SRT1720对高糖诱导的小鼠系膜细胞凋亡的影响

目的观察Sirt1激活剂SRT1720对高糖诱导的小鼠肾小球系膜细胞凋亡的作用。方法体外培养小鼠肾小球系膜细胞,随机分为正常糖组、正常糖+甘露醇组、高糖组及高糖+SRT1720组。采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)及流式细胞术检测细胞凋亡;流式细胞术检测活性氧簇(ROS)产生;Western blot检测caspase-3、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、p38 MAPK、p-p38 MAPK、Sirt1、p53、乙酰化p53及细胞色素C的表达;实时定量PCR检测Bax和Bcl-2 mRNA的表达。结果与正常糖对照组相比,高糖组系膜细胞ROS产生和细胞凋亡明显增加,cleaved caspase-3、p-p38 MAPK和乙酰化p53表达增高、Bax/Bcl-2比率明显升高、Sirt1表达下降以及细胞色素C易位。SRT1720干预能够明显抑制高糖诱导的系膜细胞凋亡和ROS产生;下调cleaved caspase-3、乙酰化p53和p-p38 MAPK的表达;上调Sirt1的表达;减少Bax/Bcl-2比率和细胞色素C易位。结论SRT1720能够抑制高糖诱导的系膜细胞凋亡,可能是通过减少ROS产生、保护线粒体功能、抑制p53乙酰化以及p38MAPK信号通路激活而实现的。     

凋亡抑制因子生存素的研究进展

生存素(survivin)是新近发现的一个IAP家族的独特成员，表达于胚胎组织和多种癌组织，但不见于正常组织。能抑制各种因子诱导的细胞凋亡，并参与血管生成，作为一种普遍表达的肿瘤特异性凋亡抑制因子，生存素可能是肿瘤靶基因蛋白治疗的理想靶点。     

p53iF向凋亡调控因子（PUMA）在吉西他滨诱导胰腺癌细胞凋亡过程中的作用

目的研究吉西他滨体外对人胰腺癌AsPC－1细胞生长的作用机制。方法用脂质体转染法将PUMA反义核酸（反义PUMAeDNA）的真核表达载体pcDNA3．1-PUMAAS和空载体pcDNA3．1－导入AsPC－1细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆。将转染载体的AsPC—1阳性克隆细胞和未转染载体的AsPC－1细胞分别暴露于浓度1、5、10和15mol／L的吉西他滨中作用72h。RT-PCR和Western blotting检测不同组细胞经吉西他滨作用72h后的PUMA表达;MTT检测细胞生长抑制,流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡,Hoechst33258荧光染色法和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）法检测细胞的凋亡。结果吉西他滨促进AsPC－1细胞凋亡,抑制细胞生长,并有明显的剂量依赖性,在细胞凋亡的同时伴有PUMA表达的上讽当细胞转染PUMA反义核酸抑制PUMA表述后,受吉西他滨作用的细胞出现PUMA蛋白表达明显降低,同时伴有细胞凋亡的抑制及细胞的明显增殖。结论吉西他滨促进体外AsPC—1细胞凋亡,并抑制其生长,其诱导凋亡与上调PUMA有关。     

P糖蛋白与细胞凋亡及肿瘤多药耐药的关系

综述P糖蛋白与细胞凋亡及肿瘤多药耐药的内在联系及其可能机制。许多抗肿瘤药物可通过诱导细胞凋亡，杀伤肿瘤细胞，而细胞膜上P糖蛋白具有多重生理功能，可通过其药物外排功能和直接或间接参与细胞凋亡的调控，导致多药耐药性的产生。     

P53促凋亡蛋白家族和p53的相互作用与细胞凋亡的研究进展

肿瘤的形成是原癌基因和抑癌基因遗传性变化如增加、丢失、突变，逐步积累的过程。同时，肿瘤又是遗传因素和后天因素共同作用的多因子疾病。p53是一个肿瘤抑制蛋白，它首先可通过影响编码细胞周期相关蛋白质的基因表达来调控细胞周期的G1停滞．同时它还会因为DNA的损伤增多．诱导细胞发生细胞凋亡。但p53诱导细胞凋亡的机制多年来一直不太清楚．而最近发现的ASPP(apoptosis stimulating protein of p53)蛋白家族对p53诱导细胞凋亡的机制的研究有了新的进展。本文就此作一综述。     

细胞凋亡基因调控机制研究进展

近年来，某些基因在细胞凋亡发生发展过程中的作用得到普遍重视。它们既具有单一的调节作用，又具有复杂的协同效应。研究这些基因在细胞凋亡中的调控机制，对利用基因治疗技术治疗恶性肿瘤和退变性疾病具有重要意义。本论述了调控细胞凋亡的基因及其在细胞凋亡中的作用机制。     

透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞p53和PUMA蛋白表达的影响

目的观察透骨草提取物对人肝癌SMMC-7721细胞形态和p53和p53上调凋亡调控因子(PUMA)蛋白表达的影响,探讨透骨草提取物诱导SMMC-7721细胞凋亡的分子机制。方法用倒置显微镜观察透骨草提取物对SMMC-7721细胞形态的影响;采用免疫组化方法检测透骨草提取物对SMMC-7721细胞p53和PUMA蛋白表达的影响。结果倒置显微镜观察可见,40.91μg/mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞体积减小,形态轮廓不清晰,细胞皱缩变形,细胞脱壁增加。免疫组化检测结果显示,40.91μg/mL透骨草提取物处理的SMMC-7721细胞p53蛋白和PUMA蛋白表达均明显高于与对照组(P<0.01)。结论透骨草提取物可能通过上调p53和PUMA蛋白表达,诱导SMMC-7721细胞凋亡。     

年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中P53及SIRT1的表达及临床意义

目的:分析年龄相关性白内障晶状体上皮细胞P53和沉默信息调节因子(SIRT1)的表达情况及临床意义。方法:选取某院行年龄相关性白内障(ARC)手术治疗的20例患者(20眼)为实验组,20例(20眼)相同年龄段晶状体透明需行晶状体摘除联合玻璃体切割手术的新发孔源性视网膜脱离患者为对照组。采集患者晶状体前囊膜标本,检测并比较2组患者晶状体上皮细胞内P53、SIRT1、氧化应激指标[谷胱氨酸过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱氨酸(GSH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]的表达水平,采用Logistic回归分析影响ARC发生的危险因素。结果:实验组患者P53、SIRT1检测结果分别为(115.05±22.16)、(0.99±0.12),高于对照组的(52.60±11.98)、(0.41±0.05),2组比较差异均有统计学意义(P <0.05);实验组患者GSH-Px、GSH、MDA、SOD检测结果分别为(0.76±0.09)μmol/g、(0.62±0.04)μmol/L、(18.80±2.15)μmol/mg、(120.69±12.25) U/mg,高于对照组的(0.30±...     

细胞凋亡相关基因与肿瘤多药耐药的关系

肿瘤多药耐药(Multi-drug resistance, MDR)系一种药物作用于肿瘤使之产生耐药性后,该肿瘤对未曾接触过、与结构无关、机制各异的多种抗肿瘤药也具有交叉耐药性的现象.细胞凋亡(Apoptosis)是化疗药物杀伤肿瘤细胞的共同通路,其受细胞凋亡相关基因调控.越来越多的研究表明,药物诱导肿瘤细胞发生凋亡依赖于完整且正常的凋亡途径,如肿瘤细胞的凋亡途径出现缺陷或抗凋亡机制增强,则可表现为对药物的耐药性.为此,本文就细胞凋亡相关基因及其蛋白与细胞凋亡及 MDR的关系作一简要综述.     

凋亡诱导因子的研究进展

在细胞正常生理状态下,凋亡诱导因子定位在线粒体内膜上,与呼吸链复合体Ⅰ互相作用,催化电子从泛醌到细胞色素C的传递。当细胞受到凋亡信号刺激后,凋亡诱导因子变成可溶性蛋白,从线粒体释放到细胞浆中,再通过其核定位信号序列进入细胞核内,和其他因子一起作用于染色体,使染色体凝聚和DNA呈大片段断裂(约50kb),最终诱导细胞凋亡。凋亡诱导因子受p53、Bcl-2家族、Hsp70等多种因子的调节。     

微丝骨架调控因子与线粒体凋亡通路相关因子关联性研究进展

目的细胞凋亡是在生理或病理状况下细胞发生自主死亡的方式。它起着维持细胞生长增殖、内环境稳定和免疫调节的作用。凋亡的启动过程涉及一系列生化反应,由多种分子调控,其中关键分子的异常表达与肿瘤发生有密切的关系。研究发现微丝骨架与细胞凋亡相关,微丝、微管的解聚以及中间丝的破坏都会导致细胞发生凋亡。当细胞发生凋亡时,骨架内结构出现解聚,凋亡微管网及凋亡小体出现,影响肿瘤细胞的侵袭及迁移。线粒体途径是细胞凋亡的重要途径,受多个信号通路影响。为了探究微丝骨架调控因子与线粒体凋亡信号通路相关因子的关联性,现对二者的关系进行综述。包括:RhoA/ROCK、MAPK信号通路、AKT信号通路、FAK/mTOR通路。     

细胞凋亡的研究进展

细胞凋亡(apoptosis)是一种基因调控的细胞生理性主动死亡过程，现就细胞调亡研究的发展、特征、检测手段及生物学意义等方面的研究现状作一综述。     

白藜芦醇对上皮细胞氧化应激保护作用的研究进展

上皮细胞是位于皮肤及腔道表层的细胞,在屏障、分泌、吸收等方面发挥重要功能。氧化应激是指体内氧化与抗氧化作用倾向于氧化的一种失衡状态,是自由基在体内产生的一种负面影响,被认为是导致疾病、衰老及细胞损伤的重要因素。RES是一种存在于多种植物中的天然多酚化合物,具有广泛的生物学特性,近年来,其抗氧化应激作用广受关注。本文就RES对上皮细胞氧化应激的保护作用及机制做一综述。     

Apelin-13对高糖诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的保护作用北大核心CSCD

目的探讨Apelin-13对高糖环境下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护机制是否与沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)相关。方法实验分组分为4部分。实验Ⅰ,将HUVECs分为6组,分别为空白组(5.5 mmol·L^(-1)糖)、模型组(33 mmol·L^(-1)高糖)、各实验组(分别用1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7)和1×10^(-6)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)。实验Ⅱ,将HUVECs分为4组,分别为空白组(5.5 mmol·L^(-1)糖)、模型组(33 mmol·L^(-1)高糖)、对照组(1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin)、实验组(用1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)糖)。实验Ⅲ,将HUVECs分为2组,分别为空载质粒组(1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)和APJ低表达组(1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)。以上3个实验均用Western blot法检测高糖环境下SIRT1蛋白的表达水平。实验Ⅳ,将HUVECs分为5组,分别为空白组(5.5 mmol·L^(-1))、模型组(33 mmol·L^(-1)高糖)、实验组(用1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)、抑制剂组(33 mmol·L^(-1)高糖+1×10^(-5)mol·L^(-1)EX527)、干预组(用1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖+1×10^(-5)mol·L^(-1)EX527)。用流式细胞术检测HUVECs的凋亡率。结果实验Ⅰ,空白组、模型组和1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7)和1×10^(-6)mol·L^(-1)Apelin实验组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.51±0.06,0.30±0.05,1.02±0.07,1.12±0.10,1.14±0.10和1.05±0.10,模型组的SIRT1蛋白相对表达量与4个实验组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验Ⅱ,空白组、模型组、对照组和实验组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.82±0.09,0.59±0.05,0.77±0.05和0.72±0.06;模型组的SIRT1蛋白相对表达量与实验组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验Ⅲ,空载质粒组和APJ低表达组的SIRT1蛋白表达水平分别为0.94±0.13和0.71±0.17,差异有统计学意义(P<0.05)。实验Ⅳ,空白组、模型组、实验组、抑制剂组和干预组的细胞凋亡率分别为(13.60±0.92)%,(24.63±1.25)%,(12.73±1.00)%,(25.68±1.42)%和(10.25±2.30)%。模型组的细胞凋亡率与空白组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);抑制剂组的细胞凋亡率与干预组相比,差异有统计学意义(P<0.05);干预组的细胞凋亡率与实验组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Apelin-13减轻高糖诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的机制与SIRT1信号通路无关。     

Aβ40诱导凋亡相关蛋白P53的表达及其意义

目的：研究将β淀粉样蛋白40（Aβ40）注射至大鼠海马探讨其诱导凋亡相关蛋白P53蛋白的表达及其与细胞凋亡的关系。方法：实验组将Aβ40立体定向注射至双侧大鼠海马的CA1、CA2-CA3区诱发其沉积、对照组立体定向注射等容量的生理盐水。通过P53单克隆抗体免疫组化法观察了凋亡相关蛋白P53的表达，并通过原位TDT末端标记（TUNEL）法观察了Aβ40的脑内致凋亡效应。结果：P53免疫组化显示，术后3天、7天的实验组大鼠切片上可见海马区明显的P53蛋白的表达，生理盐水对照组大鼠的相应切片检测未见P53蛋白的表达；术后3天、7天的TUNEL染色切片上可见海马区明显棕褐色阳性着染的凋亡细胞，生理盐水对照组的大鼠海马切片上未见明显棕褐色阳性着染的凋亡细胞。结论：TUNEL染色及P53蛋白免疫组化结果提示，Aβ40在脑内可诱导海马神经细胞发生凋亡，P53蛋白可能参与了上述神经细胞的凋亡机制。     

骨肉瘤中生存素表达及其与细胞凋亡的关系

目的探讨凋亡抑制蛋白生存素在骨肉瘤中的表达及其与细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化SP法检测52例骨肉瘤、15例骨软骨瘤及15例正常骨质标本的生存素蛋白表达,运用TUNEL方法检测细胞凋亡。结果生存素蛋白在骨肉瘤中的表达显著高于骨软骨瘤和正常骨质（P〈0.05）,在肿瘤的侵袭转移方面差别有显著性意义（P〈0.05）。AI（凋亡指数）在骨肉瘤中有无淋巴结转移、病理分型和组织学分级方面差别有显著性意义（P〈0.05）,有淋巴结转移比无淋巴结转移组明显降低（P=0.048）;纤维型和其他类型组较软骨母细胞型组明显降低（P=0.031）;骨肉瘤Ⅱ级和Ⅲ级组比Ⅰ级组明显降低（P〈0.05）。骨肉瘤中生存素蛋白表达和AI之间无明显相关。结论生存素通过抑制细胞凋亡,在骨肉瘤的发生和发展中起重要作用。测定生存素蛋白表达可作为预测预后的重要参考指标。     

血府逐瘀汤对心肌缺血大鼠外周血内皮祖细胞衰老的作用机制研究

目的 观察血府逐瘀汤对心肌缺血大鼠外周血内皮祖细胞(EPCs)衰老及抑癌基因p53、沉默信息调节因子(SIRT1)蛋白表达的影响.方法 结扎冠状动脉左前降支建立心肌缺血大鼠模型.按照体重将大鼠随机分为7组:正常组、假手术组、模型组、他汀组和低、中、高3个剂量实验组,每组8只.造模成功后第2天开始给药.他汀组腹腔注射阿托...     

沉默信息调节因子2相关酶与肺部疾病

沉默信息调节因子2相关酶(sirtuin1,Sirt1)是一种NAD+依赖性Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶(HDACⅢ),主要通过翻译后修饰调节肺部免疫炎症系统及老化进程,从而参与各种肺部疾病的发生发展。因此,Sirt1可能成为治疗肺部疾病的潜在靶点。本文主要针对Sirt1的生理特征、生物活性、修饰调节及其与慢性阻塞性肺气肿、哮喘和肺癌等肺部疾病关系做一综述。