前列腺增生对老年大鼠膀胱胶原沉积的影响

目的:观察老年大鼠膀胱形态学的改变以及BPH对其影响,探讨BPH对老年大鼠膀胱形态及胶原沉积的影响。材料与方法:材料:青年(3月龄)及老年(18月龄)雄性Wistar大鼠。除空白青年组及空白老年组外,其它大鼠手术去势加皮下注射睾酮法复制BPH模型。将模型大鼠按月龄随机分为模型青年组、模型老年组、模型老年组+非那雄胺组、模型老年组+多沙唑嗪组。各组大鼠分别给予相应药物灌胃30天。免疫组织化学染色法观察膀胱组织胶原I及胶原Ⅲ含量。结果:老年大鼠膀胱逼尿肌细胞明显减少,排列稀疏,间质中胶原组织沉积尤为明显。BPH老年大鼠的膀胱逼尿肌细胞较正常青年、老年大鼠均明显增加,经多沙唑嗪和非那雄胺治疗后,BPH老年大鼠的膀胱逼尿肌细胞数量有所下降。空白老年组膀胱组织中胶原I阳性面积(18.16±3.89)比率高于空白青年组(9.74±1.54,P<0.01),低于模型老年(23.30±1.32,P<0.01)、多沙唑嗪(23.37±2.94,P<0.01)、非那雄胺(21.94±3.23,P<0.05)等各组。模型老年组膀胱组织中胶原Ⅲ阳性面积比率(40.11±2.03)明显高于空白老年组(26.49±3.12,P<0.01)、多沙唑嗪(30.88±4.73,P<0.01)和非那雄胺组(26.13±2.46,P<0.01)。空白老年组膀胱组织胶原Ⅲ/胶原I(0.68±0.10)明显低于空白青年组(1.30±0.28,P<0.01)。多沙唑嗪(0.78±0.18,P<0.05)、非那雄胺组(0.82±0.09,P<0.01)明显高于模型老年组(0.58±0.36),但与空白老年组相比没有显著性差异。结论:老年膀胱改变是老年前列腺增生大鼠膀胱改变的重要原因,单纯解除梗阻不能完全改善之。这一结果提示我们在临床上要充分考虑前列腺增生患者膀胱自身的衰老改变,及早保护膀胱功能以延缓其衰老改变的过程。     

加味桂枝茯苓颗粒对大鼠前列腺增生组织血管新生及bFGF表达的影响

目的:观察加味桂枝茯苓颗粒对大鼠前列腺增生组织血管新生及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的影响。方法:采用SD大鼠去势后皮下注射丙酸睾丸酮法复制BPH模型,分别给予生理盐水(B组)、非那雄胺(C组)和加味桂枝茯苓颗粒(D组)悬液灌胃,30日后处死大鼠,摘取前列腺,测量前列腺体积、计算前列腺指数(PI)、检测前列腺微血管密度(MVD)和前列腺组织中bFGF表达情况。结果:与正常组比较,对照组大鼠前列腺体积、重量、指数均明显增大(P<0.01),前列腺组织MVD和bFGF表达水平明显增高(P<0.01);与B组比较,C组前列腺的重量、体积、MVD计数、bFGF表达参数明显降低(P<0.01),而D组大鼠前列腺重量、体积、前列腺指数、MVD计数及bFGF表达参数五项均明显降低(P<0.01);镜下结构显示,与B组相比,C组和D组均有不同程度的改善。结论:加味桂枝茯苓颗粒能缩小前列腺体积,对BPH有一定的治疗作用,其作用机制可能与抑制bFGF的表达有关。     

益气化瘀方对大鼠前列腺增生组织MMP-2/TIMP-2表达的影响

目的:观察益气化瘀方对大鼠前列腺增生组织血管新生和基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制物(TIMP-2)表达的影响。方法:50只SD大鼠去势7天后,皮下注射丙酸睾酮5mg.kg-1.d-1,同时给予益气化瘀方、非那雄胺混悬液灌胃,30天后股动脉放血处死大鼠,摘取前列腺,测量前列腺体积,计算前列腺指数(PI),检测前列腺微血管密度(MVD)和前列腺组织中MMP-2及其抑制物(TIMP-2)表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠前列腺指数明显增大(P<0.01),前列腺组织MVD明显增高(P<0.01),MMP-2蛋白表达显著增高(P<0.01),MMP-2/TIMP-2比值明显增大(P<0.05);各给药组前列腺前列腺指数、MVD、MMP-2表达、MMP-2/TIMP-2比值均明显低于模型组(P<0.05或P<0.01);益气化瘀方中、高剂量组大鼠前列腺指数、MMP-2表达量、MMP-2/TIMP-2比值与非那雄胺组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但前列腺组织MVD明显低于非那雄胺组(P<0.05)。结论:中药益气化瘀方具有抗前列腺组织增生作用,其机制可能与抑制MMP-2过度表达,进而抑制前列腺增生组织新生血管形成有关。     

仙甲汤抑制IL-6/JAK2/STAT3信号通路改善大鼠前列腺增生

目的 基于白细胞介素（IL）-6介导的炎症反应,探讨仙甲汤改善大鼠前列腺增生（BPH）的作用及机制。方法 将36只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、仙甲汤高、中、低剂量组、非那雄胺组,每组6只。除空白组外,每组皮下注射丙酸睾酮（5 mg/kg）连续30天制备BPH模型。造模完成后,仙甲汤高、中、低剂量组分别给予仙甲汤27.18、13.59、6.80 g/kg灌胃,非那雄胺组给予非那雄胺0.45 mg/kg灌胃,空白组和模型组给予等体积生理盐水,连续30天。测量大鼠体重、前列腺湿重及体积并计算前列腺指数;HE染色法观察前列腺组织病理学变化;甲苯胺蓝染色法观察前列腺组织肥大细胞并计数;ELISA法检测前列腺组织IL-6、IL-10含量;Western Blot检测前列腺组织酪氨酸蛋白激酶2（JAK2）、磷酸化JAK2（p-JAK2）、转录激活因子3（STAT3）、磷酸化STAT3（p-STAT3）表达;Real-time PCR检测前列腺组织IL-6、JAK2、STAT3 mRNA表达。结果 空白组大鼠前列腺组织中腺体饱满、规则;模型组大鼠前列腺腺体不规则,腺上皮细胞增生,基质内出现纤维组织增生,并有炎性细胞浸润;干预组出现不同程度好转。与空白组比较,模型组大鼠前列腺体积、湿重、指数、肥大细胞数、IL-6含量、p-STAT3、p-JAK2蛋白及IL-6、JAK2、STAT3 mRNA表达升高,前列腺组织IL-10含量降低（P<0.01）。与模型组比较,仙甲汤高、中剂量组和非那雄胺组前列腺体积、湿重、指数、肥大细胞数,IL-6含量、p-STAT3、p-JAK2蛋白及IL-6、JAK2、STAT3 mRNA表达降低,前列腺组织IL-10含量升高（P<0.05,P<0.01）;仙甲汤低剂量组大鼠前列腺体积、湿重、STAT3 mRNA表达下降（P<0.05,P<0.01）。与非那雄胺组比较,仙甲汤高剂量组大鼠前列腺体积、湿重、指数、肥大细胞数、IL-6含量、p-STAT3、p-JAK2蛋白表达降低,前列腺组织IL-10含量升高（P<0.05,P<0.01）。结论 仙甲汤能显著改善大鼠BPH,其机制可能与抑制IL-6/JAK2/STAT3通路过度激活有关。     

补肾活血方对前列腺增生模型大鼠膀胱胶原沉积的影响

目的:观察补肾活血方补肾活血方对前列腺增生大鼠膀胱组织胶原沉积的影响。方法:清洁级雄性Wistar大鼠48只,随机分为正常组、模型组、模型加补肾活血方组、模型加坦索罗辛组4组。除正常组外,其它实验大鼠以去势加睾酮注射法复制大鼠BPH模型。于去势第一天起,各组大鼠分别给予相应药物灌胃。模型+补肾活血方按1 mL/100(g.d)体重予补肾活血方(由淫羊藿、枸杞子、穿山甲、丹参、菟丝子等组成,含生药量2.34g/mL)灌胃,模型加坦索罗辛组按1.8μg/100(g.d)体重予坦索罗辛灌胃。其余各组予等体积生理盐水灌胃。均每日1次,连续38 d后检测各组大鼠前列腺、膀胱湿重及脏器指数,免疫组织化学法观察膀胱组织内胶原沉积。结果:模型组膀胱胶原Ⅲ阳性面积率、总IOD等均明显高于空白组(P<0.01)。补肾活血方、坦索罗辛组膀胱胶原Ⅲ阳性面积率及总IOD均明显较模型组低(P<0.01)。膀胱胶原Ⅰ沉积情况与胶原Ⅲ类似。模型组膀胱胶原Ⅰ/胶原Ⅲ总IOD可降至0.28,与空白组相比有非常显著的差异(P<0.01),补肾活血方组则明显高于模型组(P<0.01),与空白组相比无统计学差异;结论:补肾活血方组可以明显降低BPH模型大鼠膀胱组织胶原Ⅲ沉积,提高胶原I/胶原III比率,这可能是补肾活血方有效改善BPH继发膀胱改变的机制之一。     

前列安通片对BPH大鼠前列腺组织中 VEGF，bFGF表达的影响

目的：观察前列安通片对前列腺增生(BPH)大鼠增生前列腺组织的影响，并探讨其作用机制。方法：采用SD大鼠去势后皮下注射丙酸睾丸酮法复制BPH模型，用形态计量学方法研究各组前列腺组织的形态改变；用免疫组化法研究实验各组前列腺组织的血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达。结果：前列安通片高、中、低各剂量组(6.24，3.12，1.56 g·kg-1)及阳性药保列治组(1.67 g·kg-1)与模型组比较，前列腺质量、前列腺体积、前列腺指数均明显降低(P<0.01)；腺体平均面积、平均周长降低，相同面积内腺体总数目增加(P<0.01)；前列安通片各剂量组bFGF表达显著低于模型组(P<0.01)，高剂量组前列腺组织中VEGF表达明显低于模型组(P<0.05)。结论：前列安通片能缩小前列腺体积，对BPH有一定的治疗作用，作用机制与抑制VEGF，bFGF的表达有关。     

益气活血清热利湿方对大鼠前列腺增生模型碱性成纤维因子的影响

目的观察益气活血清热利湿方对大鼠前列腺增生模型碱性成纤维因子(bFGF)的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、保列治组和实验组,每组10只。除对照组游离但不切除睾丸外,其余3组均切除双侧睾丸,予丙酸睾丸酮皮下注射制造前列腺增生(BPH)模型。对照组和模型组予0.9%氯化钠注射液灌胃给药,保列治组予非那雄胺片溶于0.9%氯化钠注射液中灌胃给药,实验组予益气活血清热利湿方水煎剂灌胃给药;4组均连用30d,观察前列腺湿质量、前列腺体积、前列腺指数及前列腺细胞中bFGF表达、前列腺组织病理变化。结果对照组、保列治组、实验组大鼠前列腺湿质量、前列腺体积及前列腺指数均明显低于模型组(P0.05);保列治组、实验组前列腺组织中bFGF阳性颗粒数与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论益气活血清热利湿方能使增生的前列腺萎缩,降低前列腺指数,降低前列腺组织中bFGF的表达。     

前列散瘀胶囊对实验性大鼠前列腺增生组织中碱性成纤维细胞表达的干预

目的:探讨前列散瘀胶囊对实验性大鼠前列腺增生组织中碱性成纤维细胞(bFGF)表达的影响。方法:建立良性前列腺增生大鼠模型,设药物高、中、低剂量组及空白组,取相同部位前列腺腹叶,以免疫组化定量技术对前列腺组织bFGF进行测试。结果:前列散瘀胶囊高剂量组的bFGF表达明显低于空白组(P<0.01)。结论:中药前列散瘀胶囊治疗前列腺增生的机理之一是该药明显抑制了前列腺组织中的bFGF的表达,进而抑制了前列腺细胞的生长。     

益肾活血颗粒对良性前列腺增生大鼠Caspase-3及bFGF表达的影响

目的观察益肾活血颗粒(黄芪、山萸肉、牛膝等)对良性前列腺增生大鼠的影响和组织形态学改变。方法选取50只健康雄性SD大鼠,随机均分为5组,正常组、模型组(生理盐水)、阳性对照组(非那雄胺片)、中药组(高、低剂量益肾活血颗粒)。除正常组外,其余各组大鼠行双侧睾丸切除术,7 d后皮下注射丙酸睾酮法制作前列腺增生模型。连续灌胃4周取前列腺,观察前列腺指数及病理形态改变,采用免疫组化法检测Caspase-3(半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3)及b FGF(碱性成纤维细胞生长因子)表达情况。结果益肾活血颗粒及非那雄胺片均可有效的抑制大鼠前列腺增生的趋势;益肾活血颗粒高剂量组使Caspase-3水平明显升高,bFGF水平明显降低。结论益肾活血颗粒对前列腺增生大鼠的上皮组织中Caspase-3和b FGF表达的效果与非那雄胺无明显差异。     

艾灸对老年大鼠海马线粒体膜电位、神经元凋亡的影响

目的:通过测定老年大鼠海马线粒体膜电位、神经元凋亡的数量,探讨线粒体、细胞凋亡在衰老中的作用以及艾灸的延缓衰老作用。方法:依月龄将Wistar大鼠分为青年组、老年组、老年艾灸组,艾灸“百会”“肾俞”穴40 d后,用碘化丙啶(PI)和罗丹明123(Rhodamine-123)荧光染料染色30 min,通过流式细胞仪测定细胞内PI和Rhodamine-123的荧光强度,分析细胞线粒体膜电位、神经元凋亡的变化。结果:老年组海马线粒体膜电位、神经元凋亡阳性百分比均较青年组、艾灸组显著增高(P<0.01),青年组与艾灸组间无显著性差异(P>0.05)。结论:艾灸具有延缓衰老的作用,可以抑制线粒体膜电位的改变,减少神经元凋亡。     

枸杞菊花冲剂对老年大鼠肝脏和血清CAT活力及MDA含量的影响

目的：观察枸杞菊花冲剂对老年大鼠肝脏和血清过氧化氢酯（CAT）活力及丙二醛（MDA）含量的影响,探讨其延缓老年性视力衰退的可能机制。方法：将18-22月龄SD大鼠随机分为老年空白对照组和老年低、中、高剂量组,每组10只。另10只2—3月龄SD大鼠作为青年空白对照组。老年低、中、高剂量组分别以1g／kg、2g／kg、4g／kg[生药／大鼠（体质量）]的剂量灌胃枸杞菊花冲剂,其余组灌胃等量的生理盐水,连续灌胃35天后,检测肝脏和血清的CAT活力及MDA含量。结果：与老年空白对照组相比,青年空白对照组和老年低、中、高剂量组CAT活力明显提高（P〈0．01）,MDA含量明显降低（P〈0．01）,其中中剂量组总体效果最佳。结论：枸杞菊花冲剂可提高肝脏和血清的CAT活力,降低MDA含量,其延缓老年性视力衰退的机制可能与清除氧自由基延缓肝脏衰老有关。     

枸杞菊花散对老年大鼠视网膜各层细胞的影响

目的观察枸杞菊花散对老年SD大鼠视网膜各层细胞的影响,探讨其延缓老年性视力衰退的可能机制。方法以18～22月龄的SD大鼠作为老年大鼠模型,分为老年空白对照组,枸杞菊花散低、中、高剂量组,每组10只;2～3月龄大鼠10只,作为青年空白对照组。枸杞菊花散各组予枸杞菊花散灌胃,对照组予生理盐水灌胃。用药35 d后制作视网膜组织病理切片,HE染色,分层计数各层细胞数目。结果枸杞菊花散中、高剂量组大鼠的视网膜神经节细胞层、外核层细胞数,较老年空白对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01)。各组间内核层细胞数差异无统计学意义(P>0.05)。结论枸杞菊花散可以延缓视网膜神经节细胞层及外核层细胞衰减,这可能是其延缓大鼠老年性视力衰退的作用机制。     

广王不留行醇提物对大鼠慢性膀胱颈梗阻模型平滑肌细胞凋亡的影响

目的 研究广王不留行醇提物对大鼠慢性膀胱颈梗阻模型逼尿肌中的平滑肌细胞凋亡的影响.方法 实验大鼠随机分为空白对照组、造模组、实验组,各15只.参照文献方法制作大鼠膀胱颈梗阻模型.应用TUNEL法检测大鼠逼尿肌平滑肌细胞凋亡情况.结果 空白对照组平滑肌凋亡细胞率为15.5％,造模组凋亡细胞率为50.2％,实验组凋亡细胞率为30.4％,各组间比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 广王不留行醇提物可能通过抑制膀胱逼尿肌平滑肌细胞凋亡,从而改善逼尿肌功能.     

缩泉丸对自然衰老大鼠逼尿肌β3-肾上腺素能受体mRNA表达的影响

目的:观察自然衰老大鼠逼尿肌β3-肾上腺素能受体(AR)mRNA表达的改变,探讨缩泉丸“缩尿”的机制.方法:取老年大鼠(20月龄)50只,青年大鼠(3月龄)10只.设置组别为:空白对照组、模型对照组、金匮肾气丸组(1.08 g·kg-1·d-1)、缩泉丸高、中、低剂量组(0.293,0.585,1.170 g·kg-1·d-1),每组10只.空白对照组和模型对照组给予同体积蒸馏水,缩泉丸低、中、高剂量组给予相应浓度的缩泉丸药液,金匮肾气丸组予金匮肾气丸药液,连续4周.选用代谢笼法测量大鼠24h尿量及水负荷5h尿量,采用PCR方法检测自然衰老大鼠逼尿肌β3-AR mRNA表达.结果:缩泉丸中、高剂量组动24 h尿量明显减少,分别为(4.18 ±2.07),(4.16±1.54)mL· (100g)-1;缩泉丸低、中、高剂量组水负荷后5h内尿量明显减少,分别为(1.08±0.43),(0.99±0.54),(0.96±0.49)mL· (100g)-1;自然衰老大鼠逼尿肌β3-AR mRNA表达明显下降(P＜0.05),相对比值为1.61±0.045;给予缩泉丸后,中、高剂量可以显著提高自然衰老大鼠膀胱逼尿肌中β3-AR mRNA的表达(P＜0.05),相对比值为1.63±0.036,1.70±0.061.结论:缩泉丸可以上调自然衰老大鼠遥尿肌β3-ARmRNA的表达,可能是其发挥“缩尿”作用的机制.     

双参宁心方的正常与心肌缺血模型大鼠血清对 缺氧/复氧H9C2细胞作用的比较

目的:比较大鼠在正常状态与心肌缺血状态下制备的双参宁心方(SSNX)空白及含药血清对体外缺氧/复氧H9C2心肌细胞活力的影响。方法:分别设立正常组、心肌缺血模型组。大鼠心肌缺血模型由冠状动脉结扎法建立,术后缝合伤口继续喂养。术后2 h除正常空白、模型空白、模型假手术组给予生理盐水外,均按高、中、低剂量(180,90,45 mg.kg-1)分别ig给予SSNX 5日。末次给药后30,90,150 min分批处死大鼠,分别制备正常及模型血清。将其作用于缺氧/复氧H9C2细胞。MTT法检测H9C2细胞活力。结果:正常空白血清与模型空白血清对缺氧/复氧H9C2心肌细胞活力影响差异明显(P<0.05),正常动物SSNX含药血清与心肌缺血模型动物SSNX含药血清均有提高缺氧/复氧H9C2心肌细胞活力的作用,分别与正常动物空白血清及模型动物血清比较(P<0.05);各时间点正常含药血清与相应时间点模型含药血清相比更显著提高了H9C2心肌细胞活力。结论:2种方法制备的SSNX血清对体外缺氧/复氧H9C2心肌细胞活力的作用趋势一致,但强度有一定差异。     

有机阴离子转运肽oatp2b1在痰湿证大鼠组织中表达及意义

目的:通过观察痰湿状态下大鼠有机阴离子转运肽oatp2b1基因和蛋白表达来探讨oatp2b1在痰湿转运中的作用。方法:24只大鼠随机分为2组,正常组、模型组各12只。模型组采用高脂饮食造模3个月,每只大鼠取脾、肝、肾组织各1块。采用实时荧光定量PCR、Western Blot方法及免疫组化法检测组织中oatp2b1的基因表达、蛋白表达情况。结果:模型组肝、肾组织中oatp2b1 mRNA表达量高于正常组(P<0.01,P<0.05);而模型组脾组织中oatp2b1 mRNA表达量低于正常组(P<0.01)。两组oatp2b1蛋白在脾、肝、肾组织有不同程度表达,但差异无统计学意义。模型组中脾脏的巨噬细胞、肝脏的枯否氏细胞及肾小管上皮细胞均有oatp2b1蛋白分布,较正常组表达增强。结论:痰湿伤脾,脾失运化状态下,肝、肾在痰湿转运中发挥重要作用,oatp2b1可能是机体参与痰湿运化的物质基础之一。     

基于Notch信号通路探讨针刺曲池、足三里对MCAO大鼠的神经保护机制

目的:观察针刺曲池穴及足三里穴对MCAO大鼠的行为学干预效应,同时评价其对Notch信号通路标志性蛋白的影响。方法:将36只SD大鼠随机分成空白组、模型组及针刺组,各12只。模型组及针刺组大鼠均接受改良线栓法建立左侧大脑中动脉局灶性缺血(MCAO)再灌注模型,空白组大鼠仅进行血管分离术,术后空白组及模型组大鼠每日接受模拟捉拿1次,针刺组大鼠予针刺曲池穴及足三里穴,连续干预14 d,用神经行为学评分评估大鼠行动能力,TTC染色法观察脑梗死体积变化,HE染色法观察大鼠脑组织细胞形态和结构,Western blotting法检测各组大鼠脑组织Notch1、Hes1蛋白表达变化。结果:1)与模型组比较,针刺组大鼠神经行为学评分明显提高,并缩小了脑梗死体积;2)针刺可明显改善MCAO术大鼠脑组织细胞形态和结构;3)Western blot结果显示针刺可明显上调大鼠脑组织Notch1、Hes1的蛋白水平。结论:电针曲池穴及足三里穴可改善MCAO大鼠行为能力,其作用机制可能与介导Notch通路有关。     

安寐丹对不同周期睡眠剥夺模型大鼠昼夜节律、学习记忆及食欲素的影响

目的:观察安寐丹对3、6、9月龄睡眠剥夺(SD)模型大鼠昼夜节律、学习记忆及食欲素(OX)的影响并探讨其最佳显效周期及可能机制。方法:根据大鼠生长周期,分别选取3、6、9月龄SD大鼠,运用随机数字表分为空白组、模型组、艾司唑仑组(0.09mg·kg-1·d-1)、安寐丹组(9.09g·kg-1·d-1),除空白组外均采用对氯苯丙氨酸(PCPA)腹腔注射叠加多平台水环境剥夺法建立SD模型,空白组、模型组给予等容0.9%氯化钠溶液灌胃,灌胃1周。运用自主活动仪监测大鼠昼夜节律,Morris水迷宫检测其学习记忆,ELISA检测大鼠血清食欲素A(OXA)、食欲素B(OXB)含量,免疫荧光检测下丘脑区OX含量表达。结果:各月龄大鼠造模后昼夜节律紊乱,其活动时间和活动距离均高于空白组(P<0.05,P<0.01);大鼠造模后下丘脑区OX含量较空白组增多,尤以9月龄大鼠OX含量增多较为明显;安寐丹能一定程度改善SD大鼠上平台潜伏期、游泳总路程、穿越站台次数和象限活动时间(P<0.05,P<0.01),且各月龄改善效果有别,但9月龄大鼠安寐丹灌胃后上平台潜伏期、游泳总路程最短(P<0.01);安寐丹能一定程度降低各月龄SD大鼠OXA、OXB含量(P<0.05,P<0.01),但各月龄降低程度有别,且安寐丹组降低9月龄大鼠OX含量较艾司唑仑组明显。结论:安寐丹能改善不同周期SD模型大鼠的昼夜节律紊乱、学习记忆障碍,其机制可能与调节OXA、OXB有关,且初步认为安寐丹对9月龄SD模型大鼠作用效果最佳。     

Effects of electroacupuncture on urodynamics,intramedullary apoptosis and bidirectional regulation of neurotrophic factors in neurogenic bladder rats after supersacral spinal cord injury: 电针对骶上脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠尿流动力学及髓内凋亡,神经营养因子双向调控作用的影响

ObjectiveTo observe the effects of electroacupuncture on urodynamics and intramedullary apoptosis related factor B cell lymphoma gene-2 (Bcl-2), Bcl-2 related protein X (Bax) and brain-derived neurotrophic factor (BDNF) in neurogenic bladder rats after supersacral spinal cord injury.MethodsA total of 60 female SD rats, SPF grade, were randomly selected, 12 rats in the blank group and 12 rats in the sham operation group, and the remaining 36 rats were made models. Of these 36 rats, 24 rats meeting the model standard were randomized into the model group and electroacupuncture group, with 12 rats in each group. The neurogenic bladder models after supracacral spinal cord injury were prepared by the Hassan Shaker spinal cord transection method, via combining the previous model study experience. At the end of spinal shock stage, “Dàzhuī (大椎GV14)” “Zhōngjí (中极CV 3) ” “ Cìliáo (次髎BL 32) ”, and “Sānyīnjiāo (三阴交SP 6) ” were selected for electroacupuncture. Observation on the histomorphological changes of bladder detrusor and spinal cord in rats was conducted by HE staining. The apoptosis rate of spinal cord cells was measured by TUNEL assay. The maximum bladder volume and compliance were measured by urodynamics test. The protein expressions of Bcl-2, Bax, and BDNF in spinal cord tissues were measured by Western blot assay. The expressions of Bcl-2, Bax, and BDNF mRNA were measured by RT-PCR assay.Results① The results of HE staining showed that compared with the blank group and sham operation group, in the model group the bladder epithelial cell structure was destroyed, the detrusor muscle fibers proliferated, and there were severe bleeding changes, the spinal cord tissue was disordered, the structure was destroyed, the cell space was enlarged, and accompanied by a large number of inflammatory cell infiltration and cystic cavity formation. Compared with the model group, in the electroacupuncture group, the intact bladder epithelial cells increased, the detrusor muscle fiber proliferation decreased, the bleeding changes decreased, the complete structural area of spinal cord tissues increased, the cell space decreased, the levels were clearer, and the cystic cavity decreased. ② The results of TUNEL assay indicated that the TUNEL positive rate of spinal cord cells in the model group was significantly higher than that in the blank group and sham group (both P<0.05). Compared with the model group, the TUNEL positive rate of spinal cord cells in the electroacupuncture group was significantly reduced (P<0.05). ③ The results of urodynamics test suggested that compared with the blank group and sham operation group, the maximum bladder volume and compliance of the model group were significantly reduced (all P<0.05). Compared with the model group, the maximum bladder volume and compliance were significantly increased in the electroacupuncture group (both P<0.05). ④ The results of Western blot assay indicated that, compared with the blank group and sham operation group, in the model group the protein contents of Bcl-2 and BDNF were significantly reduced (all P<0.05), while the protein content of Bax in the model group was significantly increased (both P<0.05). ⑤ The results of RT-PCR assay indicated that, compared with blank group and sham operation group, in the model group the intramedullary Bcl-2 and BDNF mRNA were significantly reduced (all P<0.05), and Bax mRNA was significantly increased (both P<0.05).ConclusionElectroacupuncture at “GV14” “CV3” “BL32”, and “SP6” can promote the repair of bladder detrusor, improve the maximum bladder volume and compliance of bladder, promote morphological repair of bladder detrusor, reduce spinal cord cell apoptosis rate, thus to restore the function of bladder. This is maybe related with the electroacupuncture's two-way regulatory mechanism of increased expression of protein and gene of Bcl-2 and BDNF and decreased expression of protein and gene of Bax in spinal cord tissues.