SDF-1及其受体CXCR4与胚胎发育

CXCR4是一种独特的趋化因子受体，它仅有一种配体即基质细胞来源因子-1(stromal cell derired factor-1，SDF-1)，而SDF-1也仅仅只与CXCR4结合。在成人，趋化因子SDF-1及其受体CXCR4广泛地表达于多种细胞和组织中，包括免疫细胞、脑、心脏、肾、肝、肺及脾，在免疫系统、循环系统及中枢神经系统的发育中起至关重要的作用。而趋化因子功能的     

SDF-1/CXCR_4与泌尿系肿瘤的研究进展

基质细胞衍生因子1（Stromal cell—derived factor-1,SDF-1）是不同类型细胞分泌的低分子量（8～10kD）细胞因子,它对白细胞亚类如中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞具有趋化和预激活作用。而趋化因子受体CXCR。是一类含有7个跨膜区的G蛋白耦联受体,它作为目前已知的SDF-1惟一受体广泛的表达在血液、免疫和中枢神经系统细胞上。趋化因子受体CXCR4及其配体SDF-1相互作用形成的反应轴SDF-1／CXCRt参与多种生理和病理过程,如在白细胞的转运和归巢,特别是在炎症、感染和组织损伤中发挥着重要作用。近年来,SDF-1／CXCR。     

SDF-1/CXCR4与炎性疾病的相关研究进展

CXC趋化因子受体(CXCR)4作为一种趋化因子受体与其配体基质细胞衍生因子1(SDF-1)在人体多种组织与细胞中均有广泛表达,且两者结合能促进未成熟的中性粒细胞滞留于骨髓中,同时还能够诱导多种炎性细胞募集至炎症部位。SDF-1/CXCR4轴参与多种炎症过程和疾病,包括WHIM(疣和感染及低丙种球蛋白血症伴先天性骨髓粒细胞缺乏)综合征、自身免疫性疾病、肺纤维化以及缺血损伤等,因此阻断CXCR4似乎成为了炎性疾病的一种新的治疗策略。     

CXCR4在卵巢癌组织中的表达及意义

目的:探讨趋化因子受体CXCR4及其配体SDF-1在上皮性卵巢癌中的表达及意义.方法:应用免疫组织化学方法检测CXCR4/SDF-1蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达情况.结果:在上皮性卵巢癌组织中CXCR4/SDF-1均呈阳性表达,分别与对照组相比,差异具有显著性(P＜0.05).结论:CXCR4及其配体SDF-1系统可能在卵巢癌的发生与转移过程中起重要作用.     

CXC趋化因子受体4的研究进展

CXC趋化因子受体4(CXCR4)属于G蛋白耦联7次跨膜受体,是CXC趋化因子家族成员基质细胞衍生因子1(SDF-1)/CXCL12的惟一受体,广泛表达在许多细胞表面,与其配体SDF-1构成的SDF-1-CXCR4生物学轴,参与调节许多生物学活性作用,不仅调节胚胎发育、干细胞归巢和组织/器官的损伤修复,而且与很多疾病的发生和发展有关,成为一些疾病治疗的分子靶目标。本文对其研究进展予以综述。     

趋化因子基质细胞衍生因子-1及其受体对胃癌腹膜转移潜能的影响

目的 探讨趋化因子基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及趋化因子受体4(CXCR4)对胃癌腹膜转移潜能的影响.方法 采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测胃癌细胞NUGC4及间皮细胞HMrSV中CXCR4和SDF-1 mRNA的表达.采用MTT实验检测NUGC4细胞增殖能力的变化,采用间皮细胞黏附实验及间皮细胞迁移实验评价体外培养的NUGC4细胞与间皮细胞发生黏附的能力及其穿越间皮细胞发生迁移的能力.通过建立裸鼠胃癌腹膜种植瘤模型,评价NUGCA细胞腹膜肿瘤生成能力及荷瘤裸鼠生存时间的变化.结果 NUGC4细胞表达较高强度的CXCR4mRNA,而间皮细胞表达高强度的SDF-1 mRNA.抗CXCR4单抗对NUGC4细胞增殖具有显著的抑制作用(P＜0.05);SDF-1可促进NUGC4细胞与间皮细胞黏附及穿越间皮细胞发生迁移,抗CXCR4单抗处理可显著抑制NUGC4细胞的黏附及迁移能力(P＜0.05).体内实验结果显示,CXCR4拮抗剂AMD3100治疗组裸鼠的平均生存时间显著长于对照组[(43.8±2.8)vs(28.2±2.5)d,P＜0.01],瘤结节数目显著低于对照组[(64.6±8.2)vs(103±12.4),P＜0.01].结论 趋化因子SDF-1及其受体CXCR4参与胃癌腹膜转移过程,与肿瘤细胞增殖、肿瘤细胞-问皮细胞问的黏附和肿瘤细胞迁移等步骤密切相关;干扰SDF-1/CXCR4生物学轴可以作为胃癌腹膜转移的潜在治疗策略.     

CXCR4在胶质瘤血管内皮细胞和ECV304细胞中的表达及其意义

目的检测人胶质瘤血管内皮细胞以及体外培养的血管内皮样细胞系ECV304趋化因子受体CXCR4的表达,观察其配体SDF-1对血管内皮样细胞迁移的影响,以探讨趋化因子受体CXCR4在肿瘤血管生成中的可能作用及其机制.方法通过免疫组化方法检测人胶质瘤血管内皮细胞CXCR4蛋白的表达,采用RT-PCR、免疫细胞化学方法检测血管内皮样细胞系ECV304上CXCR4 mRNA和CXCR4蛋白的表达,并采用48孔趋化板观察SDF-1诱导体外培养血管内皮样细胞的迁移作用.结果在胶质瘤血管内皮细胞和血管内皮样细胞系ECV304上均检测到趋化因子受体CXCR4的表达,体外实验显示SDF-1能诱导血管内皮样细胞发生明显的迁移.在30、50 ng/ml的实验浓度范围内,诱导血管内皮样细胞的迁移作用呈明显量效关系.结论胶质瘤血管内皮细胞和血管内皮样细胞系ECV304上存在CXCR4表达,CXCR4激活能诱导内皮细胞的迁移.     

基质细胞衍生因子1及其受体趋化因子受体4生物学轴与头颈肿瘤

许多恶性肿瘤细胞均能分泌趋化因子,其与肿瘤细胞相互作用。关于趋化因子的研究已成为肿瘤研究的热点领域之一。基质细胞衍生因子1(SDF-1)及其受体CXC趋化因子受体4(CXCR4)广泛参与肿瘤的发生、增殖、侵袭、转移等过程,并可能与肿瘤的治疗、TNM分期及预后相关。但SDF-1/CXCR4生物学轴与头颈肿瘤的关系尤其是作用和机制的研究较少。近年来,SDF-1/CXCR4生物学轴与头颈肿瘤的研究逐渐成为热门,为头颈肿瘤的诊疗指出新思路。     

以SDF-1/CXCR4为靶点治疗疾病的研究进展

SDF-1/CXCR4是一对重要的趋化因子配体/受体,与肿瘤、免疫缺陷病毒感染、多种炎症等病理状态相关。以SDF-1/CXCR4轴为靶点治疗相关疾病成为人们研究的热点。阻断CXCR4受体可抑制肿瘤细胞的转移及增殖、防护人免疫缺陷病毒感染、减轻炎性反应。现就以SDF-1/CXCR4轴为靶点治疗相关疾病的研究进展予以综述。     

CXCR4/SDF-1对鼻咽癌细胞增殖与迁移能力的影响

目的 观察鼻咽癌不同恶性程度的细胞中趋化因子受体CXCR4的表达,检测CXCR4/SDF-1反应轴对鼻咽癌细胞的增殖作用,SDF-1对CXCR4阳性肿瘤细胞的趋化作用,探讨CXCR4/SDF-1生物学轴对人鼻咽癌细胞增殖与迁移能力的影响.方法 以鼻咽癌成瘤高转移细胞株5-8F及成瘤不转移细胞株6-10B为研究对象,采用Western blot免疫印迹法检测鼻咽癌细胞株CXCR4蛋白的表达情况,SDF-1及CXCR4阻断剂AMD3100作用于两种细胞后,MTT法检测细胞的增殖能力,体外迂徙实验检测CXCR4/SDF-1反应轴对鼻咽癌细胞的趋化作用.结果 5-8F细胞株CXCR4蛋白的表达明显高于6-10B细胞株;SDF-1能明显增强5-8F细胞增殖与迁移能力,CXCR4阻断剂AMD3100作用后,5-8F细胞增殖与迁移能力明显降低;SDF-1对6-10B细胞的迁移及增殖能力无明显影响.结论 CXCR4/SDF-1生物学轴与鼻咽癌细胞株的增殖与迁移有一定的关系,AMD3100可明显抑制鼻咽癌细胞的增殖与迁移能力.     

Study of structure function correlation of chemokine receptor CXCR4

Objective: To explore the correlation between structure domains and functions of chemokine receptor CXCR4. Methods: After the establishment of wild type chemokine.receptor CXCR4 and CXCR2 expressing cell lines, 5 CXCR4/CXCR2 chimeras, 2 CXCR4 mutants were stably expressed on CHO cell line. Binding activities of all variants with the ligand, recombinant human SDF-1β, signal transduction ability after stimulation and their function as coreceptor for HIV-1 were studied with ligand-binding assay, Cytosensor/ microphysiometry and cell-cell reporter gene fusion assay. Results: Among all 7 changed CXCR4 receptors, 3 chimeras (2444a, 4442, 4122), and 1 mutant (CXCR4-Tr) bond with SDF-1β in varying degrees, of which only 2444a totally and CXCR4-Tr partially maintain signaling. All changed receptors except for 4222 could act as coreceptors for HIV-1 (LAI) in varying degrees. Conclusion: Several structure domains of CXCR4 are involved in the binding with SDF-1β, among which, N-terminal extracellular domain has h     

Cloning of Encoding Sequences for Chemokine Receptors CXCR4 and CCR5 from a Chinese Lymphocyte cDNAs

Ｉｔｈａｓｂｅｎｋｎｏｗｎｒｅｃｅｎｔｌｙｔｈａｔｃｏｆａｃｔｏｒｓ,ｗｈｉｃｈｂｅｌｏｎｇｔｏｔｈｅｆａｍｉｌｙｏｆｓｅｖｅｎｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅＧＴＰｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｃｏｕｐｌｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒｓ,ａｒｅｎｅｃｅｓａｒｙ...     

趋化因子SDF-1β在大肠杆菌中的表达及其纯化

目的　重组人SDF 1 β在大肠杆菌中表达并获得纯化的有生物学活性的SDF 1 β蛋白。 方法　以pET32a( + ) SDF 1为人SDF 1 β克隆基因的表达载体 ,以大肠杆菌AD494(DE3)pLysS为表达菌 ,在IPTG诱导下表达出一个由 2 30个氨基酸残基组成的硫氧还蛋白 (thioredoxin) SDF 1 β的融合蛋白 ( 2 6× 1 0 3)。经细菌裂解、金属离子螯合亲和层析、肠激酶消化以游离SDF 1 β、阳离子交换层析和逆向高效液相层析等步骤纯化目的蛋白。以蛋白印迹、纯化产物的N端氨基酸测序及配体结合试验、微生理监测术鉴定纯化产物的生化性质及生物学活性。结果　在经诱导的发酵菌中融合蛋白占总菌体蛋白的 1 0 %～ 1 5 %。从 1L发酵菌液中可获得高纯度目的蛋白约 40 0 μg。蛋白印迹实验及N端氨基酸测序皆证实纯化终产物为SDF 1 β(由 71个氨基酸残基组成 ,7.8× 1 0 3)。配体结合试验及Cytosensor表明 ,该产物能与CXCR4结合 [Kd =( 1 2 .2 0± 2 .99)nmol L]并引起CXCR4表达细胞的信号传导。结论　采用本方法可获得高表达的 ,高纯度的具有与天然SDF 1 β相似活性的重组人SDF 1 β。     

Association of neutralization sensitivity of HIV-1 primary isolates with biological properties of isolates from HIV-1 infected Chinese individuals

OBJECTIVE: Although HIV-1 infection is prevalent in many regions in China, it remains largely unknown on the biological characteristics of dominant circulating isolates. This study was designed to isolate the circulating viral strains from different prevalent regions and to characterize their biological properties and neutralization sensitivity. METHODS: Primary viruses were isolated from fresh PBMCs using the traditional co-culture method and their capacity of inducing syncytium was tested in MT-2 cells. Meanwhile, their coreceptor usage was determined with two cell lines: Magi and GHOST (3) stably expressing CD4 and the chemokine receptor CCR5 or CXCR4. Furthermore, the sensitivity of these viruses to neutralization by HIV-1-infected patients' plasma which were highly active to neutralize SF33 strain, was quantified in GHOST cell-based neutralization assay. RESULTS: Six primary viral strains were isolated from 4 separated regions. Isolates LTG0213, LTG0214 and XVS032691 induced syncytia in MT-2 cells, and used CXCR4 as coreceptor. Isolates XJN0021, XJN0091, or SHXDC0041 did not induce syncytia, and used CCR5 as coreceptor. Overall neutralization sensitivity differed among four representative strains: HIV-1 XVS032691 > LTG0214 >XJN0091 approximately SHXDC0041. CONCLUSION: The neutralization sensitivity of HIV isolates is linked with the phenotype of isolates, in which syncytium-inducing (SI) or CXCR4-tropic (X4) viruses are more easily neutralized than non-syncytium-inducing (NSI) or CCR5-tropic (R5) viruses. The genetic subtypes based on the phylogeny of env sequences are not classical neutralization serotypes.     

肾透明细胞癌中SDF鄄1/CXCR4表达及临床意义的探讨

 目的探讨基质细胞衍化生长因子1（SDF-1）和趋化因子受体4（CXCR4）在肾透明细胞癌组织中的表达及其与临床病
理因素的关系。方法应用免疫组化PV6000法检测79 例肾透明细胞癌组织和43 例正常肾组织中SDF-1 和CXCR4 的表达
情况。结果CXCR4 在79 例肾透明细胞癌组织中的阳性表达率（77.2%）高于43 例正常肾组织（14.0%）（x² =45.009, P< 0.05）。
SDF-1 在79 例肾透明细胞癌组织中和43 例正常肾组织中的阳性表达率分别为13.9%、16.3%,差异无统计学意义（x² =0.123,
> 0.05）;其表达与肾透明细胞癌组织的临床分期和淋巴结转移有关（x² =4.408~11.935, P< 0.05）;SDF-1 的表达与CXCR4 的表
达呈负相关关系（ r=-0.305, P< 0.05）。结论SDF-1 和CXCR4 在肾透明细胞癌组织中的表达提示其在肿瘤的发生、发展、浸
润转移之间有密切的关系,可能在肿瘤的发展过程中扮演重要的角色。     

SDF-1/CXCR4生物学轴在宫颈癌中的研究进展

基质细胞衍生因子1(SDF-1)与其特异性受体CXCR4广泛表达在多种组织和器官上,SDF-1/CXCR4轴可在多方面影响肿瘤的生物学行为:促进肿瘤细胞的增殖;影响机体对肿瘤的清除;调控免疫细胞对肿瘤浸润;调节肿瘤血管新生;影响肿瘤浸润、转移。其作用已在宫颈癌及多种肿瘤中被研究证实,对其的研究可能为肿瘤防治找到新的突破口。     

HIV-1中国流行株的生物学表型与V3环序列变异相关性初步研究

目的分析我国HIV-1流行株的生物学表型及其与V3环序列变异的相关性。方法采用传统的共培养方法从HIV-1感染者新鲜外周血单个核细胞(PBMC)中分离病毒并在MT-2细胞上测定分离株的融合诱导性,用表达CD4和趋化因子受体CCR5或CXCR4的GHOST(3)测定毒株的辅助受体利用情况,用巢式一聚合酶链反应(nest—PCR)扩增V3环及两侧区序列并对其序列进行测定,用GCG软件分析氨基酸序列。结果在所分析的5个原代毒株中,LTG0213和LTG0214为合胞体诱导型(SI),利用CXCR4辅助受体;XJN0021、XJN0091和SHXDC0041为非合胞体诱导型(NSI),利用CCR5辅助受体。X4／SI病毒和RS／NSI病毒在V3环氨基酸序列方面,存在明显的区别。CCR5表型中国株第8、11、18及第25位氨基酸的共同基序为：8-TXXS／GXXXXXXR／QXXXXXXE／D-25,CXCR4表型株在这些位置出现碱性氨基酸取代(第25位除外),引进正电荷。结论HIV-1中国流行株的生物学表型与V3环序列变异密切相关,V3环上第8、11、18及第25位积累碱性氨基酸(或由酸性氨基酸转变为中性氨基酸),可以使病毒由NSI／R5表型转变为SI／X4表型,可以根据V3环氨基酸序列预测病毒的生物学表型。     

类风湿关节炎病人外周血中趋化因子受体CXCR4与其配体SDF-1α的表达研究

目的:探讨类风湿关节炎病人外周血中趋化因子受体CXCR4与其配体SDF-1α的表达水平。方法:选取类风湿性关节炎病人52例为观察组。另外选取同期健康体检的健康人群30名为对照组。采集受试者静脉血,检测外周血CXCR4、SDF-1α及白细胞介素（IL）-8表达水平。结果:观察组外周血CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞表面CXCR4表达百分率和血清SDF-1α、IL-8表达水平均高于对照组（P<0.01）。随着病程的延长,外周血CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞表面CXCR4表达百分率和血清SDF-1α表达水平上升（P<0.01）。直线相关性分析结果显示,外周血CXCR4及SDF-1α表达水平与IL-8均呈正相关关系（P<0.05）。结论:SDF-1α/CXCR4信号转导通路和IL-8与类风湿性关节炎的发病和进展过程有关。     

CXCR4在VEGF-C介导的胃癌淋巴道转移中的作用

目的 探索趋化因子受体CXCR4和VEGF-C与胃癌淋巴道转移的关系,为研究干预胃癌淋巴转移的新方法提供理论依据.方法 采用RT-PCR方法检测86例胃癌组织中趋化因子受体CXCR4 mRNA的表达及VEGF-C mRNA的表达,探索其与胃癌淋巴结转移的关系;Boyden趋化小室法检测CXCR4不同表达状态胃癌细胞的趋化活性和趋化抑制性.结果 86例胃癌组织均有不同程度的CXCR4 mRNA和VEGF-C mRNA的表达.53例CXCR4 mRNA呈高表达,表达率为61.63%,VEGF-C mRNA高表达率为56.98%(49/86);VEGF-C mRNA高表达组中的CXCR4 mRNA的表达率也较高;CXCR4 mRNA的表达与胃癌淋巴结转移呈正相关(P＜0.05);CXCR4的配体SDF-1对胃癌细胞的平均趋化率为81%,经抗CXCR4单克隆抗体处理后癌细胞的平均趋化率下降至30%,CXCR4被特异性抗体封闭前后的癌细胞趋化活性有显著性差异(P＜0.05).结论 胃癌CXCR4的表达和VEGF-C的表达与胃癌淋巴结转移呈正相关;CXCR4的功能状态影响胃癌细胞的迁移活性.通过干预趋化因子受体CXCR4和VEGF-C的活性可能成为阻断胃癌淋巴转移的新靶点.     

Ampelopsin, a small molecule inhibitor of HIV-1 infection targeting HIV entry

Objective To investigate the anti-HIV effects of ampelopsin and its interaction with HIV-1 coreceptor CXCR4. Methods Through anti-virus experiments in vitro, the inhibitory effect of ampelopsin on HIV-1 infection was verified. Chemotaxis assay was performed to show the ability to induce PBMCs migration by ampelopsin, RANTES and SDF-lct. Fluorescence labelling monoclonal antibody was utilized to observe the interaction of ampelopsin and CXCR4. Mice immunosuppressant model was also established to detail the role ampelopsin played in regulating cellular immunological functions. Restflts Ampelopsin could protect sensitive cells against HIV-1 infection and dramatically reduce HIV-I antigen P24 expression. HIV-lSF33 attaching to MT-4 cells was interfered by ampelopsin,and the ECso was 0.175 mg/mL for cellular protection and 0.024 mg/mL for P24 inhibition. At co-cultivating phase, EC50 was 0.229 mg/mL and 0.197 mg/mL respectively. Furthermore, the EC50 was 0.179 mg/mL and 0.348 mg/mL in acute infection. Human PBMCs migration was induced after being challenged with ampelopsin or chemokines, and synergistic action was observed during co-treatment. Ampelopsin alone resulted in maximal chemotaxis at 1 mg/mL. HIV-1 co-receptor CXCR4 on the surface of PBMCs was decreased by internalization, which indicated the effect of ampelopsin on CXCR4. About 70% CXCR4 was reduced by ampelopsin at 1 mg/mL.Ampelopsin also augmented cellular immunological functions in immunosuppressive mice.Conclusion Ampelopsin displays a strong inhibitive role during HIV-1 absorption, incubation and acute infection. These results are coincident with its immune enhancement.