山东产虎掌南星与市售天南星水分灰分的含量测定

目的:探讨山东GAP基地产虎掌南星药材中水分和灰分的含量限度。方法:采用《中华人民共和国药典》2000年版附录水分测定法(烘干法)和灰分测定法。结果:山东产虎掌南星与市售天南星中水分含量稍有差异;各样品间总灰分的含量差异较大,其中菏泽栽培品和曲阜野生品含量较高;酸不溶灰分含量甚微。结论:初步提出了山东产虎掌南星中水分和总灰分的含量限度。     

虎掌南星的本草考证

目的对中药虎掌南星名称、产地、原植物、加工炮制进行本草学考证。方法通过查阅历代本草文献进行考证。结果确定了虎掌南星的名称演变过程,明确了其原植物和道地产区。结论为虎掌南星资源的开发利用提供理论基础。     

虎掌南星规范化种植技术△

目的：规范虎掌南星药材的种植技术,以提高虎掌南星药材质量。方法：在多年研究和田间试验的基础上,总结规范了虎掌南星种植技术。结果：初步制订了虎掌南星规范化种植的操作技术规程。结论：规范虎掌南星种植技术对提高其质量与产量具有重要作用。     

虎掌南星药材产地加工方法的初步研究

目的：研究山东产虎掌南星的加工方法及质量。方法：采用《中国药典》2005年版附录中浸出物含量测定法、水分测定法和灰分测定法,检测去皮虎掌南星生晒品、烘干品、切片晒干品、切片烘干品、硫熏晒干品和未去皮晒干品的质量。结果：不同加工方法的虎掌南星药材质量有差异。结论：不同的产地加工方法对虎掌南星药材的质量有一定的影响。本研究为虎掌南星药材加工方法的制定积累了参考数据。     

虎掌南星HPLC指纹图谱建立

目的建立虎掌南星HPLC指纹图谱。方法该药材60%乙醇提取物的分析采用Lichrospher C₁₈色谱柱(4.6 mm×200 mm, 5μm);流动相乙腈-水;体积流量1 mL/min,梯度洗脱;柱温30℃;检测波长270 nm。结果 10批样品指纹图谱中有15个共有峰,相似度大于0.9。同一产地的药材聚为一类,前3个主成分累积贡献率达97.31%。结论该方法准确稳定,重复性好,专属性强,可用于虎掌南星的质量控制。     

天南星(虎掌南星)饮片质量研究

天南星(虎掌南星)饮片质量研究吴连英毛淑杰王孝涛程丽萍(中国中医研究院中药研究所北京100700)虎掌南星的饮片质量研究尚未见有报道。我们在虎掌南星的工艺、毒理、药效等研究的基础上,在安全有效的前题下,对其生、制品饮片性状、粉末特征、理化鉴别、已知成分及辅料白矾含量等,进行了比较研究,报道如下。1实验材料1.1原材料产自河南,购自河南禹县药材公司。经本所王孝涛研究员鉴定系天南星科植物掌叶半夏PineliapedatisectaSc....     

天南星(虎掌南星)炮制工艺改进研究

采用《药典》规定的天南星质量鉴别标准,并结合对小鼠的毒性反应为指标,优选出消除天南星毒副作用最佳辅料为白矾。通过比较提出了两种炮制合理的新工艺。中试证明新工艺用于大生产是可行的。     

虎掌南星炮制工艺研究

目的 :探讨虎掌南星炮制加工中的矾水浓度、浸泡时间及矾水温度对虎掌南星饮片物质基础的影响。方法 :虎掌南星饮片研制 ,HPLC指纹图谱的定量分析 ,多变量多因素分析。结果 :白矾浓度及其溶液体积对HPLC指纹图谱未见有影响。而温度对其有显著影响 ,且呈明显梯度变化。结论 :温热矾水浸泡将加速药用物质流失。应尽量在春秋季节的温度环境炮制虎掌南星。     

虎掌南星化学成分及其抑菌活性

目的研究虎掌南星Pinellia pedatisecta Schott的化学成分及其抑菌活性。方法虎掌南星氯仿提取物采用硅胶、ODS、MCI进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。平板法筛选最低抑菌浓度。结果从中分离得到10个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(1)、邻苯二甲酸丁二酯(2)、胡萝卜苷(3)、(2S)-1-O-十六碳酰基-2-O-亚油酰基-3-O-β-D-半乳糖基甘油(4)、diacygalactolipidⅠ(5)、(2S)-1-O-十八碳酰基-2-O-亚油酰基-3-O-β-D-半乳糖基甘油(6)、(2S)-1,2-双-亚油酰基-3-O-β-D-半乳糖基甘油(7)、(2S)-1-O-十六碳酰基-2-O-十四碳酰基-3-O-β-D-半乳糖基甘油(8)、spongilipid(9)、丙三醇(10)。对于金黄色葡萄球菌、黑曲霉菌、幽门螺旋杆菌,化合物4、7的最低抑菌浓度分别为20、30、50μg/mL,25、50、150μg/mL。结论所有化合物均为首次从该植物中分离得到,化合物4、7有较强的抑菌活性。     

虎掌南星加工炮制一体化工艺优化

目的 优化虎掌南星加工炮制一体化工艺.方法 以口尝麻辣感以及草酸钙针晶的含有量为指标,设计和建立虎掌南星产地加工炮制一体化的方法,在单因素考察的基础上,以温度、时间、白矾用量为考察因素,草酸钙针晶、水溶性浸出物及水麦冬酸含有量为响应值,采用BOX-Behnken响应面法优选制虎掌南星产地加工炮制一体化工艺.结果 最佳条件为白矾、生姜加水煮沸后,趁热投入鲜南星煮沸60 min,停火浸泡2d,再以原汁水蒸气加热,温度125℃,时间37 min,取出,洗净晾至七成干,切片.鲜虎掌南星-白矾-生姜用量比100∶ 12∶10.结论 该方法简便、稳定、可行,可用于虎掌南星的炮制.     

掌叶半夏脂溶性成分GC-MS研究

目的:分析掌叶半夏脂溶性成分的化学成分。方法:对乙醇提取后氯仿萃取得到的脂溶性成分进行了GC-MS分析。HP-5MS色谱柱(0.25 mm×0.25 mm×30 m);程序升温,进样口温度280℃,进样量1.0μL,分流比10∶1。结果:共分离鉴定出三氯乙酸1.86%,顺式-1,2-环己二醇3.56%,庚基氢过氧化物1.66%,Z型-2-十一碳烯5.54%,1-丁氧基-2-乙基己烯4.13%,吡咯并[1,2-A]吡嗪-1,4-二酮6.36%,棕榈酸23.32%,10-十一碳炔酸33.81%,环戊烷十一酸1.11%,2,5-哌嗪,3-苄基-6-异丙基2.95%,2-溴(正)壬烷1.04%,吡咯并[1,2-A]吡嗪-1,4-二酮,六氢-3(苯)5.73%,4-乙基四氢-2H-噻喃1.77%,1,2,2溴二十二烷1.26%,1,1-二氯-2,2,3,3-四甲基环丙烷2.31%,(Z,Z,Z)-6,9,12-十八三烯苯基甲基酯等19种成分。结论:进一步确定了掌叶半夏脂溶性部分的化学成分,为掌叶半夏的抗肿瘤作用深入研究提供参考。     

虎掌南星超快速Real-time VPCR闭管检测方法的建立及应用

目的建立虎掌南星Pinellia pedatisecta特异性DNA的闭管式超快速检测方法,实现对虎掌南星样本的快速鉴别。方法针对虎掌南星特异性的DNA序列设计其特异性的引物和TaqMan探针,通过对扩增体系进行优化,建立虎掌南星的超快速实时荧光VPCR扩增体系,实现对虎掌南星特异性DNA的快速扩增和闭管式实时检测。同时对该方法的特异性、灵敏度和实用性进行考察。结果可以在24 min内完成对虎掌南星特异性DNA的闭管快速扩增检测;检测限低至pg级DNA;在同科属常见近缘品种中无交叉反应;对采集的7批56个"半夏"样本进行分析,检测出2个批次共16个样本为虎掌南星,且该结果与测序结果 100%符合。结论所建方法可以作为虎掌南星的特异性检测方法,具有灵敏、快速和不易污染等优点,可以为虎掌南星和半夏药材的质量控制提供参考。     

铁皮石斛中总氨基酸的含量测定及提取工艺优选

目的:优选铁皮石斛中总氨基酸提取工艺,并建立其含量测定方法.方法:以天冬氨酸为对照品,采用UV测定铁皮石斛中总氨基酸含量;在单因素试验基础上,采用L9(34)正交试验考察提取时间、提取次数及溶剂用量对铁皮石斛中总氨基酸提取工艺的影响.结果:最佳提取工艺为加20倍量0.1 mol· L-1 HCl超声提取30 min,提取1次.结论:优选的提取工艺稳定可行,建立的含量测定方法简便、准确、重复性好.     

太白楤木总皂苷提取物的质量标准研究

目的:建立太白楤木根皮中总皂苷含量的测定方法.方法:采用TLC薄层色谱法,以甲醇-氯仿-水(6.5∶3.5∶1)为展开剂展开后,用10％硫酸乙醇溶液显色,并在105℃下加热进行鉴别.接着以香草醛-冰醋酸法显色,以屏边三七苷为对照品,在检测波长553 nm处对太白楤木总皂苷采用紫外-可见分光光度法进行含量测定.结果:在TLC色谱中,供试品与对照品色谱相应的位置上,日光下显相同的紫色斑点;紫外灯(365 nm)下显相同的紫色荧光斑点.屏边三七苷在0.020 65 ～0.123 9 g·L-1线性关系良好(r =0.999 9),平均加样回收率为100.20％,RSD 0.88％ (n =6),太白楤木根皮中总皂苷中总皂苷含量为61.30％.结论:以太白楤木根皮总皂苷含量为主要评价指标,所建立的方法准确、简便、快速,重复性好,可作为太白楤木根皮中总皂苷含量控制方法.     

姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶刺激性毒性的机制研究

为探索姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶刺激性毒性的机制,该研究采用掌叶半夏毒针晶诱导的小鼠腹腔炎症模型,观察姜辣素对小鼠腹腔炎症渗出液中炎症介质PGE2的影响;采用大鼠腹腔巨噬细胞体外培养模型,以上清液中TNF-α和IL-1β为指标,研究姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶的致炎作用;采用扫描电镜法观察姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶刺激后巨噬细胞表面形态的改变;采用巨噬细胞-中性粒细胞共培养模型,考察姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶对中性粒细胞迁移的影响。结果显示,姜辣素可以显著抑制掌叶半夏毒针晶所致的小鼠腹腔渗出液中PGE2的生成;姜辣素可以显著抑制掌叶半夏毒针晶诱导巨噬细胞释放炎症因子,并具有一定的量效关系;扫描电镜显示,姜辣素可以显著抑制巨噬细胞吞噬掌叶半夏毒针晶及细胞膜破损,并能显著抑制掌叶半夏毒针晶诱导的中性粒细胞迁移。姜辣素拮抗掌叶半夏毒针晶刺激性毒性的机制可能是抑制了包括巨噬细胞激活、炎症因子释放、中性粒细胞迁移聚集的致炎毒性。     

食用土当归中总有机酸的纯化工艺优选

目的：优选食用土当归中总有机酸的纯化工艺。方法：采用酸碱滴定法测定总有机酸含量。以总有机酸质量分数和转移率为指标,联用有机溶剂萃取法与酸碱法,通过单因素试验考察萃取溶剂、碱种类、碱用量、碱化次数、酸沉pH对总有机酸纯化工艺的影响。结果：最佳纯化工艺条件为加2倍量石油醚萃取4次,以1.0% KOH溶液作为碱化试剂,碱化数3次,加盐酸至pH 1,酸沉后用石油醚萃取3次;总有机酸质量分数由提取物的14.71%提高到65.08%,转移率达76.17%。结论：该工艺稳定可靠,可为食用土当归资源的综合利用提供实验依据。     

利用等位基因特异PCR鉴别虎掌南星及其部分混淆品

目的:建立中药材虎掌南星的分子鉴定方法,为天南星药材质量控制提供依据。方法:GenBank中下载半夏属、天南星属、犁头尖属物种的叶绿体rpl20基因序列,利用DNAMAN进行比对分析,发现半夏属和虎掌南星的SNP位点,并设计鉴别引物Ptrpl94F,Ptrpl708R和Pprpl148F,Pprpl484R,采用等位基因特异PCR方法对虎掌南星、半夏、水半夏3个物种的10个样品进行扩增。结果:引物Pprpl148F和Pprpl484R仅对虎掌南星扩增333 bp条带,半夏、水半夏均无扩增,能准确鉴别虎掌南星。引物Ptrpl94F和Ptrpl708R对半夏、虎掌南星均扩增611 bp条带,水半夏无扩增。结论:本实验建立的等位基因特异PCR方法能准确区别出虎掌南星和半夏、水半夏,为虎掌南星及半夏的正确用药提供了保障。     

UPLC法测定半夏提取物中尿苷、鸟苷和腺苷的含量

目的:建立以超高效液相色谱(UPLC)法测定半夏提取物中尿苷、鸟苷和腺苷含量的方法.方法:色谱柱ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm× 50 mm,1.7 μm),流动相水-甲醇不同比例梯度洗脱,柱温30℃,流速0.5 mL· min-1,检测波长254 nm.结果:尿苷在2.033 ～ 20.33 mg·L-1线性关系良好,回归方程为y=16 788X-3 556(r=0.999 9),平均回收率98.65％,RSD 2.12％;鸟苷在1.098 ～ 10.98 mg·L-1线性关系良好,回归方程为y =25 378X-325(r =0.999 9),平均回收率98.21％,RSD 2.32％;腺苷在0.201 2～2.012 mg·L-1线性关系良好,回归方程为Y=30800X-59(r=0.9999);平均回收率98.54％,RSD l.91％.结论:该方法准确、快速、可靠,能有效地测定半夏提取物中尿苷、鸟苷和腺苷的含量.     

半夏及不同炮制品中总游离有机酸含量比较

目的建立半夏及其不同炮制品中总游离有机酸的含量测定方法,比较半夏及其炮制品中总游离有机酸的含量。方法采用电位返滴定法,以琥珀酸为对照品,测定生品及炮制品中总游离有机酸的含量。结果分别测定了3批生品及清半夏、姜半夏中游离有机酸含量,姜半夏和清半夏中游离有机酸含量相对于生品有不同程度的提高。加样回收率为95．20％,RSD=1．81％。结论本法简便、准确、可靠,可作为半夏及其炮制品清半夏和姜半夏中游离有机酸测定方法。