小鼠骨髓基质细胞系QXMSC1促进骨髓移植后的造血重建

目的：观察骨髓基质细胞系QXMSC1在骨髓移植后早期能否加速造血重建。方法：用脾克隆形成单位（CFU-S）测定QXMSC1对造血干细胞的影响。计数每根股骨有核细胞数，用半固体琼脂克隆形成法测定粒单系祖细胞（CFU－GM），微量甲基纤维素法测定红系祖细胞（CFU-E及BFU－E）。结果：QXMSC1细胞可明显增加CFU－S克隆数。在骨髓移植后第10天，QXMSC1可增加骨髓有核细胞数，增加CFU－GM、CFUE克隆数。移植后第20天，这些作用更明显，且对BFU-E也有明显的刺激作用。结论：骨髓基质细胞系QXMSC1与骨髓细胞共移植可明显促进骨髓移植后早期造血功能重建。     

免疫对辐射损伤小鼠造血重建的影响(二)预防免疫的作用

采用造血干细胞及造血祖细胞体内、外培养方法,观察其免疫刺激剂短小棒状杆菌预防小鼠对辐射损伤小鼠造血—免疫重建的影响。结果表明:提高小鼠免疫水平有利于免疫嵌合体形成并促进造血重建过程。主要表现机体具有促进和调节造血干细胞增殖与分化。双重机能的作用。然后早期以CFU—S增殖为主,继之为CFU—S分化增强期。提示我们,这种,处置可能是促进同种骨髓移植个体免疫耐受性的建立。这将是抑制GVHR发生的根本措施。     

小鼠骨髓基质细胞系QXMSC1促进骨髓移植后的造血重建

目的：观察骨髓基质细胞系ＱＸＭＳＣ１在骨髓移植后早期能否加速造血重建。方法：用脾克隆形成单位测定ＱＸＭＳＣ１对造血干细胞的影响。计数每根股骨有核细胞数，用半固体琼脂克隆形成法测定粒单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ），微量甲基纤维素法测定红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ）。结果：ＱＸＭＳＣ１细胞可明显增加ＣＦＵ－Ｓ克隆数。在骨髓移植后第１０天，ＱＸＭＳＣ１可增加骨髓有核细胞数，增加ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ     

造血基质干细胞的研究Ⅱ.异位移植骨髓的造血重建

通过原位造血重建的观察,发现骨内膜细胞及小梁内细胞很可能是支持造血细胞机能的基质细胞的源泉。本实验又以异位移植的造血重建的分析,进一步证实了异位移植的股骨可以而且能重建造血。在重建造血过程中,原有髓腔内的组织、细胞几乎全部变性和坏死,而小梁或皮质内细胞成分则增生活跃、进入髓腔,作为造血微环境的主要成分支持宿主迁徙来的造血干细胞的机能,从而完成造血重建过程。但经15Gy以上照射的移植物(股骨)则完全丧失诱导造血重建的微环境作用。     

豚鼠基质祖细胞在造血放射损伤修复中的作用——对辐射损伤后输注骨髓细胞的影响

经心腔给受照4.5Gy豚鼠混输CFU=F和BMC后1、2周,检查股骨骨髓细胞数、CFU-E和CFU-F等指标,发现混输CFU=F组均较只输BMC组者明显增高。认为附加基质输注后,经血循环向受体骨髓迁徙,定居并能迅速增殖,创建适宜的造血微环境,从而促进了造血辐射损伤的再建。     

白细胞介素-6对照射后小鼠造血的影响

我们观察了白细胞介素一6（IL－6）对照射后小鼠造血的影响。现报告如下。l材料和方法BALB八小鼠、RPMll640培养基、马血清和集落刺激因子、IL－6等。粒单系集落形成单位（CFU－GM）的培养方法见刘及主编：辐射血液学。钻‘’治疗机。将小鼠随机分3组，经‘Gy钻”照射后立即分别腹腔注射不同浓度IL－e连续3天，于不同时间测定各组小鼠每根股骨的有粒细胞数、有丝分裂相及CFU－GM产率。2结果（表1，2，3）表IIL－6对有粒细胞数的影响（n—16，王士S）表2IL－6对CFU－GM产率的影响（n—16，三土S）突3if，－6对骨暗细脑右么分…     

Υ射线850伦辐照后小鼠造血干细胞增殖分化的调节

本文观察850伦辐照后造血干细胞生成的恢复与调节。小鼠30天死亡79.3%。造血细胞最大的抑制:~3H-TdR掺入率8%(24h);CFU-S 3%(48h);有核细胞数3%(96h)。细胞内cAMP含量照后显著增加。~3H-TdR掺入率照后4～5天开始上升表明造血干细胞增殖活力的恢复。细胞数量和cAMP是造血干细胞增殖分化恢复的重要的调控信息。     

肝细胞生长因子对骨髓移植小鼠造血重建的促进作用

目的 观察肝细胞生长因子（HGF）对骨髓移植小鼠造血重建的促进作用。方法 用BALB／c小鼠建立同基因骨髓移植模型，随机将BALB／c小鼠分A、B两组，B组移植后叶7d皮下注射HGF，A组皮下注射PBS，移植后1、7、14、21和28d检测小鼠血红蛋白、白细胞、血小板、骨髓单个核细胞及骨髓造血细胞面积。结果 B组血红蛋白在移植后7、14d与同期A组无差异（P〉0．05），B组血红蛋白在移植后21d高于同期A组（P〈0．05）；B组血小板在移植后7、14及21d高于同期A组（P值分别小于0．01、0．01和0．05）：B组白细胞在移植后7、14、21及28d高于同期A组（P值分别小于0．01、0．01、0．05及0．05）；B组骨髓单个核细胞及骨髓造血细胞面积在移植后7、14、21和28d高于同期A组（P值分别小于0．05、0．01、0．01及0．05）。结论 HGF对骨髓移植小鼠造血重建有一定的促进作用。     

当归补血汤对内皮细胞和骨髓造血细胞的增殖和分化作用

目的：探讨当归补血汤对内皮细胞及骨髓造血细胞的刺激增殖和诱导分化作用。方法：在培养的内皮细胞及骨髓造血细胞半固体和液体培养体系中加入不同浓度的当归补血汤，采用流式细胞术、双抗夹心法检测其对内皮细胞及骨髓造血细胞增殖的影响。结果：当归补血汤能够促进内皮细胞由G1期进入S期及细胞因子的分泌，但对BFU—E，CFU—E，CFU—GM和CFU—MK集落产率的提高及细胞表面表达CD13和CD71的细胞数量没有统计学上的意义。结论：在体外，当归补血汤能够促进内皮细胞的增殖及细胞因子的分泌，但未发现促进骨髓造血干细胞增殖与分化的作用。     

造血基质干细胞的研究Ⅰ.原位骨髓的造血重建

用大剂量电离辐射破坏小鼠一侧肢体的骨髓造血组织,在完整机体调节下,伤肢造血重建很快完成。其重建造血机制,除了目前公认的体内其它未受损伤的造血组织内造血干细胞向伤肢迁徙、定居并增殖外,还有环境因素的作用。本文发现并提出在造血重建过程中,骨内膜或骨质内细胞成分很可能起有重要作用。它提示我们,作为支持造血实质细胞机能的微环境核心成分——基质细胞有可能起源于骨内膜或骨皮质。     

造血基质干细胞的研究——Ⅳ.骨髓造血重建的细胞来源

通过对原位及异位移植股骨骨髓造血重建过程的研究,我们发现了移植物的骨内膜或骨皮质及骨小梁内细胞在诱导造血恢复上起着重要作用;骨皮质內含有造血微环境中的全部因素。本文观察了移植的骨皮质内造血重建的动态变化过程。即首先是基质细胞增殖、分化,包括骨小梁及血窦的形成,然后出现造血细胞增生。初步认为,作为诱导造血重建的环境因素的主要成分基质细胞来源于骨皮质。推断在正常机体中,骨髓内分化的基质细胞执行着支持实质细胞正常功能的作用,处于未分化的Go期的母细胞,则作为后备力量储存在骨皮质或骨小梁内(骨内膜细胞为中间阶段)。在整体调节下,二者保持着动态平衡状态。     

无细胞胎肝液对大剂量化疗后小鼠骨髓造血细胞的影响

采用小鼠体内液体扩散盒及脾结节法观察了胎鼠和成年小鼠肝脏无细胞液对大剂量环磷酰胺化疗后小鼠骨髓造血细胞增殖与分化的影响。发现无细胞胎肝液能明显促进受抑制骨髓中多能造血干细胞(CFU—S)的集落形成率,但对扩散盒内粒系祖细胞(CFU—D)的增殖分化无促进作用。成年鼠肝无细胞液则对造血细胞的增殖无刺激活性,不能促进化疗后小鼠骨髓中造血干细胞恢复。认为无细胞胎肝液中存在的造血刺激因子能有效缓解细胞毒剂对骨髓多能造血干细胞的抑制。     

芪加口服液对辐射损伤小鼠造血功能的保护作用

目的研究芪加口服液对电离辐射损伤小鼠造血功能的防护作用。方法 50只小鼠按数字表法随机分为对照组、模型组、芪加口服液低、中和高剂量组(100、200、400 mg/kg),60Coγ射线照射,吸收剂量6.0 Gy。测定白细胞数、脾指数、内源性脾结节数、骨髓有核细胞数和骨髓DNA含量。结果照后第9天给药组受照小鼠的股骨有核细胞数、DNA含量、白细胞数、脾结节和脾指数与模型组相比均有明显的增高(P<0.01或P<0.05)。结论芪加口服液对辐射损伤小鼠造血系统有保护作用。     

人工合成成骨生长肽对辐射损伤小鼠造血功能的保护作用

目的　探讨人工合成成骨生长肽 (sOGP)对辐射损伤小鼠造血功能的保护作用 ,阐明其剂量 效应关系。方法　以 4 .0和 7.5Gy13 7Csγ射线照射小鼠为模型 ,采用皮下注射和肌肉注射 2种给药途径连续 8d给予sOGP ,剂量范围为 0 .0 39～ 6 4 0nmol/(kg·d) ,观察外周血象、骨髓有核细胞数、骨髓粒系造血祖细胞集落形成(CFU G)、骨髓细胞分类和骨髓切片组织学等的变化。结果　sOGP能加快受照小鼠外周血白细胞、骨髓有核细胞数的恢复 ,在一定的剂量范围内呈明显的剂量依赖性 ,并能刺激髓外造血 ;促进 (CFU G)形成作用显著高于重组人粒系集落刺激因子 (rhG CSF)约 2倍 ;骨髓病理学观察显示sOGP能加快受照小鼠骨髓造血组织损伤的恢复 ,刺激骨髓粒系增生。结论　sOGP可明显促进受照射小鼠造血功能的恢复 ,其机制可能是通过作用于早期造血阶段或 (及 )改善微环境进而促进造血。     

钝顶螺旋藻多糖对辐射所致小鼠造血功能抑制的对抗影响

目的　观察钝顶螺旋藻多糖 (Spirulinaphatensispolysaccharide ,SPP)对辐射损伤小鼠造血功能的影响。方法　小鼠5Gy全身照射后 5、10、15d分别取材 ,作骨髓粒单系、红系造血祖细胞培养 ,造血干细胞集落测定 ,以及外周血常规计数等。SPP用量为 12 5mg·kg 1 ·d 1 ,ip,伤后连续注射 6d。结果　辐射损伤后骨髓有核细胞数、粒单系CFU GM、红系CFU E、BFU E及造血干细胞CFU S集落数均显著低于正常对照组 (P <0 .0 1) ,但应用SPP后 ,上述各项指标数值 ,均比同伤情的不用药组显著提高 ,尤以伤后10d恢复最快 (P <0 .0 1)。结论　SPP对辐射损伤有明显保护和促进造血恢复的作用。     

当归多糖动员的造血干/祖细胞移植重建小鼠造血功能的研究

目的 探讨当归多糖（Angelica polysaccharides,APS）动员的造血干／祖细胞（hematopoietic stem／progenitor cell．HSPC）对造血衰竭小鼠造血功能重建的作用。方法 将APS动员的雄性BALB／c小鼠的外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC）静脉输注给受到8．5Gy^60Coγ射线照射的雌性同系受体小鼠;观察受体小鼠外周血白细胞（WBC）、血红蛋白（HGB）、血小板（PLT）的变化及30d存活情况;采用PCR方法鉴定其造血重建的来源。结果 APS组受体小鼠WBC、PLT、HGB、30d存活数均明显高于对照组和NS组（P〈0．05）;对APS组存活小鼠进行Y染色体PCR分析,证实雌性受体小鼠重建的造血细胞来自雄性供体。结论 APS动员的小鼠外周血HSPC移植后能够重建造血衰竭小鼠长期造血。     

E838对放烧复合伤造血功能防护效应的实验观察

目的 研究新型抗放药E838对放烧复合伤和单纯放射损伤造血功能的防护效果。方法 动物致伤前、后不同时间给予E838腹腔注射,观察其存活率和死亡动物平活日,并在用药后不同时间检测其外周血白细胞计数,骨髓有核细胞数（BMNC）、骨髓CFU－GM和CFU－S数。结果 E838预防用药能够明显提高损伤动物的30d存活率及平均活存时间;对造血功能的研究结果亦表明,E838预防用药能够减少伤后外周血白细胞、骨髓有核细胞数、骨髓粒－单系祖细胞数及GFU－S等计数的下降幅度,并促进其恢复。结论 E838对放烧复合伤和单纯放射损伤具有确切的预防效果,对损伤小鼠造血功能也有很明显的保护作用。     

bcl-2基因转染小鼠造血干细胞重建造血的生物学特性

目的 观察ｂｃｌ－２基因转染小鼠造血干细胞重建造血的小鼠对放化疗的抵抗作用。方法 （１）含ｂｃｌ－２ｃＤＮＡ的逆转录病毒载体质粒,经脂质体介导转染ＰＡ３１７包装细胞,通过Ｇ４１８筛选和克隆,获得高病毒滴度的细胞株（Ｄ３）;（２）用Ｄ３细胞株的病毒上清转染小鼠胚胎肝造血干细胞;（３）经致死剂量照射小全注ｂｃｌ－２转 造血干细胞重建造血;（５）采用脾集落形成和再增殖能力观察ｂｃｌ－２转因干细胞重建造血     

照射骨髓基质细胞对辐射损伤小鼠造血重建的影响(摘要)

<正> 采用辐照方法将骨髓基质细胞(BMSC)预先强化,再经体外培养、富集后与骨髓细胞(BMC)一起经尾静脉输注给全身致死剂量照射的小鼠。采用股骨BMC计数。CFU-GM和CFU-S测定及股骨切片组织学观察等方法研究了这种细胞对辐射损伤小鼠造血重建的影响,结果表明输入的BMSC对辐射损伤小鼠造血重建具有促进作用,进一步研究表明,这种细胞对辐射损伤小鼠造血重建的促进作用是通过其经血循环迁徒至造血组织后,对同时输入的BMC中的HSC增殖和分化发挥支持和刺激作用来实现的。本法为提高BMT     

白血病患者自体造血干细胞移植后造血重建过程观察

目的：了解造血干细胞移植后骨髓造血功能重建变化规律。方法：对7例资料完整的白血病患者自体造血干细胞移植后血常规及骨髓象进行分析。结果：造血干细胞移植后1-2周骨髓呈极度抑制，第3周出现恢复征象，5-6周骨髓造血恢复正常；平均血小板体积（MPV）在预处理后明显下降，随着造血功能恢复而逐步回升，早于粒细胞数，血小板数回升。结论：预处理后1-2周时骨髓极度受抑，巨核系恢复较慢、预防出血措施应持续至5-6周；平均血小板体积（MPV）变化与骨髓造血功能有关，出现时间较早，可做为观察造血干细胞植入和骨髓造血重建的指标。