抗鼠肥大细胞单克隆抗体

本文论述了识别肥大细胞亚型及其前体细胞的一种实验手段。将纯度为95%～99%的大鼠腹膜肥大细胞裂解,制成细胞膜非颗粒性抗原,经腹膜免疫小鼠,同时把提纯的完整的肥大细胞注入免疫小鼠的腋淋巴结中。随后,将免疫小鼠的脾细胞与P_3ol 骨髓瘤细胞融合。通过间接免疫荧光法可检测出这种杂交瘤产生了一种抗体,即抗大鼠肥大细胞单克隆抗体(RMC-McAb)。该抗体所作用的靶细胞包括大鼠颗粒细胞、腹膜渗出的单核细胞、巨噬细胞、胸腺细胞和骨髓细     

弓形虫单克隆抗体的制备及其保护作用观察

应用杂交瘤技术制备弓形虫单克隆抗体（ＭｃＡｂ）。经克隆化获得２Ｂ１０、２Ｂ１１、２Ｇ８、２Ｄ１２；和１Ｄ１ＭｃＡｂ。用ＩＦＡ鉴定筛选，２Ｂ１０、２Ｂ１１为抗弓形虫整虫的ＭｃＡｂ、２Ｇ８、２Ｄ１２和１Ｄ１为抗弓形虫膜抗原的ＭｃＡｂ。用以上五株ＭｃＡｂ进行小鼠保护性试验：１．感染前２４小时、４８小时分别将５株ＭｃＡｂ稀释液注入小鼠腹腔，以１０４弓形虫速殖子进行攻击感染，结果２Ｂ１０、２Ｂ１１，和２Ｇ８对高毒株弓形虫感染鼠有明显的保护作用；２．将弓形虫速殖子与２Ｂ１０、２Ｂ１１和２Ｇ８孵育后再攻击感染能明显延长感染鼠的平均死亡时间（ＭＴＤ）；３．５株ＭｃＡｂ混合液于感染前２４小时注入小鼠体内及与速殖子孵育后也能明显延长感染鼠的ＭＴＤ。     

鼠单克隆抗体治疗中的病人抗鼠免疫球蛋白应答

鼠单克隆抗体(简称单抗)在临床治疗应用中有可能引起宿主产生抗球蛋白应答,     

仙台病毒的单克隆抗体Ⅰ.单克隆抗体制备及其特性

作者制备了12株抗仙台病毒单克隆抗体,并对其特异性、生物学功能和同种型等进行了研究。以100μg纯化的仙台病毒作为抗原加弗氏完全佐剂,腹腔注射Lou鼠,14和30天后分别以相同剂量的抗原加弗氏不完全佐剂再次注射,约10天后以放射免疫法(RIA)测试抗仙台病毒抗体滴度。取抗体滴度于1:200以上的Lou鼠,以200μg抗原加强免疫一次,4天后取其脾细胞与FO骨髓瘤细胞或Y3骨髓瘤细胞融合。经RIA筛选出     

hcG单克隆抗体的制备及其特性

随着大量工作的开展,单克隆抗体制备技术在激素的研究和应用中的重要性越来越被受到重视。人绒毛膜促性腺激素(hcG)是一种被广泛研究的十分重要的生殖激素。hcG及其亚单位的克隆抗体的制备在国外已有报导。但对这些单克隆抗体的应用价值则尚需进行更广泛的研究后才能作出一个全面的评价。本实验室使用NSI骨髓瘤细胞和     

胃癌单克隆抗体-柔红霉素结合物的制备及其细胞毒作用

柔红霉素(Daunomycin,DNR)是一广谱抗癌药物,由于其对心肌、骨髓等正常组织有毒性作用而常常发生严重的毒副反应,致使临床应用受到很大的限制。本文用葡聚糖作为中间载体,将DNR和胃癌单克隆抗体MG_7联接制备成一种免疫抗癌药,发现其中的单抗MG_7对胃癌细胞具有选择性作用,结合物中的DNR也具有抗肿瘤效应。 一、单克隆抗体的纯化 将含有抗胃癌单克隆抗体MG_7的BALB/c小鼠腹水用50％硫酸铵沉淀、再经DEAE-52离子交换层析、提取物在SDS-PAGE上显示单带,免疫组化证实其     

抗弓形虫P30单克隆抗体的制备及其抗虫作用观察

制备抗弓形虫天然P30、重组P30的单克隆抗体(mAb),并研究它们对虫体的影响,为弓形虫病诊断及保护性抗原鉴定奠定基础。采用弓形虫天然P30、重组P30及全虫抗原(对照)分别免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选稳定分泌高滴度mAb的杂交瘤细胞株。用ELISA法测定mAb亚类和效价;通过SDS-PAGE和West-ern blot进行特异性鉴定;Giemsa染色观察杂交瘤细胞的染色体数目;利用扫描电镜及间接荧光抗体试验(IFAT)观察mAb对弓形虫的杀伤作用及其靶抗原定位。结果表明,筛选出2株(2B3、1H6)特异性较好、能稳定分泌mAb的杂交瘤细胞株。Western blot结果显示,2B3、1H6产生的mAb与弓形虫全抗原的阳性反应带均在30 000 Mr处;mAb亚类均属IgM,其效价(ELISA)分别为:2B3 1∶102 400、1H6 1∶51 200;2株细胞的染色体数均在100条以上。电镜观察与mAb作用后的弓形虫虫体聚集、肿胀,膜变厚,表面出现缺口和空洞,甚至虫体变形、破碎。抗弓形虫天然P30的mAb能识别重组体pET-30a-P30的表达蛋白。成功制备了抗弓形虫天然P30、重组P30的mAb,可进一步用于弓形虫病诊断及保护性抗原鉴定研究。     

简易快速制备兔抗鼠IgM血清

随着杂交瘤技术的发展,各类单克隆抗体(McAb)相继问世,为鉴别其Ig类别及进一步提纯均需用IgM抗血清。制备该血清用IgM抗原提纯较为困难,需经多种纯化步骤     

一种新型的抗鼠 IL-2Rβ链单克隆抗体

用表达大量cDNA-编码的小鼠IL-2Rβ的大鼠转染的细胞系免疫大鼠,制备出一种抗小鼠IL-2R β链的单克隆抗体(TM-B1)。该抗体可特异性地与小鼠IL-2Rβ,cDNA 转染的细胞起反应,而不与受体细胞起反应,并可使Mr75～85kda 的小鼠IL-2Rβ产生免疫沉淀。同时表明在EL-4细胞中IL-2Rβ表达和配体的结合力两者无相互关系。TM-β1单克隆抗体可通过抑制配体与     

血红蛋白单克隆抗体的制备及其特性研究

本文报告应用淋巴细胞杂交瘤技术制备了抗人血红蛋白单克隆抗体(Hb-McAb)。经实验证明,Hb-McAb局有特异性强,效价高、使用简便、安全等优点,可作为大肠癌早期诊断的初筛指标。     

血红蛋白单克隆抗体的制备及其特性研究

本文报告应用淋巴细胞杂交瘤技术制备了抗人血红蛋白单克隆抗体(Hb-McAb)。经实验证明，Hb—McAb局有特异性强，效价高、使用简便，安全等优点，可作为大肠癌早期诊断的初筛指标。     

血红蛋白单克隆抗体的制备及其特性研究

大肠癌是严重危害人类健康的恶性肿瘤之一,早期多无症状,给早期诊断带来困难,误诊率较高。为提高早期诊断率,国外已推广普查。目前尚无特异的初筛指标,肿瘤标记物如CEA,CA19-9等均因缺乏器官特异性,未能用于早期诊断,大便潜血试验仍是主要的初筛手段,但联苯胺法特异性差,假阳性较多,且联苯胺是致癌剂,严重危害人体健康。我们应用Kohler和Milste-in方法建立了3株杂交瘤细胞G10,G5E10     

骨桥蛋白单克隆抗体的制备及其特异性分析

为了研制骨桥蛋白(OPN)特异性单克隆抗体(mAb),并鉴定其特异性。本研究在毕赤酵母中表达具有良好免疫原性的重组人OPN蛋白的基础上,用重组人骨桥蛋白(rhOPN)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选杂交瘤细胞,并结合免疫印迹对抗体的特异性进行鉴定,通过竞争抑制试验对单克隆抗体识别的抗原位点进行分析。结果共获得4株能够识别OPN不同抗原位点的mAb,亚类测定显示,3株为IgG1,1株为IgG2a。这些mAb能与重组人OPN特异性结合。本研究的四株抗体中,只有4G2B5能够检出与肿瘤转移密切相关的OPN-c的条带,预示该抗体可用于判断肿瘤预后和高转移肿瘤的临床检测。本研究成功获得了针对骨桥蛋白的特异性mAb,同时为进一步研究OPN蛋白的结构和功能提供了重要工具。     

酶标记兔抗鼠免疫球蛋白的制备与应用

用小鼠血清提取的IgG和IgM混合物,免疫家兔获得血清,再经盐析提纯,酶标记,制成酶标记免抗鼠混合免疫球蛋白(酶标记兔抗鼠IgG-M)。该酶结合物应用效价为1∶8,000-1∶10,000,检测小鼠Ig-G-M的敏感度为0.0625ug/ml。在制备抗甲肝病毒单克隆抗体的大量应用中表明,这种酶标记兔抗鼠Ig-G-M可以检测出分泌IgG和IgM的杂交瘤非特异反应少,结果可靠,并大大减少了杂交瘤初筛的工作量。     

胃癌单克隆抗体-氨甲喋呤交联物的制备及其细胞毒作用的研究

本文用本室已研制出12株鼠抗人胃癌单抗中一株MGb_2制备抗体-BSA-氨甲喋呤结合物,探讨所选单抗在胃癌导向治疗的可行性。 BSA与5倍过量的SPDP反应,每克分子BSA中引入3克分子二硫吡啶基团(PDP)。PDP-BSA通过碳二亚胺与氨甲喋呤连接。PDP-BSA-MTX以二硫代苏糖醇还原得到HS-BSA-MTX。     

抗精脒单克隆抗体的制备及其特性鉴定

本文用鼠×鼠细胞杂交瘤技术首次建立了抗多胺（精脒）单克隆抗体的杂交瘤细胞系。以此杂交瘤经体外组织培养扩大，并注入同系小鼠腹腔，产生的腹水中抗体滴度达１：１０６。单抗的类别是ＩｇＧ１。单价抗体是由分子量５２ｋＤ和２７ｋＤ组成的复合体。这个单克隆抗体可用于癌症的快速诊断和预后随访。     

卵巢上皮癌单克隆抗体阿霉素偶联物的制备及其体内外抗肿瘤作用

恶性肿瘤患者的化疗常常因严重的毒副作用而被迫停药或减量,影响了化疗药物的疗效,因此,如何将药物导向和定位于某一特定器官或组织,使药物按照人们的意愿在体,一     

Tamm-Horsfall糖蛋白单克隆抗体制备及其临床应用

用0.58mol/L NaCl沉淀提取Tamm-Horsfall糖蛋白(THP)制备了三株抗THP单克隆抗体(McAb)。免疫印迹技术(Immunoblotting Technigue,IBT)证明这些McAb特异性地和94kD THP抗原结合,ELISA抑制试验表明三株McAb识别THP抗原的不同位点。用McAb双夹心ELISA法测定尿THP的含量,表明尿THP含量与血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)呈显著负相关(P<0.01),与内生肌酐清除率(Ccr)呈明显正相关(P<0.01),BUN、Scr、Ccr正常的各种肾病尿THP含量无明显异常(P<0.05)。测定尿THP含量可作为判断肾功能损害程度的良好指标。     

抗阴道毛滴虫单克隆抗体的制备及其特性

用杂交瘤技术建立了6株能稳定分泌抗阴道毛滴虫单克隆抗体的细胞株,选取其中3株进行了分析。3株单抗的效价分别是:ⅣA12B1和ⅣA22B1为250000ⅡB2A1为1250000。ⅣA12B1和ⅡB2A为IgG3抗体,ⅣA2281为IgGl抗体。位点分析及免疫酶染色发现,ⅣA12B1和ⅣA22B1抗同一抗原决定簇,所针对的抗原主要分布于膜上;ⅡB2A1针对的抗原主要分布于胞浆中。3株单抗针对的抗原均为糖蛋白。特异性试验发现,这3株单抗与人白细胞、阴道上皮细胞、白色念珠菌、大肠杆菌及人毛滴虫均无交叉反应。用制备的单克隆抗体,建立了试断滴虫性阴道炎的胶乳凝集试验(LAT)。研究表明,LAT是一种敏感、特异、简单和快速的方法。