链脲佐菌素建立1型糖尿病大鼠模型的最优剂量研究

目的通过不同剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射,观察大鼠1型糖尿病成模率及死亡率,探讨建立可靠和稳定的1型大鼠糖尿病模型的链脲佐菌素最优剂量。方法选取清洁级雄性SD大鼠30只,分成3个实验组,各组10只,并设立对照组10只,实验组大鼠分别一次性腹腔注射STZ 40、50或60 mg/kg,对照组10只大鼠腹腔注射柠檬酸缓冲液5ml/kg,7d后血糖16.65 mmol/L判定为1型糖尿病动物模型造模成功。结果 SD大鼠腹腔注射STZ 50 mg/kg 7 d后,10只大鼠中有8只血糖值达到成模标准,并出现糖尿病临床表现,持续观察7周,有8只大鼠成模,血糖值持续16.65 mmol/L,糖尿病症状明显。结论腹腔一次性注射STZ 50 mg/kg剂量为建立1型糖尿病大鼠模型的最优剂量。     

大鼠糖尿病性勃起功能障碍模型的实验研究

目的 证实链脲佐菌素(STZ)单侧腹腔注射建立大鼠糖尿病性勃起功能障碍模型的可行性.方法 45只SD大鼠随机分为对照组(15只)和实验组(30只).实验组大鼠腹腔注射STZ 60mg/kg,对照组大鼠腹腔注射相应量的柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液,3d后测血糖确定是否成模.此后,每周测血糖1次,8周后用阿朴吗啡(APO)80μg/kg颈部皮下注射,观察大鼠阴茎勃起情况.结果 实验组糖尿病成模率为93.3%(28/30),在成模后8周的观察期间大鼠的死亡率为7.1%(2/28).实验组血糖明显高于对照组(P<0.01),体重、阴茎勃起次数、阴茎勃起率则明显低于对照组,两组间差异有统计学意义(P<0.01).结论 STZ 60mg/kg单侧腹腔内注射能安全有效地建立大鼠糖尿病模型;颈部皮下注射APO 80μg/kg可有效地筛选出大鼠糖尿病勃起功能障碍.     

链脲佐菌素诱导SD大鼠1型糖尿病性骨质疏松模型的建立

目的 通过链脲佐菌素（streptozocin, STZ）诱导建立1型糖尿病性骨质疏松（diabetic osteoporosis,DOP）SD大鼠动物模型。方法 20只健康雌性SD大鼠,随机分为正常组和模型组,每组10只。模型组采用单次左下空腹腹腔注射法,注射STZ 60mg/kg建立1型DOP动物模型。实验期间观察并记录大鼠行为学、体质量、饮水量、进食量变化,检测随机血糖。造模8周后处死大鼠,收集血清检测碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活力,采集胰腺组织和股骨组织进行组织病理学观察,并对股骨组织进行形态计量学测定。结果 模型组大鼠与正常组相比,血糖显著升高（P<0.01）,进食量与饮水量亦明显升高,而体质量显著降低,胰岛细胞形状不规则、边界模糊、体积缩小,股骨骨小梁变得稀疏,出现不同程度的断层,骨小梁厚度、骨小梁面积百分率显著降低（P <0.05）,骨小梁间距显著增加（P<0.05）,血清中ALP活力极显著上升（P<0.01）。该模型符合1型DOP成模动物诊断标准。结论 腹腔一次性快速注射STZ 60 mg/kg 8周后可成功构建1型DOP动物模型。     

裸鼠糖尿病模型的建立及皮下异种胰岛移植研究

目的 探讨链脲左菌素（STZ）建立BALB/c nu/nu裸鼠Ⅰ型糖尿病模型的方法,及将大鼠胰岛分离纯化后移植至糖尿病裸鼠皮下,对移植后裸鼠进行疗效评价。方法 选用Balb/c裸鼠分为三组：糖尿病且胰岛移植组、糖尿病胰岛未移植组和正常组;用STZ对裸鼠进行糖尿病建模,大鼠胰岛分离、纯化后移植至糖尿病裸鼠背部皮下,进行血糖、体重和HE染色考察,以糖尿病未移植组和正常组作对照。结果 STZ浓度175 mg/kg时,腹腔注射裸鼠糖尿病造模成功率高,纯化的大鼠胰岛活性较好,但移植后疗效平均维持时间约5 d,移植第5 d的OGTT结果显示胰岛皮下移植组和糖尿病组血糖均较正常组高,移植3 d时HE染色显示胰岛在皮下存活,但胰岛中心部位细胞有坏死。结论 本研究建立了一种免疫排斥缺陷宿主异种胰岛皮下移植治疗糖尿病的方法,为进一步探索改进胰岛移植研究提供参考。     

特异性转录因子在正常小鼠和糖尿病小鼠胰岛内的表达及其意义

目的 探讨正常小鼠与糖尿病小鼠胰腺组织病理学特征的异同及其意义.方法 正常C57BL/6小鼠作为对照组(n=4),腹腔内注射链脲霉素(STZ)的C57BL/6小鼠作为STZ组(n=8),非肥胖性糖尿病(NOD)小鼠作为NOD组(n=2).观察各组小鼠胰腺组织苏木素-伊红(HE)染色特点;应用免疫荧光技术观察特异性标记物在各组小鼠胰腺组织中的表达情况.结果 STZ、NOD组小鼠与对照组小鼠比较,HE染色:胰岛数目明显减少;免疫荧光染色:胰岛中Insulin+细胞与Glucagon+细胞数量比例倒置,Nkx2.2和Nkx6.1的表达均减少,STZ组小鼠胰岛中有少量Ngn3+细胞及Insulin+Glucagon+细胞.结论 糖尿病小鼠血糖升高可能是由于a细胞和á细胞数量的比例倒置所致;成体小鼠胰腺中有干细胞样特性的细胞存在;Nkx2.2需要其他转录因子的参与才能使胰岛内分泌前体细胞生成成熟a细胞.     

2型糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型的构建

目的 探究2型糖尿病性勃起功能障碍(T2DED)大鼠模型的构建方法。方法 SD大鼠30只,随机分为两组:对照组10只,饲养普通饲料;实验组20只,饲养高脂饲料。饲养8周后,实验组腹腔注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,30mg/kg),对照组注射同等剂量的柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液。腹腔注射3d后采用剪尾法测定随机血糖,≥16.7mmol/L则认为2型糖尿病(T2DM)建模成功。糖尿病(DM)成模后于2、4、6、8周各测定一次随机血糖及体质量;于糖尿病成模后4、8周进行进行腹腔葡萄糖耐量试验(intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT),及腹腔胰岛素耐量试验(intraperitoneal insulin tolerance test,IPITT);于糖尿病成模后8周行阿扑吗啡(apomorphine,APO)实验,并测定每只大鼠的阴茎海绵体内压力(intracavemous pressure,ICP)。测压完成后,收集大鼠的血清,进行甘油三酯(triglyceride,TG),总胆固醇(total cholesterol,TC),高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterin,LDL-C)含量的测量。结果(1)高脂喂养及小剂量STZ注射后,实验组20只大鼠有17只血糖16.7mmol/L,与对照组相比,在注射后第2、4、6、8周实验组大鼠血糖均明显升高(P0.05)。(2)IPGTT试验提示糖尿病大鼠存在胰岛素抵抗;IPITT试验提示糖尿病大鼠对胰岛素的敏感性下降。与对照组相比,实验组血清中的TG、TC、HDL-C、LDL-C含量显著升高(P0.05);(3)APO实验提示对照组大鼠勃起率为100%,实验组中STZ注射后2只大鼠死亡,余15只大鼠有2只可观察到勃起。行ICP测定,实验组大鼠的ICP最大值明显低于对照组大鼠(P0.05)。结论 高脂喂养联合小剂量STZ注射可成功构建T2DED的大鼠模型,APO实验可以有效可靠地筛选ED动物模型。     

SD大鼠2型糖尿病模型的建立与评价

目的探讨高脂高糖喂养联合链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）制备2型糖尿病大鼠模型的造模方法和影响因素。方法60只6周龄SPF级雄性SD大鼠高脂高糖喂养4周后随机分为3组：对照组,20只,腹腔注射柠檬酸50mg／kg,普通饲料喂养;糖尿病模型组,根据腹腔注射STZ剂量的不同分为2组,模型l组,20只。腹腔注射STZ50mg／kg,模型2组,20只,腹腔注射STZ35mg＆g,该2组大鼠继续高脂高糖喂养。分别在腹腔注射药物后第3、7、10及14天检测大鼠空腹血糖（fasting blood glucose。FBG）值,以14d后血糖〉16．7mmol／L计算糖尿病成模率,并计算死亡率;实验结束时测定空腹血清胰岛素（fasting serum insulin,FSI）、甘油三脂（TG）和胆固醇（Tc）水平。结果与对照组比较,两糖尿病模型组的TG、TC、FBG和FINS水平均明显升高（P〈0．05）;同时胰岛素敏感性（insulin sensetivity index,ISI）显著下降（P〈O．05）;模型2组的成模率高于模型1组（85％比75％）,但死亡率低于模型1组（0比25％）,P〈0．05。结论高脂高糖喂养4周后,一次性腹腔注射35mg/kgSTZ制备的2型糖尿病大鼠模型成模率高,安全性强,模型稳定。     

正常成人胰岛移植治疗糖尿病的实验研究

目的探讨正常成人胰岛移植治疗糖尿病的作用。方法 2012年1月至2013年1月健康成人胰腺供体共13例。获取胰腺后经胶原酶消化并进行胰岛提取纯化,将纯化后的胰岛移植到糖尿病裸鼠肾包膜下为实验组,生理盐水代替胰岛移植为对照组,各13只。术后通过检测糖尿病裸鼠的血糖变化和组织学检查来判定胰岛移植后的存活情况和纠正血糖的效果。结果成人胰腺消化后胰岛产量为纯化前（3608±403）IEQ/g,纯化后（2820±318）IEQ/g,纯度为85%。实验组84.6%（11/13）糖尿病裸鼠在移植术后第1天,血糖降至正常,对照组血糖无明显变化。两组糖尿病裸鼠存活时间：实验组存活时间35～57d,中位存活时间46d。对照组存活时间5～12d,中位存活时间7d。两组比较差异具有统计学意义,Log-rank（Mantel-Cox）值为8.74,P值为0.0012。结论成人胰腺消化后,可得到高纯度活力正常的胰岛,并能纠正糖尿病裸鼠的高血糖。正常成人胰岛移植可能成为临床糖尿病患者的一种有效治疗方法。     

糖尿病大鼠血糖波动对肝脏功能及超微结构的影响

目的 建立糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠血糖渡动模型,观察血糖波动对DM大鼠肝脏损伤的作用.方法 SD 大鼠24只均分为3组,A组为正常对照组,B组为稳定高血糖组,C组为波动血糖组,B组、C组大鼠均一次性腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg,建立DM模型.C组每天错时给予胰岛素和50%...     

链脲佐菌素诱导的糖尿病模型小鼠对炎症性关节炎的影响

目的 探讨链脲佐菌素(STZ)诱导的Ⅰ型糖尿病模型对小鼠炎症性关节炎的影响.方法 将16只6周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分成两组,每组8只.糖尿病组小鼠采用于6周龄时一次性腹腔注射链脲佐菌素150 mg/kg建立小鼠Ⅰ型糖尿病模型;对照组注射同等体积柠檬酸盐缓冲液.在7周龄时对两组小鼠均于双侧后足足垫注射牛...     

Can murine diabetic nephropathy be separated from superimposed acute renal failure?

BACKGROUND: Streptozotocin (STZ) is commonly used to induce diabetes in experimental animal models, but not without accompanying cytotoxic effects. This study was undertaken to (1) determine an optimal dose and administration route of STZ to induce diabetic nephropathy in wild-type mice but without the concurrent acute renal injury resulting from cytotoxic effects of STZ and (2) evaluate the pattern of tubular injury and interstitial inflammation in this model. METHODS: Male Balb/c mice received either (1) STZ (225 mg/kg by intraperitoneal injection.); or (2) two doses of STZ 5 days apart (150 mg/150 mg/kg; 75 mg/150 mg/kg; 75 mg/75 mg/kg; and 100 mg/100 mg/kg by intravenous injection). Another strain of mice, C57BL/6J, also received STZ (200 mg/kg intravenously or intraperitoneally). Renal function and histology were examined at weeks 1, 2, 4, and 8 after induction of diabetes. In initial optimization studies, animals were sacrificed at week 1 or week 2 and histology examined for acute renal injury. RESULTS: Following a single intraperitoneal injection of 225 mg/kg of STZ, only two thirds of animals developed hyperglycemia, yet the model was associated with focal areas of acute tubular necrosis (ATN) at week 2. ATN was also observed in C57BL/6J mice given a single intravenous or intraperitoneal dose of STZ (200 mg/kg), at week 2 post-diabetes. At an optimal diabetogenic dose and route (75 mg/150 mg/kg by intravenous injection 5 days apart), all mice developed diabetes and no ATN was observed histologically. However, even with this regimen, glomerular filtration rate (GFR) was significantly impaired from week 2. This regimen was accompanied by progressive histologic changes, including tubular and glomerular hypertrophy, mesangial area expansion, as well as interstitial macrophage, CD4+ and CD8+ T-cell accumulation. CONCLUSION: By careful optimization of STZ dose, a stable and reproducible diabetic murine model was established. However, even in this optimized model, renal functional impairment was observed. The frequency of ATN and functional impairment casts doubt on conclusions about experimental diabetic nephropathy drawn from reports in which ATN has not been excluded rigorously.     

4羟基壬烯醛在糖尿病大鼠肾脏中的表达及意义

目的:探讨糖尿病大鼠肾脏中4羟基壬烯醛(4-HNE)的表达情况及其作用机制。方法:链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg一次性腹腔注射构建糖尿病大鼠模型组(D组),并设空白对照组(C组),分别检测大鼠4周、8周及12周的血肌酐、尿素氮、三酰甘油、胆固醇及24 h尿蛋白定量,光镜下观察肾脏病理改变,免疫组化及Western-blot观察各组大鼠肾脏4-HNE的表达情况。结果:D组大鼠4周、8周及12周的肌酐、尿素氮、三酰甘油及胆固醇逐渐升高,并均高于同一时间点的C组,结果差异有统计学意义(P<0.05),随病程的延长D组大鼠肾脏病理改变逐渐加重,基底膜逐渐增厚,细胞外基质逐渐增多,C组病理改变不明显。免疫组化及western-blot显示D组大鼠4周、8周及12周肾组织中4-HNE的表达逐渐升高,并明显高于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:糖尿病大鼠肾脏中4-HNE随着病程延长其表达量逐渐升高,提示脂质过氧化参与了糖尿病肾病的发生及进展。     

1型糖尿病骨质疏松大鼠模型的建立及评价

目的建立I型糖尿病性骨质疏松大鼠模型,通过骨形态计量学观察该模型的改变。方法选取3月龄雄性SD大鼠60只,随机分为正常对照组(30只)和造模组(30只),造模组腹腔注射STZ60 mg/kg,诱导建立I型糖尿病性骨质疏松大鼠模型。结果从血糖、体重、骨密度、骨组织形态计量学证实该方法可以成功制备1型糖尿病性大鼠模型。结论该方法制备的I型糖尿病性骨质疏松大鼠模型,成模率高,模型稳定。     

胰岛素样生长因子1受体抑制剂可减轻糖尿病肾病小鼠肾小管病变

目的探讨胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制剂在缓解糖尿病肾病(DKD)小鼠肾小管病变中的作用。方法C57BL/6J雄性小鼠被随机分为正常对照组(n=10)和DKD模型组(n=30)。用单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ,150 mg/kg)的方法建立糖尿病肾病模型。建模成功后,DKD模型组小鼠被随机分为DKD组(n=10)、贝那普利组(n=10)和IGF-1R抑制剂组(n=10)。IGF-1R抑制剂组给予30 mg·kg-1·d-1 IGF-1R抑制剂灌胃;贝那普利组给予30 mg·kg-1·d-1贝那普利灌胃;正常对照组和DKD组分别给予等量生理盐水灌胃。8周后处死小鼠,记录小鼠体重、肾重。收集小鼠血清、尿液和肾脏样本。自动生化仪上测定血糖、尿白蛋白等生化指标,计算尿白蛋白排泄率。HE、PAS染色法观察小鼠肾脏病理改变。免疫组化、Western印迹法测定肾组织磷酸化(p)IGF-1R的表达。结果与正常对照组比较,DKD组小鼠的随机血糖、肾重/体重、尿白蛋白排泄率明显升高(均P<0.01)。DKD组小鼠肾脏病理表现为肾小球增大,肾小管管腔狭窄,肾小管肿胀、萎缩;近端小管上皮(PTE)细胞数目减少,肾小管损伤评分增加,平均肾小球体积增大,肾组织pIGF-1R表达增加(均P<0.05)。与DKD组相比,IGF-1R抑制剂组和贝那普利组小鼠尿白蛋白排泄率显著降低(P<0.01),肾脏病理改变减轻,且IGF-1R抑制剂组的作用效果更加显著。与DKD组相比,IGF-1R抑制剂组肾组织pIGF-1R蛋白表达减少(P<0.05);与贝那普利组相比,IGF-1R抑制剂组肾组织pIGF-1R蛋白表达减少(P<0.05)。结论IGF-1R抑制剂能减轻DKD小鼠肾小管病变,且效果优于贝那普利。     

舒洛地特对糖尿病大鼠肾脏病变的影响

目的:探讨2种剂量舒洛地特对糖尿病大鼠肾脏病变的影响。方法:采用STZ(链尿佐霉素,60mg/kg)腹腔注射法构建1型糖尿病大鼠模型,随机分为4组:糖尿病组(DM组)、舒洛地特10mg·kg-1·d-1组(S10组)、舒洛地特20mg·kg-1·d-1组(S20组)、氯沙坦30mg·kg-1·d-1组(L组),每组各10只。另取10只未造模大鼠作正常对照组(N组)。干预12周后测体重、24h尿白蛋白定量、血糖、血肌酐、尿素氮及肾重,光镜、电镜观察肾组织形态、结构的变化。结果:同N组相比,DM组大鼠24h尿白蛋白定量、血肌酐及尿素氮显著增加(P<0.01),病理改变较明显。同DM组相比,治疗组(S10、S20及L组)大鼠24h尿白蛋白定量减少(P<0.05或P<0.01),但血肌酐及尿素氮下降差异无统计学意义(P>0.05);同S10组相比,S20及L组大鼠24h尿白蛋白定量减少(P<0.05)。光镜及电镜显示治疗组较DM组病理变化减轻,尤以S20及L组病变减轻明显。结论:舒洛地特可对糖尿病大鼠有肾脏保护作用,而20mg·kg-1·d-1较10mg·kg-1·d-1的剂量效果更好。     

Effect of helper and/or cytotoxic T-lymphocyte depletion on low-dose streptozocin-induced diabetes in C57BL/6J mice

The low-dose streptozocin (STZ) model of diabetes has been reported to involve direct STZ beta-cytotoxicity and/or immunologically mediated beta-cell destruction. Because the T-lymphocyte dependency of such a model is controversial, we further assessed the role of T-lymphocytes by determining the occurrence and magnitude of hyperglycemia as well as the pancreatic insulin contents in both STZ-injected nude C57BL/6J male mice and STZ-injected euthymic C57BL/6J male mice selectively depleted in helper and/or cytotoxic T-lymphocytes with monoclonal antibodies (MoAbs). The effectiveness of MoAb treatment was assessed in lymph node cells by flow-microfluorometry analysis and in spleen cells by concanavalin A stimulation, allospecific cytotoxic T-lymphocyte activity, and T-lymphocyte lymphokine production. Sixteen days after the first STZ injection, hyperglycemia (plasma glucose greater than 200 mg/dl) occurred in significantly fewer helper T-lymphocyte-depleted mice (P less than .005) or helper and cytotoxic T-lymphocyte-depleted mice (P less than .001) than in non-MoAb-treated mice. However, a progressive increase in the number of mice with hyperglycemia ensued in all MoAb-treated groups, and 2 mo after STZ was administered, the prevalence of hyperglycemia, mean plasma glucose levels, and pancreatic insulin contents did not differ significantly from the values obtained in the non-MoAb-treated animals. Similarly, STZ-injected C57BL/6J male nude mice developed hyperglycemia that was associated with a marked decrease in pancreatic insulin contents on a time course comparable with that of STZ-injected euthymic C57BL/6J male mice depleted in helper or in helper and cytotoxic T-lymphocytes by MoAbs.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)