丹参影响CIA大鼠血清MMP-9水平与易栓关系

目的 观察丹参对Ⅱ型胶原诱导的类风湿关节炎(CIA)大鼠血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响,探讨丹参干预类风湿关节炎(RA)炎症与易栓状态的实验研究.方法 48只SD大鼠随机分为5个实验组,皮下注射Ⅱ型胶原诱导RA大鼠模型,应用Western Blot检测各组大鼠血清MMP-9表达.结果 所有实验组MMP-9水平均高于正常对照组(P<0.05).模型组的MMP-9水平高于丹参组、甲氨蝶呤(MTX)组和丹参 MTX组;丹参组MMP-9水平高于MTX组及丹参 MTX组;MTX组MMP-9水平高于丹参 MTX组(P<0.05).结论 丹参和MTX联合使用改善RA炎症与易栓状态比药物单用组更明显,治疗效果显著优于药物单用组.     

重组血管活性肠肽基因质粒治疗大鼠胶原性关节炎的研究

目的：观察重组血管活性肠肽（pcDNA3．1＋／VIP）质粒治疗胶原诱导的大鼠关节炎（CIA）对血清TNF—α、IL～2、IL-4表达的影响和病理变化，探讨VIP基因治疗类风湿性关节炎的效果及可能机制。方法：以Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎作为CIA模型，重组血管活性肠肽质粒关节腔内注射治疗CIA，以双抗体夹心酶联免疫吸附法（ABC—ELISA）检测血清TNF—α、IL-2和IL-4的表达，观察病理变化和整体疗效。结果：①病理切片显示CIA模型组炎性细胞浸润明显，并存在骨和软骨破坏，VIP治疗组可显著减轻关节炎性病理改变；②细胞因子测定显示：与正常组相比，各对照组血清TNF—α、IL-2水平显著升高（P〈0．05），IL-4水平减低（P〈0．05）；与各对照组相比，各重组VIP质粒治疗组血清TNF—α和IL-2表达水平均明显降低（P〈0．05），IL-4表达则升高（P〈0．05）。结论：血管活性肠肽基因质粒关节腔内注射治疗大鼠CIA具有显著的疗效，有望成为RA的有效治疗手段。     

血管紧张素Ⅱ促进血管平滑肌细胞胶原合成以及其AT2受体在其中的作用

目的利用血管紧张素（AT）Ⅱ（AngⅡ）受体阻滞剂研究血管紧张素Ⅱ的1型和2型受体在血管平滑肌细胞（VSMC）胶原合成中的作用。方法实验采用自发性高血压大鼠（SHR）以及SD大鼠血管平滑肌细胞，分别分为空白对照组，血管紧张素Ⅱ作用组，血管紧张素Ⅱ＋AT1受体阻滞剂组，血管紧张素Ⅱ＋AT2受体阻滞剂组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测量上清中细胞分泌Ⅰ型胶原的含量，细胞ELISA法测量细胞中贮存的Ⅰ型胶原的含量，逆转录-多聚酶链式反应（RT-PCR）法测量Ⅰ型胶原mRNA水平的变化。结果阻断AT1受体后，两种大鼠VSMC分泌以及胞内胶原量较AngⅡ照组明显下降（P〈0．01）；阻断AT2受体后，SHR大鼠VSMC分泌以及胞内胶原量均较Angli对照组下降（P〈0．01，后者P〈0．05），而在SD大鼠中，则无明显下降。结论在胶原合成方面，源自SHR的VSMC对于AngⅡ反应性高于源自SD大鼠的VSMC。AT1受体参与AngⅡ诱导血管平滑肌细胞胶原合成的过程；AT2受体参与AngⅡ诱导SHR的血管平滑肌细胞胶原合成的过程，但是在SD大鼠的VSMC巾没有作用。     

壮药龙钻通痹方对关节炎大鼠模型致炎因子TNF-α、IFN-γ的影响

目的：观察壮药龙钻通痹方对关节炎大鼠模型致炎因子TNF-α、IFN-γ的影响。方法采用牛Ⅱ型胶原蛋白诱导关节炎大鼠模型,以甲氨喋呤（MTX）作对照,用酶联免疫分析法检测大鼠模型各组血清TNF-α、IFN-γ的表达。结果壮药龙钻通痹方能显著降低大鼠血清TNF-α、IFN-γ水平（ P 〈0.05或P 〈0.01）,其作用优于甲氨喋呤（P 〈0.05或P 〈0.01）。结论壮药龙钻通痹方能下调关节炎大鼠血清IFN-γ、TNF-α水平,可能是其治疗类风湿关节炎的作用机理之一。     

复原益肾汤对类风湿关节炎大鼠白细胞介素-17、肿瘤坏死因子-α及基质金属蛋白酶-3的影响

目的：观察复原益肾汤对Ⅱ型胶原诱导的关节炎大鼠滑膜组织病理改变及相关细胞因子表达的作用,探讨复原益肾汤治疗类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）的潜在机制。方法：以Ⅱ胶原诱导大鼠RA模型,设正常组、模型组、甲氨蝶呤（methotrexate,MTX）组、复原益肾汤高中低剂量组,测算大鼠足肿胀率;酶联免疫吸附试验法检测血清肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白细胞介素-17（interleukin-17,IL-17）水平;免疫组化法检测软骨和滑膜基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinase-3,MMP-3）水平;光镜观察大鼠足关节滑膜组织病理学变化。结果：复原益肾汤高剂量组及MTX组的RA大鼠关节炎症积分较模型组有显著降低（F=156.671,P=0.000）;中药高、中剂量组及MTX组血清中TNF-α、IL-17均有显著降低（TNF-α：F=20.233,P=0.000;IL-17：F=205.412,P=0.000）,中药高剂量组与MTX组之间无统计学差异（TNF-α：P=0.952;IL-17：P=0.142）;中药高剂量组和MTX组中软骨层及滑膜层MMP-3较模型组有显著降低（F=14.867,P=0.000）,中药高剂量组与MTX组之间无统计学差异（P=0.08）。结论：复原益肾汤可改善关节炎大鼠的病理损伤,其作用机制与抑制TNF-α、IL-17、MMP-3等炎症介质的表达密切相关,为复原益肾汤治疗类风湿关节炎提供了科学依据。     

羊源Ⅱ型胶原蛋白诱导关节炎模型相关指标的检测

目的检测羊源Ⅱ型胶原蛋白诱导关节炎模型相关指标,分析此模型的相关指标与牛Ⅱ型胶原蛋白诱导的关节炎模型的异同。方法分别用牛、羊Ⅱ型胶原蛋白免疫动物,比较两组免疫大鼠足趾容积、关节炎肿胀评分、血清细胞因子的榆测和关节滑膜病理改变。结果羊Ⅱ型胶原蛋白成功诱导出关节炎模型,与牛Ⅱ型胶原白诱导关节炎模型在造模成功率上差别无统计学意义,其中羊Ⅱ型胶原蛋白诱导组大鼠关节发病时间、关节肿胀达高峰时间及肿胀程度均早于和重于牛Ⅱ型胶原蛋白诱导组。羊Ⅱ型胶原蛋白诱导组血清细胞因子IL-1β、TNF—α升高较牛胶原蛋白诱导组更为显著（P〈0．01）。病理切片显示两模型组关节滑膜均有炎细胞浸润,滑膜细胞层次增多,排列紊乱,但牛组重于羊组。结论羊Ⅱ型胶原蛋白可诱导大鼠关节炎。     

大鼠佐剂性关节炎模型的建立与评价

目的诱导大鼠产生佐剂性关节炎（adjuvant arthritis，AA）并进行综合评价。方法大鼠左后足垫皮下注射完全弗氏佐剂（CFA）诱导AA后，采用关节炎评分法对关节肿胀程度进行评估，应用ELISA法检测大鼠血清中抗Ⅱ型胶原（Collagen Ⅱ,CⅡ）抗体的含量，并用透射电镜观察眉窝淋巴结和病变关节滑膜的超微结构的变化。结果注射CFA后模型组血清中抗CⅡ抗体含量明显升高，透射电镜显示呈典型的类风湿性关节炎病变。结论CFA能成功诱导大鼠AA模型，为研究类风湿性关节炎（rheumatoid arithritis，RA）的发病机制及药物疗效提供理想的实验模型。     

桂芍知母汤对胶原诱导类风湿性关节炎模型大鼠血清中TNF-α、MMP-2及MMP-9的影响

目的：观察桂芍知母汤对实验性胶原诱导类风湿性关节炎（CIA）模型大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）含量的影响,探讨桂芍知母汤治疗类风湿关节炎机理。方法：选用60只清洁级SD大鼠,按体重将大鼠随机分成6组,即正常组、模型组、桂芍知母汤低剂量组、桂芍知母汤中剂量组、桂芍知母汤高剂量组、激素组。用Ⅱ型胶原蛋白诱导大鼠类风湿关节炎,建立CIA大鼠模型。药物干预治疗30天后,采用ELISA方法测血中TNF-α、MMP-2及MMP-9的含量。结果：与正常组相比,模型组、桂芍知母汤各剂量组及激素组TNF-α、MMP-2及MMP-9含量显著升高（P〈0.05,P〈0.01）;与模型组相比,桂芍知母汤各剂量组及激素组TNF-α、MMP-2及MMP-9含量均显著降低（P〈0.05,P〈0.01）;与激素组相比,桂芍知母汤组与其无显著差异。结论：桂芍知母汤可降低血清中CIA大鼠血清中TNF-α、MMP-2及MMP-9水平,减少关节局部滑膜炎和软骨的破坏,对Ⅱ型胶原蛋白诱导大鼠类风湿关节炎具有一定的治疗作用。     

金雀异黄素抗Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠滑膜血管新生的研究

目的：研究金雀异黄素（genistein,Gen）对Ⅱ型胶原诱导型关节炎（typeⅡcollagen-induced arthritis,CIA）大鼠关节滑膜血管新生的影响。方法：将40只大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、Gen治疗组、甲氨蝶呤（methotrexate,MTX）治疗组和Gen＋MTX治疗组,每组8只。除空白对照组外,各组大鼠用Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂注射诱导CIA建立大鼠模型。Gen治疗组造模次日开始用药,每天胃内灌注Gen混悬液1mL,剂量为30mg/（kg.d）;MTX治疗组造模后用药,每周胃内灌注0.2mg/kg;Gen＋MTX治疗组两种药物联合应用;空白对照组和模型对照组每天灌注等量的生理盐水。造模后第6周,取膝关节用免疫组织化学法检测其滑膜的微血管密度,并取血清用Westernblotting检测血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和基质金属蛋白酶（matrix metallopeptidase,MMP）-1、2、9的表达并计算其相对含量。结果：CIA大鼠模型关节炎指数评分、后肢容积及关节滑膜组织病理情况与正常大鼠比较差异有统计学意义（P〈0.05）,提示造模成功。Gen可使CIA大鼠关节滑膜新生血管数目明显减少,且滑膜炎症较模型对照组轻,同时还能降低血清中VEGF和MMP-1、2、9蛋白的表达。结论：Gen可能通过抑制VEGF和MMP-1、2、9的表达而发挥抗滑膜血管新生的作用,从而延缓病情的发展。Gen联合MTX治疗效果可能更强。     

复方丹参片对类风湿性关节炎大鼠胫骨形态计量学静态参数的影响

目的研究复方丹参片对大鼠类风湿相关骨质疏松的对抗作用。方法利用皮下注射牛Ⅱ型胶原诱导SD大鼠发病,建立胶原诱导性关节炎（collagen induced arthritis,CIA）大鼠模型,设立正常对照组、实验对照组和实验组（复方维生素D组及不同剂量的复方丹参组）,分别给予灭菌用水、复方维生素D及不同剂量的复方丹参处理2月后,比较各组大鼠胫骨的干重、湿重、长度、周径以及骨组织形态计量学静态参数。结果实验各组及实验对照组中大鼠胫骨的湿重、干重及骨组织形态计量学静态参数显著低于正常对照组,而实验各组大鼠胫骨的上述参数显著高于实验对照组。结论复方丹参能部分抵抗类风湿疾病引起的骨质破坏和骨质疏松。     

血管紧张素Ⅱ受体阻断对成年大鼠心肌成纤维细胞Col I和TIMP-1 mRNA水平的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）2型受体（AT2）在心肌成纤维细胞胶原代谢中的作用，以及AT2受体和AngⅡl型受体（AT1）作用的差异。方法差速贴壁分离及培养成年SD大鼠心肌成纤维细胞，将细胞分为4组进行药物干预：AngⅡ组、AngⅡ＋Losartan（ATl受体阻断剂）组、AngⅡ＋PD123319（AT2受体阻断剂）组、AngⅡ＋Losartan＋PDl23319组．应用半定量RT—PCR检测4组细胞中的I型胶原（Col I）、组织蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）mRNA水平的表达。结果以β-actin作为内参照，ATl受体阻断使Col I mRNA水平降至原水平的71．8％（P〈0．05），AT2受体阻断降至81．5％（P〈0．05），共阻断降至50．9％（P〈0．05）；ATl受体阻断使71，MP-1mRNA水平降至原水平的88．1％（P〈0．05），AT2受体阻断降至75．4％（P〈0．05），共阻断后降至44．1％（P〈0．05）。结论在成年大鼠心肌成纤维细胞，AT2受体阻断下调Col I和TIMP1 mRNA水平，说明AT2受体参与胶原的合成与降解代谢，有促进心肌纤维化的作用。     

胰激肽释放酶和缬沙坦对自发性高血压大鼠左室肥厚、一氧化氮及血管紧张素Ⅱ水平的影响

目的 探讨胰激肽释放酶单用或与缬沙坦联合应用对自发性高血压大鼠（SHR）左心室重构的作用及对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平、血清一氧化氮（NO）含量的影响。方法 选用雄性15周龄的SHR24只、WKY大鼠8只，分为4组：①SHR阳性对照组（SHR）；②胰激肽释放酶组（SHR-TPK组）；③缬沙坦＋胰激肽释放酶组（SHR—Val＋TRK（组）；④WKY阴性对照组（WKY）。实验期8周。放免法测定血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、化学法检测血浆一氧化氮（NO）水平，常规测量各组收缩压（SBP）、左心室重量指数（LVMI）、心肌胶原体积比例（CVF）和心肌血管周围胶原与管腔面积的比例（PVCA）。结果 SHR组的SBP，LVMI，CVF，PVCA，AngⅡ水平明显增高而血清NO含量明显下降，与WKY组相比差异有显著性（P〈0．01）；治疗组（TPK组；Val＋TPK组）SBP，LVMI，CVF及PVCA均显著下降（P〈0．01），血清NO水平明显升高（P〈0．01），Val＋TPK组血浆AngⅡ水平显著上升（P〈0、01），而心肌AngⅡ水平明显下降（P〈0．01），TPK组心肌局部和血浆AngⅡ变化不明显。结论 缬沙坦和胰激肽释放酶均能有效的改善高血压左室重构，两者合用效果佳。     

含笑内酯对类风湿关节炎小鼠模型治疗作用研 究!简

目的探讨含笑内酯对类风湿关节炎DBA／1小鼠模型的治疗作用。方法将40只6周龄雄性DBA／1小鼠随机分为4组：未处理的空白对照组（Nor组）、诱导发病并注射甲氨蝶呤药物的甲氨蝶呤治疗组（MTX组）、诱导发病并注射含笑内酯的实验组（MCL组）和诱导发病并注射DMSO的模型对照组（Con组）,用牛Ⅱ型胶原法诱导MTX、C0n和MCL组小鼠发病建立类风湿关节炎模型;在二次免疫注射24h后开始隔天腹腔注射给药并对小鼠体重和关节炎发病情况进行隔天观察,给药28次后停止用药,眼球取血、蛋白芯片测血清中细胞因子,处死小鼠取爪子及膝盖做组织病理学检查。结果成功构建了DBA／1小鼠类风湿关节炎模型;各组小鼠之间体重差异无统计学意义（P〉0．05）;关节炎评价显示MCL组低于Con组（P〈0．01）,高于MTX组（P〈0．01）;病理结果显示Nor组小鼠组织正常．Con组受累关节m现炎症细胞浸润、滑膜增生、炎性肉芽组织形成、坏死组织等症状,MCL组与MTX组受累关节仅出现轻于Con组的炎症细胞侵润、滑膜增生等症状;小鼠血清细胞因子检测结果共显示m6种细胞因子：C5／C5a、TIMP-1、M—CSF、sICAM-1、IFN-吖和BLC;Con组的类风湿关节炎小鼠中C5／C5a、TIMP-1和M—CSF表达量降低,经含笑内酯治疗的MCL组中这些因子均有不同程度的恢复（P〈0．01）,仅仅在MCL组中检测到BLC表达。结论含笑内酯对小鼠DBA／1类风湿关节炎具有治疗作用,C5／C5a、TIMP-1、M—CSF和BLC等因子在这-过程发挥不同的作用。     

烟碱样胆碱能通路对胶原性关节炎大鼠的作用研究

目的探讨烟碱样胆碱能通路对胶原性关节炎（CIA）的作用，为关节炎等自身免疫性疾病寻找新的治疗途径。方法建立大鼠CIA模型，将模型大鼠分为迷走神经刺激（VNS）组和假手术组，VNS组在完全清醒状态下给予持续迷走神经刺激（5v，2ms，1HZ），每天30min，共4周。观察2组大鼠的病理和关节炎指数变化，用免疫组织化学和RT—PCR技术检测大鼠烟碱样乙酰胆碱受体α7亚单位（nAChRα7）和胆碱乙酰转移酶（ChAT）及乙酰胆碱酯酶（AChE）在关节滑膜的蛋白和基因表达。结果治疗4周后，VNS组大鼠关节炎指数明显低于假手术组（P〈0．01）；VNS组大鼠躁关节组织病理改善明显高于假手术组（P〈0．01）：免疫组化和RT—PCR检测nAChRα7、ChAT蛋白和mRNA表达均明显高于假手术组（P〈0．01）；各组大鼠AChE蛋白和基因水平表达均差异无显著性（P〉0．05）。结论电刺激迷走神经可以上调nAChRα7、ChAT基因在免疫组织的表达，减轻胶原性关节炎大鼠的炎症，提示烟碱样胆碱能通路在治疗胶原性关节炎中有重要作用。     

关节炎丸对类风湿性关节炎大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α含量的影晌

目的探讨关节炎丸对类风湿性关节炎大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α含量的影响。方法建立类风湿性关节炎大鼠模型。用放射免疫法检测大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α的含量。结果与空白组比较,模型组各指标含量均增高,差异有统计学意义（P〈0．01）;与模型组比较,关节炎丸大、小剂量组及雷公藤阳性对照组各指标含量均有不同程度下降,差异有统计学意义（P〈0．05）;与雷公藤阳性对照组比较。关节炎丸大、小剂量组各指标含量下降,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论关节炎丸能控制类风湿性关节炎大鼠血清IL-1、IL-6和TNF-α等炎性细胞因子的活性,对类风湿性关节炎有很好的治疗作用。     

STAT3对大鼠重症急性胰腺炎血清体外作用AT-ⅡSP-C的影响

目的探讨信号转导-转录活化因子3（Stat3）信号通路在大鼠重症急性胰腺炎血清体外作用于肺泡Ⅱ型上皮细胞（AT-Ⅱ）的影响。方法原代培养肺泡Ⅱ型上皮细胞分成：①对照组：加入不含大鼠胰腺炎血清的DMEM培养液的正常AT-Ⅱ;②SAP组：加入含大鼠胰腺炎血清的DMEM培养液的正常AT-Ⅱ;③SAP＋AG490组：用AG490预处理细胞,加入含大鼠胰腺炎血清的DMEM培养液的正常AT-Ⅱ。EMSA法测STAT3活化状态;RT-PCR检测mRNA水平;流式细胞技术检测AT-ⅡSP-C表达。结果与对照组比,SAP组STAT3活性增强,STAT3 mRNA表达增强（P〈0．05）,SP-C蛋白表达下降（P〈0．01）;与SAP组比,SAP＋AG490组STAT3活性减弱,STAT3 mRNA表达减弱（P〈0．01）,SP-C蛋白表达下降（P〈0．01）。结论JAK激酶／转录信号传导和激活因子3（Stat3）信号传导通路参与重症急性胰腺炎中AT-Ⅱ的损伤的病理生理过程。     

甲氨蝶呤对CIA大鼠血清软骨寡聚基质蛋白的作用

目的探讨甲氨蝶呤（MTX）对CIA大鼠血清软骨寡聚基质蛋白水平的调节作用。方法选取SD大鼠30只,随机分为3组,其中10只未经行造模,未进行移植治疗为空白对照组;另20只造模成功后为两组：标准对照组及MTX治疗组。MTX治疗组每周予以MTX 5mg/kg灌胃×3次,空白组予以同等剂量的生理盐水,每周断尾取血1.5ml。留取血清比较三组的软骨寡聚基质蛋白（COMP）数值。结果造模组血清COMP水平明显高于标准对照组;血清COMP水平与大鼠关节炎指数明显相关;MTX治疗组血清COMP水平明显高于标准对照组,比较有显著性差异（P〈0.05）。结论血清软骨寡聚基质蛋白水平在急性炎症关节炎中明显升高,与炎症指数相关,MTX治疗组可以下调炎症关节炎血清软骨寡聚基质蛋白水平,从而延缓大鼠软骨的破坏进程。     

类风湿关节炎患者血清抗Ⅱ型胶原抗体检测的临床意义

目的探讨Ⅱ型胶原抗体在类风湿关节炎患者早期诊断和发病机制的意义。方法检测60名健康志愿者（正常对照组）、120名活动期类风湿关节炎患者（RA组）,及60名其它结缔组织病患者（阳性对照组）的血清中抗Ⅱ型胶原抗体、抗环瓜氨酸多肽抗体、血沉及C反应蛋白的水平。结果（1）RA组患者血清抗Ⅱ型胶原抗体水平明显高于正常对照组,两者比较差异有统计学意义（p〈0.01）。阳性对照组抗Ⅱ型胶原抗体检出率为5%（3/60）,与RA组患者相比差异有统计学意义（p〈0.01）。（2）早期类风湿关节炎患者抗Ⅱ型胶原抗体阳性率为66.3%（34/50）,病程大于1年的患者抗体检出率为22.4%（16/70）,两者比较差异有统计学意义（p〈0.05）。（3）抗Ⅱ型胶原抗体阳性组,其抗环瓜氨酸多肽（CCP）抗体阳性检出率为88%（44/50）;抗Ⅱ型胶原抗体阴性组,其抗环瓜氨酸多肽（CCP）抗体阳性检出率为47%（33/70）,两者比较差异有统计学意义（p〈0.05）。同时在抗Ⅱ型胶原蛋白阳性组C反应蛋白和血沉水平都明显高于抗Ⅱ型胶原抗体阴性组。结论抗Ⅱ型胶原抗体在类风湿关节炎的发病机制和疾病活动度中有十分重要的作用,抗Ⅱ型胶原抗体的检测对于类风湿关节炎早期的检测有非常重要的意义。     

类风湿性关节炎患者血清PRL水平检测的意义

目的探讨类风湿性关节炎患者检测血清（PRL）催乳激素水平的临床意义。方法采用发光免疫分析检测50例类风湿关节炎患者血清中PRL含量并设35名正常人作对照。结果类风湿关节炎患者血清中PRL水平显著高于正常人组（P〈0．05），活动性和非活动性差异有非常显著性（P〈0．05）。结论PRL含量的测定对类风湿性关节炎患者发生、发展具有一定的实际意义。