紫菀酮对小鼠脊髓损伤后神经元凋亡的影响

目的 探讨紫菀酮(SHI)对脊髓损伤(SCI)小鼠运动功能的影响及可能的分子机制。方法 采用C57BL/6小鼠构建SCI模型,分为模型组(SCI组)和SHI药物治疗组(SCI+SHI组),假手术小鼠为对照组。采用Basso小鼠量表(BMS)评分评估SCI小鼠运动功能恢复情况,采用HE染色和Nissl染色观察SCI小鼠脊髓组织纤维化和神经元的形态学变化,采用免疫荧光染色分析脊髓组织中神经元凋亡情况。体外培养小鼠海马神经元HT22细胞,分为肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导组和SHI药物治疗组,采用Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白的表达。利用网络药理学、基因本体和京都基因与基因组百科全书富集分析预测SHI促进SCI功能恢复的可能分子靶点和信号通路,并通过体内外实验对其分子机制进行验证。结果 与SCI组比较,SCI+SHI组小鼠BMS评分在第21、28、35、42天显著升高(P=0.003、P=0.004、P=0.023、P=0.007),脊髓组织纤维化面积显著降低(P=0.021),神经元存活数量显著增加(P=0.001),活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-Ca...     

EGCG对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及作用机制探讨

目的 观察没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury, IRI)的保护作用,并探讨其作用机制。方法 建立大鼠急性心肌缺血再灌注（I/R）模型,将大鼠分为假手术组(SO组)、I/R组和EGCG组。EGCG 组（10 mg/kg）在再灌注开始前5 min予以静脉滴注。采用心电图记录仪观察I/R过程中室性心律失常发生频次并评分,检测大鼠血清中心肌酶学〔乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸激酶（CK）〕水平,心肌组织中炎症因子〔肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6和白介素-8（IL-6和IL-8）〕的表达,心肌组织HE染色进行病理学观察,Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶 (phosphatidyl inositol 3-kinase, PI3K ) / 蛋白激酶B (Akt)通路蛋白中磷酸化的PI3K调节亚基(p-p85)和Akt蛋白（p-Akt)表达水平。结果 I/R组大鼠各类室性心律失常的频次增加明显,其心律失常严重程度评分(P<0.01)、血清中LDH与CK表达水平、心肌组织中TNF-α、IL-6和IL-8的表达水平均高于SO组 (P<0.05);EGCG组心律失常严重程度评分、LDH与CK的表达水平、心肌组织中TNF-α、IL-6和IL-8的表达水平均低于I/R组(P<0.05),并且EGCG组大鼠心肌病理学损伤程度轻于I/R组,EGCG组大鼠心肌中p-p85与p-Akt表达水平高于I/R组(P<0.05)。结论 EGCG能通过激活PI3K/Akt信号通路抑制炎症反应水平,有效减轻IRI。     

PI3K/Akt信号通路在肾缺血再灌注损伤中的研究进展

肾缺血再灌注损伤(RIRI)多继发于肾脏手术、器官移植、严重创伤和休克等,是急性肾损伤高病死率的主要原因,目前尚无特效治疗方法.磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路是调节细胞生长、增殖、代谢和迁移的重要通路,可调节下游的多种信号分子,并通过调节自噬、抑制凋亡、减轻氧化应激、调节内皮功能损伤等在R...     

脑红蛋白在脑梗死大鼠脑组织中的表达及其神经保护作用机制

目的：观察脑梗死大鼠脑组织中脑红蛋白（Ngb）的表达及其对PI3K/Akt 信号通路的影响,探讨二者在缺血性脑损伤中的作用及Ngb神经保护作用的可能机制。方法：60只SD大鼠随机分为假手术组、缺血组、Hemin（Ngb 诱导剂）组、LY（PI3-K/Akt抑制剂LY294002）组和Hemin＋LY组,每组12只。应用大脑中动脉线栓法制备脑梗死动物模型,术后24 h观察各组大鼠神经功能评分和脑组织梗死体积;应用RT-PCR法检测各组大鼠脑组织Ngb mRNA表达水平及PI3-K/Akt活性。结果：假手术组未见TTC不着色区,未检出神经功能缺损。与缺血组比较,Hemin组大鼠脑组织中Ngb和Akt mRNA表达水平升高（P<0.01）,神经功能评分降低（P<0.05）,脑梗死体积减小（P<0.01）;与缺血组比较,LY组大鼠脑梗死体积增加（P<0.01）,神经功能评分升高（P<0.05）,Akt mRNA表达水平降低（P<0.01）,Ngb无明显变化。与Hemin组比较,Hemin＋LY组大鼠脑组织损伤加重,Akt mRNA表达水平明显降低（P<0.01）,Ngb未被抑制。结论：Ngb可以减小局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积,改善神经功能,并且可能通过PI3K/ Akt信号通路发挥神经保护作用。     

榆栀止血颗粒调控PI3K-Akt通路对子宫出血大鼠的保护作用

【摘要】 目的 探讨榆栀止血颗粒(YZZXKL)对子宫出血大鼠磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路的调控及对子宫的保护作用。 方法 将SD雌性孕鼠灌胃给予米非司酮(13.8 mg/kg)和米索前列醇片(135 μg/kg)复制大鼠子宫出血模型,随机分为模型组（Model组）、YZZXKL低（4 g/kg）、高（16 g/kg）剂量组、PI3K/Akt通路抑制剂LY294002组(LY组,0.3 mg/kg)、YZZXKL+LY组（16 g/kg+0.3 mg/kg）,各组10只。另取10只灌胃给予等量生理盐水为正常对照组（Normal组）。造模成功后,Normal组和Model组灌胃和腹腔注射给予生理盐水10 mL/kg,各药物处理组分别灌胃给予相应剂量YZZXKL或腹腔注射给予LY,1次/d,共7 d。给药期间于大鼠阴道置入棉球检测子宫出血量（UBQ）;末次给药24 h后,处死大鼠,取血清和子宫组织,酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清雌二醇（E2）、孕酮（P）;半自动凝血分析仪检测凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)含量;苏木精-伊红试剂（HE）染色观察子宫组织形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测子宫组织PI3K、p-Akt、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶（MMP-1）蛋白相对表达水平。 结果 与Normal组相比,Model组和YZZXKL+LY组大鼠子宫组织可见间质纤维化及炎性细胞浸润等病理损伤,血清E2、P、FIB含量、子宫组织PI3K、p-Akt、eNOS、VEGF蛋白表达水平均降低 (P＜0.05),UBQ、凝血指标TT、PT及APTT、MMP-2蛋白表达均升高 (P＜0.05)。与Model组和YZZXKL+LY组相比,YZZXKL低、高剂量组大鼠子宫组织病理损伤减轻,E2、P、FIB、PI3K、p-Akt、eNOS、VEGF蛋白表达水平均升高 (P＜0.05),UBQ、TT、PT、APTT、MMP-2蛋白表达均降低 (P＜0.05),且YZZXKL各剂量组上述指标呈剂量依赖性;而LY组大鼠子宫组织病理损伤加重,E2、P、FIB、PI3K、p-Akt、eNOS、VEGF水平均降低 (P＜0.05),UBQ、TT、PT、APTT、MMP-2水平均升高 (P＜0.05)。Model组和YZZXKL+LY组相比,上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论 YZZXKL可提高子宫异常出血大鼠凝血功能和激素水平,改善出血情况,其作用机制可能通过激活PI3K/Akt/eNOS通路,促进血管生成实现。     

磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B信号通路在胃癌及癌旁组织中的表达及与其病理特征的关系

目的分析磷脂酰肌醇3-激酶蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在胃癌及癌旁组织中的表达及与其病理特征的关系。方法选取2018年2月至2019年4月商丘市第一人民医院收治的54例胃癌患者,检测磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达水平,对比p-PI3K、p-Akt在胃癌及癌旁组织中的表达情况和不同病理特征胃癌组织中的阳性表达率。结果 p-PI3K胃癌组织阳性表达率[81.48%(44/54)]高于癌旁组织[22.22%(12/54)](P<0.05)。p-Akt胃癌组织阳性表达率[75.93%(41/54)]高于癌旁组织[20.37%(11/54)](P<0.05)。低分化、有淋巴结转移的胃癌组织p-PI3K阳性表达率高于中高分化、无淋巴结转移的胃癌组织(均P<0.05);低分化、有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期的胃癌组织p-PI3K阳性表达率高于中高分化、无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期的胃癌组织(均P<0.05)。结论 p-PI3K、p-Akt胃癌组织阳性表达率高,p-PI3K、p-Akt表达情况与分化程度、疾病分期、淋巴结转移密切相关,PI3K/Akt信号通路可能为临床药物治疗提供新靶点。     

人参皂苷Rg3对邻苯二甲酸二丁酯致小鼠生殖功能损伤的改善作用及其机制

探讨人参皂苷Rg3对邻苯二甲酸二丁酯（DBP）诱导的雄性生殖功能损伤小鼠的生精保护作用,并阐明其作用机制。     

脑缺血后脑红蛋白的保护作用及信号转导机制

目的 观察脑红蛋白(Ngb)的神经保护作用并探讨其与磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3-K/Akt)信号通路的关系.方法 健康雄性SD大鼠随机分为5组(n=12):①假手术组,②缺血组,③Hemin组,④LY(LY294002)组,⑤Hemin+ LY组,应用大脑中动脉线栓法(MCAO)制作大鼠局灶性脑缺血模型,评定大鼠神经功能并计算脑梗死体积,Western blot方法检测Ngb蛋白表达和PI3-K/Akt活性变化.结果 脑缺血后Ngb蛋白表达增加,Hemin可诱导Ngb高表达,磷酸化Akt (pAkt)水平亦同时升高,脑梗死体积减小,神经功能改善;LY294002特异性阻断了PI3-K/Akt信号通路的活化,加重了脑损伤,不能抑制Ngb表达.结论 细胞存活信号通路PI3-K/Akt可能介导了脑缺血后Ngb的神经保护作用.     

内质网应激与PI3K/Akt和ERK1/2通路在大鼠宫腔粘连治疗中的作用

目的 探讨内质网应激与PI₃K/Akt和ERK1/2信号通路在宫腔粘连治疗中的作用机制。方法 将18只SD雌鼠随机分为对照组(不做任何处理)、模型组(机械损伤法构建大鼠宫腔粘连模型)及治疗组(造模后当天开始皮下注射17β-雌二醇10μg,连续7天)。通过HE及Masson染色观察大鼠子宫病理形态,免疫组化法检测CD31的表达。采用Western blot法测定子宫内质网应激凋亡相关蛋白及Akt/p-Akt和ERK/p-ERK蛋白的表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠子宫内膜腺体数量减少,纤维化面积明显增加,CD31的表达明显降低(P＜0.01);模型组大鼠子宫组织中GRP78和CHOP蛋白表达显著升高,而Akt、p-Akt和ERK、p-ERK蛋白表达显著降低,差异均有统计学意义(P均＜0.01)。与模型组比较,治疗组大鼠子宫内膜腺体数量增加,纤维化面积降低,CD31的表达明显增加(P＜0.05);治疗组大鼠子宫组织中GRP78和CHOP蛋白含量显著减少(P＜0.05),Akt、p-Akt和ERK、p-ERK蛋白表达有所增加(P＜0.05)。结论 17β-雌二醇可改善子宫内膜的纤维化,促进子宫内膜血管增生,其作用机制可能与内质网应激及PI₃K/Akt和ERK1/2信号通路相关。     

PI3K/AKT信号通路调控心肌细胞凋亡的研究进展

凋亡作为一种发生在生物体内程序性死亡的过程,受多种基因的调控,对生物的正常发育和组织细胞稳态至关重要。凋亡参与了多种心血管疾病的病理过程,并且是缺血性心功能障碍的主要原因之一。磷酸肌醇3激酶(PI3K)是一种脂质激酶,在细胞存活、心电生理和能量代谢等方面发挥着重要作用,是治疗和预防心脏疾病相关损伤的重要靶点。PI3K可产生磷脂酰肌醇-3,4,5-磷酸膜磷脂(PIP3),进而激活3-磷酸肌醇依赖激酶-1(PDK-1)和AKT,发挥对心脏疾病中心肌损伤的调控作用。通过对PI3K/AKT信号通路的干预,可减轻心肌凋亡程度,表现出对心肌细胞的保护作用。文章对此通路及其与心肌细胞凋亡关系的研究进展作一综述。     

微RNA-126介导磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基2及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号与肿瘤关系的新进展

磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基2(PIK3R2)是磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的家庭成员之一,通过PI3K/蛋白激酶B(Akt)信号通路参与血管的形成、维护以及改造的调控,是组织器官正常发育、损伤以及肿瘤发生的一个重要的基因调控靶目标。不同类型的肿瘤,微RNA(miRNA)126介导的PIK3R2调控水平及趋势存在差异,可能与肿瘤的发生存在联系,是肿瘤研究中有前景的调控靶目标之一。     

再灌注损伤挽救激酶信号通路在心肌再灌注损伤保护中的研究进展

再灌注损伤挽救激酶(reperfusion injury salvage kinase, RISK)信号通路是指一组促存活蛋白激酶,主要包括磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol -3-OH kinase, PI3K)-蛋白激酶B(Akt)和细胞外信号调节蛋白激酶1/2(extra-cellular signal-regulated protein kinase 1/2, Erk1/2),心肌再灌注时被激活,有强大的心脏保护作用.机械干预(如缺血预适应和缺血后处理)和药物干预(如他汀,腺苷,心房钠尿肽等)均能激活RISK信号通路,使心肌梗死面积减少最多达50%.RISK信号通路是近年来研究较多的再灌注时干预的靶点,具有良好的应用前景.文中就RISK信号通路的定义、下游效应器以及作用于RISK信号通路的各种干预方法 做一综述.     

天麻素抗心肌氧化应激损伤的作用机制研究

 摘要：目的  探讨天麻素在大鼠心肌细胞氧化应激损伤时是否通过线粒体机制发挥心脏保护作用。方法  首先使用过氧化氢H2O2 650 μmol/L处理大鼠心脏组织来源的H9c2心肌细胞,复制氧化应激损伤模型。分别使用50.0、10.0、1.0和0.1 μmol/L天麻素预处理,利用共聚焦显微镜成像技术,检测线粒体膜电位的变化,四甲基偶氮唑盐比色法检测天麻素对细胞存活率的影响,Western blot检测天麻素对糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）、蛋白激酶-B（Akt）活性的影响。结果  不同浓度的天麻素预处理均能减弱H2O2引起的四甲基罗丹明乙酯荧光强度降低程度,且与模型组（0.30±0.25）比较,10.0 μmol/L天麻素预处理组（0.79±0.08）作用最为明显。天麻素（10.0μmol/L）预处理能提高H9c2细胞的存活率,使p-GSK-3β（Ser9）、p-Akt（Ser473）蛋白水平升高,而磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）抑制剂渥曼青霉素可以阻断其发挥作用。结论  天麻素能够减轻由H2O2引发的H9c2心肌细胞氧化应激损伤,其可能是通过PI3K/Akt途径使GSK-3β失活,抑制mPTP开放以发挥心脏保护作用。

     

PI3K/AKT/GSK-3β信号通路与心肌缺血/再灌注损伤的相关性研究

磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路在肿瘤细胞中被发现。随着分子医学的发展,研究发现,该通路通过调控下游的多种效应分子对器官的缺血/再灌注损伤起保护作用,其中糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)是主要效应分子,两者联合被称为PI3K/AKT/GSK-3β信号通路。该通路在心肌细胞缺血/缺氧培养、心肌暖缺血/再灌注损伤及离体心脏心肌缺血/再灌注损伤中的保护作用已经得到证实,但在心脏移植中对于心肌缺血冷保护及移植后的再灌注损伤的作用报道较少,需要进一步探讨。     

哮喘大鼠肺组织Akt蛋白表达上调对IL-4,IL-12和IL-13的影响

目的：研究Akt蛋白对支气管哮喘大鼠IL-4,IL-12和IL-13表达的影响。方法：雄性SD大鼠24只,随机分为3组：对照组（C组）、哮喘组（A组）、渥曼宁青霉素组（Wortmannin,W组）,每组8只。以卵白蛋白（OVA）致敏和激发建立大鼠哮喘模型。各组大鼠于末次激发后24h,放血处死。酶联免疫吸附试验（ELISA）测定BALF中IL-4,IL-13和IL-12的浓度;免疫组化法测定肺组织中p-Akt蛋白的表达;Western blot测定肺组织匀浆中p-Akt蛋白的含量。结果：A组p-Akt蛋白的表达明显高于C组,W组p-Akt蛋白的表达低于A组,但仍高于C组;BALF中IL-4,IL-13的含量A组明显高于C组,W组IL-4,IL-13的含量低于A组,但仍高于C组,BALF中IL-12的含量A组明显低于C组,W组IL-12的含量低于C组,但仍高于A组。结论：哮喘大鼠模型中出现了Akt蛋白的激活,细胞因子失衡可能与Akt蛋白的激活有关。     

PI_3K/Akt与血液恶性肿瘤关系的研究进展

在肿瘤的发生发展中,细胞的凋亡受抑在细胞生存中起着主要的作用。磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路与肿瘤发生发展中的许多细胞生物学过程存在着密切联系,这些生物学过程包括:细胞凋亡、转录及细胞周期的调控等。因此,探讨PI3K/Akt作用的分子机制并揭示其与肿瘤的关系将为抗肿瘤药物的研究提供新靶点。     

蛋白激酶B与糖原合成激酶3

蛋白激酶B(PKB)通过依赖或不依赖磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)信号途径参与多种维持机体正常生命活动的调节机制,糖原合成-激酶3(GSK-3)影响PI3-K/PKB许多下游事件,包括胰岛素诱导的糖原和蛋白质合成调控、细胞生长分化、抗凋亡过程等,还与许多疾病有直接关系如糖尿病、癌症、Alzheimer病等。     

基于PI3 K/Akt通路探究丙泊酚对七氟烷诱导大鼠神经细胞凋亡的保护作用

目的 基于磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路探究丙泊酚对七氟烷诱导大鼠神经细胞凋亡的保护作用.方法 2020年1月—2021年1月于湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院实验室进行实验,选取健康、清洁级Wistar雄性大鼠30只,随机数字表法分为对照组、七氟烷组、七氟烷+丙泊酚组(联合组),各10只...