中药复方“松友饮”增强IFN-α抑制肝癌的实验研究

目的:研究联用中药"松友饮"和干扰素α(IFN-α)对高转移人肝癌裸鼠原位模型肿瘤生长、转移和生存期的影响。方法:以人高转移MHCC97H细胞建立裸鼠原位移植瘤模型,48只成模裸鼠随机分成对照组、"松友饮"组、IFN-α组及"松友饮"+IFN-α组,肝脏接种肿瘤24h开始每天1次灌胃给药及皮下注射,连续5周。第35天每组随机处死6只裸鼠,计算肿瘤体积及转移情况;剩余成瘤裸鼠用于观察生存期。结果:"松友饮"组、IFN-α组及"松友饮"+IFN-α组肿瘤体积、肺转移结节数及生存期与对照组比较,均有显著差异(P<0.05)。结论:连续5周联用"松友饮"显著增强IFNα对HCC裸鼠模型肿瘤生长、转移的抑制作用并延长生存期,对HCC病人有潜在的应用价值。     

中药复方“松友饮”含药血清体外抑制高转移人肝癌MHCC97H细胞的实验研究

目的：研究中药复方＂松友饮＂含药血清对体外培养的人肝癌MHCC97H细胞增殖、侵袭潜能的影响。方法：以MHCC97H细胞构建裸鼠原位移植瘤模型,84只成模裸鼠随机平均分成对照组和＂松友饮＂组,肝脏接种肿瘤24 h内开始1次/天灌胃给药。在第1、4、7、14、21、28、35次灌胃结束后2h,每组分别处死6只裸鼠收集血样。应用含药血清体外干预MHCC97H细胞,检测细胞增殖、侵袭潜能变化。结果：＂松友饮＂灌胃给药1、4、7天的荷HCC裸鼠含药血清体外抑制HCC作用逐渐增强,给药7、14、21、28、35天的含药血清抑制作用无统计学差异。灌胃7天的＂松友饮＂含药血清抑制HCC增殖的作用与中剂量卡培他滨作用近似,抑瘤率分别为37.4%、41.1%。给药7天的含药血清抑制HCC侵袭潜能达到最强,＂松友饮＂组穿膜细胞数明显少于对照组,为26.0±3.6和37.3±2.8。结论：给药7天的含药血清达到稳态血药浓度,对MHCC97H细胞的体外抑制作用达到最强。     

优化中药复方“松友饮”的基础研究

目的:研究中药复方"松友饮"的体内药效物质基础并重新配伍设计,为其组方优化提供理论基础。方法:应用高转移人肝细胞癌细胞株MHCC97H构建裸鼠原位移植瘤模型,24只成模裸鼠随机平均分成对照组和"松友饮"组,肝脏接种肿瘤1 d开始1次/d灌胃给药("松友饮"3.6 g/kg,对照组予以等量蒸馏水)。灌胃5周,脱颈处死裸鼠收集血样,用于进一步分析"松友饮"体内药效物质基础,采用均匀设计的实验方法重新设计、配伍、优化"松友饮"。结果:裸鼠模型构建过程顺利,灌胃过程中实验组死亡1只裸鼠,有效获取含药血清。结合参考文献及通过比对发现连续给药5周,"松友饮"吸收入血的主峰来自组方药材成分:黄芪甲苷、槲皮素及隐丹参酮、丹参酮IIA(新组复方主要含4种单体,简称HHYD复方),重新配伍为3种新组方。结论:基于5周给药的含药血清药效物质基础新组方的组分更加明确,更易定量和质量控制。     

中药复方“松友饮”对高转移人肝癌裸鼠原位移植瘤的抑制作用

目的:研究中药松友饮对高转移人肝癌裸鼠原位移植肿瘤生长、转移和生存期的影响。方法:以肝癌细胞(MHCC97H)细胞建立裸鼠移植瘤模型,32只成模裸鼠随机分成对照组C0和松友饮剂量递增的C1、C2和C3组,肝脏接种肿瘤24h内开始1次/d灌胃给药,连续5周,每周测体质量。第35d处死裸鼠,计算肿瘤体积及转移情况。另选12只成瘤裸鼠分成对照组和松友饮组,选择上述结果中最合适的剂量,观察生存期。结果:C0、C1、C2和C3组肿瘤体积分别为(2072.73±801.23)mm3、(1779.48±969.59)mm3、(976.30±608.01)mm3和(959.99±376.47)mm3,C2、C3与C0相比差别有统计学意义;C2组抑瘤率52.90%,肺转移程度明显下降。按C2组剂量给药,裸鼠生存期(75.00±3.86)d,对照组(52.00±2.34)d(P<0.01)。结论:连续5周松友饮灌胃抑制HCC裸鼠模型肿瘤生长、转移,延长荷瘤裸鼠生存期,对HCC病人有潜在的应用价值。     

中药复方松友饮抑制姑息性肝切除术后残癌生长和转移的实验研究

目的:研究中药复方松友饮对姑息性肝切除裸鼠模型中残癌生长及转移的影响。方法:以人肝癌细胞(MHCC97H)建立裸鼠移植瘤姑息性肝切除模型,36只裸鼠随机分成对照组和松友饮组,每天1次灌胃给药连续5周,每周测体质量。给药结束后第2d每组处死6只裸鼠观察肿瘤大小、肺转移等;并检测残癌中白细胞介素-1β(IL-1β)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况。剩余裸鼠用于观察生存期。结果:松友饮组与对照组残癌体积为(724.9±337.6)mm3和(1205.2±581.3)mm3(P<0.05),抑瘤率为39.9%;肺转移分级下降(P<0.05)。前者体质量大于对照组(P<0.001),生存期延长率为22.7%;IL-1βmRNA表达水平显著下调(P<0.001),蛋白水平为(18.0±5.1)pg/mL和(27.9±4.5)pg/mL(P<0.01);PCNA指数为(75.2±8.5)%和(86.1±4.8)%(P<0.001)。结论:松友饮灌胃给药下调残癌表达IL-1β和PCNA,抑制残癌生长、转移,对肝癌病人有潜在的应用价值。     

熄风活络丹的抗血栓作用

熄风活络丹连续给大鼠灌胃7天或10天，显著地抑制胶原诱导的血小板聚集，延长颈总动脉血栓形成时间，呈剂量-效应关系。该药体内外给药可明显延长大鼠血浆复钙时间；但对出血时间和血浆纤维蛋白原含量无明显影响。该复方连续给小鼠灌胃4天，对急性脑缺血有保护作用。     

复方菝葜抑瘤作用的实验研究

目的：在S180荷瘤鼠上观察复方菝葜的抑癌机理。方法：将S180腹水瘤小鼠随机分为4小组，即正常对照组、模型对照组、治疗组和预防给药组，用复方菝葜灌胃给药，观察该方对S180荷瘤鼠体内外抑瘤作用、免疫功能、抗氧化方面的影响。结果：复方菝葜有较好的抑制体内外实验性肿瘤的作用。结论：复方菝葜可能是通过增强机体免疫力、提高SOD活力和清除自由基来抑制肿瘤生长并延长荷瘤鼠生存时间的。     

复方木鸡冲剂的抑瘤,保肝降酶作用的研究

复方木鸡冲剂２０ｇ／ｋｇ日连续灌胃给药７天，对小鼠肉瘤１８０（Ｓ１８０）有明显抑制作用，对小鼠肝癌也有一定的抑癌作用；１０ｇ／ｋｇ日连续灌胃给药７天，对Ｓ１８０小鼠的细胞免疫功能有增强作用；以１４ｇ／ｋｇ日提前７天灌胃给药对四氯化碳致急性肝损伤大鼠的谷丙转氨酶（ＳＧＰＴ）增高有明显降低作用。     

复方藤梨根制剂对胃癌细胞乙酰肝素酶、基质金属蛋白酶-9mRNA表达的影响

目的:探讨复方藤梨根制剂抑制胃癌转移机制。方法:建立裸鼠胃癌腹腔移植瘤模型24只,随机分成生理盐水组、复方藤梨根制剂低剂量、中剂量和高剂量组;18天后,给予复方藤梨根制剂灌胃21天。随后观察裸鼠生存天数和死亡后肿瘤转移浸润情况;用RT-PCR方法检测各组肿瘤组织中HPA、MMP-9 mRNA的表达。结果:对照组与低剂量治疗组转移部位的赋值评分显著高于中、高剂量组;对照组胃癌细胞的HPA mRNA表达高于中、高剂量组(P<0.05);对照组胃癌细胞的MMP-9 mRNA表达明显高于各给药组(P<0.05)。结论复方藤梨根制剂可能通过下调HPA、MMP-9基因的表达而抑制胃癌转移并延长生存时间。     

扶脾化瘤饮对人胃癌裸鼠移植瘤生长及TNF、NK活性的影响

目的:观察中药复方扶脾化瘤饮对荷人胃癌SGC-7901裸鼠移植瘤生长及对荷瘤裸鼠TNF、NK活性的影响。方法:建立人胃癌SGC-7901细胞BALB/C裸小鼠皮下移植瘤模型,随机分为5组,每组8只。荷瘤对照组予纯净水灌胃,扶脾化瘤饮大、中、小剂量组予扶脾化瘤饮煎剂灌胃,20ml/kg,1次/d;阳性对照组予环磷酰胺灌胃,20mg/kg,1次/d。观察各组裸鼠移植瘤生长情况,采用L929细胞杀伤实验检测TNF活性及NK细胞活性。结果:扶脾化瘤饮大、中剂量对荷人胃癌SGC-7901裸鼠具有显著的抑瘤作用,抑瘤率为44.46%、35.79%(P0.01,P0.05),同时能显著促进产生TNF,细胞毒指数分别为55.53%、52.52%(P0.01);扶脾化瘤饮大剂量对脾脏NK细胞活性也有提高作用,细胞杀伤率为30.59%(P0.05)。结论:扶脾化瘤饮可以抑制人胃癌SGC-7901的生长,且能拮抗荷瘤所致的免疫功能的抑制。     

中药复方“松友饮”及其组方药材提取物高效液相指纹图谱研究

目的：分析中药复方＂松友饮＂及组方药材提取物指纹图谱用于质量控制。方法：采用高效液相色谱法（high-performance liquid chromatography,HPLC）研究中药指纹图谱。包括低压四元泵,自动进样器和二极管阵列检测器（DAD）,Agilent Zorbax RX-C8色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,柱温25℃,流动相为水-乙腈,进行梯度洗脱（流速,0.5 mL/min;洗脱时间,60 min;检测波长,280nm）。结果：成功构建＂松友饮＂及组方提取物高效液相指纹图谱,色谱保留时间稳定,各主要色谱峰偏移小于0.1 min。通过比对发现＂松友饮＂HPLC色谱峰来自组方药材成分。重复HPLC色谱相似度（90%,精密度、稳定性、重复性实验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积RSD（3%。结论：HPLC方法可靠、可行,指纹图谱重复性良好,为＂松友饮＂质控提供参考。     

中药复方“松友饮”诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的：研究中药复方“松友饮”对人肝癌细胞凋亡的影响及可能的分子机制,为临床应用提供理论依据。方法：采用流式细胞术、Caspase-3活性实验及RealTimePCR技术,观察2、4、8、10、20、30及40me,／mL“松友饮”（c1、c2、c3、c4、c5、c6及c7组）对体外培养的人肝癌细胞MHCC97H凋亡的影响,并探索可能的分子机制。结果：流式细胞仪检测结果显示,同对照组相比,干预组细胞凋亡率呈时间依赖性增加,“松友饮”（c4,10mg／mL）干预72h后MHCC97H细胞凋亡率增加超过3倍。干预48h后Caspase-3显著激活,Caspase-3活化呈时间依赖性。“松友饮”浓度增加,转移抑制基因1（Metastasissuppressor1,MTSS1）抑制效果越明显,“松友饮”（c4,10mg／mL）干预48h,MTSS1基因表达抑制率为39．0％。结论：“松友饮”诱导肝癌细胞凋亡可能与MTSS1基因表达抑制、Casoase-3活化相关。     

复方丹参饮对胰岛素抵抗大鼠血管内皮细胞ICAM-1、VCAM-1表达的研究

目的:探讨复方丹参饮对胰岛素抵抗(IR)大鼠血清中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达。方法:将60只Wistar雄性大鼠适应性的喂养1周,随机分为生理盐水组、胰岛素抵抗组、复方丹参饮预防组(中药预防组)复方丹参饮治疗组(中药治疗组)、罗格列酮组(西药对照组),每组分为12只。采用高脂高糖高胆固醇饮食喂养,建立大鼠IR模型。喂养16周以后采用酶联免疫法检测各组Wistar大鼠血清中ICAM-1、VCAM-1的含量。结果:与生理盐水组比较,除复方丹参饮预防组差异无统计学意义外(P>0.05),其余各组大鼠血清中ICAM-1、VCAM-1的含量均升高(P<0.05),有统计学意义;与胰岛素抵抗组相比较,西药对照组、中药治疗组与中药预防组均能减少大鼠血清中ICAM-1、VCAM-1的含量(P<0.05)。结论:认为复方丹参饮具有抑制大鼠血清血管内皮细胞ICAM-1、VCAM-1的过度表达作用,对胰岛素抵抗大鼠的血管内皮细胞具有保护功效。     

Effect of a derived herbal recipe from an ancient Chinese formula,Danggui Buxue Tang,on ovariectomized rats

Ethnopharmacological relevance: Radix Astragali (root of Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge.) Hsiao, RA), Radix Angelicae sinensis (root of Angelica sinensis (Oliv.) Diels, RAS) and Folium Epimedii (leaves of Epimedium brevicomum Maxim., FE) are three of the extensively applied herbal remedies among traditional Chinese medicines for gynecological disorders and osteoporosis. A derivative herbal recipe—RRF, composed of the three medicines with a weight ratio of 5:1:5, is derived from a famous Chinese herbal formula—Danggui Buxue Tang (DBT). RRF has shown noteworthy protective effect in ovariectomized rats, which might represent a promising candidate for the treatment of perimenopausal disorders. The aim of this study was to investigate the herbal recipe RRF for its efficacy on perimenopausal disorders and the underlying mechanisms via ovariectomy (OVX) models.     

龙胆泻肝汤合温胆汤加减治疗胃食管反流病胆热犯胃证40例临床观察

目的：观察龙胆泻肝汤合温胆汤加减治疗胃食管反流病胆热犯胃证的临床疗效。方法：将80例胃食管反流病胆热犯胃证患者随机分为中药组和西药组各40例,分别予龙胆泻肝汤合温胆汤加减和奥美拉唑加达喜治疗,疗程8周,观察2组的临床疗效和内镜疗效。结果：中药组与西药组均能有效改善患者I临床症状,中药组改善口苦咽干、烧心、咽部不适及便干4项症状明显优于西药组（P〈0．01）。中药组在改善食管黏膜炎症方面与西药组作用相当（P〉0．05）;在改善内镜下胃内胆汁反流方面优于西药组（P〈0．05）。结论：龙胆泻肝汤合温胆汤加减治疗胃食管反流病胆热犯胃证具有良好的临床疗效。     

不同功效古典方剂对肝硬化大鼠肝组织氧化应激反应的影响

目的 比较5首不同功效古典方剂逆转二甲基亚硝胺（DMN）诱导的大鼠肝硬化的抗肝组织氧化应激效应。方法 4周内给大鼠腹腔注射DMN 12次制备肝硬化模型,成模后停止染毒,随机分为模型对照组、一贯煎组、黄芪汤组、茵陈蒿汤组、下瘀血汤组及小柴胡汤组,分别以生理盐水或相应药物灌胃给药2周;检测各组大鼠肝组织总超氧化物歧化酶（T SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH Px）、谷胱甘肽 S转移酶（GST）活性及丙二醛（MDA）含量及血清肝功能、肝组织羟脯氨酸（Hyp）含量的变化。结果 与正常组比较,模型大鼠肝组织GST活性及MDA含量显著升高,分别于造模2周末（肝纤维化形成期）、4周末（肝硬化形成）达到高峰,而T-SOD及GSH-Px活性显著降低;与6周模型组比较,黄芪汤组和茵陈蒿汤组大鼠肝硬化明显减轻,肝组织MDA含量及GST活性显著下降,T-SOD活性显著升高。结论 氧化应激是DMN诱导大鼠肝硬化形成的重要病理环节,抗氧化应激效应是茵陈蒿汤和黄芪汤逆转大鼠肝硬化的主要机制之一。茵陈蒿汤的祛邪作用重在清除脂质过氧化物等病理因子,黄芪汤的扶正效应重在提高机体内在的抗氧化能力。     

益气养阴活血方治疗2型糖尿病性视网膜病变临床疗效观察

目的:观察益气养阴活血方药治疗糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的临床疗效,并分析DR中医证候与眼底变化的相关性。方法:益气养阴活血方(太子参、生黄芪、山萸肉、生葛根、丹参、枳壳等)治疗气阴二虚血瘀型DR患者48例3个月(怡开为对照组),观察中医证候、视力和眼底的疗效变化,分析中医证候与眼底疗效的相关性。结果:治疗组眼底五项综合积分及点状出血、片状出血分项积分的好转明显优于对照组(P0·05,P0·01),治疗后视力均有好转,但与对照组无差异;治疗组中医证候的改善优于对照组(P=0·0504);治疗组中医证候积分治疗前后的变化与眼底好转程度之间具有一定的相关性(r=0·4174,P=0·0424),与眼底出血斑(r=0·4472,P=0·0324)和出血点(r=0·4944,P=0·0165)好转变化之间的相关性更强。结论:益气养阴活血方具有改善DR患者视力、眼底病变及中医证候的显著疗效,方药的干预作用同时表现为中医证候好转与眼底病变改善的相关性互动关系。     

知母中总黄酮和多糖的微波提取与含量测定

目的：从知母中提取总黄酮和多糖，并测定其含量。方法：运用微波技术提取知母总黄酮和多糖，用比色法测定总黄酮和多糖含量。结果：测得知母中总黄酮含量为3．685％，平均回收率为100．3％，相对标准偏差(RSD)为1．04％(n=5)；多糖含量为20.28％，平均回收率为101.54％，相对标准偏差(RSD)为0．46％(n=5)。结论：运用微波技术从知母中联合提取总黄酮和多糖，反应速度加快，提高了提取效率。