcl-2, Bax和caspase-3的表达。结果 桦褐孔菌醇抑制人卵巢癌细胞增殖, 呈时间-剂量依赖性;形态学检测出现典型的细胞凋亡改变。50 mg·L^-1桦褐孔菌醇作用人卵巢癌SKOV3细胞24、48 h的凋亡率分别为(21.91±2.84)%和(43.83±3.22)%, 肿瘤细胞凋亡率(AR)随药物作用时间的延长而上升, 显示明显的时效关系(P<0.05)。免疫细胞化学法染色显示, 桦褐孔菌醇组人卵巢癌SKOV₃细胞Bcl-2基因蛋白的阳性表达率明显降低, 而Bax、caspase-3基因蛋白阳性表达率明显升高。结论 桦褐孔菌醇对人卵巢癌SKOV3细胞株有抗增殖和诱导凋亡作用, 该药可能是通过下调凋亡抑制基因Bcl-2的表达和上调促进凋亡基因Bax的表达及启动caspase凋亡信号而发挥抗癌作用。     

基于Wnt通路加味乌梅丸对结肠癌的抑制机制

目的:探讨加味乌梅丸抑制结肠癌的效果并分析其作用机制。方法:选取BALB/c雄性小鼠30只,随机分为空白组、模型组和乌梅丸组,每组10只。其中空白组小鼠不接受干预措施,乌梅丸组进行乌梅丸煎剂灌胃处理,空白组及模型组接受等剂量生理盐水灌胃,均干预28 d,观察肿瘤体积的变化、小鼠的体重及存活率、肿瘤组织Wnt、JNK水平变化。结果:模型组与乌梅丸组小鼠肿瘤体积较干预前均有增加的趋势,其中乌梅丸组增加的速度较慢,并在干预28 d后肿瘤组织有减小的趋势;干预28 d空白组小鼠体重与初始体重相近,模型组及乌梅丸组小鼠体重明显下降,其中模型组较乌梅丸组下降明显,差异有统计学意义(P0.05);干预结束后模型组仅有4只小鼠存活,而乌梅丸组有7只小鼠存活,存活率差异有统计学意义(P0.05)。模型组及乌梅丸组小鼠肿瘤组织Wnt、JNK蛋白及mRNA均过表达,其中模型组Wnt、JNK表达水平明显高于乌梅丸组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:加味乌梅丸具有明显抑制结肠腺瘤恶化作用,其抗肿瘤机制可能与抑制Wnt通路表达有关。     

白藜芦醇联合奥沙利铂对人结肠癌细胞恶性生物学行为的抑制作用及机制

目的:探讨白藜芦醇(Res)联合奥沙利铂(Oxa)对人结肠癌细胞恶性生物学行为的抑制作用及机制。方法:将体外培养结肠癌HCT-116细胞分为Res组、Oxa组、联合组及对照组,分别以100μmo L/L Res、2μmo L/LOxa、100μmo L/L Res+2μmo L/LOxa、等量生理盐水处理,各组分别处理24、36、48 h。采用噻唑蓝(MTT)法检测结肠癌HCT-116细胞增殖抑制情况;采用Transwell小室实验检测结肠癌HCT-116细胞侵袭能力; Wound Healing法检测结肠癌HCT-116细胞迁移能力;采用蛋白免疫印迹法检测结肠癌HCT-116细胞波形蛋白(Vimentin)蛋白表达情况。结果:干预48 h时,Res组、Oxa组及联合组结肠癌HCT-116细胞增殖抑制率分别为(28. 41±6. 25)%、(36. 11±8. 47)%、(83. 61±12. 72)%;干预48 h时,对照组、Res组、Oxa组及联合组结肠癌HCT-116细胞侵袭率分别(97. 14±2. 81)%、(81. 23±4. 52)%、(69. 84±3. 97)%、(37. 11±3. 58)%;迁移率分别为(68. 57±4. 02)%、(46. 11±3. 13)%、(31. 25±2. 86)%、(18. 79±2. 21)%; Vimentin蛋白相对表达量分别为0. 93±0. 14、0. 52±0. 08、0. 31±0. 04、0. 13±0. 02。Res组、Oxa组及联合组结肠癌HCT-116细胞增殖抑制率呈逐渐升高趋势(P 0. 05);与对照组比较,Res组、Oxa组及联合组结肠癌HCT-116细胞侵袭率、迁移率和Vimentin蛋白相对表达量降低,且联合组显著低于Res组与Oxa组,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:Res与Oxa联合使用具有显著的协同效应,可更有效抑制结肠癌HCT-116细胞增殖,并降低其侵袭和迁移能力,其机制可能与下调Vimentin蛋白表达有关。     

姜黄素在体外对人大肠癌细胞株生长和凋亡的影响

目的：本实验通过姜黄素在体外对大肠癌CX-1细胞株的抗肿瘤作用研究，探讨姜黄素抗大肠癌的作用机理及其分子机制。实验方法：采用细胞生长抑制试验检测不同浓度姜黄素对大肠癌CX-1细胞的生长抑制作用，设立实验组和对照组。光镜下观察对照组和实验组CX-1细胞的生长情况、形态学改变及凋亡过程；透射电镜技术观察对照组和试验组CX-1细胞的超微结构，特别是观察试验组细胞的凋亡结构；通过流式细胞仪测定一定浓度姜黄素处理CX-1细胞不同时间的凋亡率，并与对照组细胞的凋亡率比较，已显示姜黄素作用时间与凋亡率二者之间的关系；免疫组化常规SABC法检测一定浓度姜黄素作用前后CX-1细胞内抑制凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白bax蛋白含量的变化情况。结论：①在体外，姜黄素能抑制人大肠癌CX-1并诱导产生凋亡，其机制与细胞内的抑凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白bax的蛋白含量密切相关。②姜黄素对人大肠癌CX-1细胞具有明显的细胞毒作用。③姜黄素在大肠癌治疗中可能成为一种有希望的凋亡诱导剂。