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人化SCID鼠的建立及在人单抗制备中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
人化联合免疫缺陷鼠(huSCIDmice)可作为人类免疫系统的模型,在检测人体免疫应答、揭示HIV感染、肿瘤以及自身免疫系统疾病等的发病机理和人单克隆抗体的制备等领域中得以广泛应用。本文概述了人化SCID鼠的构建过程,并总结了其在制备人单克隆抗体中的应用进展。 相似文献
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用ENCAPCEL~(TM)微囊技术培养鼠×鼠杂交瘤细胞和生产单克隆抗体,已显示出一定的优越性,表现在最终细胞密度和单克隆抗体产量、浓度以及纯度等四个方面。但鼠杂交瘤不易受人×人杂交瘤,培养方法即选择的限制因素的影响:如维持饲养裸鼠的困难和人×人、人×鼠杂交瘤单克隆抗体产量很低。作者实验应用微囊法培养,研究了生产人×人杂交 相似文献
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目的 获得鼠抗人精浆蛋白单克隆抗体Fab段基因并在大肠杆菌中表达。方法 从分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系E4B7中提取总RNA,用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)克隆Fd段和k链基因;构建到噬粒pComb3中;并用ELISA、Westem blotting和免疫细胞化学分析证明表达的Fab段特异性结合人精浆蛋白。结果 从分泌抗人精浆蛋白的鼠单克隆抗体杂交瘤细胞系E4B7中克隆出了重链Fd段和k链基因,经序列测定表明,U属于鼠免疫球蛋白XⅢ家族,VH与鼠免疫球蛋白MUSIGHAEI同源性最高。将该Fd和k链基因克隆到表达载体pComb3中,在大肠杆菌中获得了表达。结论FLISA、Westem blotting和免疫细胞化学分析表明,表达的Fab段可以特异性的与人精浆蛋白结合。 相似文献
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鼠单克隆抗体作为显像剂及帮助肿瘤治疗的技术正被广泛采用,这导致在许多病人体内诱导出人抗鼠抗体(HAMA)。HAMA可与作为免疫放射分析(IRMA)试剂中的鼠单克隆抗体结合,并在一定程度上干扰双位点IRMA的测定结果。本文就68例接受^132i-CEA单克隆抗体免疫显像的卵巢癌患者体内人抗鼠抗体的产生进行动态监测, 相似文献
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应用基因工程技术对鼠单克隆抗体进行改造,使其人源化,即将鼠单克隆抗体的CDRs 区插到人抗体V 区框架中。其目的在于降低鼠单克隆抗体对人体的抗原性,以适合于人体治疗。实验证明:这种人源化的单克隆抗体的抗原性大大降低,而其抗体活性仍存在,有的人源化抗体甚至出现了原抗体不曾具有的ADCC 效应,将人源化单克隆抗体用于人体治疗,获得满意的疗效,本文将对此进行综述。 相似文献
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血管内皮细胞生长因子促进成年小鼠胸腺细胞的增殖与分化 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 研究血管内皮生长因子(VEGF121)在免疫系统的表达及其对小鼠胸腺细胞的作用。为了解VEGF在免疫系统中的功能提供实验依据。方法 构建pCDI-VEGF真核表达载体,转染COS-7细胞,收获上清检测其对小鼠胸腺细胞的促增殖效应和CD4,CD8分子表达,用抗VEGF单克隆抗体及不同信号转导抑制剂进行阻断实验。通过RT-PCR方法检测人VEGFmRNA在胸腺,脾脏等免疫器官的表达。结果 实验证明VEGFmRNA可以在多种免疫组织中表达。VEGF121真核表达蛋白可明显促进小鼠胸腺细胞增殖和分化。此作用可被VEGF的单克隆抗体所封闭;不同的信号转导抑制剂具有不同的效应。结论 VEGF参与了免疫系统的功能,对小鼠胸腺细胞的增殖分化有促进作用。可能是内源性的免疫系统的调节因子。 相似文献
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《细胞与分子免疫学杂志》1991,(2)
答:DNA重组技术为产生新的“第二代”单克隆抗体开辟了新的途径。目前制备的大多数是鼠/鼠单克隆抗体,该种抗体长期应用于人体可以导致过敏反应或产生中和抗体而降低单克隆抗体的效价。目前研制人/人 相似文献
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李国华 《细胞与分子免疫学杂志》1995,(2)
一种新型骨髓瘤细胞TKHMY的构建(文摘)[英/T~K…//JImmunolMeth1992;177:17]随着医学技术水平不断提高,人单克隆抗体技术在基础医学与临床医学研究中的应用也日趋深人。与鼠单克隆抗体比较,人单克隆抗体在临床应用中的副作用比较... 相似文献
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汪保安 《细胞与分子免疫学杂志》1992,(2)
自单克隆抗体技术问世以来,已制备了针对各种不同抗原的单一特性的抗体,但因种利原因,人单克隆抗体技术发展缓慢。最近,利用功能性免疫系统缺陷的严重的联合免疫缺陷(SCID)小鼠,可使人一人杂交瘤在该种小鼠腹腔内产生腹水。本文报道了这一简单而有效的方法,从而增加人单克隆抗体的产量。 相似文献
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现在已有多种鼠源性单克隆抗体用于临床诊断,还有几种正处于初步临床试验阶段。然而,人源性单克隆抗体是否一定优于目前临床用的鼠单克隆抗体,这点尚需验证,如果人单克隆抗体引起的变态反应性并发证及形成的抗原抗体复合物较少,倘若它能提高放射图象的分辨率,那么,人单克隆抗体无疑优于鼠单克隆抗体。但现有用于体细胞杂交技术来延续产 相似文献
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洪锦心 《细胞与分子免疫学杂志》1988,(3)
七十年代中杂交瘤单克隆抗体问世以来,在医学和生物学的研究及临床应用中,单克隆抗体己越来越显示它的重要性。但是,目前能应用的单克隆抗体(McAb)大多是鼠-鼠杂交瘤,抗体是属鼠的免疫球蛋白(Ig),在进入人体后能激发抗异种蛋白的反应。为此,人们试着获得人型免疫球蛋白(Ig)的McAb。目前除了人-人杂交瘤外,用抗体基因工程方 相似文献
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人PBMC不同途径转输SCID小鼠后表型及杀伤活性的动态观察 总被引:3,自引:0,他引:3
肿瘤生物治疗的核心是调整机体的免疫状态,发挥识别和攻击肿瘤细胞的作用。在众多的动物体内模拟实验中,60年代以前,采用鼠源肿瘤-鼠源免疫系统(鼠-鼠模式)。60年代以后,由于单纯T淋巴细胞缺乏的裸鼠问世,出现了人源肿瘤-鼠源免疫系统(人-鼠模式)。80年代以后,T、B淋巴... 相似文献
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近年来随着单克隆抗体技术的发展,发现了一些消化道肿瘤相关抗原,有些对消化道肿瘤的诊断具有一定价值,但在特异性及敏感性上仍存在一些不足。本文用一组鼠抗人胃癌单克隆抗体(MG系列)对胃癌相关抗原MG-Ag进行血清检测。 相似文献
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抗人组织蛋白酶B人-鼠嵌合抗体的表达及体外对癌细胞浸润的抑制效应 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 制备抗人组织蛋白酶B人-鼠嵌合抗体。方法从分泌抗人组织蛋白酶B单克隆抗体的杂交瘤细胞株提取总RNA,通过RT-PCR扩增单克隆抗体VH和VL的DNA片段,对其进行序列分析,证实具有小鼠可变区完整的结构,利用基因工程技术将它们分别和人Ig的Cγ1和Ck恒定区基因连接组建人鼠嵌合轻链和重链Fab抗体,并克隆到pcDNA3真核细胞表达载体。将重组体转染到中国仓鼠卵巢细胞(CHO),通过G418筛选、ELISA检测和Western blot鉴定,分离纯化抗人组织蛋白酶B人-鼠嵌合抗体,用于体外抑制癌细胞浸润的试验。结果得到分泌抗人组织蛋白酶B人-鼠嵌合抗体的中国仓鼠卵巢细胞克隆(O62A2),分泌的抗人组织蛋白酶B人-鼠嵌合抗体在体外能抑制癌细胞浸润。结论人-鼠嵌合抗体的成功表达,将有可能用于组织蛋白酶B过度表达的有关疾病的治疗。 相似文献
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鼠与人MUC1分子同源性位点的分析 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:分析鼠与人粘蛋白1(MUC1)的同源性位点。方法:用抗人类MUC1单克隆抗体GP1.4、CA15-3,通过细胞ELISA和Western blot鉴定鼠Lewis肺癌细胞表面MUC1分子的表达,并用蛋白分析软件分析鼠与人MUC1分子的同源性。结果:抗人类MUC1单克隆抗体GP1.4和CA15-3与Lewis肺癌细胞表面MUC1存在交叉反应;鼠与人MUC1分子约具有49.1%的同源性。结论:鼠与人MUC1分子具有一定的同源性,可用鼠Lewis肺癌细胞作荷瘤鼠研究人类MUC1肿瘤疫苗;鼠源性MUC1蛋白也可用于制备人类的肿瘤疫苗。 相似文献
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单克隆抗体不仅在基础研究和临床诊断中发挥着重要作用,单克隆抗体药物也在经历了鼠抗体的异源性和全抗体的大分子蛋白进入人体后引起免疫排斥和难于渗透组织的困顿之后,目前正以其“高度特异性”在临床显示出无可替代的优势。对抗体异源性的改造经历了人——鼠嵌合抗体、人源化抗体和基因库技术使人型抗体的生产走向可能。Fab片段有效解决了全抗体的大分子问题。单纯抗体和“生物导弹“已进入临床,分别通过中和或封闭靶分子与通过抗体的靶向作用使其携带的药物,细胞毒素,凋亡诱导剂或放射性核素等“生物导弹”定向于靶,发挥低毒高效的杀伤作用。 相似文献
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<正> 美国和加拿大的研究组将人抗体基因的恒定区与小鼠抗体基因的可变区拼接,创造出具有全部人和鼠单克隆抗体最佳特性的杂交分子。这项技术能使任何小鼠单克隆抗体改变成期望的大部分近似人的单克隆抗体,使免疫原性更低,而作用效果更好。理论上,所有人单克隆抗体应能不激发人体免疫应答,但长期来,在对人杂交瘤方面所做的工作收效甚微。人-鼠嵌合抗体将有助于解决这一问题。 相似文献
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鼠单克隆抗体用于人体的诊断和治疗时,人体会产生抗鼠蛋白抗体和对鼠单抗的排斥反应,因而影响使用效果。近年来随着生物工程技术的发展,人们试图通过人-鼠嵌合抗体及小分子抗体的研究以解决单克隆抗体在治疗中存在的免疫反应问题。抗体的最 相似文献
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目的:研制功能性鼠抗人OX40单克隆抗体。方法:以转人OX40的转基因细胞L929-OX40为免疫原,常规免疫6—8周龄的雌性BALB/c小鼠;采用B淋巴细胞融合技术,将免疫小鼠脾脏细胞与SP2/0融合,以L929-OX40转基因细胞及PHA活化的T细胞为抗体筛选阳性细胞,经免疫荧光标记分析对杂交瘤进行反复筛选和多次的克隆化培养;采用快速定性试纸法及竞争抑制结合试验分析了该单抗的亚类及抗原识别位点;采用MTT法分析单抗在体外对T细胞的促增殖效应以及ELISA分析活化T细胞分泌的细胞因子。结果:获得1株持续、稳定分泌鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞株(命名为7E11),该单抗能特异性地识别人OX40分子和介导有效的共刺激信号,体外促进活化的T细胞增殖和细胞因子的分泌。结论:成功研制成一株能分泌功能性鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤,该抗体特异性地识别人OX40分子并具有在体外协同刺激T细胞的作用。 相似文献