聚合酶链反应对小儿急性呼吸道感染多病原学检测及临床研究

６３例小儿急性呼吸道感染（ＡＲＩ）应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）针对肺炎衣原体、肺炎支原体、沙眼衣原体、呼吸道合胞病毒、腺病毒进行５种病原联合检测。肺炎衣原体感染占第１位，阳性２２例，阳性率３４．９％（２２／６３），其中３岁以下小儿占１９例（１９／２２，８６．８％）。其次为呼吸道合胞病毒感染，阳性１９例，阳性率３０．２％（１９／６３）。混合感染７例，其中５例为呼吸道合胞病毒、肺炎衣原体感染。     

血小板减少性紫癜44例临床分析

目的总结小儿血小板减少性紫癜(ITP)的临床特点，其发生与病毒感染的关系及治疗。方法对44例ITP患者的临床资料进行回顾性分析。结果急性占68．2％，慢性占31．8％；男女比例为1．75：1；PAIgG升高占75％，PAIgA升高占5％；发病1～6周前有明确前驱感染者24例(54．5％)；检测到巨细胞病毒(CMV)、EB病毒(EBV)、人微小病毒B19感染急性病例5例(16．7％)，慢性病例11例(78．6％)；在传统治疗方法外，采用更昔洛韦(丽科伟)、磷甲酸钠(可耐)清除病毒感染，急性患者全部治愈，慢性患者疗效提高。结论血小板减少性紫癜，特别是慢性病例的发生与病毒感染密切相关；采用更昔洛韦、磷甲酸钠清除病毒，可提高疗效。     

41例小儿再生障碍性贫血病因的初步探讨

目的：探讨病毒感染及其相关因素与小儿再生障碍性贫血(AA)发病的相关性。方法：41例AA患儿均详细询问病史。对照组为同期我院保健门诊1～12岁32例健康儿童。用ELISA法检测血清肝炎病毒、EB病毒抗体IgM(EBV-IgM)、巨细胞病毒抗体IgM(CMV-IgM),用PCR法检测EBV-DNA和CMV-DNA,巢式PCR扩增微小病毒B19(B19-DNA)。结果：41例中,病因不明12例,占29.3％;有病毒感染或红斑狼疮等病史者29例,占70.7％。4种病毒检出率为61.0％(25/41),高于对照组病毒感染阳性率6.3％(2/32),差异有显著性(P<0.01)。结论：小儿AA以继发性为主,可能与CMV,EBV,B19及肝炎病毒等感染有关。     

昆明地区2457例小儿急性下呼吸道感染病原学研究

目的 了解昆明地区不同年龄组小儿急性下呼吸道感染（ALRI）患儿细菌、呼吸道病毒感染病原谱及病原流行病学特点。方法 对昆明地区2457例ALRI住院患儿，抽取鼻咽分泌物培养检测细菌病原；应用直接免疫荧光法进行呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、流感病毒（IFA、B型）、副流感病毒（PIV1、2、3型）七种病毒抗原检测。结果 2457例ALRI患儿标本中，检出阳性病原菌506株，阳性率20．6％（506／2457）；检出呼吸道病毒阳性病例587例，阳性率23．9％（587／2457）；新生儿（出生～28d）、婴儿（～1岁）、幼儿（～3岁）、儿童（～18岁）组病原联检阳性率分别为56．6％、46．8％、41．7％、15．3％，呼吸道病原总阳性率44．5％（1093／2457）；阳性病例中混合感染53例（婴儿49例），混合感染率4．8％（53／1093）。各年龄组细菌及病毒感染率比较差异均具有显著性（P〈0．01）。细菌病原中革兰阴性菌占83．0％，前三位依次为大肠埃希杆菌、肺炎克雷白杆菌、阴沟杆菌；病毒病原中RSV占阳性病毒株的86．0％，其他病毒病原呈散在流行，两年中未检出IFA病毒株。昆明地区小儿ALRI细菌感染无明显季节性，呼吸道病毒感染具有明显季节性，高峰流行季节在每年7月至次年2月，流行季节持续近8个月，两年间夏季呼吸道病毒感染率存在差异。结论 昆明地区各年龄组小儿ALRI的主要病原均以革兰阴性菌及RSV感染为主，年龄越小发病率及混合感染率越高；呼吸道病毒病原谱及流行季节存在地区差异。     

儿童肺炎衣原体肺炎病原学检测及其临床应用

目的：了解儿童肺炎衣原体（C.pn)肺炎的发病情况，探讨套式聚合酶链反应（nPCR)及微量免疫荧光（MIF）检测肺炎衣原体肺炎的临床意义。方法：联合应用nPCR及MIF检测300例肺炎患儿及130例健康儿童，结果进行统计学分析，并随机选取2例nPCR阳性标本，进行DNA测序。结果：检测300例肺炎中，nPCR阳性且MIFT符合急性感染标准者30例，即确诊为肺炎衣原体肺炎，占肺炎总数的10．0％。nPCR阳性者42例占14．0％，MIF符合急性感染标准者31例，占10．3％，在年龄分布上，120例≤3岁者有16例nPCR阳性，阳性率13．3％，8例MIF符合急性感染标准，阳性率6．7％；180例＞3岁患儿中26例nPCR阳性，阳性率14．4％，23例MIF符合急性感染标准。阳性率12．8％。130例健康对照儿童中，nPCR均呈阴性，虽有24例MIFIgG≥1:16(IgG滴度分别为1：16－1：28），但无一例符合急性感染标准。2例nPCR阳性标本nPCR产物之DNA序列与C.pn标准株（CWL－29）完全一致。结论：肺炎衣原体是儿童肺炎重要的病原，nPCR诊断肺炎衣原体感染快速、简便、敏感、特异性高，联合应用用nPCR及MIF可以提高诊断的敏感性和特异性。     

病毒性心肌炎患儿巨细胞病毒感染的研究

目的：研究小儿病毒性心肌炎的病例中巨细胞病毒的感染情况。方法：用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测急性病毒性心肌炎患儿血清巨细胞病毒(CMV)特异IgM抗体,同时取健康小儿血清标本作为对照。结果：70例病毒性心肌炎中CMV-IgM阳性13例,阳性率 18.6%;与对照组比较阳性1/37,阳性率2.7%,差异有显著性意义(χ2=4.04, P<0.05)。结论：CMV感染是病毒性心肌炎的常见病因之一。     

聚合酶链反应诊断婴儿肝炎综合征巨细胞病毒感染

我们应用PCR检测肝炎综合征尿中巨细胞病毒DNA特异片段，以了解本地区巨细胞病毒感染现状。对象及方法一、一般资料住院肝炎综合征患者64人。新生儿7例，<3mo45例，＞3mo12例。出生体重＜2500g23例。母乳喂养31例、人工喂养23例．混合喂养10例。二、诊断标准按全国小儿巨细胞病毒感染学术会议拟定的巨细胞病毒感染诊断试行标准[1]。实验室检查检出巨细胞病毒DNA特异片段。三、方法入院后用清洁试管取患儿及母亲尿。经两次离心标本，弃上清液．加入引物（430bp），再加人TapDNA多聚酶。经处理后开始循环。循环参数：90Clmin．65C0．5mi…     

感染性疾病厌氧菌培养结果分析

目的 提高厌氧菌培养的阳性率，了解厌氧菌的感染情况及在各种标本中的分布。方法 应用VITAI-200细菌培养箱及VITEK-60鉴定仪对厌氧培养及分离的厌氧菌种进行鉴定。结果 478份临床标本进行厌氧和需氧培养，122份标本细菌培养阳性，总阳性率255％，其中单纯厌氧菌阳性22例，占阳性标本18％；单纯需氧菌阳性81例，占阳性标本66．4％；两者混合阳性19例，占阳性标本15．6％。包括混合感染，共检出厌氧菌45株，厌氧菌检出率为8．5％。结论 在临床标本检测中，厌氧菌有较高的培养阳性率，开展厌氧培养能提高感染性疾病的病原菌阳性检出率及临床诊治水平。     

575例儿童肝功能损害病因及临床特点研究

目的 探讨小儿肝功能损害的病因、临床特征,为肝功能损害的早期诊断及干预提供理论依据.方法 选取长春市儿童医院2010年8月至2013年12月住院诊断肝功能损害的患儿575例为研究对象.采集患儿血、尿、便及咽部分泌物标本,采用血培养法进行细菌检测及鉴定;荧光定量PCR方法进行弓形虫、巨细胞病毒、EB病毒、单纯疱疹病毒、呼吸道合胞病毒、支原体DNA、轮状病毒、肠道病毒RNA病原检测;ELISA法做乙肝三对[乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、抗乙型肝炎表面抗原的抗体（抗HBs）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）、抗乙型肝炎e抗原的抗体（抗HBe）、抗乙型肝炎核心抗原的抗体（抗HBc）、乙肝核心抗体IgG和IgM（HBcAb-IgG和HBcAb-IgM）],甲型肝炎抗体,丙型肝炎抗体检测;质谱法进行血遗传代谢病筛查并收集患儿的临床资料,进行统计分析.结果 婴儿组304例,幼儿组139例,学龄前组71例,学龄组61例,各年龄组间比较,婴幼儿组占比例最高.感染性疾病占78.6％ （452/575）,非感染性疾病4.3％（25/575）,婴儿肝炎综合征中未明确病原的占17.0％（98/575）.感染性疾病中,有211例检测出了病原,其中病毒感染189例（89.2％）,细菌感染13例（6.1％）,支原体感染8例（3.8％）,弓形虫感染1例（0.5％）.病毒感染所致肝功能损害中,巨细胞病毒感染94例（49.7％）,EB病毒感染58例（30.7％）,肠道通用型病毒感染6例（3.2％）,单纯疱疹病毒感染2例（1.1％）,轮状病毒感染15例（7.9％）,EV71病毒感染8例（4.2％）,柯萨奇A16病毒感染3例（1.6％）,呼吸道合胞病毒感染3例（1.6％）;巨细胞病毒感染多发生在1月龄～1岁患儿组,EB病毒感染多发生在大于1岁患儿组.非感染性疾病中,药物性肝功能损害7例（1.2％）,遗传代谢性疾病3例（0.5％）,先天性胆道闭锁4例（0.7％）.肝损害程度：轻度340例（59.1％）,中度204例（35.5％）,重?     

重庆地区人类偏肺病毒感染与小儿毛细支气管炎

目的探讨人类偏肺病毒(human metapneumovirus，hMPV)在重庆地区小儿毛细支气管炎中的感染情况，比较hMPV与呼吸道合胞病毒(RSV)感染引起的毛细支气管炎的临床特点。方法用免疫荧光快速诊断方法，检测80例毛细支气管炎患儿鼻咽分泌物中RSV、腺病毒(Ado)、流感病毒(Flu)A、B、副流感病毒(Para)1、2、3七种常见呼吸道病毒，采用RT-PCR的方法检测上述患儿鼻咽分泌物中hMPV的L基因和M基因。结果80例毛细支气管炎患儿鼻咽分泌物中病毒检出率为65％，在病毒阳性检出标本中RSV感染占63．4％(33／52例)，Flu-B(3／52例)和Para-3(3／52例)均占5．77％，Para-1占1．92％(1／52例)，Flu-A与Flu-B混合感染占3．85％(2／52例)；80例患儿的鼻咽分泌物中发现10例为hMPVL和M基因同时阳性，其中单独hMPV阳性7例，3例为RSV与hMPV合并感染，hMPV阳性占病毒阳性检出标本的13．46％(7／52例)，hMPV与RSV合并感染为5．77％(3／52例)。结论RSV仍然是引起毛细支气管炎的首位病原，约为41．25％；hMPV感染在重庆地区小儿毛细支气管炎中居第二位，约占8．75％(7／80例)，仅从临床表现上很难鉴别hMPV感染与RSV感染。     

婴幼儿病毒性肺炎104例病原学分析

目的探讨本地区引起婴幼儿病毒性肺炎的病原学概况与临床表现特点。方法应用ELISA法检测婴幼儿肺炎患儿急性期血清5种病毒[呼吸道合胞病毒（RSV）、流感病毒（IFV）、腺病毒（ADV）、副流感病毒（PIV）、巨细胞病毒（CMV）]特异性抗体IgM。按血清病毒特异IgM阳性、C-反应蛋白（CRP）〈8mg／L且无其他病原学感染的临床及实验室证据为条件检测221例肺炎患儿。结果1．检出总抗体阳性104例．阳性检测率为47．1％．其中单一病毒感染75例，占72．1％，混合感染29例．占27．9％。2．RSV感染居首位，其余依次为IFV、ADV、PIV、CMV。3．婴幼儿不同年龄段、不同季节易感病毒的种类不同。结论引起小儿肺炎的病原除细菌性感染外，病毒性感染的种类繁多，其流行季节高峰与临床表现各异。对感染者及早进行病原学检测，明确病原学种类，以利及时采取相应治疗措施。     

先天性TORCH感染35例临床分析

为探讨先天性ＴＯＲＣＨ感染的早期临床表现，为尽早诊断提供依据，本文分析了我院新生儿病房１９９４年７月￣１９９８年７月收治的先天性ＴＯＲＣＨ感染３５例，占同期住院新生儿的１．８６％。在感染类型中，巨细胞病毒感染最常见，占７１．４２％，其次为弓形体感染，占１１．４３％。其临床表现以黄疸、贫血、肝肿大最多见，分别占９４．２９％，４５．７１％及２０％。合并感染以肺炎最多见占２５．７１％。提示先天性ＴＯＲＣ     

ITP患儿治疗中血小板下降的因素探讨

目的 分析部分病毒感染导致ITP患儿在治疗中，血小板数量下降的因素。方法 用ELISA方法检测62例治疗中ITP患儿血清柯萨奇病毒(CBV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、EB病毒(EB)和肺炎支原休(MP)IgM抗体。结果 显示62例ITP患儿感染阳性率为75．8％(47／62)。其中RW阳性率为32．3％(20／62)；CBV阳性率为17．7％(11／62)；MP阳性率为14．5％(9／62)；ADV阳性率为9．7％(6／62)。两种以上病原体感染阳性率为33．9％(21／62)。结论 ITP患儿治疗过程中，部分呼吸道病毒感染是其反复发作的重要因素，临床上应重视抗病毒和免疫的应用。     

先天性肾积水与巨细胞病毒感染的关系

应用聚合酶链反应技术检测２３例先天性肾积水患儿肾盂内尿液和狭窄段组织块人巨细胞病毒ＤＮＡ，以及血清间接免疫荧光试验法检测巨细胞病毒。结果：６例肾盂内尿液、８例狭窄段组织块和８例血清标本为阳性；对照组６例，仅１例尿液为阳性（Ｐ＜０．０５）。提示光天性肾积水可能与巨细胞病毒感染有关。     

小儿胃幽门螺杆菌感染诊断方法的研究

为探讨小儿幽门螺杆菌（ＨＰ）感染诊断的最佳手段，对９８例不同群体小儿用胃粘膜活检标本尿素酶快速诊断法、血清ＨＰ－ＩｇＧ测定法、胃液ＨＰ－聚合酶链反应（ＰＣＲ）法进行了ＨＰ感染的对比性研究。结果：三种方法在上消化道疾病组胃粘膜活检标本中ＨＰ感染阳性率分别为４２％、５４％、４８％，与非消化道疾病及健康小儿对照组差异有显著性意义（Ｐ＜０．００５）。结果表明：三种方法在检测ＨＰ的阳性率方面无明显差别，而胃液ＨＰ－ＰＣＲ法方法简单实用、敏感性和特异性均较好，可作为诊断ＨＰ感染的最佳方法之一。     

小儿下呼吸道感染2646例临床观察

目的探讨小儿急性下呼吸道感染的病原。方法对天津市儿童医院2002年1月～2004年3月的2646例下呼吸道感染患儿进行呼吸道病毒检测。结果共有1523例标本为病毒阳性，总阳性率57．56％。病毒阳性标本中腺病毒(ADV)为首位，共836例，占31．59％，并以ADV3亚型为主。结论呼吸道病毒是小儿急性下呼吸道感染的主要病原，ADV是天津地区婴幼儿急性下呼吸道感染的首要病毒病原，呼吸道病毒检测为临床诊断和治疗提供了可靠依据。     

婴儿先天性巨结肠与巨细胞病毒感染

为了解婴儿先天性巨结肠（ＨＤ）与巨细胞病毒（ＣＭＶ）感染的关系，对１９例２～１８个月的ＨＤ患儿（经病理证实）的血清、尿和组织块用病毒分离和ＤＮＡ探针杂交方法进行ＣＭＶ检测。结果：１９例ＨＤ患儿分离ＣＭＶ的１９份尿标本中２份污染，在１７份尿标本中７份阳性，阳性率为４１．２％；正常儿尿标本阳性率为１４．４％（Ｐ＜０．０５）。１９例ＨＤ血清中，ＣＭＶＩｇＭ抗体２例阳性，阳性率为１０．５％；正常儿阳性率为８．０％（Ｐ＞０．０５）。１９例ＨＤ痉挛段组织块中无一例ＣＭＶ阳性，但６例ＨＤ痉挛段组织块ＣＭＶ－ＤＮＡ探针杂交全部阳性，其中２例强阳性，阳性率为１００％。说明婴儿ＨＤ与ＣＭＶ感染关系密切，ＣＭＶ感染可能是包括ＨＤ在内的一些先天性畸形的重要致畸因素。     

幽门螺杆菌感染在儿童胆汁返流中的临床意义

目的研究胆汁返流患儿中幽门螺杆菌(Hp)感染的阳性率，探索Hp感染在胆汁返流中的临床意义。方法应用小儿胃镜诊断慢性胃炎伴胆汁返流，检测血清Hp抗体，应用^13C-Hp尿素呼气法及Hp-PCR—DNA检测，诊断Hp感染。并进行χ^2检验。结果96例胃炎患儿中39例Hp阳性，阳性率为40．63％。伴胆汁返流19例，阳性率为39．5％，不伴胆汁返流20例，其阳性率为41．69％，经统计学处理，两者差异无显著。结论小儿胆汁返流与Hp感染有关。临床诊疗过程中应考虑Hp感染这一因素。     

婴儿巨细胞病毒性肝炎外周血白细胞巨细胞病毒感染

用过氧化物酶抗过氧化物酶法，检测１９例婴儿巨细胞病毒性肝炎患儿外周血淋巴细胞、单核细胞、粒细胞中人巨细胞病毒前早期抗原、早期抗原、晚期抗原，并对其中５例作了恢复期复查。结果表明，急性期大都伴有白细胞受感染，三类细胞之间感染阳性率无显著性差异，恢复期白细胞受感染极少；三种抗原在白细胞中的产生有差异，表达前早期抗原、早期抗原的居多，表达晚期抗原的较少。先天感染患儿抗原阳性的淋巴细胞、单核细胞占总细胞的百分比明显高于围生期感染者。提示婴儿巨细胞病毒性肝炎患儿免疫细胞易受巨细胞病毒感染。     

血尿患儿尿和肾组织中巨细胞病毒抗原检测及其临床意义

目的 探讨血尿患儿巨细胞病毒（CMV）感染状况。方法 应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白－地氧化物酶连结法,检测55例血抗CMV－IgM阳性的血尿患儿尿中巨细胞病毒早期抗原（CMV－EA）,并对其中6例行肾穿刺活检,进行肾组织中CMV－EA检测。结果 单纯性血尿组患儿尿CMV－EA阳性率为80％（32／40）。非单纯性血尿组患儿尿CMV－EA阳性率为20％（3／15）。对照组尿CMV－EA阳性率为19％（10／53）。单纯性血尿组尿MCV－EA阳性率明显高于非单纯性血尿组和对照组（P＜0．005,P＜0．05）。6例肾组织CMV－EA检测5例阳性（83％）。肾组织CMV感染细胞多为皮质区小管上皮细胞。结论 巨细胞病毒感染可能是单纯性血尿的主要病因。