人参皂苷Rg1抗肝纤维化的实验研究

[目的]观察三七总甙单体成分人参皂苷Rg1对实验性肝纤维化的作用。[方法]用50?l4致大鼠肝纤维化模型,共35 d,同时给予三七总皂甙单体成分人参皂苷Rg1治疗,于实验第2、5周(实验结束)时检测肝功能、血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN),于实验结束时分离肝组织光镜观察其病理变化。[结果]人参皂苷Rg1及三七总皂甙能改善肝纤维化大鼠的肝功能,降低血清PCⅢ、HA、LN水平;人参皂苷Rg1中、高剂量组及三七总皂甙明显减轻肝组织胶原的沉积,改善肝纤维化程度。[结论]人参皂苷Rg1及三七总皂甙具有抗肝纤维化作用,人参皂苷Rg1是三七总甙抗肝纤维化有效成分之一。     

熊果酸对肝星状细胞烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶的影响

近年来研究表明,肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)表达的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NADPH oxidase,NOX)在肝纤维化发病中起关键作用[1].NOX产生的活性氧(reactive oxygen species,ROS)介导了各种促肝纤维化因子在HSC内的信号转导,有望成为抗肝纤维化的新靶点[2].熊果酸(ursolic acid)是从中药植物(如丹参、女贞子等)中提取的单体成分,具有保护肝细胞的作用[3],但其抗肝纤维化作用研究甚少.申月明等[4]在体外研究发现熊果酸能抑制HSC增殖,诱导其凋亡;体内实验证实熊果酸有显著的抗肝纤维化作用[5],但熊果酸抗肝纤维化的作用靶点及机制尚不清楚.Steinkamp-fenske等[6] 报道熊果酸能下调人内皮细胞NOX4的表达并抑制ROS的产生.本实验旨在观察熊果酸对HSC中NOX的影响,以探索熊果酸抗肝纤维化的作用靶点及机制.     

维生素E对肝星状细胞增殖及胶原合成的影响

动物实验研究表明维生素Ｅ(ＶｉｔＥ)具有抗肝纤维化作用[1] ,但其具体机制不明。目前认为肝星状细胞 (ＨＳＣ)在肝纤维化形成中起关键作用[2 ] 。为探讨ＶｉｔＥ抗肝纤维化的细胞学机制 ,我们以白细胞介素 2 (ＩＬ 2 )及肿瘤坏死因子α(ＴＮＦα)作为刺激因素观察了ＶｉｔＥ对大鼠ＨＳＣ增殖和胶原合成的调控作用。—、材料和方法1 实验动物 :雄性ＳＤ大鼠 ,体重 5 5 0ｇ。2 大鼠ＨＳＣ的分离和培养 :采用链酶蛋白酶和胶原酶液原位循环灌注消化肝脏 ,经 11%Ｍｅｔｒｉｚａｍｉｄｅ液一步密度梯度离心分离大鼠ＨＳＣ。将分离的ＨＳＣ按 2…     

苦参素及联合维生素E的抗肝纤维化作用及机制

肝脏的纤维化是一个缓慢而动态的过程 ,涉及到细胞 细胞因子 细胞外基质 (ECM )之间一系列复杂的变化 ,与下列两个因素关系非常密切。一是肝星状细胞 (hepaticstel latecell,HSC) ,它是胶原合成的主要来源。二是组织金属蛋白酶抑制因子 (TIMP) ,其中TIMP 1的合成增多在肝纤维化的发展中具有特殊重要的作用[1 3 ] 。苦参素 (Oxymatrine,OM)和维生素E(VE)正逐渐得到人们的重视。苦参素主要成分为氧化苦参碱 ,研究显示能抑制成纤维细胞的增殖及Ⅲ型前胶原mRNA的表达[4] 。也可通过抗炎、抗病毒、抑制免疫等环节起到抗肝纤维化作用。…     

人参皂苷Rgl抗肝纤维化的实验研究

[目的]观察三七总甙单体成分人参皂苷Rg1对实验性肝纤维化的作用.[方法]用50%CC14致大鼠肝纤维化模型,共35 d,同时给予三七总皂甙单体成分人参皂苷Rg1治疗,于实验第2、5周(实验结束)时检测肝功能、血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN),于实验结束时分离肝组织光镜观察其病理变化.[结果]人参皂苷Rg1及三七总皂甙能改善肝纤维化大鼠的肝功能,降低血清PC Ⅲ、HA、LN水平;人参皂苷Rg1中、高剂量组及三七总皂甙明显减轻肝组织胶原的沉积,改善肝纤维化程度.[结论]人参皂苷Rg1及三七总皂甙具有抗肝纤维化作用,人参皂苷Rg1是三七总甙抗肝纤维化有效成分之一.     

大黄对慢性肝炎抗肝纤维化的临床研究

大黄不仅具有利胆退黄、抗炎抑菌、抗病毒、调节免疫等多种作用,近年来实验研究还发现,大黄中的大黄素、大黄酸等成分具有抗肝纤维化的作用[1,2 ] 。有关大黄抗肝纤维化作用的临床研究报道较少,为此我们观察了37例应用大黄治疗慢性肝炎患者,从肝组织学、转化生长因子β1(TGF β1)及血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、IV型胶原(IVC)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)等方面来探讨大黄抗肝纤维化的作用。材料与方法一、病例选择73例均为我院2 0 0 1年1月～2 0 0 3年6月门诊及住院的慢性肝炎患者,男6 7例,女6例,年龄2 1～4 5岁,平均年龄35 .3岁;慢性乙…     

大麻素受体1在慢性乙型肝炎肝纤维化发生和发展中的作用

Sato等[1]和Teixeira Clerc等[2]先后发现大麻素受体1(CB1R)在慢性肝病发展过程中起着独特作用.为深入研究CB1R在慢性乙型肝炎(CHB)肝纤维化发生、发展过程中的作用,我们用免疫组织化学染色法检测肝组织中CB1R表达情况,分析CB1R半定量评分与纤维化分期、血清转化生长因子(TGF)β1、ALT以及HBV DNA水平等指标的相关性,为今后以CB1R为靶点进行抗肝纤维化治疗提供依据.     

白细胞介素7对转化生长因子β1诱导的大鼠肝星状细胞的影响

肝星状细胞(HSC)的活化和增殖是肝纤维化形成的关键环节[1].转化生长因子(TGF)β1可通过HSC内的TGFβ/Smads信号通路促进纤维化的发生发展,被认为是调控肝纤维化的核心物质.抑制TGFβ1合成或其信号传导已证明能拮抗HSC活化与细胞外基质的产生,成为抗肝纤维化的主要目标[2].IL-7是在骨髓中最早发现的一种细胞因子,以往研究证实其能通过上调成纤维细胞Smad7的表达抑制TGFβ/Smads信号通道,具有抗纤维化的作用[3-5].本实验旨在了解IL-7在肝纤维化中的作用,并探讨其作用的分子机制.     

干扰素γ治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床研究

肝纤维化是肝炎发展为肝硬化的必经环节 ,抗肝纤维化治疗是预防肝硬化的有效措施[1] 。本研究使用重组人干扰素γ(IFNγ)治疗慢性乙型肝炎 ,采用肝组织活检这一“金标准”观察疗效 ,进一步探讨其抗肝纤维化的效果。一、资料与方法1.研究对象 :肝纤维化程度S2以上的慢性乙型肝炎患者 2 2例 ,年龄 2 4～ 6 1岁 ,病程 0 .5～ 14年。诊断符合 2 0 0 0年修订的“病毒性肝炎防治方案”[2 ] 。半年内未接受过抗肝纤维化和 (或 )抗病毒药物治疗。　　 2 .治疗方法 :IFNγ由上海克隆生物公司提供 ,1MU ,皮表 1　2 2例患者治疗前后肝组织病理分期…     

银杏叶提取物对实验性大鼠肝纤维化的逆转作用

[目的]观察银杏叶提取物(EGb)对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化病理过程的逆转作用.[方法]采用CCl4腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型成功后,予EGb或0.85%氯化钠灌胃,8周后用苏木精-伊红染色、苦味酸-酸性品红染色和网状纤维染色观察大鼠肝脏病理变化,酶动力法检测肝功能,SP免疫组化法检测肝组织中α-肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β2)、Ⅰ型胶原表达的变化,RT-PCR法检测肝组织中TGF-β1、Ⅰ型胶原、金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP1)的表达情况.[结果]EGb可促进大鼠肝纤维化的逆转,使肝组织中α-SMA、TGF-β1、Ⅰ型胶原、TIMP1的表达降低(P＜0.01);肝功能改善(P＜0.01);肝组织纤维化程度分级好转,胶原纤维、网状纤维所占面积显著缩小(P＜0.01).[结论]EGb能有效逆转大鼠肝纤维化病理过程,其作用机制为抗脂质过氧化、保护肝细胞和抑制肝星状细胞活化,抑制TGF-β1、Ⅰ型胶原、TIMP1的合成,从而逆转纤维化的形成.     

肝纤维化形成中血管紧张素(1-7)及其转换酶与胰岛素样生长因子结合蛋白2的动态变化

肝脏存在局部肾素-血管紧张素系统(RAS),血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)是其主要介质,AngⅡ在肝星状细胞活化与纤维增生中起重要作用.近年发现血管紧张素转换酶2(ACE2)及其代谢产物Ang-(1-7),Ang-(1-7)可通过Mas受体拮抗AngⅡ的作用,引起血管舒张、抑制细胞增殖[1].胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)主要由肝实质细胞产生和表达,与肝纤维化的形成关系密切[2].但对Ang-(1-7)、ACE2及IGFBP-2在肝纤维化形成过程中的动态变化报道较少.因此,本实验采用CC14诱导的大鼠肝纤维化模型作为研究对象,探讨ACE2、Ang-(1-7)、IGFBP-2在大鼠肝纤维化形成过程中的动态变化.     

环氧合酶-2抑制剂尼美舒利对大鼠肝纤维化的影响

环氧合酶-2(COX-2)是一种诱导酶，在大部分正常组织中无表达，可在炎性介质等的作用下诱导表达。Nanji等在肝纤维化的研究中发现，COX-2的表达与肝内炎症有关。本实验应用选择性COX-2抑制剂尼美舒利(NS)观察其对大鼠肝纤维化的影响。γ-干扰素(IFN)具有抗肝纤维化的作用已成共识，故以其作疗效对照。     

联用阿米洛利与维生素E预防大鼠肝纤维化的实验研究

新近关于肝纤维化形成机制的研究表明,氧应激和Na^ ／H^ 交换泵在肝纤维化形成中起重要作用,为抗肝纤维化的研究提供了新靶点。本实验通过建立二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化模型,观察联用Na^ ／H^ 交换泵抑制剂阿米洛利(amiloride,Am)与抗氧化剂维生素E联用对大鼠纤维化形成的影响,以探索临床抗肝纤维化的新途径。     

苦参素穴位注射防治大鼠肝纤维化研究

[目的]观察苦参素足三里注射预防及治疗大鼠肝纤维化的疗效,并探讨其作用机制.[方法]采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,SD大鼠35只,随机分为5组:正常对照组、模型对照组、苦参素腹腔注射(OM ip)对照组、苦参素足三里(OM ZSL)注射治疗组、OM ZSL注射预防组.实验至10周末,测定血清透明质酸(HA)、谷氨酸转肽酶(GGT)及肝组织中羟脯氨酸(Hyp)、丙二醛(MDA)水平.VG染色观察肝细胞结构和肝纤维化程度;RT-PCR和蛋白酶谱法检测肝组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA、MMP-2蛋白的表达.[结果]OM ZSL注射预防与治疗给药均能明显降低CCl4诱导肝纤维化大鼠HA、GGT、Hyp及MDA(P＜0.05,＜0.01).病理学观察,OM ZSL注射治疗与预防组大鼠胶原纤维沉积明显减轻,假小叶结构明显减少;且肝纤维化程度轻于治疗组;肝组织中MMP-2 mRNA、MMP-2活性蛋白的表达显著低于模型对照组(P ＜0.05,＜0.01).[结论]OM ZSL穴位注射对CCl4诱导的肝纤维化有较好的预防及治疗作用,其部分机制是通过减少脂质过氧化产物MDA,减少MMP-2 mRNA、MMP-2活性蛋白的表达,促进细胞外基质(ECM)的降解,抑制ECM沉积,从而减轻或逆转肝纤维化.     

肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶9及其抑制因子1基因表达的动态变化及下瘀血汤对其影响

[目的]研究免疫性肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶9(MMP-9 mRNA)和基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1 mRNA)基因表达的动态变化及下瘀血汤对其影响,探讨下瘀血汤抗肝纤维化的机制。[方法]猪血清腹腔注射复制大鼠肝纤维化模型,造模8周后灌胃给予下瘀血汤流浸膏干预治疗,用药4周后和造模过程中的1、2、4、8周动态处死大鼠,获取标本,检测指标。[结果]与正常组相比,模型组1、8、12周MMP-9 mRNA表达明显降低(P0.05,0.01),2周MMP-9 mRNA表达显著升高(P0.01),4周表达无明显变化。与模型组12周相比,下瘀血汤组MMP-9 mRNA表达明显升高(P0.05)。与正常组相比,1、2、4、8和12周模型组TIMP-1 mRNA表达均有显著升高(P0.05,0.01))。与12周模型组相比,下瘀血汤组TIMP-1 mRNA表达显著降低(P0.01)。[结论]大鼠猪血清免疫性肝纤维化存在着MMP-9 mRNA和TIMP-1 mRNA的动态变化,下瘀血汤可通过促进MMP-9 mRNA表达和抑制TIMP-1 mRNA表达而发挥抗肝纤维化的作用。     

莪术油注射液对肝星状细胞增殖、凋亡及分泌细胞外基质的影响

肝星状细胞(HSC)是肝纤维化发展动态变化网络的核心,抑制活化HSC增殖和诱导其凋亡是治疗肝纤维化的重要策略[1].目前尚缺乏确切有效的抗肝纤维化药物.近年研究发现,中药对肝纤维化的防治具有良好的发展前景[2].莪术(curcumae)是一种传统的活血化瘀中药,药理作用较广,具有抗肿瘤、抗纤维组织增生等作用,对肝纤维化的作用报道较少.本实验研究了莪术油注射液对体外培养HSC增殖、凋亡及分泌细胞外基质的影响,探讨莪术抗肝纤维化作用及其机制.     

丹参煎液对肝纤维化大鼠肝脏肾素-血管紧张素系统的影响

[目的]研究肝纤维化大鼠与肝脏局部肾素-血管紧张素系统(RAS)的关系,丹参煎液的抗肝纤维化作用及对CCl4肝纤维化大鼠RAS的影响。[方法]采用CCl4造模的同时,分别给以丹参煎液及氯沙坦灌服,共6周,光镜下观察病理改变;检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)水平;血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的水平;检测大鼠肝组织中-αSMA蛋白和AngⅡ1型受体(AT1R)mRNA表达。[结果]丹参煎液可促使大鼠肝组织的炎症和纤维化程度减轻;使肝组织中血浆AngⅡ水平降低(P0.01);AT1R mRNA、-αSMA蛋白表达降低(P0.05,0.01),肝功能改善(P0.05,0.01);肝组织纤维化程度减轻(P0.05,0.01)。[结论]丹参煎液具有一定的保护肝细胞、改善肝功能、抗肝纤维化的作用。其抗肝纤维化作用的机制之一可能与其降低肝纤维化大鼠血浆AngⅡ水平,抑制肝组织AT1R的基因表达有关。     

联合应用血管紧张素Ⅱ与四氯化碳致大鼠肝纤维化模型研究

Ｈａｆｉｚｉ等[1] 证明 ,将心肌间质、肾间质成纤维细胞在血管紧张素Ⅱ (ＡｎｇⅡ )溶液中孵育 ,可促成纤维细胞增殖及细胞外基质 (ＥＣＭ )合成。将激活的肝星状细胞 (ＨＳＣ)在ＡｎｇⅡ溶液中培养可促其收缩、分裂和增殖[2 ] 。这些均通过ＡｎｇⅡ 1型受体起作用。最近国内外研究也证实 ,ＡｎｇⅡ 1型受体阻断剂用于实验性肝纤维化有效。因此我们认为ＡｎｇⅡ可能参与肝纤维化。目前实验研究肝纤维化主要采用四氯化碳 (ＣＣｌ4 )造模 ,需时约 8周。本实验联合应用ＣＣｌ4 与ＡｎｇⅡ ,观察能否加快大鼠肝纤维化进程。一、材料与方法1.动…     

核转录因子在肝星状细胞激活中的作用

肝纤维化的形成是多种类型细胞、氧化压力、细胞因子和生长因子等一系列复杂作用的结果[1]。库普弗细胞和肝星状细胞(HSC)的激活是肝纤维化发生过程中两个重要的步骤[2]。HSC可台成以I型为主的多种胶原,形成细胞外基质(ECM),破坏肝脏的固有结构,是目前研究的热点。     

三七皂甙对肝纤维化大鼠分泌型磷脂酶A2和肿瘤坏死因子表达的影响

用四氯化碳复制大鼠肝纤维化模型,探讨三七皂甙对细胞因子的影响,研究三七皂甙单体Rg_1、Rb_1抗纤维化的作用机制。 一、材料与方法1.材料:(1)肿瘤坏死因子α(TNFα)和前列腺素E2GE2)试剂盒分别购自第四军医大学免疫学教研室和苏州医