同病异证H22肝癌小鼠肿瘤组织细胞凋亡通路基因差异表达的特征

目的:观察昆明种H22肝癌小鼠邪毒壅盛证与气虚证肿瘤组织细胞凋亡通路基因表达特征,探讨中医同病异证发生的物质基础。方法:采用小鼠计量化辨证方法,筛选出瘤早期邪毒壅盛证与气虚证同病异证H22肝癌小鼠,采用Affymetrix GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array检测肿瘤组织细胞凋亡通路相关基因表达的特征。结果:依据KEGG数据库细胞凋亡通路,筛选出芯片数据中匹配的33个基因,发现(1)TNF-α和IL-1依赖的细胞凋亡信号通路总体上不利于邪毒壅盛证小鼠肿瘤细胞的凋亡;(2)IL-3依赖的细胞凋亡信号通路总体上反似有利于邪毒壅盛证小鼠肿瘤细胞凋亡;而(3)线粒体介导的细胞凋亡信号通路,邪毒壅盛证小鼠一致表达下调,提示不利于其细胞凋亡。结论:邪毒壅盛肝癌小鼠肿瘤细胞恶性增殖程度高,可能与线粒体介导的细胞凋亡信号通路系列相关基因表达轻度抑制有关。     

同病异证H22肿瘤小鼠内分泌-免疫网络的物质基础

目的:揭示同病异证肿瘤小鼠内分泌-免疫网络的物质基础。方法:采用标准化诊法技术在接种同样H22腹水癌细胞数的肿瘤小鼠中筛选出不同组别的同病异证肿瘤小鼠,ELISA法检测血清内分泌-免疫网络有关激素与分子含量。结果:筛选出邪危组、邪毒组、邪中组、邪微组及邪中兼气虚组等5个同病异证组别小鼠,发现其ACTH、醛固酮、TSH、T3、T4、FT3、FT4、睾酮、IL-2、IL-10、IL-12、TNF-α、IFN-γ等含量与同病异证有着对应性改变。结论:荷瘤小鼠存在同病异证且有其内在复杂及特征性的内分泌和免疫系统改变,这为荷瘤小鼠个体化辨证论治及其疗效评价提供了客观依据,也为比较和优化辨证论治方案提供了模式生物的依据。     

同病异证H22肝癌小鼠甲状腺AC-cAMP信号通路基因差异表达的特征

目的 观察同病异证H22肝癌小鼠甲状腺AC-cAMP信号通路基因差异表达的特征.方法 采用小鼠计量化四诊和辨证方法及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,观察肿瘤邪毒证、气虚证甲状腺激素生成和释放相关AC-cAMP信号通路及相关基因表达特征.结果 ①一些基因相对关键,Tg和转录因子Pa...     

甲状腺激素释放相关水解酶基因在H22肝癌小鼠早期不同证候中的表达特征

目的：研究甲状腺激素释放相关主要水解酶基因在H22肝癌小鼠早期不同证候中的表达特征。方法采用标准化诊法技术筛选出早期邪毒证、气虚证H22肿瘤小鼠,先采用Affeymetrix基因芯片技术,初步获得甲状腺球蛋白（Tg）,即甲状腺激素前体蛋白,及其相关的水解酶基因表达特征,并筛选主要差异表达基因;进而重复实验,RT-PCR检测主要差异表达基因的变化,同时ELISA检测血清甲状腺激素T3和T4水平。结果①初次实验芯片结果,Tg及其释放相关重要的水解酶：组织蛋白酶B（Ctsb）、组织蛋白酶D（Ctsd）、组织蛋白酶l（Ctsl）、天冬氨酸肽酶（Napsa）、三肽酶I （Tpp1）在肝癌小鼠早期邪毒证、气虚证呈下调趋势[Tg（邪毒0.77、气虚0.84）、Ctsb（邪毒0.83、气虚0.91）、Ctsd（邪毒0.79、气虚0.95）、Ctsl（邪毒0.95、气虚0.65）、Napsa（邪毒0.78、1.05）、Tpp1（邪毒0.75、0.94）],以邪毒证下降尤甚。②酶联免疫吸附试验（ELISA）表明,在邪毒证[T3为（1.519±0.162）ng/ml、T4为（2.194±0.305）μg/dl]和气虚证[T4为（4.366±0.727）μg/dl]均出现下调,且邪毒证尤甚（P＜0.01）,与两批次Tg转录水平的变化相一致;③对Ctsb等基因的RT-PCR检测结果表明,Tg（邪毒0.22、气虚0.38）、Ctsb（邪毒0.31、气虚0.55）、Ctsd（邪毒0.36、气虚0.78）、Napsa（邪毒0.24、气虚0.59）基本一致,Ctsl（邪毒1.24、气虚2.11）和Tpp1（邪毒2.85、气虚0.85）虽趋势相同,但在气虚证表达量大于同期邪毒证上则始终一致。结论综合不同批次实验结果,H22肝癌小鼠早期甲状腺功能受到抑制,且邪毒证抑制程度更重。     

邪毒壅盛证H22荷瘤小鼠肿瘤组织基因的表达特征研究

目的揭示H22荷瘤小鼠邪毒壅盛证肿瘤组织基因表达的特征。方法采用GeneChipMouseExon1．0STArray等技术及芯片分析方法,观察H22荷瘤小鼠邪毒壅盛、早期气虚、中期阳气虚及中晚期气阴阳虚证肿瘤组织基因表达的差异。结果筛选到邪毒壅盛证独特性高表达的基因32个,其中包括Tete3、Phf7、Ldhc等参与睾丸发育、精子或卵子发生的基因22个,Adipoq、Nream、Tnfaip6等与肿瘤有关的基因4个,以及Atp8b3、Pnpla3、Retn等其他功能的基因6个。筛选到邪毒壅盛证独特性低表达的基因2个,有Cort和LOC668417。结论邪毒壅盛证H22荷瘤小鼠肿瘤组织中存在大量独特性表达的基因,可能是该证候与其他证候区别的内在特征。     

不同证候小鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴基因表达的特征

目的：观察不同证候小鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴（HPTA）相关主要已知基因表达的特征。方法：采用小鼠计量化四诊和辨证方法、及GeneChip Mouse Exon 1.0 STArray等技术,观察正常偏气虚证小鼠、早期邪毒壅盛证和早期气虚证荷瘤小鼠HPTA相关基因表达差异。结果：（1）正常小鼠气虚证者,甲状腺机能减退,Atp1a1、Atp1a2、Atp1a3、Atp1b1、Atp1b2、Pax8、Tg、Tpo、NIS等与甲状腺素合成有关基因的表达水平一致下降;而垂体、下丘脑处于积极的代偿之中,TRH、TSH等激素表达增加。（2）肿瘤发生后的早期,荷瘤小鼠亦出现甲状腺机能的减退,垂体、下丘脑亦处于积极的代偿之中,TRH、TSH等激素表达增加。但是,该阶段邪毒壅盛证小鼠,垂体已出现失代偿的征兆,TSHb的表达量已显著低于同期的气虚证以及正常气虚小鼠。结论：甲状腺机能减退可能是气虚证发生的重要基础,而非下丘脑和垂体。荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证垂体继发的失代偿表现,可能与该证候荷瘤小鼠带瘤生存期短、预后差有关。     

H22荷瘤小鼠不同阶段及证候的甲状腺上下调高表达基因

目的:揭示荷瘤小鼠甲状腺不同阶段上下调高表达基因特征.方法:采用荷瘤小鼠及其标准化四诊及辨证方法,以及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,检测H22荷瘤小鼠早期邪毒壅盛证和气虚证、中期阳气虚证、中晚期气阴阳虚证4个证候甲状腺上下调基因,重点关注那些高表达量的基因.结果:早期邪毒壅盛证和气虚证同时上调高表达基因1个即Ifi27,下调高表达基因2个即AY036118和Dub2a;中期阳虚证上调高表达基因25个,如Clec2g和Probe号6809296的基因等,下调高表达基因5个即Klklb27,Crispl,Fas,H2-Ea和GOs2;中晚期气阴阳虚证上调高表达基因1个即Miff,下调高表达基因3个即Spare,Col4al和Col3al.结论:部分基因表达量改变及功能特征呈现一定的趋势,如中期阳气虚证上调高表达基因数量明显多于早期及中晚期,且与细胞构造、运动、增殖、凋亡相关基因较多,推测可能与肿瘤发生相关,以上绝大部分基因,以往在甲状腺生理与病理研究中较少涉及.这些基因具体功能如何,及甲状腺在肿瘤发生中所起的作用,有待进一步研究.     

不同证型H22肝癌小鼠肾上腺皮质类固醇激素合成酶及其调节因子表达的特征

目的 观察不同证候肝癌小鼠肾上腺皮质类固醇激素合成酶及其调节因子的基因表达特征。     

H22肝癌荷瘤小鼠辨证论治操作规程的研究

目的构建早期常见证候肝癌荷瘤小鼠的辨证论治及疗效评价的操作规程。方法采用小鼠计量化辨证方法,从大量荷瘤小鼠中筛选出邪毒壅盛、气虚、肿瘤居中等证候荷瘤小鼠,分为对照组与治疗组,对治疗组进行对症治疗;综合带瘤生存时间等计量化辨证指标,对辨证论治方案进行评价。结果构建起早期常见证候肝癌荷瘤小鼠的辨证论治及疗效评价的操作规程,观察到3种辨证论治方案在带瘤生存期及常见证候等方面的疗效差异。结论所构建的肝癌荷瘤小鼠的辨证论治及疗效评价的操作规程是可行的。     

大肠癌和肝癌术后“异病同证”的代谢组学研究

目的：本文主要探讨大肠癌和肝癌术后肝肾阴虚证、脾虚证和湿热证“异病同证”的血浆共同代谢物及其代谢机制。方法：对大肠癌和肝癌术后肝肾阴虚证、脾虚证、湿热证和隐证的血浆代谢物谱进行代谢组学（GC-MS）检测,采用主成分分析（PCA）方法寻找其“异病同证”的共同代谢物,并通过KEGG数据库分析代谢通路。结果：大肠癌和肝癌术后肝肾阴虚证共同的代谢物是甘氨酸,尿素,色氨酸和丙氨酸,其代谢调控以氨基酸的降解为主;脾虚证共同的代谢物是甘氨酸、尿素、色氨酸、葡萄糖、赖氨酸和肌醇,氨基酸的降解和糖类的分解功能受到影响;湿热证的共同代谢物是甘氨酸、尿素、色氨酸、葡萄糖、丙酸、甘露醇、山梨醇和赖氨酸,以影响糖类物质分解和供能过程为主要特征。结论：代谢组学方法是研究“异病同证”的有效工具之一。大肠癌、肝癌术后在肝肾阴虚证、脾虚证和湿热证各有其共同的代谢物以及代谢机制。     

正常与不同证候H22荷瘤小鼠肾上腺高表达的基因

目的:揭示正常与不同证候昆明种荷瘤小鼠肾上腺高表达的基因.方法:采用昆明种正常小鼠与腋下接种H22腹水瘤细胞的小鼠,取接种肿瘤后第8天(早期)邪毒壅盛证与气虚证、第21天(中期)阳气虚证、第29天(中晚期)气阴阳虚证荷瘤小鼠与正常对照组小鼠肾上腺,抽提RNA、纯化及Gene Chip Mouse Exon 1.0 ST Array检测.结果:筛选到402条高表达的基因,其中有1个及以上组别芯片读数计算值大于5 000的有88条.这些基因主要参与代谢和基因表达的调控,部分参与化学合成、化学加工修饰、运输和信号转导,以及部分参与免疫、细胞周期和细胞凋亡、发育:另有许多基因功能未知.结论:这些在正常与疾病小鼠肾上腺内持续且稳定表达的基因,可能对于维持肾上腺的正常生理功能具有重要的生物学意义;鉴于气虚证荷瘤小鼠这些基因大多表达量低于正常小鼠和同期的邪毒壅盛证小鼠,反映出气虚证候的本质及特征;再次,4个不同证候荷瘤小鼠肾上腺这些基因表达差异分别有集中的趋势,印证了中医学“同病异证“的理论及其本质,要求辨证论治.     

黄芪散对H22肝癌细胞P53基因表达的影响

目的：观察黄芪散对肝癌荷瘤小鼠P53基因表达的影响。方法：将H22肝癌荷瘤小鼠50只随机分为5组,中药高、中、低剂量组分别予以0.4ml中药灌胃,CTX组予以0.2ml（小鼠给药剂量为20mg/kg.d-）腹腔注射,模型组予以0.4ml生理盐水灌胃,每日1次,给药14天;免疫组织化学法检测肿瘤组织P53基因的表达,同时考察脾、胸腺指数及肿瘤抑制率。结果：黄芪散高中低剂量组都能降低H22肝癌荷瘤小鼠癌组织中P53基因的表达水平,且能升高小鼠的脾、胸腺指数。结论：黄芪散对H22肝癌荷瘤小鼠癌组织中P53基因的表达具有一定抑制作用,且能保护小鼠的免疫器官。     

中国中西医结合周围血管疾病2010年学术交流会在哈尔滨召开

中国中西医结合周围血管疾病2010年学术交流会在哈尔滨市召开。大会由中国中西医结合周围血管疾病委员会主任委员李令根教授主持。中国中西医结合学会秘书长穆大伟、黑龙江省卫生厅副厅长、黑龙江省中医药管理局局长王国才,黑龙江中医药大学校长匡海学、黑龙江中医药大学附属第一医院院长郭鲁义、黑龙江中西医结合学会秘书长韩志杰出席了开幕式并作了讲话。会议共收到论文180余篇,到会代表150人。会议主要分成两大部分,第一部分由美国俄克荷拉马大学Robert D. Forman, Timothy J. Lyons, 秦潮,吴明远等四位教授和国内学者：王嘉桔教授,崔公让教授,吴庆华教授,张纪蔚教授做学术演讲。第二部分为大会学术交流。美国学者以“脊髓刺激法”在“周围血管疾病中的应用”为主题。从基础到临床进行了全面的介绍,为中西医结合周围血管疾病的治疗开拓了新的视野。中国学者以周围血管疾病的三大主病：动脉硬化闭塞症、糖尿病足病、下肢深静脉血栓形成为中心深入地探讨了我国周围血管疾病中西医结合治疗的现状和趋势。给与会者很大的启迪。会议的学术交流部分,更是紧张热烈,来自全国各地的代表畅谈了用中西医结合方法治疗常见周围血管疾病的亲身体会,并向专家们请教了临床中遇到的各类问题。本次会议除了阐述血管外科的前沿课题以及当前研究趋势外,主要突出了中医药在周围血管疾病诊疗中的优势和特色。会议内容以最常见的周围血管疾病为主题,以最基层医生的心得体会为重点。既有普及,又有提高。（中国中西医结合学会周围血管疾病委员会整理）     

不同气虚证小鼠甲状腺G蛋白通路及相关基因转录特征

目的:观察不同气虚证小鼠甲状腺G蛋白信号通路及功能激素基因表达的特征.方法:采用小鼠计量化四诊和辨证方法,以及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,观察正常小鼠、肿瘤气虚证荷瘤小鼠甲状腺G蛋白信号通路及相关基因表达特征.结果:不同气虚小鼠垂体TSH与甲状腺TSH受体(TSHR)表达量均增加,但正常气虚证小鼠甲状腺G蛋白通路的腺苷酸环化酶(AC)和蛋白激酶A(PKA)未见相应的表达量增加;而肿瘤气虚证小鼠则相应增加、活跃,发生响应,Ras基因亦如是.结论:正常气虚小鼠甲状腺G蛋白通路中大多基因表达不活跃可能是其部分物质基础,而荷瘤小鼠气虚证系因实致虚,因此表现与正常气虚证不同,即甲状腺尚处于代偿状态.     

不同气虚证小鼠甲状腺G蛋白通路及相关基因转录特征

目的:观察不同气虚证小鼠甲状腺G蛋白信号通路及功能激素基因表达的特征。方法:采用小鼠计量化四诊和辨证方法,以及GeneChip Mouse Exon 1.0 ST Array等技术,观察正常小鼠、肿瘤气虚证荷瘤小鼠甲状腺G蛋白信号通路及相关基因表达特征。结果:不同气虚小鼠垂体TSH与甲状腺TSH受体(TSHR)表达量均增加,但正常气虚证小鼠甲状腺G蛋白通路的腺苷酸环化酶(AC)和蛋白激酶A(PKA)未见相应的表达量增加;而肿瘤气虚证小鼠则相应增加、活跃,发生响应,Ras基因亦如是。结论:正常气虚小鼠甲状腺G蛋白通路中大多基因表达不活跃可能是其部分物质基础,而荷瘤小鼠气虚证系因实致虚,因此表现与正常气虚证不同,即甲状腺尚处于代偿状态。     

鹅血对H22肝癌小鼠的抑瘤和肿瘤细胞周期的影响

目的探讨鹅血对肝癌小鼠的抑瘤作用以及对肝癌细胞周期的影响。方法选择移植性肝癌小鼠为模型,观察鹅血的抑瘤作用及对肿瘤细胞周期的影响。结果鹅血对荷瘤小鼠肿瘤有显著的抑制作用。抑瘤率为60.72%。经流式细胞术发现,鹅血治疗组的S期肿瘤细胞较模型组高,而G2加M期细胞明显少于模型组,表明鹅血可影响肿瘤细胞的周期从S期向G2加M期的转变过程,将细胞阻滞在S期,从而抑制肿瘤细胞的增殖。结论鹅血具有抑制肿瘤生长的作用。