失荅剌知丸对脑缺血再灌注大鼠脑梗死体积及缺血侧脑组织NF-κB表达的影响

目的:观察失荅剌知丸对脑缺血再灌注大鼠缺血侧脑组织NF-κB表达的影响。方法:将96只SD雄性大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、金纳多阳性药物对照组、失答剌知丸低、中、高剂量组,后5组采用线栓法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,缺血2 h后再灌注,术后分别于12 h、24 h、72 h取材,共16组,每组6只。TTC染色法检测脑组织梗死体积;干湿重法测脑含水量;逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)分析测定NF-κBmRNA的活性表达。结果:与假手术组比较,缺血再灌注组及各给药组各时间点大鼠脑梗死体积、脑组织含水量及NF-κBmRNA的表达均显著增加(P0.01);与IR组比较,各给药组各时间点脑梗死体积、脑组织含水量及NF-κBmRNA的表达均显著降低(P0.01);与GC组比较,失答剌知丸各时间点脑梗死体积、脑组织含水量及NF-κBmRNA的表达有统计学意义(P0.05或P0.01),其中SH组各时间点脑梗死体积、脑组织含水量及NF-κBmRNA的表达显著减少(P0.01)。结论:失荅剌知丸不仅能够减少大鼠脑梗死体积及脑组织含水量,还能够明显降低脑组织NF-κB的表达,抑制炎症反应,其发挥神经保护的作用机制可能与抑制炎症反应有关。     

回药“失荅剌知丸”对大鼠脑缺血再灌注后Delta样配体4表达的影响

目的:探讨失荅刺知丸对大鼠脑缺血再灌注后Delta样配体4表达的影响。方法:将102只SD大鼠随机分为17组,每组6只,分别为:空白组、假手术组、模型组、尼莫地平组、失荅剌知丸低剂量组、失荅剌知丸中剂量组、失荅剌知丸高剂量组,其中模型组和给药组又根据再灌注时间分为1d、3d、7d组。以上各组除空白、假手术组外,均采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO)。各组在观察饲养相应天数后取材,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),测定脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中Delta样配体4的相对表达情况。结果:Western blot、PCR结果显示,与模型组相比,失荅剌知丸各组Delta样配体4表达显著升高,与尼莫地平组比较,失荅剌知丸高剂量组Delta样配体4的表达显著增高(P0.05)。结论:失荅剌知丸对脑缺血大鼠再灌注后损伤脑组织中的Delta样配体4表达有促进作用,可能是失荅剌知丸治疗脑缺血再灌注的重要机制之一。     

失荅剌知丸对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织海马区Fas和FasL表达的影响

目的:观察失荅剌知丸对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织海马区死亡因子(Fas),死亡因子受体(Fas L)蛋白和Fas mRNA,Fas L mRNA表达的影响,探讨失荅剌知丸抑制海马区神经元细胞凋亡的作用机制。方法:将108只SPF级SD雄性大鼠适应性喂养1周后,按照随机数字表法分为6组:假手术组,脑缺血再灌注模型组(以下简称模型组),金纳多组,失荅剌知丸低剂量组,失荅剌知丸中剂量组,失荅剌知丸高剂量组,根据再灌注时间的不同,再分为12,24,72 h 3个亚组,每个亚组SD大鼠6只。脑缺血再灌注模型采用改良线栓法阻塞大鼠大脑中动脉(MCA)制成,术后2 h进行再灌注。金纳多组、失荅剌知丸低剂量组、失荅剌知丸中剂量组、失荅剌知丸高剂量组分别在制作脑缺血-再灌注模型前30 min给予相应药物第1次灌胃,以后每天灌胃2次,失荅剌知丸:低剂量11.92 g·kg~(-1),中剂量23.83 g·kg~(-1),高剂量47.66 g·kg~(-1);金纳多浓度14.44 g·kg~(-1),鼠灌胃容积为10 m L·kg~(-1);假手术组、模型组按同样方法予以等量蒸馏水灌胃,每组3个亚组在给药时间分别持续12,24,72 h后取材。通过蛋白免疫印迹(Western blot)以及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)的方法,观察失荅剌知丸对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织海马区Fas,Fas L蛋白及Fas,Fas L mRNA表达的影响。结果:与假手术组比较,模型组及各用药组各时间点Fas,Fas L表达明显增高(P0.01);与模型组比较,各用药组各时间点Fas,Fas L表达明显减少(P0.01);与金纳多组比较,失荅剌知丸中剂量组Fas,Fas L表达无显著性差异,失荅剌知丸高剂量组各时间点Fas,Fas L表达有所减少(P0.05,P0.01),尤以72 h组减少明显(P0.01)。结论:失荅剌知丸对脑缺血再灌注损伤具有较好保护作用,其机制可能与抑制海马区神经细胞凋亡有关。     

回药失荅剌知丸抗大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡的实验研究

目的:观察回药失荅剌知丸对大鼠脑缺血再灌注后脑组织中Fas及Fas L表达的影响,探讨失荅剌知丸治疗脑缺血性疾病的机制。方法:SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、金纳多组、失荅剌知丸低浓度组、失荅剌知丸中浓度组、失荅剌知丸高浓度组,局灶性脑缺血再灌注模型制备成功后分别于12h、24h、72h取材,采用干湿重法测脑含水量,免疫荧光法观察Fas阳性细胞表达量,TUNEL和免疫组化法观察神经细胞凋亡情况及Fas L表达的变化。结果:与假手术组相比,缺血再灌注损伤后脑含水量、神经细胞凋亡数量及Fas、Fas L的表达明显增高(P0.01,P0.05);与模型组比较,用药组各时段脑含水量、神经细胞凋亡数量及Fas、Fas L的表达均减弱(P0.05),以失荅剌知丸高浓度组的表达减弱显著(P0.01)。结论:失荅剌知丸能够有效减轻脑组织水肿,抑制Fas、Fas L的表达,其发挥神经保护的作用机制可能与抑制神经细胞凋亡有关。     

回药失荅剌知丸对脑缺血再灌注大鼠脑组织ERK5蛋白激酶表达的影响

目的:探讨失荅剌知丸对脑缺血再灌注大鼠脑组织ERK5蛋白激酶表达的影响;方法:将238只SD大鼠随机分为17组,每组14只,分别为:空白组,假手术组,模型再灌注、尼莫地平再灌注1d、3d、7d组,失荅剌知丸再灌注高、中、低剂量1d、3d、7d组,以上各组除空白、假手术组外,均采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO)。空白组、假手术组、模型组均用0.9%氯化钠溶液灌胃,灌胃剂量为1mL/100g;尼莫地平组予以浓度为1.08g/L、剂量1mL/100g的稀释液灌胃;失荅剌知丸高剂量组予以浓度为4.5g/mL、中剂量组予以浓度为3.0g/mL、低剂量组予以浓度为1.5g/mL,灌胃剂量按1mL/100g的原方浓缩剂灌胃;以上各组每天同一时间灌胃,1天2次。各组分别在缺血再灌注后1d、3d、7d各时间点取材后,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中P-ERK5蛋白激酶的相对表达情况;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中ERK5激酶的相对表达情况。结果:Western blot结果示:磷酸化活化后的P-ERK5蛋白激酶表达结果示:(1)各药物组与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05);(2)尼莫地平组与失荅剌知丸低剂量组比较有统计学意义(P0.05),与失荅剌知丸中剂量组比较没有统计学意义(P0.05),与失荅剌知丸高剂量组比较差异性显著(P0.01);(3)失荅剌知丸各剂量组1d、3d、7d比较,P-ERK5蛋白激酶的表达随着治疗时间的延长依次增加,其中失荅剌知丸高剂量7d组表达量最高。RT-PCR结果同P-ERK5激酶Western blot结果。结论:失荅剌知丸对脑缺血有一定的治疗作用,且可上调蛋白激酶ERK5表达,这可能与治疗过程中激活MAPK/ERK5通路,促使ERK5蛋白激酶磷酸化活化为P-ERK5,从而发挥其神经保护的作用有关。     

“失荅剌知丸”对大鼠脑缺血再灌注后Notch/Delta信号通路相关因子表达的影响

目的探讨失荅刺知丸对大鼠脑缺血再灌注后脑组织损伤血管修复及Notch/Delta信号通路相关蛋白Notch1、Notch4、Delta样配体4表达的影响。方法将102只SD大鼠随机分为17组,每组6只,分别为:空白组、假手术组、模型组、尼莫地平组、失荅剌知丸低剂量组、失荅剌知丸中剂量组、失荅剌知丸高剂量组,其中模型组和给药组又根据再灌注时间分为1d、3d、7d组。以上各组除空白、假手术组外,均采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO)。各组在观察饲养相应天数后取材;电镜观察大鼠因脑缺血受损血管的恢复情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),测定缺血再灌注损伤大鼠脑组织中Notch1、Notch4、Delta样配体4蛋白与基因的相对表达量。结果Western blot、PCR结果显示,失荅剌知丸各组Notch1、Notch4、Delta样配体4蛋白和基因表达显著升高,表达量与给药剂量和治疗时间成正相关(P0.01)。结论团队既往研究得出失荅剌知丸对大鼠脑缺血再灌注后血管损伤修复有促进作用;该修复作用可能与激活了Notch/Delta信号通路有关。     

失荅剌治丸对脑缺血大鼠再灌注bcl-2和bax蛋白表达的影响

目的:观察失荅剌知丸对大鼠脑缺血再灌注后皮质缺血周围区bcl-2和bax蛋白表达的影响。方法:78只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、金纳多组和失荅剌知丸组,后三组采用线栓法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,缺血2 h后再灌注,术后分12 h、24 h、72 h、7 d组,共13组,每组6只。采用免疫组化法和原位细胞凋亡检测脑组织Bcl-2、Bax蛋白表达及凋亡细胞数。结果:与假手术组比较,模型组及各药物组各时间点凋亡细胞数有显著增高(P<0.01),金纳多组各时点凋亡细胞数均明显少于模型组(P<0.01),失荅剌治丸组各时点凋亡细胞数均明显少于金纳多组(P<0.01)。金纳多组各时点Bcl-2蛋白表达均明显高于模型组(P<0.05),失荅剌治丸组各时点Bcl-2蛋白表达均明显高于金纳多组(P<0.05)。金纳多组各时点Bax蛋白表达均明显低于模型组(P<0.05),失荅剌治丸组各时点Bax蛋白表达均明显低于金纳多组(P<0.05)。结论:失荅剌知丸可促进Bcl-2表达、抑制Bax表达,其发挥脑保护的作用机制可能与减少神经细胞凋亡有关。     

失荅剌知丸对脑缺血再灌注大鼠海马区神经干细胞增殖的影响

目的观察失荅剌知丸对脑缺血再灌注大鼠海马区神经干细胞增殖情况的影响,探究其可能的作用机制。方法将204只SD雄性大鼠随机分为空白组(12只)、假手术组(12只)、模型组(36只)、尼莫地平组(36只)、失荅剌知丸低剂量组(36只)、失荅剌知丸中剂量组(36只)及失荅剌知丸高剂量组(36只),空白组不进行手术操作,假手术组进行假手术操作,其余各组均采用改良Longa法建立大鼠脑缺血再灌注模型。造模成功后各组大鼠均按1 mL/100 g剂量给药,尼莫地平组予浓度为1.08 mg/mL的尼莫地平混悬液灌胃,失荅剌知丸低、中、高剂量组分别给予浓度为1.5、3.0、4.5 g/mL的失荅剌知丸药液灌胃,空白组、假手术组及模型组予0.9%氯化钠注射液灌胃。分别观察各组大鼠在灌胃1、3、7 d后神经功能Garcia JH评分、海马区神经干细胞增殖情况及脑组织巢蛋白(Nestin)表达情况的变化。结果与空白组及假手术组同期比较,模型组、尼莫地平组及失荅剌知丸低、中、高剂量组Garcia JH评分均明显降低(P0.05),神经干细胞增殖增多(P0.05),Nestin蛋白表达增高(P0.05),并且随着时间的延长效果越明显;与模型组同期比较,尼莫地平组及失荅剌知丸低、中、高剂量组Garcia JH评分均明显升高(P0.05),神经干细胞增殖增多(P0.05),Nestin蛋白表达增高(P0.05);与尼莫地平组同期比较,失荅剌知丸低剂量组Garcia JH评分升高、神经干细胞增殖增多及Nestin蛋白表达增高情况均不及尼莫地平组(P0.05),失荅剌知丸中剂量组与尼莫地平组疗效相当(P0.05),失荅剌知丸高剂量组疗效则明显优于尼莫地平组(P0.05)。结论失荅剌知丸对脑缺血再灌注大鼠的神经功能损伤具有确切疗效,可明显改善大鼠神经功能损伤症状,促进Nestin蛋白表达,其作用机制可能与促进神经干细胞增殖有关,并且其促进作用具有剂量和时间依赖性。     

失答剌知丸对脑缺血再灌注大鼠海马区Notch1和Jagged1含量的影响

目的:观察失答剌知丸对脑缺血再关注大鼠海马区Notch1和Jagged1含量的影响。方法:将102只SD大鼠随机分为17组,每组6只,分别为:空白组,假手术组,模型组,尼莫地平组,失荅剌知丸高剂量组、中剂量组和低剂量组,其中后5组分别依据再灌注时间的不同分为1 d、3 d、7 d组。以上各组除空白、假手术组外,均采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO)。其中空白组、假手术组、模型组均用生理盐水灌胃;尼莫地平组给予浓度为1.08 g/L灌胃;失荅剌知丸组则以浓度分别为4.5 g/m L、3.0 g/m L和1.5 g/m L灌胃;以上各组每天同一时间灌胃,2次/d。各组分别在缺血再灌注1 d、3 d、7 d各时间点取材,检测Notch1和Jagged1水平。结果:(1)空白组与假手术组对比没有统计学意义(P>0.05);(2)模型组和各药物组相较于空白组、假手术组均有统计学意义(P<0.05);(3)各药物组相较于模型组均有统计学意义(P<0.05);(4)尼莫地平组与失荅剌知丸低剂量组对比有统计学意义(P<0.05),与失荅剌知丸中剂量组对比没有统计学意义(P>0.05),与失荅剌知丸高剂量组对比差异性显著(P<0.01);(5)失荅剌知丸低、中、高剂量组,随着1 d、3 d、7 d时间点的延长,Notch1和Jagged1表达量依次呈上升趋势,其中尤以7 d组表达量最高。结论:失答剌知丸治疗脑缺血可能与自身药效和促进海马区Notch1和Jagged1表达水平有关。     

失荅剌知丸及其拆方对脑缺血再灌注大鼠海马区JNK蛋白表达的影响

目的:探讨失荅刺知丸及拆方对脑缺血再灌注模型大鼠脑组织JNK表达的影响。方法:将204只SD雄性大鼠按随机数字表法分为正常组、假手术组、模型组及干预组(包括失荅剌知丸组,失荅剌知丸拆方Ⅰ组、拆方Ⅱ组、拆方Ⅲ组),其中模型组及各干预组按时间点不同分为1 d组、3 d组和7 d组,并予MACO线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型,同时干预组于每日固定时间灌胃,同时观察大鼠神经功能症状情况,以大鼠神经功能Garcia JH评分并记录,治疗后于相应时间取材。运用Western Blot法检测海马组织中p-JNK蛋白的含量,以p-JNK/GAPDH表示蛋白表达相对水平。结果:失荅剌知丸及各拆方组中的p-JNK蛋白表达量均有降低,且与灌药时间成正比(P0.05);失荅剌知丸原方较各拆方组蛋白表达均低,其中拆方Ⅰ组最高,拆方Ⅱ组最低,拆方Ⅲ组次之(P0.05)。神经功能评分结论与p-JNK蛋白表达结果一致。结论:失荅剌知丸原方及各拆方组均具有改善脑缺血后神经功能、抗神经细胞凋亡作用,而这可能与本实验所研究的JNK蛋白下调有关;其中,除原方外,又以拆方Ⅱ组作用效果最好,考虑该组可能在失荅剌知丸原方中发挥君药、或君药加臣药的主要作用。     

失荅剌知丸及其拆方对脑缺血再灌注大鼠海马区JNK蛋白表达的影响

目的:探讨失荅刺知丸及拆方对脑缺血再灌注模型大鼠脑组织JNK表达的影响。方法:将204只SD雄性大鼠按随机数字表法分为正常组、假手术组、模型组及干预组(包括失荅剌知丸组,失荅剌知丸拆方Ⅰ组、拆方Ⅱ组、拆方Ⅲ组),其中模型组及各干预组按时间点不同分为1 d组、3 d组和7 d组,并予MACO线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型,同时干预组于每日固定时间灌胃,同时观察大鼠神经功能症状情况,以大鼠神经功能Garcia JH评分并记录,治疗后于相应时间取材。运用Western Blot法检测海马组织中p-JNK蛋白的含量,以p-JNK/GAPDH表示蛋白表达相对水平。结果:失荅剌知丸及各拆方组中的p-JNK蛋白表达量均有降低,且与灌药时间成正比(P<0.05);失荅剌知丸原方较各拆方组蛋白表达均低,其中拆方Ⅰ组最高,拆方Ⅱ组最低,拆方Ⅲ组次之(P<0.05)。神经功能评分结论与p-JNK蛋白表达结果一致。结论:失荅剌知丸原方及各拆方组均具有改善脑缺血后神经功能、抗神经细胞凋亡作用,而这可能与本实验所研究的JNK蛋白下调有关;其中,除原方外,又以拆方Ⅱ组作用效果最好,考虑该组可能在失荅剌知丸原方中发挥君药、或君药加臣药的主要作用。     

芹菜素对大鼠脑缺血再灌注NF—κBiNOS动态表达的影响

目的:探讨芹菜素对局灶性脑缺血再灌注损伤后核转录因子-κB(NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)动态表达的影响。方法:将大鼠135只随机分为假手术组(S组)、模型组(M组)及芹菜素组(A组),后2组按再灌注时间不同又分为再灌注24h、48h、72h和7天各4小组,总共9小组,每组15只大鼠。采用线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉缺血(1.5h)再灌注模型。光镜电镜观察脑组织病理形态改变,免疫组织化学法检测NF-κBp65蛋白表达,比色法检测iNOS活性。结果:大鼠脑缺血再灌注后M组各时间点NF-κBp65表达增多(P<0.01)、iNOS活性增高(P<0.01)。芹菜素在脑缺血再灌注后72h和7天有下调NF-κBp65的表达(P<0.05),降低iNOS活性的作用(P<0.05)。M组脑缺血再灌注后各个时间点皮层和海马细胞肿胀、细胞间质水肿,有空泡形成,尤以缺血再灌注后48h最为明显,而神经细胞均有核固缩、碎裂、溶解,以缺血再灌注后24h为著。芹菜素有减轻脑缺血再灌注后组织细胞水肿的作用,对神经细胞超微结构改变不明显。结论:芹菜素的神经保护作用可能与抑制大鼠缺血再灌注后脑组织中NF-κB的表达及iNOS活性有关。     

失荅剌知丸对脑缺血再灌注大鼠海马区ERK2含量的影响

目的研究失荅刺知丸对大鼠局灶性脑缺血再灌注模型MAPK-ERK信号通路中ERK2表达的影响。方法将238只SD大鼠随机分为空白组,假手术组,模型组、尼莫地平组,失荅剌知丸高、中、低剂量组,其中模型组和各药物组需区别1d、3d、7d。针对模型组和各药物组采用MCAO制备模型,用相应制剂灌胃后分别于3个时间点进行样本采集。通过Western Blot和RT-PCR来检测样本中ERK2的相对表达量。结果失荅剌知丸低中高剂量组中的ERK2蛋白和基因的表达量均显著升高,且与灌药浓度及时间成正比(P0.01)。结论失荅剌知丸具有抗神经细胞凋亡、改善脑缺血后神经功能的作用,而这可能与本实验中研究的启动MAPK-ERK信号通路ERK2有关。     

头穴透刺对MCAO/R大鼠缺血脑组织NF-κB、TNF-α蛋白表达的影响

目的:探讨头穴透刺对脑缺血再灌注大鼠核转录因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法:70只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和头针组。线栓大鼠右侧大脑中动脉制备局灶性大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/R)动物模型。头针组大鼠采用透刺法针刺右侧百会、曲鬓穴。神经功能评分检测各组大鼠不同时间点神经功能缺损程度;免疫组化法检测缺血脑组织NF-κB、TNF-α蛋白的定性表达情况;Western blot和ELISA法分别检测缺血脑组织NF-κB、TNF-α蛋白的定量表达情况。结果:头针组大鼠神经功能缺损程度较模型组减轻,再灌注3天、7天,m NSS评分与同期模型组比较,差异有统计学意义(P0.05)。模型组和头针组大鼠不同时间点缺血脑组织中NF-κB、TNF-α蛋白含量均较假手术组明显升高(P0.05);但头针组大鼠缺血脑组织中NF-κB、TNF-α蛋白含量均较同时间点模型组明显降低(P0.05)。结论:头穴透刺可明显改善脑缺血再灌注后大鼠的神经功能缺损,具有神经保护作用,其机制可能与抑制脑缺血再灌注后缺血脑组织中NF-κB、TNF-α蛋白表达、降低缺血再灌注后的炎症反应有关。     

失荅刺知丸对脑缺血再灌注大鼠海马神经元形态学和Caspase-3、Caspase-9表达的影响

目的:观察失荅刺知丸对脑缺血再灌注大鼠海马神经元形态学和Caspase-3、Caspase-9表达的影响。方法:130只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组(模型组)、失荅刺知丸组(实验组)和金纳多组(阳性对照组),其中后三组根据取材时间点又各分为12 h、24 h和72 h共三个亚组,每组13只。采用线栓法制成大鼠大脑中动脉再灌注模型,透射电镜下观察海马区神经元超微结构变化,免疫组织化学法和Western-blot印迹法检测大鼠海马组织凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-9蛋白表达的变化。结果:与假手术组比较,再灌注组大鼠海马神经元出现胞核及线粒体损伤,并且Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与再灌注组比较,失荅刺知丸组大鼠海马神经元胞核及线粒体损伤明显减轻,而Caspase-3、Caspase-9蛋白的表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:失荅刺知丸可减轻脑缺血再灌注大鼠海马神经元的损伤,其作用机制可能与抑制Caspase-3、Caspase-9蛋白表达有关。     

大黄素对缺血性中风大鼠脑组织NF—κB、ICAM-1基因表达的影响

目的 探讨大黄素对缺血性中风大鼠脑组织NF-κB、ICAM-1基因表达的影响.方法 采用MACO模型制作脑缺血大鼠动物模型,分别考察缺血后再灌注1h、22h和70h的神经功能评分;采用SYBR Green嵌合荧光定量RT-PCR,观察大黄素对缺血大鼠脑组织NF-κB、ICAM-1基因表达的影响.结果 缺血性中风大鼠动物模型被成功复制,其神经功能评分表明,大黄素可明显改善该项指标,尤其对冉灌注22h组的影响显著(与模型对照22h组相近);另对荧光定量RT-PCR检测方法中的总RNA提取、反转录与内参基因有效性、特异性和重复性进行考察,证明该检测方法可行,并且大黄素可明显抑制脑缺血再灌注后ICAM-1的表达,对受损大鼠脑缺血区域组织的NF-κB mRNA表达水平呈下调效应.结论 大黄素可明显改善缺血后再灌22h的神经功能评分指标,并且该作用可能与抑制脑缺血再灌注后ICAM-1的表达、下调脑缺血区域组织的NF-κB mRNA表达水平有关.     

当归多糖对脑缺血再灌注损伤大鼠IL-1β、TNF-α、NF-κB表达的影响

目的探讨当归多糖对脑缺血再灌注损伤大鼠IL-1β、TNF-α、NF-κB表达的影响。方法构建脑缺血再灌注造模,将60只大鼠随机分为假手术组、模型组及当归多糖低、中、高剂量组(30、45、60 mg/kg),每组12只,预灌胃给药14 d。缺血再灌注24 h后,观察大鼠神经功能,ELISA检测血清和脑组织中IL-1β、TNF-α水平,Western blot检测脑组织中NF-κB蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠的神经功能评分和抓力降低,血清和脑组织中IL-1β、TNF-α水平及脑组织NF-κB蛋白表达升高(P0.05);与模型组比较,当归多糖中、高剂量组(45、60 mg/kg)大鼠的神经功能评分和抓力增加,血清和脑组织中IL-1β、TNF-α水平及脑组织NF-κB蛋白表达降低(P0.05)。结论预给药当归多糖(60 mg/kg)可以减轻缺血再灌注大鼠脑组织中的炎症反应,有助于大鼠神经功能恢复。     

电针对老龄大鼠脑缺血再灌注脑组织核转录因子NF-κB和氨基酸递质的影响

目的:从观察脑组织谷氨酸(GLU)、天门冬氨酸(ASP)、甘氨酸(GLY)含量和核转录因子(NF-κB)表达的变化,揭示针刺穴位抗老年脑缺血再灌注I/R损伤的保护机制。方法:采用大脑中动脉闭塞方法造成老龄大鼠脑缺血动物模型,大鼠随机分组为假手术组、模型组、非穴位组、穴位治疗组。每组又根据缺血及再灌注时间不同分为缺血3h后再灌注1、3、7、12d4个时间点观察。观察各时间点大鼠神经症状积分、脑组织含水量、病理变化、高效液相色谱法测定脑组织GLU、ASP、GLY;免疫组织化学方法测定脑组织NF-κB表达。结果:与假手术组比较,模型组各时间点大鼠神经症状积分、脑组织含水量、GLU、ASP含量和NF-κB表达明显升高,GLY含量无明显变化。与模型组比较,穴位治疗组各时间点大鼠神经症状积分、脑组织含水量、GLU、ASP含量和NF-κB表达显著降低(P<0.05),GLY含量无明显变化;与模型组比较,非穴位组各时间点大鼠神经症状积分、脑组织含水量、GLY、GLU、ASP含量和NF-κB表达无明显变化。结论:脑缺血可增强大鼠脑组织兴奋性氨基酸释放和NF-κB表达;针刺穴位抗脑缺血再灌注损伤的机制与其降低脑组织兴奋性氨基酸神...     

生脉注射液对小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后组织因子表达及相关信号通路的影响

目的:观察生脉注射液对小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后的神经保护作用及组织因子(TF)表达及相关信号通路的影响.方法:C57BL/6J小鼠随机分成假手术组、缺血再灌注组、生脉注射液高、中、低剂量组(5.68,2.84,1.42 g·kg-1).采用线栓法复制小鼠大脑中动脉栓塞模型,缺血1h后ip不同剂量生脉注射液,再灌注24 h后观察小鼠脑梗死面积、神经行为学评分等指标.同时采用蛋白印迹技术测定缺血1h,再灌注1h后脑组织中TF,核转录因子κB(NF-κB/p65),蛋白激酶B(Akt)等蛋白的表达与磷酸化情况.结果:与模型组相比,高、中剂量生脉注射液可显著降低脑缺血再灌注小鼠的脑梗死率,提高神经行为学评分,并呈现一定的剂量依赖性.生脉注射液可显著下调缺血再灌注1h诱导的模型小鼠脑组织TF的表达,同时抑制NF-κB的激活与Akt的磷酸化.结论:生脉注射液在一定剂量范围内,可显著改善小鼠脑缺血再灌注损伤,其作用机制可能与抑制TF的异常表达及相关的NF-κB和Akt通路活化有关.     

葛根素对脑缺血再灌注后核因子kappaB表达的影响

目的：研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后核因子kappaB(NF-κB)在时间和空间上表达的变化过程及葛根素对其的影响；方法：线栓法建立右侧大脑中动脉闭塞大鼠模型,分别于缺血90 min后再灌注2,6,12,24,72 h,缺血前1 h及随后每间隔6 h腹腔内给药。大鼠在各时间点断头取脑,测算脑梗死体积,免疫组织化学方法和免疫印迹法检测脑组织内NF-κB的表达。结果：大鼠缺血再灌注后,免疫组化分析提示NF-κB从细胞浆向细胞内移位,核内表达水平在6 h开始明显升高,在24 h达到高峰,72 h下降,其脑梗死体积随着再灌注时间延长而增加。葛根素明显降低NF-κB在缺血再灌注后24,72 h的表达及减小脑梗死体积。结论：脑缺血再灌注后,脑梗死周边区域出现NF-κB从胞浆至胞核的转位并伴表达增加,葛根素可能通过抑制NF-κB的表达,减轻缺血再灌注损伤。